ELISA检测乳癌病人血清P^(53)Ab

目的 :探讨血清P53Ab作为肿瘤标记物的可能性以及与肿瘤预后的关系。方法 :用酶联免疫分析法 (ELISA)检测正常人 1 5例、乳腺良性肿瘤 1 7例、乳癌 58例血清的P53Ab。结果 :乳癌血清P53Ab阳性率 2 9.31 % ,正常人和乳腺良性肿瘤患者血清P53Ab阴性。P53Ab与肿瘤大小有关 ,与腋淋巴结转移和激素受体情况无关。结论 :血清P53Ab可预示患癌或癌瘤复发的危险性 ,但与癌瘤预后关系不大。

康尔爱片诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡及对P^(53)基因表达影响的研究

目的 :观察康尔爱片诱导人胃腺癌SGC - 90 1细胞凋亡及对P5 3基因表达的影响。方法 :应用流式细胞仪检测康尔爱片体外给药后人胃腺癌SGC - 790 1细胞DNA含量变化和P5 3基因表达情况。结果 :康尔爱片中、大剂量组细胞凋亡百分率分别为 9.0 6 %、96 .32 % ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) ;小、中、大 3个剂量组P5 3基因表达率分别为 95 .0 9%、89.47%、5 2 .0 4% ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1)。结论 :康尔爱片中、大剂量组可以明显诱导人胃腺癌SGC - 790 1细胞凋亡 ,且小、中、大 3个剂量组均可降低突变型P5 3基因表达率。

SRRS方剂抑制消化道恶性肿瘤P^(53)基因突变的实验研究

目的：从分子水平探讨ＳＲＲＳ方剂治疗消化道癌的可能机制。方法：选用Ｌｏｖｏ结肠腺癌细胞裸小鼠移植瘤模型，观察中药ＳＲＲＳ方剂抑制移植瘤生长的作用，并用ＰＣＲＳＳＣＰ银染色法研究ＳＲＲＳ方剂对Ｌｏｖｏ移植瘤生长过程中Ｐ５３基因突变的影响情况。结果：对照组有５０％（５／１０）发生Ｐ５３基因第七外显子突变，ＳＲＲＳ方剂治疗组无（０／１０）此现象（Ｐ＜００５）。结论：提示ＳＲＲＳ方剂能抑制Ｌｏｖｏ移植瘤生长过程中Ｐ５３基因的突变。

胃癌组织中Survivin、PTEN、P^(53)基因的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制基因 Survivin和抑癌基因 PTEN、P53在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法 应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 Survivin、PTEN和 P53基因在 6 5例胃癌、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。结果 胃癌组织中Survivin、PTEN、突变型 P53基因的阳性表达率分别为 70 %、4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中分别为 4 2 %、85 %、31% ,Survivin和突变型 P53基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中 PTEN基因的表达与正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,胃癌组织、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜中 Survivin和突变型 P53基因的表达差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。随临床分期增加、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型 P53基因的阳性表达率逐渐上升 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (P<0 .0 5 )。在胃癌组织中 Survivin与突变型 P53基因的表达呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,与 PTEN基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因与突变型 P53基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 )。结论 Survivin、PTEN和

小儿急性白血病骨髓细胞Bcl-2和P^(53)蛋白的表达

目的 探讨小儿急性白血病骨髓细胞Bcl- 2、P53 蛋白的表达状态。方法 以SP免疫组化法对 41例患者及 11例对照骨髓细胞Bcl- 2、P53 蛋白进行检测 ,高倍镜下计数 5 0 0个细胞 ,P53 阳性细胞≥5 %为阳性病例 ,Bcl- 2≥ 10 %为阳性病例。结果 Bcl- 2蛋白表达率在小儿ALL、ANLL及ALL高危型中均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1,P <0 .0 1) ,ALL标危型与对照组相比无差异 (P >0 .0 5 ) ,但ALL高危型高于标危型 ,ANLL高于ALL(P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。P53 蛋白表达率在ALL、ANLL、ALL高危型及标危型均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ,ALL高危型与标危型及ALL与ANLL之间无差异 (P >0 .0 5 )。结论 P53 突变及Bcl- 2表达增强参与了小儿急性白血病骨髓细胞的恶性转化 ,但其作用机制可能是相互独立的。

达纳康抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后P^(53)蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的 研究达纳康在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的脑保护作用及其分子机制。方法 采用线栓法建立大鼠大脑中动脉 ( MCAO)缺血 1h再灌注 2 4 h模型 ,18只雄性大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组和达纳康治疗组 ,每组 6只。采用 Zea- L onga评分法观察神经功能缺损程度 ,采用免疫组织化学方法、TUNEL 法分别观察各组 P53蛋白表达和细胞凋亡。结果 假手术组神经功能缺失评分为 0分 ,高倍视野下无 P53蛋白染色阳性细胞及凋亡细胞 ;达纳康治疗组神经功能缺失评分 ( 0 .4 8± 0 .3 7分 )、P53蛋白染色阳性细胞数 ( 5 .16± 1.84个 /高倍视野 )、凋亡细胞数 ( 4 .18± 1.2 1个 /高倍视野 )均较生理盐水对照组 ( 2 .76± 0 .82分、10 .4 3± 1.5 6个 /高倍视野、8.16± 1.5 0个 /高倍视野 )显著减少 ( P<0 .0 1)。结论 达纳康可明显减轻局灶性脑缺血再灌注损伤 ,其抑制神经细胞P53蛋白的表达 ,进而抑制细胞凋亡 ,是其脑保护作用的分子机制之一。

氯化甲基汞对大鼠脑神经细胞凋亡及P^(53)基因表达的影响

选用Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠，经皮下注射给予１０ｍｇ／Ｋｇ体重氯化甲基汞（ＣＨ３ＨｇＣｌ），连续７天，第１５天取其脑组织，利用细胞和分子生物学技术进行ＤＮＡ电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析。实验结果，染毒组大鼠脑组织ＤＮＡ电泳呈现特征性梯形电泳带；ＦＣＭ分析染毒组大鼠脑神经细胞的凋亡率、Ｐ５３基因表达率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结果表明：ＣＨ３ＨｇＣｌ以诱导凋亡方式导致脑神经细胞损伤，Ｐ５３基因参与ＣＨ３ＨｇＣｌ诱导脑神经细胞凋亡的基因调控过程。

人脑星形细胞瘤P^(21WAF1)/CIP1的表达与P^(53)、MDM2及细胞增殖指数间的关系

目的 探讨P^(21)、P^(53)和MDM2表达与人脑星形细胞瘤发生、发展及与细胞增殖指数间的关系。方法 用免疫组化技术检查41例石蜡包埋的人脑星形细胞瘤标本P^(21)、P^(53)和MDM2蛋白的表达和由增殖细胞核抗原（PCNA）反映的细胞增殖程度，同时用RNA原位杂交技术检测24例新鲜人脑星形细胞瘤标本的p21 mRNA表达情况。结果p21 mRNA原位杂交检查中无论是高级别肿瘤组或低级别肿瘤组，表达均有明显的差异。免疫组化检查中P^(21)、P^(53)、 MDM2和PCNA的阳性率分别为75．6%、68．3%、65．9%和100%。P21蛋白表达在高级别肿瘤中较高(P ＝ 0．001)，且与细胞增殖指数明显相关，但与P^(53)表达和MDM2表达无明显相关。P^(53)表达与肿瘤组织学分级无关(P ＝0．424)，但与细胞增殖指数明显相关。MDM2表达与肿瘤组织学分级无关(P ＝ 0．812)，与细胞增殖指数亦无明显相关性。多元线性逐步回归分析表明，细胞增殖指数(PCNALI)和P21标记指数与肿瘤组织学分级有密切关系(P ＝ 0．000和P ＝ 0．001)。结论 （1）p21 mRNA和P21蛋白在人脑星形细胞瘤中过度表达,其与细胞增殖指数相关,但与P^(53)表达无关,表明可能有不依赖于P^(53)的通路诱导P^(21)表达。仅有P^(21)过度表达对抑制肿瘤生长是不够的,还需要PCNA参与；（2）P^(53)?

急性白血病缓解前后P^(53)、Bcl-2蛋白的表达意义

目的探讨儿童急性白血病（ＡＬ）缓解前后Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白的表达状况。方法 以ＳＰ免疫组化法对４１ ＡＬ例及 １１例对照骨髓细胞Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白进行检测。结果Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白表达率在 ＡＬＬ、ＡＮＬＬ治疗前均显著高于对照组，缓解后与对照组比较无差异。Ｐ５３蛋白表达率在ＡＬＬ、ＡＮＬＬ缓解前后及二者化疗前之间均无差异。 Ｂｃｌ－２蛋白表达率在 ＡＮＬＬ显著高于 ＡＬＬ，二者缓解前后也存在显著性差异。结论 Ｐ５３突变、Ｂｃｌ－２蛋白过表达均参与了儿童ＡＬＬ的发病，而Ｂｃｌ－２蛋白在预测化疗效果中意义更大。

P^53突变与VEGF在大鼠胃癌中的表达及中药胃康宁的防治作用

目的:了解P53基因突变与VEGF在大鼠实验性胃癌中的表达及中药胃康宁的防治作用.方法:Wistar ♂大白鼠,2-3月龄,体重120-140 g,用MNNG限期饲饮法诱导大鼠发生胃腺癌,设对照组,胃康宁1组、2组,用光镜、电镜观察大鼠胃黏膜细胞形态,用免疫组化法检测突变型P53及VEGF表达.结果:与对照组比较,胃康宁组大鼠胃黏膜细胞异形性、核浓染、核浆比增大等恶性表型轻微,能降低突变型P53蛋白表达(3.4905±1.5225),和VEGF表达(3.519±2.204),(P＜0.001).结论:以MNNG诱导大鼠实验性胃癌的发生与P53基因突变及VEGF高表达有关,中药胃康宁具有良好的防治作用,能显著抑制P53蛋白和VEGF表达.

胃癌p^（53）突变产物的增强表达

作者应用ＡＢＣ免疫组化方法，对３８例手术切除的胃癌组织及癌旁胃粘膜的冰冻切片标本进行了ｐ５３突变蛋白表达的检测．结果：３８例胃癌标本，２４例ｐ５３突变蛋白高表达，阳性率６３．２％，高分化腺癌３／４（７５．０％）阳性，中分化腺癌１３／２０（６５．０％）阳性，低分化腺癌５／９（５５．６％），粘液腺癌３／５（６０．０％）阳性，癌旁胃粘膜有１０例ｐ５３突变蛋白弱表达．２３例伴有淋巴结转移的胃癌标本，１８例（７８．３％）ｐ５３蛋白高表达．以上结果提示：抑癌基因ｐ５３的突变在胃癌的发生中是一个比较常见的基因改变，尤其在分化型腺癌的发生中表现明显．

鼻咽癌、喉癌中细菌L型感染及P^(53)、CerbB-2基因突变的对比研究

用革兰染色和免疫组化染色技术，对１２９例鼻咽癌、８５例喉癌、２０例鼻咽慢性炎、２０例声带息肉进行细菌Ｌ型检测，同时对Ｌ型阳性和阴性组织的Ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２表达进行对比分析。结果显示，鼻咽癌、喉癌的革兰染色Ｌ型检出率分别为７８３％和７６５％。肿瘤组的Ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２表达率明显高于炎症组（Ｐ＜０００５）。鼻咽癌、喉癌中Ｌ型阳性组的Ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２表达率也高于其Ｌ型阴性组（Ｐ＜０００５）。表明Ｌ型感染与鼻咽癌、喉癌及Ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２过表达有关。提示Ｌ型参与了Ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２基因突变，并可能在鼻咽癌、喉癌发生中起作用。

柴胡总皂甙对戊四氮致痫大鼠海马神经细胞凋亡和P^(53)蛋白表达影响的实验研究

目的:观察柴胡总皂甙对实验性痫性发作大鼠海马神经细胞凋亡和P53蛋白表达的影响。方法:采用戊四氮(PTZ)致痫大鼠模型。将40只SD大鼠,随机分为6组,其中A组(8只)为PTZ模型组,B、C、D组(各8只)分别为柴胡总皂甙低、中、高剂量组,E组(4只)为正常对照组,F组(4只)为安定给药组。以原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞,免疫组化法检测P53蛋白,观察大鼠痫性发作后48小时其海马齿状回(DG)区神经细胞凋亡和P53蛋白表达情况。结果:各组大鼠海马DG区均可观察到不同程度的阳性细胞,其中A组阳性细胞数最多,其余各组阳性细胞数明显减少,各组与A组比较,C、D、E、F组与B组比较,差异均有显著性意义(P<0．05)。各组大鼠海马DG区均有不同程度的P53蛋白表达,其中A组免疫表达阳性细胞数最多,其余各组阳性细胞数明显减少,各组与A组比较,差异均有显著性意义(P<0．05)。结论:柴胡总皂甙对PTZ致痫大鼠所致的海马神经细胞凋亡和P53蛋白表达有明显抑制作用,可能对痫性发作引起的神经细胞凋亡有一定的保护作用。

神经生长因子对红藻氨酸致痫大鼠海马神经细胞凋亡和野生型P^(53)表达的影响

目的 探讨外源性神经生长因子 ( NGF)对癫痫发作大鼠海马神经细胞凋亡与野生型 P5 3 ( wt P5 3 )蛋白表达有无抑制作用。方法 采用 KA诱导癫痫发作大鼠模型。以 TUNEL方法标记 DNA片段 ,原位检测凋亡细胞 ;免疫组化 SP法检测 wt P5 3 蛋白。观察大鼠癫痫发作 4 0 h(注射 KA4 8h)后其海马 CA1神经细胞凋亡和 wt P5 3 蛋白表达情况及外源性 NGF对它们的影响。结果 大鼠急性癫痫发作后 ,其凋亡细胞和 wt P5 3 蛋白表达均明显增加 ,wt P5 3 蛋白表达与细胞凋亡呈正相关 ( r =0 .83 9,P <0 .0 1 ) ;给予 NGF,凋亡细胞数及 wt P5 3 表达均显著性降低 ( P<0 .0 1 )。结论 外源性 NGF对癫痫所致神经细胞凋亡有抑制作用 ,其抑制凋亡的分子机制可能是通过抑制 wt P5 3蛋白表达而实现的。

急性白血病骨髓细胞增殖细胞核抗原、P^(53)基因表达及其意义

目的 探讨骨髓细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)及P53 基因在儿童急性白血病 (AL)中表达及其临床意义。方法 用SP免疫组化法检测儿童AL骨髓细胞的PCNA和P53 。结果 急性淋巴细胞白血病 (ALL)组、急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)组PCNA、P53 表达与对照组比较均有显著差异 ,组间比较均无差异 ;PCNA表达在ALL标危组显著高于高危组。PCNA阳性表达者缓解率显著高于阴性表达者 ,3年无病生存率无差异 ;P53 阳性表达者缓解率较阴性表达者无差异 ,而 3年无病生存率显著低于阴性表达者。结论 PCNA、P53 基因均参与了儿童AL发病过程 。

Survivin和p^(53)在胃粘膜异型增生和胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨sorvivin和p53表达在胃粘膜上皮癌变过程中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测80例胃癌、88例胃粘膜异型增生和22例正常胃粘膜中survivin、P53的表达,分析它们与胃癌临床病理特征的关系。结果:(1)survivin在正常胃粘膜不表达。survivin阳性表达率在轻中度异型增生时较低,分别是3%(1/28)和7%(3/43);而在重度异型增生时达82%(14/17),与胃癌组76%(61/80)无显著差异(P>0.05)。P53在正常胃粘膜和轻度异型增生无表达,中度异型增生时有少量表达16%7/43,至重度异型增生时阳性表达率达35%6/17,与胃癌组52%42/80无显著差异(P>0.05);(2)survivin表达与胃癌不同分化程度、浸润深度无关,与淋巴结转移有关。p53表达与胃癌不同分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关;(3)survivin和p53表达呈正相关(P<0.01)。结论:survivin和p53共同参与胃癌的发生过程,是胃癌早期诊断的有用指标。p53亦可作为反映胃癌生物学行为的依据之一。

大鼠全脑缺血再灌流后脑组织P^(53)及P^(21)蛋白的表达

目的 探讨大鼠全脑缺血再灌流后Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达及其与迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）的关系。方法 在４ 血管闭塞法全脑缺血模型上，采用ＨＥ及ＬＳＡＢ染色法，观察脑组织病理改变，检测脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达，以及蛋白合成抑制剂放线菌酮对其的影响。结果 全脑缺血１５ ｍ ｉｎ 再灌流后，脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达增加，且两者分布接近。海马结构、丘脑、下丘脑等白质区（再灌流后６ ｈ）较皮层、海马的神经细胞核（２４ ｈ）先检测到Ｐ５３、Ｐ２１蛋白，７２ ｈ 表达达高峰。并且以缺血损伤最严重的海马ＣＡ１ 区Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达为强。另外，放线菌酮可抑制脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白的表达，并对ＤＮＤ具有一定的保护作用。结论 全脑缺血再灌流损伤后，脑组织Ｐ５３、Ｐ２１蛋白表达增加，放线菌酮可抑制其表达，并对ＤＮＤ起保护作用，提示Ｐ５３、Ｐ２１蛋白参与了全脑缺血后ＤＮＤ的凋亡机制。

口腔白斑及鳞癌中Rb、P^(53)蛋白的表达

目的 :探讨抑癌基因p5 3 、Rb蛋白产物在口腔白斑及鳞癌中的表达。方法 :用免疫组化法检测 2 0例口腔白斑 (OLK)、3 3例鳞癌 (OSCC)组织中P5 3 及Rb蛋白的表达。结果 :Rb蛋白在OLK、OSCC中的表达较正常口腔黏膜组增强 ,但无显著性差异 ;突变型P5 3 蛋白的表达在OLK即已出现 ,且随着细胞异常增生程度的增高而增强 ,在OSCC中其阳性表达率高达 80 %。结论 :p5 3 基因突变、P5 3 蛋白过度表达与OSCC的发生发展密切相关 ;OSCC的发生可能涉及Rb、p5 3

戊四氮致痫大鼠脑P^(53)蛋白表达与神经细胞凋亡关系的研究

目的 探讨戊四氮诱导癫痫发作大鼠脑 P53蛋白表达与神经细胞凋亡的关系。方法 采用戊四氮诱导癫痫发作大鼠模型 ,以原位末端标记 (TUNEL)法和免疫组织化学方法分别检测大鼠脑海马 CA1 区神经细胞凋亡及 P53蛋白表达的动态变化。结果 戊四氮致痫后 6 h海马周白质出现 P53蛋白较弥散的表达 ,12 h时海马 CA1 区可见少量锥体细胞凋亡 ,细胞核出现 P53蛋白的微弱表达 ,2 4 h时凋亡的锥体细胞数明显升高 ,P53蛋白表达开始增加 ,至 4 8h两者同时达高峰 (P <0 .0 0 1) ,此后开始下降。结论 P53是调节戊四氮诱导癫痫发作大鼠脑神经细胞凋亡的重要分子之一。

ras、c-erbB-2、P^(53)基因与金葡菌L型感染在实验性小鼠肿瘤中的作用

目的 探讨癌基因ras ,c -erbB - 2和抑癌基因P53 与金葡菌L型感染在C57小鼠致瘤中的作用和意义。方法 应用免疫组化及核酸原位杂交对L型感染后诱发的 10只小鼠肿瘤和 13只小鼠癌前病变组织进行ras、c -erbB - 2及P53 蛋白产物及基因的检测。结果 小鼠肿瘤中P2 1、c-erbB - 2、P53 的蛋白表达阳性率分别为 6 0 %、70 %、6 0 % ;癌前病变 15 .38%、15 .38%、38.46 %。原位核酸杂交ras、c -erbB - 2、P53 、mRNA表达在小鼠肿瘤中分别为 5 0 %、70 %、5 0 % ;癌前病变中为 15 .38%、0 %、38.46 %。结论 癌基因ras、cerbB - 2及抑癌基因P53 在小鼠肿瘤中有不同程度异常表达 ,L型极有可能成为诱癌因素之一 。