基于P32蛋白的山羊痘病毒抗体荧光微球检测方法的建立

为建立一种山羊痘病毒(GTPV)抗体快速检测方法,试验将携带GTPV结构蛋白P32基因的重组质粒pET28a-P32转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后获得了重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明该蛋白具有良好的特异性和反应原性。以荧光微球为标记材料对P32蛋白进行标记,通过优化反应条件制备了快速检测GTPV抗体的荧光微球免疫层析试纸条,并对其性能进行评价。结果:该试纸条与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)的阳性血清均无交叉反应;阳性血清稀释至800倍仍能检出阳性,敏感性较高;批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,稳定性较好;与ELISA检测方法对比的总符合率为92.5%。综上,本试验建立的荧光微球试纸条可用于GTPV抗体的快速检测和流行病学调查。

单分散磁性P(St/BA/MAA)微球的制备

在共沉淀法合成超细磁流体的基础上 ,以苯乙烯 (St)、丙烯酸丁酯 (BA)和甲基丙烯酸 (MAA)为共聚单体 ,在不同的介质体系中采用无皂乳液聚合法制备了单分散 ,粒径范围为 80～ 2 30nm的磁性P(St BA MAA)微球 .详细探讨了介质极性、磁流体中表面活性剂含量对磁性高分子微球粒径和单分散性的影响 .实验结果表明 ,在一定范围内随介质极性降低 ,磁性高分子微球的单分散性提高 ,随表面活性剂用量增加 ,单分散性变差 .总体来看 ,磁性高分子微球的单分散性与其表面静电斥力密切相关 ,过大或过小的静电斥力均会导致磁性高分子微球单分散性的降低 .

溶胶-凝胶法制备新型P(AM-co-MAA)/SnO_2复合微球

以反相悬浮聚合法制备得到的P(AM-co-MAA)为模板,通过SnCl4的Sol-gel法制备得到新型P(AM-co-MAA)/SnO2复合微球.通过扫描电子显微(SEM)、傅立叶红外分析(FT-IR)、热重分析(TG)、X-射线衍射分析(XRD)和元素分析(EA)等一系列表征手段对复合微球的表面形貌和无机物组成进行了表征.

P(St-EA-MAA)模板法制备中空二氧化硅微球

以种子乳液聚合制得的P(St-EA-MAA)共聚物微球为模板,γ-氨丙基三甲氧基硅烷(APS)为助结构导向剂,正硅酸四乙酯(TEOS)为硅源,制备了P(St-EA-MAA)/SiO2复合微球,经高温煅烧除去聚合物模板,得到了中空二氧化硅微球。热重分析(TGA)表明模板剂的最佳脱除温度为600℃。高分辨透射电镜(HRTEM)观察显示所制得的二氧化硅微球具有典型的中空结构和良好的单分散性,其尺寸主要取决于共聚物微球的大小,通过调节微球模板的尺寸可以有效控制中空微球的大小。N2吸附-脱附曲线显示二氧化硅壁具有丰富的微孔,比表面积、平均孔径和孔容分别为117.87m2/g、1.98nm和0.21cm3/g。在制备复合微球的过程中加入一定量的CTAB可以调整中空微球的壁厚和壁的孔结构,使其比表面积、平均孔径和孔容增加到219.79m2/g、3.89nm和0.25cm3/g。

聚(甲基丙烯酸/丙烯酰胺)pH敏感微球的制备及性能的研究

以单体丙烯酰胺(AM)、甲基丙烯酸(MAA)为原料,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,在无水乙醇溶液中,60℃时通过沉淀聚合的方法制备出一系列的聚甲基丙烯酸/丙烯酰P(MAA/AM)微球。实验结果表明,成功的制备700～1 100 nm粒径范围内的单分散的微球;初步实现了对单分散的微球粒径大小及分布情况的控制设计。此外,微球具有良好的pH敏感性,此性能与MAA的解离常数有关;通过对环境pH值的调节可以迅速控制微球自身体积的收缩与溶胀。

负载CGRP及SP的明胶缓释微球用于修复家兔骨质疏松模型骨缺损的研究

目的:将负载不同浓度的降钙素基因相关肽(CGRP)及P物质(SP)的明胶缓释微球植入骨质疏松兔的股骨缺损中,观察其对骨缺损修复的影响。方法:通过去势方法建立兔骨质松模型,利用乳化交联的方法制备负载不同浓度的CGRP及SP的明胶缓释微球。将24只骨质疏松兔随机分组,于股骨髁部制备骨缺损并分别植入负载10-6 mol/L、10-8 mol/L和10-10 mol/L的SP以及CGRP的明胶微球,3个月后处死观察结果。结果:负载不同浓度的CGRP及SP均能有效地促进成骨,影像学结果示SP在10-6 mol/L时其骨体积分数最高,并且能有效提高骨小梁数量,降低骨小梁间的间距(P<0.05),CGRP在浓度为和10-8 mol/L时效果即达到上述效果;而组织学结果示SP和CGRP均在浓度为10-6 mol/L时其新生骨组织比例最高(P<0.05)。结论:负载不同浓度的CGRP及SP均能有效地促进骨质疏松兔骨缺损的成骨,在所研究的浓度中,高浓度的效果优于低浓度的效果。

Fe_3O_4/P(St-CBA)核壳磁性复合微球的制备及性质

运用分散聚合法制备出Fe3O4 /P(St -CBA)核壳磁性复合微球。该微球粒径为 0 .0 75～0 .70 0 μm、w(Fe3O4 ) =0 .0 5 %～ 0 .90 % ,呈规整球型 ,表面光滑 ,在 0 .0 5T磁场中的磁响应性为3.0cm/min。制备微球的最佳条件为 :w(磁流体 ) =0 .5 %～ 3 .0 %、w(马来酸酐 ) =0 .0 %～2 .0 %、w(无水乙醇 ) =30 .0 %～ 70 .0 %。

Ni_(12)P_5微球的溶剂热合成与表征

以硫酸镍(NiSO4.7H2O)作为镍源,以乙二醇和水作为混合溶剂,利用溶剂热法成功地制备了磷化镍(Ni12P5)微球。X射线粉末衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电镜(TEM)和高分辨透射电镜(HRTEM)等分别对所制备样品进行了表征。结果表明,所得产物为纯的四方相磷化镍(Ni12P5)微球,粒径约为2～5μm;研究了不同实验参数对样品尺寸、形貌及微球形成过程等的影响。最后对磷化镍微球的发光性进行了研究。

单分散大粒径P(GMA-St)微球的制备

以乙醇水溶液为反应介质,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为分散剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,采用分散聚合法制备了粒径为4～9μm的单分散甲基丙烯酸缩水甘油酯/苯乙烯共聚物(P(GMA-St))微球。研究了分散聚合中单体配比及浓度、醇水比、分散剂及引发剂用量对微球粒径及粒径分布的影响。通过扫描电镜(SEM)和红外光谱(FTIR)对P(GMA-St)微球的表面形貌和化学结构进行了表征。

肝癌组织经^(32)P玻璃微球内放射治疗后的细胞凋亡改变

目的 了解经内放射治疗后肝癌细胞是否产生凋亡以及内放射对癌周组织的影响。方法 对我院1994～ 1998年收治的 4 4例不能切除的晚期肝癌患者施行3 2 P玻璃微球 (3 2 P GMS)肝动脉灌注治疗后 2～ 6个月 ,有 3例肝癌得以二期切除 ,作为治疗组 ;另外选择相应年龄、相同部位、相同分化程度的可切除的 4例肝癌作为对照组。将切除的肝癌组织行TUNEL染色并对其观察计数 ,计算凋亡指数。结果 肝癌细胞凋亡指数治疗组为 2 9%～ 34% ,平均 (31± 16 ) % ;而对照组为 4 %～ 6 % ,平均 (5± 12 .2 ) %。癌周组织凋亡指数治疗组为 2 7%～ 37% ,平均 (35±11) % ;对照组为 0 .3%～ 5 .0 % ,平均 (4.1± 3.3) %。结论 3 2 P GMS内放射治疗肝癌后 。

顺铂给药方式对^(32)P玻璃微球抑制舌鳞癌移植瘤生长的影响

【目的】观察顺铂不同腹腔注射方式联合瘤内注射32P玻璃微球(32P-GMS)对裸鼠舌鳞癌移植瘤的生长抑制效果,探讨顺铂不同腹腔注射方式对32P-GMS间质注射内放射的增敏效果。【方法】将40只荷瘤人舌鳞癌Tca8113细胞裸鼠随机分为4组,每组10只(空白对照组、单纯32P-GMS组、大剂量顺铂联合32P-GMS组和小剂量顺铂联合32P-GMS组),分别处理两周后取出肿瘤称瘤体质量,计算各组抑瘤率,比较各治疗组对移植瘤生长的抑制作用。【结果】单纯32P-GMS组、小剂量顺铂联合32P-GMS组及大剂量顺铂联合32P-GMS组抑瘤率分别为46%、78%、57%。【结论】多次小剂量顺铂较单次大剂量顺铂对32P玻璃微球对裸鼠舌鳞癌移植瘤的生长抑制作用有更明显增强效果。

^(32)P玻璃微球血管栓塞内照射加局部灌注抗癌药对肺癌的治疗作用

目的 :探讨3 2 P玻璃微球 (phosphorus 32 glassmicro spheres,3 2 P GMS)经支气管动脉栓塞内照射治疗支气管肺癌的有效性和安全性 .方法 :经病理确诊的 2 4例支气管肺癌患者均接受 2个周期的全身化疗 .非小细胞肺癌 (NSCLC)采用CAP方案化疗 ;小细胞肺癌 (SCLC)采用EP方案化疗 . 4wk为一周期 .所有患者均于第 8周后复查胸部CT ,在证实其病灶变化不明显后行支气管动脉局部灌注化疗并以3 2 P GMS与超液化碘油的混悬液进行栓塞 .于第 12周观察治疗前后胸部CT影像学改变、临床症状、副作用及介入并发症等发生率 .结果 :3 2P GMS支气管动脉超选择性介入栓塞内照射术治疗肺癌疗效显著 ,完全缓解 (CR) 5例 (2 1% ) ,部分缓解 (PR) 15例(6 2 % ) ,稳定 (SD) 3例 (12 % ) ,进展 (PD) 1例 (4% ) ,有效率(CR +PR) 83% ;除 1例出现一过性脊髓缺血 ,经积极治疗后好转外 ,未见其他并发症 .结论 :全身化疗后序贯3 2 P GMS肿瘤血管支栓塞内照射加局部灌注化疗治疗支气管肺癌有较高的近期缓解率 ,患者耐受良好 ,是治疗肺癌安全、有效的方法之一 .

^(32)P玻璃微球经支气管动脉栓塞内照射治疗中晚期肺癌的对比研究

目的:评价介入化疗合并32P玻璃微球(phosphorus32glassmicrospheres,32PGMS)经支气管动脉栓塞内照射治疗支气管肺癌与单纯介入化疗的疗效.方法:将支气管肺癌48(腺癌9、鳞癌24、腺鳞癌1和小细胞肺癌14)例按入院先后顺序随机分为两组.内放射治疗组在全身化疗2个周期后4wk行支气管动脉灌注化疗和32PGMS经支气管动脉栓塞内照射治疗;传统治疗组在全身化疗2个周期后4wk经支气管动脉灌注化疗.两组的全身化疗方案一致.结果:内放射治疗组完全缓解(CR)5例(21%),部分缓解(PR)15例(62%),稳定(SD)3例(12%),进展(PD)1例(4%),有效率(CR+PR)83%(20/24);而传统治疗组CR2例(8%),PR10例(42%),SD8例(33%),PD4例(17%),RR12例(50%).两组差异明显(83%vs50%,χ2=6.00,P=0.01).而两组术后并发症的发生率无显著差异(8%vs17%,P=0.666).结论:32PGMS经支气管动脉栓塞内照射治疗支气管肺癌的近期疗效优于传统介入组,而不良反应发生率与传统方法无差异.

Ni_2P微球的溶剂热合成与表征

以氯化镍作为镍源,无水乙醇和水作为混合溶剂,采用硬脂酸钠辅助的溶剂热法成功地制备了Ni2P微球.X射线粉末衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)分别对所制备样品的结构、形貌进行了表征.结果表明:所制备的Ni2P具有纯的六方相结构,形状为微球,其直径介于2～4μm之间.硬脂酸钠用量、反应温度、反应时间及溶剂配比等对样品尺寸、形貌及微球形成过程等均有一定的影响.通过对比实验得出Ni2P微球的最佳条件是硬脂酸钠的质量百分数为0.42%,VH20∶VEthanol=1∶1,反应温度为180℃,反应时间12h.

微波辐射法制备Fe_3O_4/P(MMA-AMPS)磁性微球

采用微波辐射法制备了油酸(OA)表面修饰的Fe_3O_4颗粒,透析后得到稳定的Fe_3O_4磁流体。在Fe_3O_4磁流体和十二烷基硫酸纳(SDS)的存在下,以甲基丙烯酸甲酯(MMA)和2-丙烯酰胺基-甲基丙磺酸(AMPS)为单体,采用微波辐射乳液聚合法制备了MMA-AMPS共聚物包覆Fe_3O_4磁性高分子微球,并对磁性高分子微球的形态与结构进行了表征,测定了磁性高分子微球的粒径、磁含量和饱和磁化强度。结果表明:在优化聚合反应条件下,通过微波辐射乳液聚合法可制备出粒径为0.25~0.50μm,饱和磁化强度为4.2emu·g-1的磁性高分子微球。

^(32)P玻璃微球在肿瘤治疗中的应用

的 3 2 P玻璃微球是一种新型的组织内放射抗肿瘤制剂 ,有局部栓塞和组织内局部照射杀死肿瘤细胞的作用 ,临床应用有重要意义。综述了3 2 P玻璃微球治疗肿瘤的机理及应用现状。

Ni_2P微球的合成、表征及其电化学性能

通过简单溶剂热,以乙二醇（EG）和苯（Benzene）为溶剂,在不添加任何表面活性剂的条件下,成功制备出了Ni2P微球.结果表明,产物为纯的六方相Ni2P,形貌为由大量20nm的粒子组成的球形,微球直径介于1~3μm.通过考察反应温度、溶剂体积比及反应时间等对产物的影响,得到Ni2P微球的最佳制备条件为：反应温度160℃,溶剂比例V（EG）∶V（Benzene）=1∶1,反应时间12h.并以所制备Ni2P微球作为锂电池负极材料,研究了其电化学性能,结果表明样品的初始放电容量达1 915mAh/g.

经皮瘤内注射^(32)P玻璃微球对肝癌组织的影响

目的探讨经皮瘤内注射^(32)P玻璃微球(^(32)P-GMS)对肝癌瘤组织的影响及其最佳剂量。方法建立24只兔VX2肝癌模型,分为A、B、C、D 4组并分别经皮瘤内注射37、74、111和148个放射性强度单位(MBq)的^(32)P-GMS,7、14和21 d后分批处死实验兔并取注药部位肿瘤组织,在光镜和电镜下观察其病理变化。结果注射^(32)P-GMS剂量与肿瘤细胞的放射性损害相关。A、B组不能完全杀死癌组织；C组肿瘤细胞几乎完全消失,纤维结缔组织对瘤灶形成完整的包绕；D组未见存活的肿瘤组织,但见正常肝组织亦被累及。结论经皮瘤内注射适量的^(32)P-GMS可以最大限度地杀伤瘤组织,本实验显示111 MBg为最佳剂量,对于阻止肝癌转移具有重要意义。

^(32)P玻璃微球瘤内注射抗肿瘤作用及对免疫功能的影响

目的观察32P玻璃微球(32P-GMS)的抑瘤效果及对免疫功能的影响。方法称重法检测32P-GMS对小鼠S180肉瘤的抑瘤率,脾淋巴细胞转化实验检测32P-GMS对S180肉瘤小鼠淋巴细胞转化功能的影响,观察小鼠淋巴细胞对豆刀素A(ConA)和脂多糖(LPS)的刺激增殖作用。结果32P-GMS瘤内注射抗肿瘤的抑瘤率分别为15.1%,20.3%,32.4%,模型组和32P-GMS治疗组小鼠胸腺细胞和脾淋巴细胞的免疫功能均有不同程度抑制,并随32P-GMS剂量的增大,抑制愈明显。结论32P-GMS瘤内注射很强的抗肿瘤作用,32P-GMS照射亦可加重小鼠免疫功能抑制。

Fe_3O_4/PPy复合微球的制备及对水中结晶紫的吸附性能

采用化学聚合法将聚吡咯(PPy)原位聚合在Fe3O4纳米粒子表面,制备得到了磁性Fe3O4/PPy复合微球,考察该复合微球对水中结晶紫的吸附性能。用透射电子显微镜、X-射线衍射仪、红外光谱、振动样品磁强计和紫外可见分光光度计对产品进行了表征。结果显示,多个粒径约8nm的Fe3O4粒子包埋在聚吡咯微球内,形成直径约为130nm的Fe3O4/PPy复合微球,其比饱和磁化强度为52.2 A·m2/kg,展现出良好的磁响应性能和迅速从液相中分离出来的能力。50mg的Fe3O4/PPy复合微球在30min内能够吸附水中97%的结晶紫(30mg/L,50mL);70mg的Fe3O4/PPy复合微球在15min内能吸附水中95%的结晶紫;在60min内,50mg和70mg的Fe3O4/PPy复合微球均能吸附水中100%的结晶紫,表明制得的Fe3O4/PPy复合微球是一种快速有效的吸附剂,可用于吸附工业废水中的结晶紫。