32种中草药提取物体外抗骨肉瘤作用的筛选

目的对32种中草药进行初步抗骨肉瘤的体外筛选实验,为中药标准化和治疗骨肉瘤提供依据。方法应用MTT法测定各中药提取物对U2OS细胞株增殖活性的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的剂量效应关系;应用形态学观察、FCM及AnnexinV法测定筛选出的中药水提取物对U2OS细胞的凋亡作用。结果32种中草药提取物中蟾酥、牛胆粉等对骨肉瘤U2OS细胞株具有增殖抑制作用,深入研究表明蟾酥、牛胆粉水提取物对U2OS细胞具有促进凋亡作用,其中以蟾酥促进凋亡作用最为明显。结论通过对32种中草药进行筛选,发现蟾酥、牛胆粉等对骨肉瘤细胞株U2OS的增殖有抑制作用,为进一步开展抗骨肉瘤中草药有效成分的筛选及体内动物研究提供实验依据。

蒙药牛胆粉与羊胆粉中胆酸类成分的分析测定

胆酸与硫酸加热产生脱水反应,形成共轭双键,在紫外区产生特征吸收峰。用紫外-分光光度法测定了牛胆粉与羊胆粉中胆酸的含量。测定线性范围为0·0033～0·0167mg·mL-1(r=0·9997),加样回收率及RSD分别为98·48%,1·79%,96·46%,2·50%。5批次样品测定表明:牛胆粉中胆酸的含量在40·85%～43·03%之间,羊胆粉在30·88%～32·64%之间。牛胆粉精密度RSD为2·41%,羊胆粉精密度RSD为2·92%。稳定性试验在8h之内测定牛胆粉RSD为0·55%,羊胆粉RSD为0·59%。重复性试验牛胆粉RSD为2·11%,羊胆粉RSD为2·68%。方法简便、快速、便于推广应用,且可有效地控制牛胆粉与羊胆粉的内在质量。

四种动物胆粉中胆酸类成分分析及药理作用比较

目的:采用HPLC法分别测定熊胆粉与猪胆粉、牛胆粉和鸡胆粉的胆酸类成分并进行药理作用的比较。方法:采用HPLC法对胆酸类成分分析。应用Lichrospher C18(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.001 mol/L KH2PO4溶液为流动相,梯度洗脱(0～20 min,乙腈30%→30%;20～40 min,乙腈30%→40%;40～70 min,乙腈40%→50%),流速:1.0 ml/min,柱温30℃,DAD检测器,检测波长为215nm。以小白鼠为实验研究对象,利用扭体法,观察四种胆粉的镇痛作用,利用制备二甲苯致炎模型,观察四种胆粉的抗炎作用。结果:①胆酸类成分含量牛胆粉>鸡胆粉>熊胆粉>猪胆粉,四种胆粉中有相同的胆酸类成分,其中熊胆粉与牛胆粉的化学成分更为接近,共有峰重叠率达52.941%,相似度达0.540;②四种胆粉均能有效抑制二甲苯引起的小鼠耳朵肿胀,对炎症的抑制率依次为牛胆粉>熊胆粉>猪胆粉>鸡胆粉;③四种胆粉也能明显减少冰醋酸所致的小鼠扭体次数,延长潜伏期,作用强弱依次为熊胆粉>牛胆粉>鸡胆粉>猪胆粉。结论:熊胆粉与猪胆粉、牛胆粉和鸡胆粉相比较有相同的胆酸类成分,抗炎及镇痛作用接近,该方法为熊胆代用品的寻找提供了依据。

熊胆粉、猪胆粉、牛胆粉及鸡胆粉中总胆酸的含量测定及其抑菌作用

目的:建立用紫外分光光度计测定熊胆、猪胆粉、牛胆粉、鸡胆粉中总胆酸含量的方法并评价抑菌效果。方法:分别以胆酸和熊去氧胆酸为对照品,采用加入硫酸-水(50∶50),在75℃水浴加热18 min反应显色,于388 nm波长处测定熊胆粉等动物胆粉中总胆酸的含量;同时以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌种,在650 nm波长处测定OD值以考察体外抑菌效果。结果:胆酸在5.7～34.3μg·mL-1范围内有良好的线性关系,线性方程为Y=41.573 X-0.166 1,r=0.999 5;熊去氧胆酸在4.7～23.5μg.mL-1范围内有良好的线性关系,线性方程为Y=24.957 X-0.067 9,r=0.999 6;胆酸及熊去氧胆酸在熊胆粉、牛胆粉、猪胆粉、鸡胆粉中的平均回收率及RSD值分别为:98.9%,100.5%,1.59%,1.07%;97.7%,98.8%,1.08%,1.12%;104.1%,99.4%,2.00%,1.67%;102.9%,103.6%,1.22%,1.78%。熊胆粉等4种动物胆粉对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有明显的抑菌作用,但差异无显著性。结论:本法准确,简便,重复性好,可用于熊胆等4种动物胆粉中总胆酸的含量测定,熊胆等4种动物胆粉均可抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长。

牛胆粉高效液相色谱法特征图谱研究

目的:探求比较黄牛胆粉和水牛胆粉的HPLC特征图谱,为建立牛胆粉的特征图谱提供依据。方法:采用梯度洗脱技术进行HPLC分离分析。色谱柱为Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.001 mol.L-1 KH2PO4溶液为流动相,梯度洗脱(0～20 min,乙腈30%→30%;20～40 min,乙腈30%→40%;40～70 min,乙腈40%→50%;70～80 min,乙腈50%→50%),流速1.0mL.min-1;柱温30℃;DAD检测器,检测波长210 nm。用聚类分析方法处理色谱特征信息,比较色谱以胆酸为参照色谱峰的22个特征峰的信息。结果:通过分析10批黄牛胆粉和水牛胆粉样品,确定了22个共有峰,建立了牛胆粉的HPLC特征图谱。结论:黄牛胆粉和水牛胆粉的色谱指纹特征比较相近,但特征成分含量有一定差异。