银杏素调节TGF⁃β1/Smad通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨银杏素调节转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法将人脐静脉血管内皮细胞HUVEC分为对照组(未处理的HUVEC细胞)、模型组(50μg/mL ox⁃LDL处理的HUVEC细胞)、银杏素组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素处理HUVEC细胞)、SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+10μmol/L的TGF⁃β1/Smad激活剂SRI⁃011381处理HUVEC细胞)、银杏素+SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素+10μmol/L的SRI⁃011381共同处理HUVEC细胞)。ELISA试剂盒检测HUVEC细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;CCK⁃8法检测HUVEC细胞增殖;流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡率;Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)、TGF⁃β1/Smad通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、神经型钙黏附蛋白(N⁃cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白水平显著增加(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、上皮钙黏附素(E⁃cadherin)蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,银杏素组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、N⁃cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、E⁃cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),而SRI⁃011381组趋势相反,SRI⁃011381减弱了银杏素对ox⁃LDL诱导的HUVEC细胞损伤的抑制作用。结论银杏素可能通过下调TGF⁃β1/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导的血管内皮细胞损伤起到改善作用。

Essen卒中风险评分联合OX-LDL、UCH-1对非房颤人群首发急性缺血性脑卒中患者短期预后的预测价值

目的探讨Essen卒中风险评分联合氧化型低密度脂蛋白胆固醇(Oxidized low-density lipoprotein,OX-LDL)、血清泛素C末端水解酶L1(Ubiquitin carboxy-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)对非房颤人群首发急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)患者短期预后的预测价值。方法根据改良Rankin量表(Modified rankin scale,mRS)评分,将132例非房颤人群首发AIS患者分为预后良好组(mRS≤2分)93例,预后不良组(mRS>2分)39例,在入院治疗前进行Essen卒中风险评分和血清OX-LDL、UCH-L1检测。采用Spearman相关性分析Essen卒中风险评分与OX-LDL、UCH-L1水平的差异,采用Logistic回归分析预后不良的危险因素,采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析Essen卒中风险评分、OX-LDL、UCH-L1水平及三者联合对非房颤人群首发AIS预后评估的效果。结果预后不良组Essen卒中风险评分高于预后良好组(Z=-5.365,P<0.001),血清中OX-LDL、UCH-L1水平高于预后良好组(Z=-6.152,P<0.001;Z=-7.020,P<0.001)。血清中OX-LDL、UCH-L1水平与Essen评分呈正相关(r=0.629,P<0.001;r=0.598,P<0.001)。Logistic回归分析显示,Essen卒中风险评分、OX-LDL、UCH-L1是脑卒中预后的独立影响因素。Essen卒中风险评分联合OX-LDL、UCH-L1对非房颤人群首发AIS预后的ROC曲线下面积为0.896,灵敏度为88.54%,特异度为92.93%。结论Essen卒中风险评分联合OX-LDL、UCH-L1对非房颤人群首发AIS预后有良好的预测作用,Essen卒中风险评分、OX-LDL、UCH-L1水平越高,提示预后不良的风险越大。

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路的miR-24调控ox-LDL诱导的HUVECs自噬机制研究

目的探讨miR-24对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬的影响及其相关机制,为进一步阐明miR-24在动脉粥样硬化(AS)中的作用提供理论依据。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-24的表达;应用蛋白免疫印迹法(western blot)和qRT-PCR法检测Beclin-1、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、p-mTOR、p-PI3K、p-Akt的蛋白和mRNA表达水平;应用透射电子显微镜技术检测细胞的自噬小体生成情况;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、细胞划痕法、Caspase-3比色法和Hoechst 33258染色法分别检测细胞活性、迁移和凋亡情况。结果应用ox-LDL诱导HUVECs后,发现HUVECs中miR-24的表达显著降低(P<0.05)。miR-24过表达可明显抑制ox-LDL诱导的HUVECs自噬(P<0.05),而miR-24低表达则会增加ox-LDL诱导的HUVECs自噬(P<0.05)。miR-24过表达可显著降低Beclin-1的表达水平,上调LC3Ⅰ/LC3Ⅱ的水平(P<0.05),同时,miR-24过表达可显著促进p-PI3K、p-Akt和p-mTOR的表达(P<0.05)。此外,miR-24过表达显著抑制HUVECs的活力和迁移,增加Caspase-3活性并促进其凋亡(P<0.05)。结论miR-24的过表达可激活PI3K/Akt/mTOR信号通路而降低ox-LDL诱导的HUVECs的自噬水平并促进其凋亡,miR-24可能成为AS的潜在治疗新靶点。

梓醇对T2DM大鼠大血管病变的保护作用及与oxLDL/LDL和NF-κB信号通路的关系

目的探讨梓醇对2型糖尿病(T2DM)大鼠大血管病变的保护作用与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)/低密度脂蛋白(LDL)和核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的关系。方法用高糖高脂饲料喂养和腹腔注射STZ复合因素对大鼠进行T2DM造模,将大鼠分为模型组、二甲双胍组(134 mg·kg^(-1)·d^(-1))、梓醇组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),另设对照组,每组10只,模型组和对照组给予相同体积的0.9%氯化钠溶液,干预4周。结束后,自动生化分析仪检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平;酶联免疫吸附法测定人巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、oxLDL含量;RT-PCR法检测主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA表达;Western blot检测主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1蛋白表达;透射电镜观察大鼠主动脉内皮细胞结构。结果对照组大鼠主动脉内皮细胞形态正常,模型组细胞显著肿胀,连续性中断、见空泡,部分内皮细胞有显著脱落,细胞核褶皱变形,线粒体、内质网中度肿胀,嵴肿胀紊乱或溶解,见脂滴、糖原颗粒;二甲双胍组和梓醇组内皮细胞形态结构轻微肿胀,线粒体、内质网结构正常,细胞核轻微变形,部分内皮细胞有轻微脱落,损伤程度显著轻于模型组。与对照组比较,模型组血清FBG、TC、TG、LDL水平,MCP-1和oxLDL水平,主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA及蛋白表达量显著性升高(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组和梓醇组血清FBG、TC、TG、LDL水平,MCP-1和oxLDL水平,主动脉壁LOX-1、NF-κB p65、MCP-1 mRNA及蛋白表达量显著性降低(P<0.05)。结论梓醇可能通过oxLDL/LDL和NF-κB信号通路减轻T2DM大鼠大血管病变。

高血压性脑出血患者微创血肿清除术前血清ox-LDL、25-(OH)-D水平对脑水肿的预测价值

目的分析高血压性脑出血(HICH)患者微创血肿清除术前血清氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)、25-羟维生素D[25-(OH)-D]水平对脑水肿的预测价值。方法选择2020年8月至2022年8月复旦大学附属华山医院虹桥院区75例HICH患者作为研究对象,根据术前血清ox-LDL水平将患者分为高水平ox-LDL组(ox-LDL≥50μg/dL)、低水平ox-LDL组(ox-LDL<50μg/dL),根据血清25-(OH)-D水平高低将患者分为高水平25-(OH)-D组(25-(OH)-D≥30 ng/mL)、低水平25-(OH)-D组[25-(OH)-D<30 ng/mL],比较各组术后48 h内脑水肿发生率,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析术前血清ox-LDL、25-(OH)-D水平对HICH患者微创血肿清除术后脑水肿的预测价值。结果不同血清ox-LDL、25-(OH)-D水平患者血肿体积、纤维蛋白原水平、脑水肿发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Point-biserial相关分析结果显示,HICH患者脑水肿发生情况与血清ox-LDL水平呈正相关(r=0.455,P<0.05),与血清25-(OH)-D水平呈负相关(r=-0.534,P<0.05);Pearson相关分析结果显示,血清ox-LDL水平与25-(OH)-D水平呈负相关(r=-0.444,P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,术前血清ox-LDL、25-(OH)-D单独及联合检测预测HICH患者微创血肿清除术后脑水肿的曲线下面积(AUC)分别为0.777、0.768、0.839,联合检测的AUC最大。结论HICH患者微创血肿清除术前血清ox-LDL水平呈高表达、25-(OH)-D水平呈低表达,术前血清ox-LDL、25-(OH)-D水平对HICH患者微创血肿清除术后脑水肿具有较高的预测价值。

Ox-LDL诱导血管内皮细胞表达LOX-1

【目的】探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)作为氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的特异性受体在摄取ox-LDL后对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达LOX-1的影响以及LOX-1在ox-LDL诱导其自身表达中所起的作用。【方法】用天然低密度脂蛋白(n-LDL)、LOX-1的受体阻断剂聚肌苷酸[pdy(Ⅰ)]250μg／mL和爱兰苔胶(carrageenan)以及不同质量浓度的ox-LDL(0，10，20，50，100μg／mL)与HUVECs作用于不同的时间(0，6，12，24，36h)，用Realtime RT-PCR测定LOX-1 mRNA的表达水平，用Western blot测定LOX-1蛋白表达水平，并比较加入LOX-1阻断剂前后LOX-1表达的变化。【结果】在HUVECs中加入不同质量浓度的ox-LDL(0，10，20，50，100μg／mL)，各组剂量的ox-LDL都可以增加LOX-1 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01)，在10～50μg／mL的剂量范围内有明显的剂量-效应关系。但n-LDL对LOX-1的表达元影响。随着ox-LDL与HUVECs作用时间的延长，LOX-1 mRNA和蛋白的表达显著升高(P＜0.01)，在6～24h内呈明显的时间-效应关系(P＜0.01)。HUVECs预先与250μg／mL的poly(Ⅰ)或carrageenan作用2h，然后再加入50μg／mL的ox-LDL作用24h。poly(Ⅰ)和carrageenan都可以显著抑制ox-LDL诱导的LOX-1 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01)。【结论】Ox-LDL可以诱导HUVECs LOX-1的表达，该诱导作用可被LOX-1的阻断剂部分拮抗。表明LOX-1不仅特异性地结合ox-LDL，而且介导ox-LDL对LOX-1表达的上调作用。

MiR-590-5p对ox-LDL诱导血管内皮细胞凋亡以及LOX-1表达的影响

目的：研究miR-590．5p对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡过程中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）表达的调节作用，观察miR-590．5p对HUVECs凋亡的影响。方法：HUVECs经ox-LDL（50／ag／mL）作用不同时间（0-48h）。AnnexinV-FITC／PI双染流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-590-Sp的表达变化。HUVECs转染miR-590-Sp模拟物（miR-590-5pmimics）后ox-LDL继续作用48h-RT-qPCR和Western印迹分别检测LOX．1mRNA和蛋白的表达情况。FCM检测HUVECs凋亡率的变化。结果：随ox-LDL作用时间的延长，HUVECs凋亡率逐渐升高，miR-590-5p表达逐渐下调。miR-590-5p模拟物转染后可以降低LOX．1mRNA和蛋白的表达，并抑制ox-LDL诱导的HUVECs凋亡。结论：miR-590-5p可抑制ox-LDL诱导的HUVECs凋亡，其机制可能与下调LOX-1基因表达有关。

LOX-1介导ox-LDL诱导的血管内皮细胞MCP-1的表达

目的:观察血凝素氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)对氧化LDL(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(humanunbilicalveinendothelialcells,HUVECs)表达单核细胞趋化蛋白(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)基因及蛋白的影响。方法:用RT-PCR和Westernblot的方法观察ox-LDL对培养的HUVECs表达LOX-1和MCP-1基因及蛋白的影响,然后用LOX-1的受体阻滞剂爱兰苔胶(carrageenan)和聚肌苷酸[polyinosinicacid,poly(I)]与HUVECs预先作用后,再观察内皮细胞表达LOX-1和MCP-1基因和蛋白的变化。结果:用不同浓度的ox-LDL(0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L)与HUVECs培养24h后,LOX-1和MCP-1的mRNA和蛋白的表达明显增加,呈浓度依赖性;用Carrageenan和polyinosinicacid与HUVECs预先作用2h后,再加入50mg/L的ox-LDL培养24h,与未加Carrageenan和polyinosinicacid相比,HUVECsLOX-1和MCP-1的mRNA和蛋白的表达明显减少。结论:ox-LDL可以调节培养的HUVECsLOX-1和MCP-1基因和蛋白的表达,LOX-1作为ox-LDL的特异性受体,可能介导了ox-LDL诱导血管内皮细胞分泌MCP-1,从而在动脉粥样硬化的发生发展中起着重要的作用。

3种姜黄色素干预ox-LDL促平滑肌细胞增殖与影响LDL-R表达的研究

目的:研究3种不同结构的姜黄色素单体对牛主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖及牛VSMC低密度脂蛋白受体(LDL-R)表达的影响,解析构效关系。方法:用MTT比色法和流式细胞仪观察3种不同结构的姜黄色素单体对ox-LDL促牛VSMC增殖及对VSMC LDL-R表达的影响。结果:ox-LDL在2.5,5,10 mg.L-1时,对VSMC有明显的促增殖作用,P<0.05。姜黄素16.5,33,66μmol.L-1,一脱甲氧基姜黄素(简称一脱)33,66μmol.L-1和二脱甲氧基姜黄素(简称二脱)66μmol.L-1对10 mg.L-1ox-LDL培养的VSMC有明显的抑制作用,P<0.05。3种姜黄色素的抑制率为姜黄素>一脱>二脱。3种姜黄色素在66,33,16.5μmol.L-1时对VSMC LDL-R的表达均有明显的上调作用,其中姜黄素16.5μmol.L-1组与正常组比较,P<0.05,其他组与正常组比较P<0.01,上调作用二脱>一脱>姜黄素,经组间方差分析,P<0.01,与姜黄色素抑制牛VSMC增殖作用相反。结论:3种不同结构姜黄色素单体能明显抑制ox-LDL促牛VSMC增殖作用,上调牛VSMC LDL-R表达,从而有可能延缓动脉粥样硬化的发生发展过程。

木豆叶、鲜地黄提取物对ox-LDL损伤的HUVEC的保护作用

目的研究木豆叶、鲜地黄提取物(DMT)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响,初步探讨DMT防治动脉粥样硬化的机制。方法应用血清药理学方法制备正常对照、辛伐他汀、DMT血清,以供细胞实验使用。采用ox-LDL损伤HUVEC,与各组药物共培养,即空白组、模型组、辛伐他汀组(15%辛伐他汀血清)及DMT低(5%DMT血清)、中(10%DMT血清)、高剂量组(15%DMT血清),24 h后MTT法检测细胞活力;收集细胞,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量;硝酸还原酶法检测上清液NO含量;ELISA法检测上清液内皮素(ET-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)含量;Western Blot法检测细胞凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(Lox-1)、Caspase-3、Cytc蛋白的表达。结果与模型组比较,辛伐他汀组及DMT低、中、高剂量组细胞活力明显提高(P<0.01);DMT低剂量组ROS水平明显降低(P<0.05);辛伐他汀组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01);DMT低剂量组细胞Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.01);DMT中剂量组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01),细胞上清液中NO含量明显升高(P<0.01);DMT高剂量组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.01),NO含量明显升高(P<0.01)。结论DMT能够抑制ox-LDL诱导的HUVEC损伤,恢复其收缩舒张分泌功能,其机制可能与影响Lox-1介导的内皮细胞氧化应激有关。

冠心病患者血清TBIL与OX-LDL水平的变化与相关性研究

目的探讨冠心病(CHD)血清总胆红素(TBIL)与氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)水平的变化及其相互之间的关系。方法采用日立7600-20型全自动生化分析仪氧化酶法检测血清TBIL含量。用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测OX-LDL水平。结果冠心病组血清TBIL明显低于健康对照组[(8.85±2.97)μmol/Lvs(15.51±3.92)μmol/L,P<0.01],而血浆OX-LDL明显高于健康对照组[(85.63±32.45)mmol/Lvs(29.21±11.36)mmol/L,P<0.01]。冠心病患者血清TBIL与血浆OX-LDL的变化呈显著负相关(r=-0.61,P<0.01),而健康对照组中两者间的相关性则不明显(r=-0.15,P>0.05)。结论冠心病时血清TBIL显著降低而OX-LDL显著升高。冠心病患者血清TBIL抗LDL氧化能力的减弱可能是导致OX-LDL升高的重要原因之一。

Ox-LDL对PMA诱导的THP-1巨噬细胞自噬的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)对PMA诱导的THP-1巨噬细胞自噬的影响。方法 PMA诱导THP-1细胞24 h,使其分化为巨噬细胞,再分别用0、10、20、40或80 mg/L的Ox-LDL处理24 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹技术(Western blotting)分别检测Beclin-1以及LC3的mRNA及蛋白表达;细胞免疫荧光检测LC3在细胞内的含量;MDC染色检测自噬囊泡的形成。结果随着Ox-LDL浓度的增加,THP-1源性巨噬细胞Beclin-1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);LC3 mRNA表达无明显改变(P>0.05),但蛋白水平LC3II/LC3I显著降低(P<0.001);免疫荧光结果表明随着Ox-LDL浓度的增加,LC3II含量降低,MDC染色结果显示自噬囊泡随着Ox-LDL浓度的增加而减少。结论 Ox-LDL抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞自噬。

子痫前期患者oxLDL、8-isoprostane、MDA和MIF的检测及意义

目的探讨子痫前期患者氧化低密度脂蛋白(oxidatively modified low density lipoprotein,oxLDL)、8-异前列腺素(8-isoprostane)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibition factor,MIF)的检测及其临床意义。方法选择子痫前期患者49例,其中轻度子痫前期患者(轻度子痫前期组)26例,重度子痫前期患者(重度子痫前期组)者23例。选择接受剖宫产术的正常妊娠晚期孕妇(对照组)30例。检测3组胎盘组织中MIF mRNA的表达水平及血浆oxLDL、8-isoprostane、MDA的水平,并对轻度、重度子痫前期2组血浆oxLDL水平与胎盘组织中MIF mRNA表达水平的相关性进行分析。结果与对照组比较,轻度、重度子痫前期2组血浆oxLDL、8-isoprostane、MDA水平及胎盘组织中MIF mRNA表达水平均明显升高(均P<0.01);与轻度子痫前期组比较,重度子痫前期组血浆oxLDL、8-isoprostane、MDA水平及胎盘组织中MIF mRNA表达水平均显著升高(均P<0.01)。轻度、重度子痫前期2组血浆oxLDL水平与胎盘组织中MIF mRNA表达水平均呈正相关(r=0.85、0.87,均P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘组织中MIF及血浆oxLDL、8-isoprostane、MDA的过度表达,可能参与子痫前期的发生发展。

LOX-1介导苯扎贝特对ox-LDL所引起PAI-1表达的影响

目的探讨苯扎贝特对ox-LDL所诱导HUVECs表达PAI-1的影响及是否通过LOX-1介导。方法体外培养HUVECs,RT-PCR检测PAI-1 mRNA表达,ELISA法观察PAI-1蛋白含量表达。结果ox-LDL组,PAI-1 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),poly(Ⅰ)组,PAI-1 mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.05);不同浓度苯扎贝特组,PAI-1 mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.05),组间比较差异有统计学意义,呈浓度依赖关系(P<0.05);Poly(Ⅰ)+100μmol/L苯扎贝特组,与未加poly(Ⅰ)组比较,PAI-1 mR-NA和蛋白表达均明显减少(P<0.05)。结论LOX-1介导了ox-LDL所诱导HUVECsPAI-1的表达;苯扎贝特可以下调ox-LDL所诱导的HUVECs PAI-1的表达,呈浓度依赖关系,部分机制可能通过LOX-1介导。

冠心病患者血清TBIL与OX-LDL水平的变化及其相关性

目的 探讨冠心病(Coronary heart disease, CHD)患者血清总胆红素(Total bilirubin, TBIL)与氧化修饰低密度脂蛋白(low density lipoprotein, OX-LDL)水平的变化及其相互关系。 方法 采用氧化酶法和 ELISA(Enzyme-linkedimmunoadsordent assay)法分别检测血清TBIL及血浆OX-LDL水平。 结果 冠心病患者血清TBIL水平显著低于正常对照组(P <0 01),而血浆OX-LDL水平则明显高于正常对照组(P <0 .01);冠心病患者血清TBIL与血浆OX-LDL水平呈显著负相关(r =-0 .59, P <0. 01),而正常对照组这两成分间则无明显相关性(r =-0 .18, P <0. 05)。 结论 冠心病患者血清TBIL水平显著降低而OX-LDL显著升高;冠心病患者血清TBIL抗LDL氧化能力的减弱可能是导致OX-LDL升高的重要原因之一。

LOX-1介导oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞高通透性反应

目的探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(lectin like oxidized low density lipoprotein receptor 1,LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮高通透性反应中的作用。方法采用Transwell单层细胞模型系统和油红O染色,观察oxLDL或和LOX-1阻断抗体对单层血管内皮细胞LDL通透性的影响以及下室THP-1巨噬细胞内脂质的蓄积情况;用Western blot法和激光扫描共聚焦显微镜检测oxLDL或和LOX-1阻断抗体对桥粒芯糖蛋白1(DSG1)在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中表达和分布的改变。结果 oxLDL可以增加单层内皮细胞对LDL的通透性和下室THP-1巨噬细胞脂质的蓄积,同时降低DSG1的表达及其在细胞间分布的连续性,而抑制LOX-1可以减弱内皮细胞的高通透性反应和巨噬细胞脂质蓄积。结论 oxLDL可能是通过降低桥粒蛋白表达使内皮细胞构型改变来诱导内皮高通透性,从而促进内皮下巨噬细胞内的脂质蓄积,其机制可能涉及LOX-1的介导。

茶多酚对ox-LDL刺激的系膜细胞NF-κBp65活化的影响

目的 观察茶多酚对培养的大鼠肾小球系膜细胞摄取氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)及其NF κBp6 5的活化的影响。方法 以ox LDL刺激体外培养的大鼠系膜细胞 ,用不同浓度的茶多酚干预后 ,测定系膜细胞内总胆固醇 (TC)含量 ,免疫组化染色检测NF κBp6 5的活化。结果 ox LDL刺激后 ,系膜细胞内TC含量明显增高 ,NF κBp6 5活化率明显增加 ;茶多酚干预后系膜细胞内TC含量及其NF κBp6 5的活化率明显下降。结论 茶多酚可抑制系膜细胞摄取ox LDL及其诱导的NF κBp6 5的活化。

氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(H-UVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响。方法:采用ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,将细胞分为空白组、ox-LDL高、中、低剂量组(25μg/ml、50μml、100μg/ml、200μg/ml),采用CCK8法检测HUVEC活性,采用实时荧光定量PCR分析NOR1转录水平变化,采用Western-Blot分析NOR1蛋白表达的变化。结果:在HUVEC中加入不同浓度ox-LDL共同培养12h后,CCK8值与ox-LDL呈现明显的剂量反应关系,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.01)。Ox-LDL能够诱导NOR1 mRNA转录和蛋白表达,NOR1 mRNA峰值出现在ox-LDL共同培养后的3h,NOR1蛋白质最大值出现在ox-LDL共同培养后的6 h。结论:ox-LDL能够损伤HUVEC,并能诱导NOR1的表达上调,其在内皮细胞损伤和动脉粥样硬化炎性反应中的作用有待进一步研究。

冠心病患者血清TBIL与OX-LDL水平的变化及其相关性研究

目的:探讨冠心病(CHD)血清总胆红素(TBIL)与氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)水平的变化及其相互之间的关系。方法:采用日立7600-20型全自动生化分析仪氧化酶法检测血清TBIL含量;采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测OX-LDL水平。结果:冠心病组血清TBIL明显低干健康对照组(8.855±2. 97μmol/L vs 15.51±3.92μmol/L,P<0.01),而血浆OX-LDL明显高于健康对照组(85.63±32.45mmol/L vs 29.21±11.36mmol/L,P<0.01);冠心病患者血清TBIL与血浆OX-LDL的变化呈显著负相关(r=-0. 61,P<0.01),而健康对照组中两者间的相关性则不明显(r=-0.15,P>0.05)。结论:冠心病时血清TBIL显著降低而OX-LDL显著升高;冠心病患者血清TBIL抗LDL氧化能力的减弱可能是导致OX-LDL升高的重要原因之一。

瑞舒伐他汀对ox-LDL诱导的人单核巨噬细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨瑞舒伐他汀对ox-LDL诱导的健康人单核巨噬细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA及蛋白表达的影响.方法 体外密度梯度离心法分离并培养单核巨噬细胞并传至2～4代用于实验.单核巨噬细胞培养24 h作为空白对照组,ox-LDL 100 mg/ml培养24 h作为ox-LDL对照组,实验组分别用ox-LDL 100 mg/ml培养2 h后,各加入不同剂量瑞舒伐他汀（0.01、0.1、1.0、10.0 μmol/L）共同作用24 h.分别提取各组细胞RNA,用半定量逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）测定MMP-9 mRNA表达,用ELISA法测定MMP-9的蛋白含量.结果 单核巨噬细胞经100 mg/ml ox-LDL诱导后,与空白对照组比较MMP-9mRNA和蛋白表达显著增加;ox-LDL诱导后,不同剂量瑞舒伐他汀组与ox-LDL对照组比较MMP-9 mRNA和蛋白表达显著降低,并呈剂量-效应关系,P＜0.05;与空白对照组比较,瑞舒伐他汀10.0μmol/L组MMP-9蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 外周血单核巨噬细胞在ox-LDL诱导后,MMP-9mRNA和蛋白含量明显增加.瑞舒伐他汀呈剂量依赖性,可能通过ox-LDL途径来下调人单核巨噬细胞MMP-9 mRNA和蛋白含量的表达,起到抗炎和稳定斑块的作用.