THE STUDY ON RELATIONSHIP BETWEEN CIGARETTE SMOKING AND THE p53 PROTEIN AND P21 PROTEIN EXPRESSION IN NON-SMALL LUNG CANCER

This paper discusses the relationship between cigarette smoking and the p53 protein and P21 protein expression by the immunohistochemical analysis in 93 cases with lung cancer in which squamous cell carcinoma accounted for 45 cases, adenocarcinoma 48 cases. The results showed that positive proportion of p53 protein expression was 74.20% (28 of 37 squamous cell carcinoma, 21 of 30 adenocarcinomas) in cigarette smoking group with lung cancers, and 38.46% (3 of 8 squamous cell carcinoma, 7 of 18 adenocarcinomas) in nonsmoking group with lung cancers. The difference was statistically significant. Odds ratio was 4.14 and confidence limits for OR was 1.42-12.52. A dose-related presents in the p53 protein expression for the smoking amount and smoking years. The positive proportion of P21 protein expression was 79.31% (21 of 28 squamous cell carcinoma, 25 of 30 adenocarcinomas) in cigarette smoking group with lung cancers, and 82.75% (10 of 11 squamous, 14 of 18 adenocarcinomas) in nonsmoking group with lung cancers, the difference was not statistically significant. But their positive proportion of P21 protein expression were very high in both groups. It was indicated that no relationship between cigarette smoking and the P21 protein expression. We suggest that the p53 gene could be a common target of tobacco-associated carcinogenesis in lung cancer.

大鼠全脑缺血再灌流后脑组织P^(53)及P^(21)蛋白的表达

目的 探讨大鼠全脑缺血再灌流后Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达及其与迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）的关系。方法 在４ 血管闭塞法全脑缺血模型上，采用ＨＥ及ＬＳＡＢ染色法，观察脑组织病理改变，检测脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达，以及蛋白合成抑制剂放线菌酮对其的影响。结果 全脑缺血１５ ｍ ｉｎ 再灌流后，脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达增加，且两者分布接近。海马结构、丘脑、下丘脑等白质区（再灌流后６ ｈ）较皮层、海马的神经细胞核（２４ ｈ）先检测到Ｐ５３、Ｐ２１蛋白，７２ ｈ 表达达高峰。并且以缺血损伤最严重的海马ＣＡ１ 区Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达为强。另外，放线菌酮可抑制脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达，并对ＤＮＤ具有一定的保护作用。结论 全脑缺血再灌流损伤后，脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达增加，放线菌酮可抑制其表达，并对ＤＮＤ起保护作用，提示Ｐ５３、Ｐ２１蛋白参与了全脑缺血后ＤＮＤ的凋亡机制。

P21^(ras)、P16在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨癌基因P21^(ras)及抑癌基因P16与大肠癌的关系。方法应用免疫组化SP法分析、研究了P21^(ras)蛋白、P16蛋白在80例大肠癌、20例大肠腺瘤及20例正常大肠组织中的表达。结果①P21^(ras)在前二者中的阳性表达率分别为70.1％(57/80)和65％(13/20),明显高于在正常组织中的30％(6/20),其比较具有显著性差异(x^2=17.66、P<0.005;x^2=5.23、P<0.05);P16在大肠癌中的阳性表达率为36.3％(29/80)低于在腺瘤及正常组织中的65％(13/20)和75％(15/20),其比较亦具有显著性差异。②P21^(ras)、P16的阳性表达率在大肠癌患者的年龄、性别及肿瘤大小方面无显著性差异,而与肿瘤的临床Dukes分期(x^2=6.20、P<0.025;x^2=6.25、P<0.05)、有无淋巴结转移及术后5a生存率密切相关。③P21^(ras)在不同的大肠癌组织病理类型中,其表达率无显著性差异;P16的阳性表达率随着肿瘤浸润深度的增加有下降趋势,但无统计学意义。④在80例大肠癌患者中,P21^(ras)阳性而P16阴性者比率高于其他三者,而且这类大肠癌患者的术后5a生存率下降。结论大肠癌的发生、发展,是由包括癌基因、抑癌基因在内的多种因素作用的结果;在临床工作中联合检测P21^(ras)及P16蛋白在大肠癌中的表达水平,对我们估计患者的病情、推测其预后有指导性意义。

贲门癌组织P53、P21和CD_(44V6)蛋白的表达及其意义

目的 探讨P53 、P2 1和CD44V6蛋白的表达情况与贲门癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组化法对 4 1例贲门癌组织进行P53 、P2 1和CD44V6蛋白的测定。结果 贲门癌组织中P53 、P2 1和CD44V6蛋白的阳性率分别为 75 6 %、5 3 6 %和 4 1 4 % ,其表达与患者性别、年龄、临床分期和病理类型无明显关系。CD44V6蛋白阳性表达与肿瘤浸润深度有关 (P <0 0 5 ) ;P53 蛋白表达与P2 1蛋白表达呈正相关 ,但无统计学意义。P53 、P2 1和CD44V6蛋白阳性者预后比其阴性者差。结论 P53 、P2 1和CD44V6蛋白的测定可作为判断贲门癌患者预后的参考指标 。

口腔白斑及鳞癌病理组织中ras癌基因P^(21)蛋白表达

口腔白斑及鳞癌为口腔临床中常见的癌前病损和恶性病变。本研究应用免疫组化技术（ＡＢＣ法）检测口腔鳞状细胞癌及白斑组织中ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋白的表达。检测结果表明：在４０例口腔鳞癌中Ｐ２１蛋白阳性表达率为９２．５０％；２１例口腔白斑病变中其阳性率为１９．０５％。Ｐ２１阳性表达位于分化差的癌细胞膜及胞浆内，且阳性表达与临床病理分级呈正相关，提示Ｐ２１蛋白检测可以作为癌及癌前病损预后观察的客观指标。

腺苷三磷酸对人横纹肌肉瘤细胞系P^(21)和c-myc蛋白表达的影响

为进一步研究腺苷三磷酸抑制癌细胞增殖诱导分化的作用机理，用ＡＴＰ作用于人横纹肌肉瘤单细胞克隆亚系ＲＤＬ６细胞，用免疫荧光细胞化学方法观察ＡＴＰ作用后的ＲＤＬ６细胞核内Ｐ２１蛋白表达增强，ｃ－ｍｙｃ蛋白表达降低，膜下胞质内微丝束－应力纤维组装改善，粘着斑内的主要粘附蛋白——纽蛋白（ｖｉｎｃｕｌｉｎ）表达增强，正常小鼠成肌细胞Ｃ２Ｃ１２细胞核内Ｐ２１蛋白高表达，ｃ－ｍｙｃ蛋白不表达。结果表明：ＲＤＬ６细胞Ｐ２１表达的丢失和ｃ－ｍｙｃ表达的活化与细胞的增殖和分化异常相关，从而表明Ｐ２１表达增强和ｃ－ｍｙｃ表达的降低在ＲＤＬ６细胞表型逆转过程中起重要作用。

洛伐他汀对NB4细胞ras基因p21^(Ras)膜结合作用影响的体外试验

目的 :探讨洛伐他汀 (LOV)对人白血病NB4细胞的作用及其机制。方法 :以MTT比色法首先观察LOV对NB4细胞增殖的影响 ;利用逆转录 -聚合酶链反应半定量测定LOV作用于NB4细胞不同时间H -ras、K -ras、N -ras癌基因mRNA表达水平 ;同时采用流式细胞术测定NB4细胞p2 1Ras总蛋白、膜蛋白的表达。结果 :①LOV抑制NB4细胞增殖 ,IC5 0为 12 5 9μmol/L。②NB4细胞H、K、N -ras基因表达均为阳性。③LOV处理不同时间的NB4细胞H、K、N -ras基因转录水平无明显变化 ;p2 1Ras总蛋白水平也无变化 ,而细胞膜表面p2 1Ras蛋白水平随时间进行性下降。结论 :LOV抑制NB4细胞增殖。LOV靶向HMG -CoA还原酶 ,抑制p2 1Ras蛋白异戊二烯化、阻滞p2 1Ras蛋白与细胞膜结合 ;不影响ras癌基因以及p2 1Ras总蛋白的表达。

rasP^(21)表达早期诊断大肠腺瘤的临床价值

采用流式细胞术（ＦＣＭ）对４４ 例散发性大肠腺瘤组织、腺癌组织和２３ 例正常组织进行了Ｐ２１表达、ＤＮＡ倍体分析。结果为Ｐ２１标记率、ＤＮＡ异倍体检出率在正常大肠粘膜－腺瘤－腺癌的顺序中依次增高，各组间有显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）；随着腺瘤的增大，二指标亦趋增高（Ｐ＜ ０．０５），且呈同相变化趋势；Ｐ２１标记率在异倍体腺癌中明显高于二倍体腺癌。说明用流式细胞术检测Ｐ２１标记率结合ＤＮＡ倍体分析，

鼻腔鼻窦恶性肿瘤P^(16)、P^(21(WAF1/CIP1))基因表达的研究

目的 :探讨抑癌基因 P1 6 和 P2 1 的表达在鼻腔鼻窦恶性肿瘤中的意义。方法 :用免疫组化 SP法检测了 6 0例鼻腔鼻窦恶性肿瘤 ,10例良性肿瘤 ,2 0例无瘤组织的 P1 6、P2 1基因的表达情况。结果 :鼻腔鼻窦恶性肿瘤组织的 P1 6、P2 1蛋白阳性率低于良性肿瘤及无瘤组织相应的阳性率 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 P1 6 、 P2 1 蛋白的改变为非相关性事件。结论 :P1 6 、 P2 1基因表达与鼻腔鼻窦恶性肿瘤的发生密切相关 ,且作用是相互独立的 ,与该肿瘤患者性别、年龄、组织来源、局部浸润及转移等因素无关。

胃癌术后硫酸性肠化切缘P^（53）和ras P^（21）蛋白的表达及其意义

目的探讨硫酸性肠化切缘Ｐ５３和ｒａｓＰ２１蛋白的表达，进一步从分子生物学水平证实硫酸性肠化与胃癌术后切缘复发的关系。方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对１８例硫酸性和１７例非硫酸性肠化切缘粘膜上皮细胞的Ｐ５３和ｒａｓＰ２１蛋白的表达量进行了定量研究．结果硫酸性肠化切缘上皮的Ｐ５３和ｒａｓｐ２１蛋白的表达量显著高于非硫酸性肠化切缘和正常粘膜上皮，而低于胃癌细胞．结论硫酸性肠化切缘的ｐ５３和ｒａｓＰ２１蛋白有过量表达，可能与胃癌术后复发有关。

云南个旧非小细胞肺癌ras癌基因产物P_(21)蛋白的表达

应用ＡＢＣ免疫组化法对来自云南个旧的２０例非小细胞肺癌标本进行了ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋白的表达检测结果阳性１５例，阳性率７５０％，表达率较高其中１６例鳞癌中。

肺鳞癌细胞p^(53)蛋白及ras p^(21)的免疫组织化学定量研究

应用免疫组织化学方法检测２２例肺鳞癌组织标本的ｐ５３及ｒａｓｐ２１表达，用显微图像分析仪测定阳性细胞百分率Ｐ／Ａ（％）和平均光密度（ＡＯＤ），并采用阳性水平指数（ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｅｖｅｌｉｎｄｅｘ，ＰＬＩ）作为免疫组化反应水平指标，对癌基因蛋白进行比较研究。结果显示：ｐ５３表达阳性率为５０％，ｒａｓｐ２１表达阳性率为６３６％。ｐ５３蛋白表达在非角化型鳞癌组高于角化型鳞癌组；ｒａｓｐ２１的表达随组织分化程度的增高而增高，ｒａｓｐ２１与ｐ５３的表达水平无直线相关关系。

ras-P_(21)过表达和 P_(53)蛋白蓄积对肺癌预后的研究

应用Ｈａ－ｒａｓＰ２１和Ｐ５３（Ｄｏ－１）单克隆抗体，采用Ｓ－Ｐ免疫组化法对７７例原发性肺癌进行研究。结果表明：Ｐ２１强阳性（）率在细支气管肺泡癌的表达明显高于腺泡状腺癌和大细胞癌（Ｐ＜０．０５），分化程度越高，染色越强。Ｐ５３蛋白蓄积与肺癌的分型、分化、ＴＮＭ分期无关，但Ｐ５３染色阳性与阴性患者的术后平均存活月数间有显著差异（Ｐ＜０．０５），Ｐ５３染色越强术后存活时间越短，提示Ｐ５３蛋白蓄积是判定肺癌预后的指标之一。

焦炉工外周血P_(21)和P_(53)表达水平测定及其意义

目的了解焦炉工外周血中P21 和P53 蛋白表达水平。方法采用P21、P53 免疫组化染色试剂盒 ,对56名焦炉工和40名对照者的外周血进行检测。结果56例焦炉工中有13例P21 蛋白阳性 ,12例P53 蛋白表达阳性。阳性率分别为23.2%和21.4 % ;40名对照者外周血中各有2例P21、P53 蛋白阳性 ,阳性率各为5.0 % ,两组间差异有统计学意义 (P<0.05)。对焦炉工按是否吸烟与工龄进行分组比较 ,未发现P21、P53 组间差异。结论煤焦油沥青可使接触者外周血中P21、P53 蛋白表达水平升高。

P_(21)^(ras)在胃良、恶性病变中的表达及与幽门螺旋杆菌感染的关系

本文Ｐ２１ｒａｓ免疫组化采用链霉菌抗生物素蛋白——过氧化酶（ＳＰ）法检测了６１例胃粘膜标本。结果表明胃癌（５６．０％）与胃癌前病变（６０．０％）阳性率高于胃良性病变（１４．０％），Ｐ值分别＜０．０５与＜０．００５。并进行了诊断胃癌价值评估，其敏感性、特异性和准确性分别为５６．０％，６６．７．与６２．３％，说明Ｐ２１ｒａｓ诊断胃癌有一定价值。同时检测了幽门螺旋杆菌（ＨＰ），计算Ｐ２１ｒａｓ阳性与ＨＰ感染的相关系数为０．８７９，呈正相关。

蛋白激酶C抑制剂对SACC-83系P_(21)^(ras)、c-myc表达的影响

本实验采用ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ作用于ＳＡＣＣ－８３系，观察对Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的影响．结果表明，Ｓｔａｕｒｏｐｏｒｉｎｅ可明显降低Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ表达程度（ｐ＜０．０１），这提示ＰＫＣ对ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ基因表达具有调控作用，ＰＫＣ抑制剂可能通过调控癌基因的表达来表现抗肿瘤作用的．

食管癌DNA倍体异质性肿瘤的P^(53)和ras P^(21)蛋白的表达

目的 在ＤＮＡ含量研究的基础上，进一步从蛋白质表达水平上探讨ＤＮＡ 倍体异质性肿瘤的生物学特性。方法 应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术，对１５ 例异质性肿瘤和非异质性肿瘤细胞的Ｐ５３ 和ｒａｓＰ２１ 蛋白表达量进行了定量和比较。结果 异质性肿瘤细胞的Ｐ５３ 和ｒａｓＰ２１ 蛋白的表达量显著高于非异质性肿瘤和正常组织（ Ｐ＜ ０．０５ ～０．０１）。结论 ＤＮＡ 倍体异质性肿瘤的癌基因激活和抑癌基因失活的程度高于非异质性肿瘤，异质性肿瘤的恶性程度高于非异质性肿瘤。

ras癌基因蛋白P^(21)表达与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系

应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,对42例膀胱移行细胞癌基因ras P^(21)表达进行了定量分析,并结合患者随访结果进行回顾性研究。结果表明,ras P^(21)表达与肿瘤细胞分化程度及浸润情况密切相关。ras P^(21)表达与肿瘤复发也具有相关性,在复发的膀胱肿瘤中,P^(21)阳性表达(87.5％),显著高于P^(21)阴性表达(12.5％)。

子宫内膜癌细胞rasP^(21)、P^(53)表达、DNA含量和临床病理特征及预后的关系

为探讨ｒａｓ癌基因和Ｐ５３抗癌基因表达产物、ＤＮＡ含量及其它临床病理因素对子宫内膜癌预后的影响，本文采用单因素、Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存曲线和ＳＰＳＳ多元相关与逐步回归软件将患者年龄、临床期别、病理类型、临床分型、组织学分级、肌层侵犯深度、局部免疫反应、ＤＮＡ指数（ＤＩ）、Ｓ期细胞比率（ＳＰＦ）、增殖指数（ＰＩ）、Ｐ２１荧光指数（Ｐ２１ＦＩ）、Ｐ５３荧光指数（Ｐ５３ＦＩ）和Ｐ５３免疫组织化学表达强度等１３个因素与生存的关系进行了分析。结果表明：Ｐ５３表达强度和临床期别为最有意义的预后指标，Ｐ５３表达强阳性和临床Ⅲ期与短生存期有关；另外，肌层侵犯超过２／３、乳头状腺癌和年龄大也提示不良预后。

Cox-2和P-21蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨子宫内膜癌中P-21蛋白和环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)的表达和意义。方法采用免疫组织化学中的SP法对对照组中20例正常的子宫内膜组织患者、非典型增生组中的7例子宫内膜出现非典型增生组织患者以及子宫内膜癌组中的55例子宫内膜癌组织患者中P-21蛋白及COX-2的表达情况进行检测。结果与非典型增生组和子宫内膜癌组相比,对照组中患者P-21蛋白的阳性表达率显著较高(P<0.05),而对照组中Cox-2的阳性表达率显著较非典型增生组和子宫内膜癌组低(P<0.05);在手术-病理分期和分化程度,以及淋巴结出现转移等宫内膜癌组织的相关方面,P-21蛋白的阳性率具有明显差异(P<0.05);Cox-2阳性率在子宫内膜癌组织的手术-病理分期、分化程度、肌层浸润方面差异有统计学意义(P<0.05),子宫内膜癌组织P-21蛋白阳性表达率与Cox-2阳性呈负相关(r=-0.498,P=0.000)。结论 P-21蛋白和Cox-2异常表达可能在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用。