P^(75 NGFR)在先天性胆总管囊肿的表达意义初探

目的 探讨神经生长因子受体 (P75NGFR)在先天性胆总管囊肿 (CCC)的分布情况及其意义。方法 应用免疫组化方法对 1 8例先天性胆总管囊肿患儿及 9例对照组的胆总管进行检测。结果 丰富的P75NGFR染色阳性神经纤维分布于正常胆总管外膜下 ,神经节细胞表现为P75NGFR染色强阳性 ;先天性胆总管囊肿的P75NGFR染色阳性纤维明显减少。结论 P75NGFR在先天性胆总管囊肿的异常分布可能与CCC的发病机理有关。

先天性巨结肠P^(75NGFR)的免疫组化研究

目的：研究神经生长因子受体（Ｐ７５ＮＧＦＲ）在先天性巨结肠（ＨＤ）中的分布及其与ＨＤ发生的关系。方法：应用免疫组化技术对３０例ＨＤ患儿进行检测，观察各段肠管中Ｐ７５ＮＧＦＲ的分布情况。结果：正常肠段的粘膜固有层和粘膜肌层中有大量的Ｐ７５ＮＧＦＲ阳性纤维，粘膜下和肌间神经丛中神经节细胞表现为Ｐ７５ＮＧＦＲ强阳性，痉挛段肠管粘膜固有层和粘膜肌层中Ｐ７５ＮＧＦＲ阳性纤维明显减少或缺如，粘膜下和肌间粗大神经纤维的神经束膜表现为Ｐ７５ＮＧＦＲ强阳性，象一个环包绕在周围。结论：Ｐ７５ＮＧＦＲ在ＨＤ痉挛段中的异常分布可能与ＨＤ的发生有关，Ｐ７５ＮＧＦＲ染色可作为诊断ＨＤ的方法之一。

Immunohistochemical study of P^(75NGFR) in Hirschsprung's disease

ＴｈｅｃｌａｓｉｃａｌｅｘｐｌａｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｔｉｏｌｏｇｙｏｆＨｉｒｓｃｈｓｐｒｕｎｇ’ｓｄｉｓｅａｓｅ（ＨＤ）ｉｓｔｈｅｆａｉｌｕｒｅｏｆｍｉｇｒａｔｉｏｎｏｆｎｅｕｒａｌｃｒｅｓｔｃｅｌｓｉｎｔｏｔｈｅｇｕｔｄｕｒｉｎｇｅｍｂｒｙｏｎ...

利用DDRT-PCR技术分析神经生长因子低亲和力受体诱导的细胞凋亡过程中基因表达的差异

转染了Ｐ７５ＮＧＦＲ的Ｒ２神经细胞系Ｒ２Ｌ１在去血清的培养时可以诱导细胞凋亡的发生．此凋亡可以被ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ和蛋白质合成抑制剂环己酰胺所抑制．利用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术比较了去血清培养的发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞与有血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｌ１细胞以及去血清培养的不发生凋亡的Ｒ２Ｐ细胞基因表达的差异．克隆了数个特异或差异表达的短ｃＤＮＡ片段，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实其中两个片段ＬＩＡＲＥＳＴ－１和ＬＩＡＲＥＳＴ－２表达量在凋亡细胞中显著高于不发生凋亡的细胞中，ＧｅｎＢａｎｋ检索表明此二片段为新的ｃＤＮＡ序列并给予登录号Ｕ４７３１５和Ｕ４７３１６．另有一个ｃＤＮＡ片段ＬＩＡＲＣＤ－３在凋亡细胞中受到了明显的抑制，经检索为一已知的与前强啡肽原上游调控区结合的ＤＮＡ结合蛋白ｃＤＮＡ编码区的一部分。

人胚胎嗅球嗅鞘细胞的制备

目的探讨人胚胎嗅鞘细胞(OECs)培养与纯化的优化方法。方法取3～5个月流产胚胎,无6菌条件下取出嗅球,解剖镜下仔细剥离嗅球表面的软膜组织和血管,消化后用条件培养基制成密度为10个细胞/ml细胞悬液,利用差速贴壁法结合阿糖胞苷抑制法进行无血清纯化液细胞纯化培养,对不同培养时期进行观察75和行PNGFR(低亲和力神经营养因子受体)和FBN(纤维粘连蛋白)免疫荧光染色鉴定。结果此制备法可以有效去除成纤维细胞,获得纯度90%嗅鞘细胞,显微镜下观察嗅鞘细胞有卵圆形的胞体和细长的突触,细胞多呈75为双极或多极形,免疫荧光染色NGFRP阳性细胞百分数为80%-90%。结论本培养纯化方法可行,可获得符合临床细胞移植治疗要求细胞制剂。