光棘豆悬浮细胞原生质体培养再生小植株(简报)

迄今为止,药用植物原生质体培养再生植株的报道还不多。光棘豆(Oxytropis leptophylla)是多年生豆科植物,可饲用,是一种常用的野生中草药。全株入药有清热解毒功能,用于治疗痈疤肿毒。已有研究表明,光棘豆具有离体培养时愈伤组织增殖快、植株再生频率高的特点。进行原生质体培养再生植株的研究将有助于光棘豆的改良和驯化,为其开发利用提供基础。本文首次报道了光棘豆悬浮细胞原生质培养再生小植株的结果。

光棘豆单细胞培养再生植株

选择光棘豆胚轴体细胞无性系中再生能力强的愈伤组织，通过继代培养诱导出不同类型的愈伤组织。将其转入液体培养基Ｓ１２（２．４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ，ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ，ＺＴ０．２５ｍｇ／Ｌ）振汤培养，经过滤得到单细胞，２１％蔗糖溶液漂洗纯化后，以１～５×１０￣５个／ｍＬ的密度接种到Ｓ１２培养基中进行液体浅层和双层培养，每７ｄ加液一次，形成愈伤组织后转入增殖培养基；经ＮＢ１２培养基诱导分化出芽，ＭＩ培养基（ＭＳ＋ＩＢＡ０．４ｍｇ／Ｌ）诱导生根，再生完整植株。五种类型的愈伤组织分离的单细胞均能再生细胞团，但只有来源于Ｂ类和Ｃ类愈伤组织的单细胞再生愈伤组织可分化出完整再生植株。

光棘豆单细胞培养再生植株

由光棘豆种子无菌苗的胚轴和子叶诱导的愈伤组织建立起细胞悬浮系。由悬浮系分离出单细胞。单细胞在含有1～2mg/L 2,4—D的2/3MS培养基中采用振荡和静止两种方法培养。结果表明。振荡培养愈伤组织再生频率较高,所需时间较短。单细胞再生的愈伤组织转入分化培养基后分化出芽。幼苗转入含有IBA和IAA的1/2MS培养基中生根,成为完整的再生植株。在分化培养基中,只有瘤状愈伤组织能够分化出芽。并且较高浓度的细胞分裂素(6—BA或KT)或6—BA与ZT结合使用对愈伤组织的分化是有利的。