葡萄糖氧化酶和植物乳杆菌抑菌性能的研究

采用牛津杯法研究葡萄糖氧化酶(GOD)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)对鸡源、猪源大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)的抑菌作用。结果表明,牛津杯法检测到GOD对不同来源致病菌均具有抑菌性,且在一定浓度范围内随浓度增加抑菌性能增强,在GOD酶活10 U/mL时仍具有抑菌作用,抑菌圈直径均≥9.25 mm。GOD酶在37~75℃干热处理10 min后仍具有较好的抑菌活性,65℃时对猪源大肠杆菌K88和37℃时对沙门氏菌0533抑菌作用最强,抑菌圈直径分别为10.75 mm和12.25 mm。植物乳杆菌BLCC2-0126对被试病原菌抑菌圈直径最大,对猪源大肠杆菌K99和沙门氏菌0533抑菌圈直径为13.75 mm。总之,GOD和BLCC2-0126均具有抑菌作用,且可共用于实际生产中。

凝结芽孢杆菌培养液及其离心上清液、菌悬液的抑菌性能研究

试验旨在比较研究凝结芽孢杆菌培养液(B.coagulans culture solution,BCS)及其离心上清液(centrifuged supernatant of B.coagulans culture solution,CSS)、菌悬液(centrifuged bacterial suspension of B.coagulans culture solution,CBS)在不同pH条件下的抑菌性能差异。试验设计4个处理组:无菌蒸馏水组(sterile distilled water,SDW组,对照组)、BCS组、CSS组、CBS组。采用牛津杯体外抑菌试验法,参照畜禽胃肠道pH,检测4组在不同pH(2.5、4.0、5.5、7.0)条件下,对3个肠道有害菌(猪霍乱沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌K88)的抑菌圈值,统计比较抑菌性能的差异。模拟肠道pH环境的结果显示:pH 4.0、5.5、7.0条件下,BCS组和CBS组对3个指示菌均有抑制作用,且CBS组抑制效果显著大于BCS组(P<0.05);CSS组在pH 4.0条件下,对3个指示菌有抑制作用,但在pH 5.5和7.0时均无抑制作用;SDW组在pH 4.0、5.5和7.0时,对3个指示菌均无抑制作用。模拟胃pH环境的结果显示:pH 2.5条件下,4个处理组均对3个指示菌有强抑制作用,BCS、CSS、CBS 3组之间抑制效果差异不显著(P>0.05),均显著大于SDW组(P<0.05)。以上结果表明,凝结芽孢杆菌的培养液(BCS)及其离心菌悬液(CBS)可用于牛津杯抑菌试验操作,能反映菌株的抑菌性能;相反,离心上清液(CSS)的抑菌效果较弱,不适合凝结芽孢杆菌的体外抑菌试验操作。此外,本次体外抑菌研究支持了凝结芽孢杆菌在肠道环境对有害菌的有效抑制作用不受肠道pH的影响。

响应面法优化姜黄素凝胶剂及其稳定性评价

凝胶剂是皮肤科常用的一种外用半固体制剂,具有易吸收组织液、可调性强、稳定性好、安全性高等特点.本研究以外观、涂展性、耐寒耐热和离心稳定性等作为感官评分指标,通过单因素实验以及响应面优化实验来探讨姜黄素凝胶剂的制备工艺,并通过牛津杯法检验姜黄素的抑菌性能.结果表明:在本实验条件下,凝胶基质的最优配方为0.5%卡波姆940,0.5%甘油,1.0%三乙醇胺,姜黄素的载药量范围在0.5~2.0 mg/g.该凝胶呈亮黄色,成形性及涂展性良好,其耐寒耐热和离心等稳定性指标均符合《中国药典》2020年版对凝胶剂的质量要求.

迷迭香粗提物提取工艺优化及其抑菌活性

迷迭香具有抑菌、抗氧化等生物活性,为获得有效抑菌成分,该研究通过单因素试验结合响应面试验优化迷迭香粗提物提取工艺;利用牛津杯法和滤纸圆片法对迷迭香粗提物抑菌作用进行研究,并确定其最低抑菌浓度。研究结果表明:迷迭香粗提物提取最优工艺条件为液料比7∶1(mL/g)、提取温度78℃、提取时间62 min、乙醇浓度60%、提取次数3次,在此条件下,迷迭香粗提物得率为(32.40±0.52)%。抑菌试验结果表明,迷迭香粗提物对食品中常见致病菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、蜡样芽孢杆菌)均具有较好的抑制作用,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、蜡样芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为15.12、22.15、23.22、9.58 mm,最低抑菌浓度分别为50.0、12.5、25.0、25.0 mg/mL。

新型含酰胺基硫脲结构1,3,4-噻二唑衍生物的合成及其抗菌活性

酰基硫脲结构化合物具有多种生物活性。以噻二唑胺为原料,经卤代、肼解生成酰肼,再与不同取代的苯甲酰基异硫氰酸酯反应合成10个新型含酰胺基硫脲结构的1,3,4-噻二唑衍生物(9a~9j)。所有化合物的结构经IR、~1H NMR和HR-MS(ESI)表征。采用牛津杯法对其进行抗菌活性筛选,结果表明:9a~9j对哈氏弧菌活性存在不同程度的抑制作用,其中9d抗菌活性最好,抑菌圈直径为15.74±0.26 mm。

地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其抑菌活性分析

为了研究不同来源的地衣芽孢杆菌对常见致病菌的抑菌效果等生物学特性,试验采用细菌形态学、生理生化、16S rRNA基因测序、系统发育树分析、牛津杯抑菌试验等检测技术,对5株不同来源(鸡粪、羊粪、牛瘤胃内容物、猪肠内容物及土壤)的地衣芽孢杆菌进行了分离鉴定及体外抑菌活性检测。结果表明:5株分离株B17(鸡粪)、B30(羊粪)、B32(牛瘤胃内容物)、B35(猪肠内容物)和B38(土壤)均可在LB固体培养基上生长,其中有3株不同来源的分离株B30、B35和B38菌落形态相同;镜检可见分离株均为革兰氏阳性杆菌、均有近中生的孢子,符合芽孢杆菌的菌体特征;生理生化特性与芽孢杆菌相符;PCR扩增均得到约为1500 bp的目的片段;所有分离株与GenBank中的地衣芽孢杆菌在同一簇,均鉴定为地衣芽孢杆菌;在5株地衣芽孢杆菌中,除猪源地衣芽孢杆菌B35外,其余4株均有抑菌作用,羊源及牛源地衣芽孢杆菌B30及B32的抑菌效果较好,抑菌范围更广泛。说明从羊粪及牛瘤胃内容物中分离出的地衣芽孢杆菌可作为益生芽孢杆菌控制病原菌,不同来源的地衣芽孢杆菌的抑菌效果不同。

中药提取物的抑菌作用研究

文章以乙醇为溶剂用超声法提取艾叶、桉叶及菊花的有效成分,并用其提取液进行抑菌性实验;同时,文章还对比了3种常见植物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌作用,对其抑菌效果的差异进行分析。结果表明,3种天然提取物对于各菌种抑菌效果最好的是金黄色葡萄球菌,功效为桉叶>艾叶>菊花,可以根据实验结果将桉叶作为天然抑菌添加剂应用于不同领域。

饲用枯草芽孢杆菌抑菌性能的研究进展

文章综述枯草芽孢杆菌在体内、体外的抑菌性能,旨在保障枯草芽孢杆菌的饲用效果,重点总结3方面:其一,枯草芽孢杆菌抑菌性能评估方法;其二,枯草芽孢杆菌的体外抑菌作用(牛津杯法体外抑菌试验评估);其三,饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道菌群的调控效果(体内抑菌试验评估)。体外试验文献显示,枯草芽孢杆菌对肠道有害菌和饲料源有害菌的抑菌报道较多,对肠道有益菌和其他商业益生菌的抑制研究很少,且不同菌株的抑菌性能差异较大,这与饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道有益菌及个别有害菌调控出现差异化结果相符。文章建议完善枯草芽孢杆菌体外抑菌评估的体系,这有助于筛选安全的菌株及高效地研制单一和复合饲用枯草芽孢杆菌制剂。

三株饲用枯草芽孢杆菌抑菌性能的比较研究

研究旨在评估三株枯草芽孢杆菌抑菌性能的差异。采用体外牛津杯试验,设4个处理组,以土霉素(对照组)为参照,按抑菌圈直径(DIZ)比较三株菌株处理组的枯草芽孢杆菌(菌株编号为D、B、G)对4类13个指示菌的抑制作用。结果显示:(1)对于肠道有害菌:菌株D、B对大肠杆菌K88和K99及鸡白痢沙门氏菌有抑制作用,且菌株D抑制效果均显著大于菌株B(P<0.05);相反,菌株G对大肠杆菌K88和K99及鸡白痢沙门氏菌无抑制作用(不敏感);菌株D、G对猪霍乱沙门氏菌的抑制作用为“不敏感”,菌株B为“敏感”;三个菌株对产气荚膜梭菌的抑制作用均达“高敏感”。(2)对于肠道有益菌,菌株B对罗伊氏乳酸杆菌的抑制作用达“高敏感”,菌株D为“敏感”,菌株G为“不敏感”。(3)对于饲料源有害菌,菌株B对金黄色葡萄球菌的抑制作用为“敏感”,菌株D、G为“不敏感”。(4)对于商业饲用益生菌,菌株B对凝结芽孢杆菌、丁酸梭菌、粪肠球菌、屎肠球菌、产朊假丝酵母的抑制作用均达“高敏感”,相反菌株G均为“不敏感”。以上结果提示,三株枯草芽孢杆菌抑菌性能有较大差异,且对其他商业饲用益生菌存在可能的颉颃效应。

4种中草药提取液的工艺优化及抗菌效果对比研究

研究了黄连、杜仲、五倍子、白头翁4种中草药提取的最佳工艺.以乙醇为溶剂,通过超声波提取和牛津杯法,以单因素试验考察提取时间、提取温度、乙醇浓度、料液质量浓度及提取溶剂pH等条件,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、黑曲霉的抑菌效果;并以二倍稀释法确定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果表明:在本实验条件下,4种中草药的最佳提取条件为:提取时间10 min,提取温度50℃,乙醇浓度60%~70%,料液质量浓度125 g/L,提取时pH为2.0.4种中草药对5种微生物的MIC值在7.8~125 mg/mL,MBC值在31.25~250 mg/mL.本研究得出的4种中草药的最佳提取工艺,为中草药饲料添加剂的科学配伍、配方研发以及标准化流程的建立奠定了理论基础.

喙尾琵琶甲防御液季节性变化及抗菌活性比较

喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera Fairmaire是云南彝族长期广泛使用的昆虫药物,其虫体和防御液均具有很高的药用价值。为明确药用昆虫喙尾琵琶甲刺激性防御液的组成、组分含量及抗菌活性的季节性变化,本研究通过常规饲养喙尾琵琶甲成虫,每月初对该昆虫尾部采用直接刺激法收集防御液,观察其状态特征,应用GC-MS分析其组成及组分含量变化,并选择具有季节特征月份的防御液测定其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明,防御液月采集率为0.06%~0.40%,年均采集率0.22%,月间分泌量差异较大。不同月份采集的防御液的状态及抑菌效果亦有所差异,在气温较低月份采集的防御液不分层,颜色为红棕色,采集的量相对偏低,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色假丝酵母菌的MIC等于或大于512μg/mL;气温较高的月份所得防御液,分层情况良好,液体呈现黄棕色,采集的量相对偏高,对金黄色葡萄球菌的MIC为64μg/mL,大肠埃希菌的MIC为256μg/mL,白色假丝酵母菌的MIC为512μg/mL。通过GC-MS分析鉴定出喙尾琵琶甲防御液中的6个主要组分:对苯醌,2-甲基-1,4-苯醌,2-乙基-1,4-苯醌,1-十三烯、2-甲基-1,4-苯二酚和4-乙基-1,3-苯二酚,比较发现1-12月间采集防御液的主要成分及各组分相对含量差异较大。综上所述,喙尾琵琶甲刺激性防御液的组成、组分含量及抗菌活性会呈现出季节性的差异,其抗菌活性的差异与醌类、酚类组分相对含量的变化有关。

50种清热类中药对金黄色葡萄球菌抑菌作用的聚类分析

目的:测定50种清热类中药对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,对比不同类型的清热药物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果及差异,旨在为治疗感染性疾病提供新的治疗思路。方法:通过牛津杯法测定药物抑菌圈直径与吸光值两个指标,对中药的抑菌能力进行评价。结果与结论:聚类分析表明,50种不同类型的清热药对金黄色葡萄球菌的抑菌效果、清热作用和药用部位分类并不完全一致。50种清热类中药中,秦皮、黄芩、紫花地丁、连翘、马齿苋、黄连、板蓝根、半枝莲、苦参、金银花、青蒿、赤芍等清热类中药对金黄色葡萄球菌的抑菌效果明显,可作为防治金黄色葡萄球菌引起的感染类疾病的一种新型治疗手段。

食品包装用箬叶提取物抑菌活性及稳定性研究

目的:以牛津杯法研究箬叶提取物的抑菌活性和稳定性。方法:用水超声法提取箬叶提取物,以枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌为指示菌,总抑菌圈为考察指标,进行抑菌试验;用正交试验分析料液比、提取时间和提取次数3个因素不同水平对箬叶提取物抑菌效果的影响,优化提取工艺,测试提取物的最小抑菌浓度(MIC)和稳定性。结果:研究表明,在工艺参数料液比1∶14、超声4次和每次50 min条件下获得的提取物对4种指示菌的抑菌效果最显著,提取物对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为0.025、0.05、0.025、0.05g/mL,并且在pH=4和100℃条件下抑菌效果稳定。结论:箬叶水提取物对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌具有显著的抑菌效果,且热稳定性和酸稳定性良好。

关于去屑功效检测评价扩散法的筛选

通过抑制糠秕马拉色菌的体外测试方法,对日用化妆品进行去屑功效方法探究。选用常规去屑香波作为试验对象,对引起头皮屑的糠秕马拉色菌进行活化培养,通过牛津杯法、打孔法、滤纸片法,三种扩散法进行实验筛选;结果表明,牛津杯法的准确性和重复性更好,实验结果更符合实际意义,可以作为一种新的可行性较高的去屑功效评价手段。

3种香辛料提取物抑菌及挥发性成分的研究

选取常见的辛辣调味料花椒、八角、辣椒为材料,以乙醇为提取剂,采用普通蒸馏法进行提取,以3种常见细菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌为供试菌,采用牛津杯法测定八角、辣椒、花椒提取液的抑菌效果。实验结果表明,八角提取液对3种菌株均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用较好;辣椒提取液对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用;花椒提取液对3种供试菌均无明显的抑制作用。采用气相色谱-质谱法分析提取物中主要挥发性化学成分,分析结果表明:八角、花椒提取液中的主要挥发性有机成分各有27种,八角提取物的成分中存在多种同分异构体,有机成分中茴香脑相对含量为59.4568%,占一半以上;花椒提取物中茴香脑的相对含量为4.1965%,有机成分中大多以低分子量的烷烯为主;辣椒提取液中的挥发性主要有机成分有30种,含量最高的也是茴香脑,其相对含量为22.7613%,活性成分辣椒素的相对含量为12.5766%。

蛋氨酸羟基类似物和有机酸化剂对主要肠道病原菌体外抑菌效果的比较

本文旨在采用平板法和试管法测定蛋氨酸羟基类似物(HMTBA)体外抑菌效果,并与常见有机酸,如乳酸(LA)、甲酸(FA)以及二甲酸钾(KDF)进行比较。试验结果表明,HMTBA对鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、产气荚膜梭菌和空肠弯曲菌的抑菌效果与等摩尔甲酸、二甲酸钾相当,优于等摩尔乳酸。

丁香提取物抑菌作用及稳定性研究

采用牛津杯法研究丁香提取物的抑菌作用,对提取工艺进行优化,并探讨提取物的最小抑菌浓度和抑菌稳定性影响因素。结果表明,用体积分数85%的乙醇提取,料液比为1∶10,提取温度80℃,超声波提取80 min时,获得的丁香提取物对常见细菌均具有较好的抑菌效果。其中丁香提取物对表皮葡萄球菌的抑菌效果最好,最小抑菌浓度为0.0531 g/mL,对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度为0.1063 g/mL。丁香提取物对紫外线有很强的稳定性,对热稳定性较好,大多数金属离子对其抑菌效果也无明显作用,在弱酸性及中性环境下的抑菌稳定性很好,但是对强酸和碱敏感。因此,丁香提取物可运用于食品的防腐保鲜,并且适应多种加工条件。

8种单体多酚对葡萄酒微生物的抑菌活性比较

酚类化合物不仅能赋予葡萄酒丰富的色泽、风味和抗氧化活性,还能抑制葡萄酒微生物的生长。为了比较不同多酚化合物抑菌能力的大小,用牛津杯测试法研究了不同质量浓度(2、5、10 g/L)单体多酚(儿茶素、表儿茶素、没食子酸、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)、鞣花酸、杨梅酮、槲皮素和山奈酚)对引起葡萄酒病害的代表菌种:乳酸菌、醋酸菌和酵母菌的抑制作用。结果表明:在8种供试多酚中,杨梅酮、槲皮素和EGCG抑菌能力相对较强;黄烷-3-醇类化合物对醋酸菌和酵母菌的抑制能力比乳酸菌更强,没食子酸则恰好相反;山奈酚对所有供试菌株都没有抑菌能力。多酚能在一定程度上抑制葡萄酒微生物的生长繁殖。

产类细菌素乳酸菌的筛选及其生物学特性研究

采用平板稀释和CO2厌氧培养技术,从多种发酵食品中分离出158株乳酸菌。通过牛津杯双层平板扩散试验,筛选出1株有明显抑菌活性的乳酸菌R-6,经初步鉴定为乳酸乳杆菌(Lactobacillus sp.)。R-6发酵上清液用NaOH调节pH5.5,对指示菌Escherichi coli.仍有明显抑菌活性,过氧化氢酶作用后其抑菌效果基本不变,因此可以排除乳酸和过氧化氢的干扰;R-6培养液经胰蛋白酶和蛋白酶K处理后,抑菌活性明显降低,且超过100℃热处理其抑菌活性迅速丧失,证实所产抑菌物质确系多肽类细菌素。该细菌素在酸性条件下活性较强,对革兰氏阴性菌(E.coli)抑菌作用较强,对革兰氏阳性菌(Bacillus subtilis和Staphlococcus aureus)也有明显抑制,显示出一定的抗菌广谱性。

具有抑制大肠杆菌作用的乳酸菌的初步筛选及其益生潜能的研究

为了筛选出具有抑制致病性大肠杆菌作用的乳酸菌,本实验以大肠杆菌ATCC25922作为指示菌,抑菌实验采用牛津杯法。通过发酵上清液对大肠杆菌ATCC25922的抑菌实验,初步筛选出三株乳酸菌发酵上清液对大肠杆菌ATCC25922具有抑制作用,经过对16S rRNA基因进行系统发育分析,发现这三株乳杆菌均为嗜酸乳杆菌。随后又对这三株嗜酸乳杆菌进行了耐酸、耐胆盐及抗生素敏感性实验。结果表明:KLDS1.0901酸耐受性最强,而KLDS1.0902和KLDS1.1003与Lactobacillus acidophilus NCFM酸耐受性接近;对照菌株Lactobacillus acidophilus NCFM胆盐耐受能力最强,KLDS1.0901和KLDS1.1003与Lactobacillus acidophilus NCFM胆盐耐受能力差异不显著,KLDS1.0902胆盐耐受能力最弱;对于抗生素敏感性,三株嗜酸乳杆菌展现出类似的结果,对氨基糖苷类的抗生素展现出耐受;相比于KLDS1.0902,KLDS1.0901和KLDS1.1003有着更好的益生作用潜能,因此随后将对这两株菌在细胞和动物模型中对抗病原菌的作用进行进一步的研究。