低频重复经颅磁刺激对难治性癫痫大鼠模型脑内P—gP表达的影响

目的：观察低频重复经颅磁刺激（rTMS）对难治性癫痫大鼠模型脑内P-糖蛋白（P—gp）表达的影响。方法：24只大鼠海仁酸注射以建立难治性癫痫模型，随机分为4个造模组：单纯rTMS组、假性rTMS组、丙戊酸钠组和丙戊酸钠＋rTMS联合治疗组，每组6只；另有6只不造模作对照组，只注射等容量生理盐水以作对照。用免疫组织化学方法观察和比较各组动物脑内P—gP的表达。结果：单纯rTMS组大鼠脑内梨状皮层和丘脑区P—gP的表达与假性rTMS组相比明显下降，差异有统计学意义（P=0.003，P=0.005）；丙戊酸钠组大鼠脑内P—gP表达在海马CA3区、梨状皮层和丘脑区明显升高，与联合治疗组比较差异有统计学意义（P=0．008，P=0．003，P=0．001）。结论：低频rTMS可以降低难治性癫痫大鼠脑内P—gP的高表达。

乳腺癌Ki一67P—gp表达创面脱落细胞检查临床意义相关性研究

目的研究不同病期乳腺癌中Ki一67、P—gp表达及根治术中创面冲洗液脱落细胞情况，揭示其三者之间的相关性及与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测90例不同病期乳腺癌患者手术根治标本中Ki一67、P—gP表达水平，采用离心沉淀法检测其根治手术创面冲洗液中有无癌细胞，同时对上述病例跟踪随访3年，观察其有无复发转移情况及3年生存率，计算Pearson相关系数。结果Ki一67在乳腺癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的阳性表达率分别是60．0％，71．8％，90．5％；P—gp阳性表达率分别为36．7％，38．5％，57．1％；脱落细胞的阳性率分别是3．3％，7．7％，14．3％。结论Ki一67、P—gp、创面脱落细胞在乳腺癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期阳性表达率存在正相关关系。

二甲双胍通过抑制IL-6/NF-κB/P-gp改善卵巢癌PARP抑制剂耐药

目的:探讨二甲双胍对同源重组修复功能缺陷(HRD)阳性PARP抑制剂(PARPi)耐药卵巢癌的作用及相关机制。方法:逐步诱导法建立尼拉帕利耐药的HRD阳性SKOV3卵巢癌细胞系(SKOV3/PARPi)。白细胞介素-6(IL-6)、转染si-IL-6 RNA以及二甲双胍作用后,采用CCK-8法检测SKOV3或SKOV3/PARPi细胞增殖的变化,Western blot检测细胞内IL-6及P糖蛋白(P-gp)水平、AKT及NF-κB活性的变化,ELISA法检测细胞培养上清液中IL-6含量的变化。建立SKOV3/PARPi卵巢癌裸鼠荷瘤模型并验证二甲双胍、PARPi处理对瘤体的影响,免疫组化及Western blot检测瘤组织内P-gp蛋白的表达。结果:100μg/L IL-6作用SKOV3细胞后尼拉帕利的IC_(50)上调(P<0.001),细胞内P-gp表达增加(P<0.001)。SKOV3/PARPi细胞转染si-IL-6 RNA后尼拉帕利的IC_(50)下调(P=0.008),P-gp表达降低(P<0.001)。二甲双胍作用SKOV3/PARPi细胞后,尼拉帕利的IC_(50)下调(P<0.001);细胞内IL-6及P-gp蛋白水平、AKT及NF-κB活性均下降(P<0.001)。二甲双胍可改善SKOV3/PARPi荷瘤裸鼠尼拉帕利耐药,下调瘤组织内P-gp表达(P均<0.05)。结论:二甲双胍可通过抑制IL-6/NF-κB/P-gp改善卵巢癌PARPi耐药。

TCP1表达对HL60和HL60/A 细胞增殖及细胞内药物蓄积的调控作用及其机制

目的:研究TCP1表达对HL60及HL60/A细胞增殖及细胞内药物蓄积的影响及其机制。方法:利用慢病毒转染技术构建敲低、过表达TCP1的HL60/A细胞和HL60细胞及其对照组细胞,Western blot评估敲低、过表达效率。采用CCK-8法检测细胞增殖能力;激光共聚焦显微镜及流式细胞术检测细胞内的药物蓄积;流式细胞术及Western blot检测膜转运蛋白(MRP1、P-gP)及p-AKT的表达水平。结果:在HL60/A细胞中敲低TCP1的表达能够抑制细胞增殖,增加细胞内药物蓄积,降低转运蛋白MRP1及P-gP的表达,在HL60细胞中过表达TCP1能够促进细胞的增殖,减少细胞内药物蓄积,提高转运蛋白MRPI及P-gP的表达。同时利用PI3K抑制剂LY294002抑制PI3K/AKT信号能够拮抗TCP1过表达所致的细胞增殖活性增强、细胞内药物蓄积减少及MRP1、P-gP表达的升高。结论:TCP1能够促进细胞增殖,并通过激活PI3K/AKT信号促进转运蛋白MRP1、P-gP的表达,降低细胞内的药物蓄积。

洗心汤对肠上皮屏障炎症模型P-gp/eCBs轴的影响

目的 观察洗心汤对肠上皮屏障(IEB)炎症及P-gp/e CBs轴的影响,基于“脑-肠轴”探讨其治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制。方法 将T84细胞接种于Transwell跨膜培养系统中模拟肠黏膜屏障,将细胞分为空白组、模型组和洗心汤24、48、72 h组,根据筛选后的造模及药物浓度进行干预,MTT法检测细胞存活率,上皮细胞电阻仪检测跨膜电阻(TEER),ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6、β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)、p-Tau含量,Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)、大麻素受体1(CB1)、大麻素受体2(CB2)蛋白表达,免疫荧光染色检测P-gp表达,RT-PCR检测P-gp m RNA表达。结果 与空白组比较,模型组细胞存活率明显降低,TEER明显减小,细胞上清液TNF-α、IL-6、Aβ_(1-42)和p-Tau含量明显增加,CB2蛋白表达明显降低,CB1蛋白表达明显升高,P-gp蛋白和m RNA表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,洗心汤48 h、72 h组细胞存活率明显升高,TEER明显增大,细胞上清液TNF-α、IL-6、Aβ_(1-42)和p-Tau含量明显减少,CB2蛋白表达明显升高,CB1蛋白表达明显降低,P-gp蛋白和m RNA表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 洗心汤可能通过调节P-gp/e CBs轴相关蛋白表达改善脂多糖诱导的IEB炎症,影响AD病理进展。

高原低氧环境下HDAC5在大鼠体内P-gp表达中的作用及对苯妥英钠药代影响

目的探究高原低氧环境下HDAC5在大鼠体内P-gp表达中的关键作用及对苯妥英钠药代的影响。方法Wistar大鼠运至海拔4010 m的青海玉树巴塘,每组6只。不同组分别给予苯妥英钠、苯妥英钠联用金丝桃素、苯妥英钠联用维拉帕米。在高原地区收集服药后不同时间的血浆和肝组织。采用UFLC-MS法测定血浆中苯妥英钠的浓度,计算药代动力学参数。Western blot检测肝组织中HDAC5、P-gp蛋白表达的变化。结果UFLC-MS结果表明,给予P-gp激动剂后,AUC(0-t)、AUC(0-∞)、MRT(0-t)、MRT(0-∞)、T_(1/2z)、CL_(z)/F、V_(z)/F增加;给予P-gp抑制剂后,AUC(0-t)、AUC(0-∞)、MRT(0-t)、MRT(0-∞)、T_(1/2z)降低。同时,高原低氧环境下,HDAC5参与P-gp表达的调控。当给予P-gp激动剂和抑制剂时,HDAC5与P-gp表达呈现相同变化趋势。结论高原低氧环境下,肝中转运体P-gp的表达影响了P-gp底物苯妥英钠的药代动力学,P-gp的变化水平与HDAC5有关。

Sirt1、P53及P-gp在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨沉默信息调节因子1(Sirt1)、P53及P-糖蛋白(P-gp)在胃癌组织中的表达、临床病理意义及对生存预后的影响。方法采用免疫组化方法检测胃癌组织及正常组织石蜡切片中的Sirt1、P53及P-gp的表达,KaplanMeier生存曲线分析68例患者生存时间与上述指标的表达水平的关系。结果肿瘤组织中Sirt1、P53及P-gp的表达较正常组织表达增高(P<0.001)。Sirt1的高表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,且浸润深度越深、有淋巴结转移及临床分期升高时表达随之升高(P<0.05)。Sirt1阳性表达和P53、P-gp之间存在一定的相关性(P<0.001)。Sirt1阳性表达的患者生存时间较Sirt1阴性表达者低(P<0.001)。结论 Sirt1、P53及P-gp在胃癌组织中呈现高表达,且与胃癌的病理学特征有相关性;联合检测Sirt1、P53及P-gp表达可作为一组判断患者生存时间及预后的指标。

大肠癌组织中HSP27、bcl-2、p53和P-gp的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白27(Heatshockprotein,HSP27)和bcl-2、p53、P-gp蛋白在大肠癌组织中的表达及其意义。方法运用免疫组织化学SP法检测HSP27和bcl-2、p53、P-gp在72例大肠癌组织中的表达,并运用多因素COX比例风险模型分析患者的预后。结果HSP27、bcl-2、p53和P-gp在大肠癌组织中的阳性表达率分别为69.44%(50/72)、54.17%(39/72)、59.72%(43/72)和40.28%(29/72)。HSP27在高分化腺癌组的表达率为84.85%,显著高于低分化组的28.57%(χ2=29.614,P=0.000),bcl-2、p53和P-gp在高分化腺癌组的表达率也高于低分化腺癌组,具有统计学意义(P<0.05)。HSP27与bcl-2及P-gp在大肠癌中的表达具有相关性(r=0.380,P=0.001;r=0.284,P=0.016)。COX回归分析提示HSP27表达与生存期呈负相关。结论HSP27、bcl-2、p53和P-gp在大肠癌组织中呈高表达,提示与大肠癌耐药有关;联合检测对临床制定合理的化疗方案具有指导意义;HSP27可作为判断大肠癌预后的一个独立预测指标。

左金丸对小鼠S180肿瘤细胞获得性多药耐药P-gp的表达及血清肿瘤标志物的影响

目的:研究左金丸、黄连和吴茱萸对小鼠获得性多药耐药S180腹水肿瘤细胞生长的抑制作用,以及对肿瘤细胞P-gp的表达和血清4种肿瘤标志物:(TM)酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、醛缩酶(ALD)和乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响。方法:PFC方案建立S180多药耐药细胞模型,将耐药后S180细胞悬液以每只小鼠0.2ml接种于腹腔,黄连、吴茱萸及左金丸灌胃给药7d,观察小鼠体重、脾指数、肝指数、生命延长率(ILS),流式细胞仪测定P-糖蛋白(P-gp)的表达率,试剂盒检测血清中肿瘤标志物的活力。结果:左金丸给药组对小鼠S180多药耐药细胞增长有明显的抑制作用,能有效降低肝指数,提高脾指数,提高生命延长率(ILS)(60.26%)的作用明高于黄连(21.85%)和吴茱萸单独给药(20.53%)(P<0.01)。同时,左金丸给药组能有效逆转S180肿瘤细胞中P-gp的表达(2.69%)至接近S180细胞对照组水平(1.65%),显著低于模型组(16.07%),也强于黄连(5.69%)及吴茱萸(9.15%)单独给药时的逆转效果。并且左金丸可有效降低血清中ALD(75.94±12.47U.L-1)和LDH(1632.92±494.48U.L-1)的活力,提高血清中ACP(103.28±10.36U.100ml-1)和AKP(34.56±4.91U.100ml-1)的活力,与黄连、吴茱萸给药组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:黄连和吴茱萸合用能产生明显的配伍协同抗肿瘤作用,对P-gp的表达和血清中肿瘤标志物的影响可能是其抗肿瘤和逆转多药耐药的潜在机制。

多药耐药基因产物P-gp、TopoⅡ在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨胃癌组织中多药耐药 (MDR)基因产物 P-糖蛋白 (P- gp) ,DNA拓扑异构酶 (Topo )表达与胃癌分型、分期和淋巴结转移间的关系。方法 应用链菌素亲生物素 -过氧化物酶 (SP)法 ,对 10 6例胃癌标本中的 P- gp、 Topo 进行检测。结果 P- gp表达与胃癌临床分期有关 (P<0 .0 5 ) ;Topo 表达与胃癌组织分型有关 (P<0 .0 5 ) ;P- gp高表达和 Topo 低表达与胃癌淋巴结转移相关 (P<0 .0 5 )。结论 检测 P- gp、Topo 不仅可以作为多药耐药的标志物 ,而且对于胃癌治疗方案的选择和预后判断具有重要参考价值。

NF-κB、P-gp、c-erbB-2蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨核因子κB(NF-κB)、P-gp、c-erbB-2蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Power visionTM两步法检测97例乳腺癌组织中NF-κB、P-gp、c-erbB-2的表达情况。结果乳腺癌组织中NF-κB、P-gp、c-erbB-2的阳性表达率分别为65.97%、43.29%、50.51%;NF-κB、c-erbB-2与乳腺癌淋巴转移及病理分期相关(P<0.05);在乳腺癌标本中NF-κB、P-gp、c-erbB-2蛋白表达两两间均有相关性(P<0.05)。结论乳腺癌中NF-κB、P-gp、c-erbB-2三者间蛋白表达均有相关性,其在乳腺癌多药耐药发生中具有一定作用。

乳腺癌组织中COX-2与MDR1/P-gp表达的相关性研究

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)蛋白与P糖蛋白(P-gp)在乳腺癌组织中表达的相关性。方法:应用免疫组织化学染色法,检测32例乳腺癌组织中COX-2蛋白与P-gp蛋白的表达情况。结果:32例乳腺癌组织中COX-2表达阳性率为62·5%(20/32),P-gp表达阳性率为46·9%(15/32),两者表达呈正相关性(r=0·598,P<0·05)。结论:乳腺癌组织中COX-2与P-gp表达呈正相关,COX-2可干预P-gp的表达并参与乳腺癌多药耐药(MDR)的调节。

胸腔镜肺段切除术对NSCLC患者肺功能、血栓因子、P-gp、GBU4-5的影响

目的研究胸腔镜肺段切除术(TS)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺功能、血栓因子、P糖蛋白(P-gp)、解旋酶(GBU4-5)的影响。方法前瞻性选取2021年1月至2022年12月于宿迁市第一人民医院治疗的NSCLC患者92例为研究对象,按照随机数字表法将其分为TS组(n=46)、胸腔镜肺叶切除术(TL)组(n=46)。TS组行TS治疗,TL组行TL治疗。观察两组术中出血量、手术时间、淋巴结清扫数目、术后引流量、术后24 h疼痛情况、术后住院时间;手术前、术后90 d最大通气量(MVV)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%pred)及用力肺活量占预计值的百分比(FEV1/FVC);手术前、手术后7 d血浆血栓调节蛋白(TM)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)等血栓因子水平;手术前、手术后7 d血清P-gp、GBU4-5水平;术后并发症等指标。结果TS组手术时间为(145.36±19.26)min,长于对照组[(120.85±14.48)min],术中出血量、术后引流量、术后3 d VAS评分分别为(81.65±8.42)mL、(307.67±33.05)mL、(3.25±0.35)分,均小于TL组[(123.54±15.09)mL、(331.96±35.86)mL、(4.30±0.36)分],术后住院时间为(7.57±0.78)d,短于对照组[(9.46±0.97)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。手术后90 d,两组MVV、FEV1%pred、FEV1/FVC均升高,且TS组MVV、FEV1%pred、FEV1/FVC分别为(85.06±8.81)L/min、(86.74±8.93)%、(85.13±8.76)%,均高于TL组[(78.04±8.13)L/min、(79.06±8.21)%、(78.06±8.11)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。术后7 d,两组血浆TM、PIC、TAT及血清P-gp、GBU4-5水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。TS组术后并发症发生率为2.17%,低于TL组(17.39%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论TS治疗NSCLC可减少手术创伤,减少术后并发症,保留更多的肺功能,降低血栓因子、P-gp、GBU4-5水平,可达到与TL一致的切除病灶的目的,有助于患者术后康复。

P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学技术(S-P法)检测P-gp、PKC-α和MRP在50例上皮性卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达。结果P-gp、PKC-α和MRP三个指标在上皮性卵巢癌组织中阳性率分别为48.0%、56.0%、60.0%,显著高于正常卵巢和良性肿瘤(P<0.05);P-gp和PKC-α表达存在密切的相关关系(P<0.01);卵巢癌P-gp、PKC-α和MRP表达阳性者的化疗反应率分别为25.0%、25.0%、33.3%,低于阴性表达组(P<0.05);复发患者P-gp和PKC-α阳性表达率明显高于未复发的患者(P<0.05),MRP表达与复发无关(P>0.05)。单因素分析表明,P-gp、PKC-α和MRP与卵巢癌患者的生存期和不良预后有关。多因素分析表明,P-gp及三个指标共同表达与患者的生存率有关。结论卵巢恶性肿瘤中P-gp、PKC-α和MRP阳性表达与临床化疗耐药有关,并影响患者的生存率。联合检测三个指标对临床化疗疗效判断和患者预后估计具有积极的指导作用。

P-gp170、GST-π、TOPOⅡ在外周T细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的:探讨多药耐药(MDR)相关的P糖蛋白(P-gp170)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)、拓扑异构酶(TOPOⅡ)在不同亚型外周T细胞淋巴瘤(PTCL)的表达情况以及和化疗反应性、预后的关系。方法:应用免疫组化方法检测64例经病理确诊的PTCL患者病理组织P-gp170、GST-π、TOPOⅡ的表达情况,并分析它们之间的相关性以及与病理亚型、化疗效果、预后的关系。结果:64例患者中PTCLP-gp170、GST-π、TO-POⅡ表达阳性率分别为57.8%(37/64)、51.6%(33/64)和53.1%(34/64)。三者的表达无显著的相关性(P>0.05)。P-gp170在PTCL-U和ALK+ALCL两组中的表达具有显著性差异(P=0.0182)。P-gp170表达强阳性和首程化疗后完全缓解(CR)、部分缓解(RR),均呈显著负相关(P=0.000)。本文综合定义的MDR高危组(≥2分)和RR具有显著负相关(P=0.002)。P-gp170表达强阳性和MDR高危组和预后相关(P=0.000;P=0.0145)。PTCL的病理亚型、对化疗的反应性(包括CR和RR)为外周T细胞淋巴瘤的独立预后因素。P-gp170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ尚不能作为独立预后因素。结论:P-gp170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ的表达在PTCL的不同亚型中有一定的差异,在一定程度上和PTCL的耐药性以及不良预后有关。

新辅助化疗对乳腺癌P-gp、GST-π的影响及意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽转移酶(GST-π)在新辅助化疗乳腺癌组织的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测100例乳癌患者新辅助化疗前后肿瘤组织中P-gp及GST-π的表达,并与疗效作相关性分析。结果新辅助化疗总有效率79%,P-gp、GST-π阳性者化疗有效率分别为69.04%和77.08%,阴性者分别为86.20%(P<0.05)和80.76%(P>0.05)。P-gp在化疗前后的阳性表达率分别为41.75%和64.83%,差异有统计学意义(P<0.05);GST-π在化疗前后阳性表达率分别为49.45%和54.94%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论新辅助化疗后P-gp表达显著升高,P-gp对乳腺癌新辅助化疗疗效有一定预测价值。

MDR逆转因子筛选技术P-gp细胞系的建立及其生物学特性评价

目的通过基因转导和药物诱导,建立稳定表达Pgp的细胞系,用于筛选特异性逆转Pgp的药物。方法经RTPCR反应得到小鼠肿瘤细胞PgpDNA,转化大肠杆菌,构建并将质粒DNA转导逆转录病毒载体中,进而感染BMDC1细胞。采用Northern印迹法和流式细胞技术检测细胞PgpmRNA和Pgp分子的表达;以MTT法分析细胞的增殖活性;应用药物聚集和排放实验检测其生物学活性。结果成功构建了稳定表达特异性Pgp基因和Pgp分子的BMDC1(ADR+/+)细胞系。经阿霉素诱导,BMDC1(ADR+/+)细胞Pgp的表达明显增高,在阿霉素增加至12000ng/mL时,仍有80%的细胞保持良好增殖状态,而BMDC1(wt)细胞在1000ng/mL时100%细胞死亡。BMDC1(ADR+/+)较(wt)细胞对MD123有较低的聚集量和较高的排放量,加入Pgp逆转剂Verapamil后,BMDC1(ADR+/+)细胞MD123聚集量增加,药物外排作用消失。结论BMDC1(ADR+/+)细胞系具有较强的药物耐受性,可用于筛选特异性逆转Pgp的药物,Verapamil可逆转Pgp耐药性,具有Verapamil特性者可视为具有逆转Pgp耐药性。

电针对MCAO模型大鼠海马CA1区P-gp表达的影响

目的:研究电针内关对局灶性脑缺血模型大鼠海马CA1区微血管内皮细胞P-gp表达的影响,探讨针刺治疗脑缺血的机制。方法:采用大脑中动脉栓塞法(MCAO)复制局灶性脑缺血模型,电针内关、地机,应用免疫组化法观察各组大鼠海马CA1区P-gp的表达。结果:MCAO模型大鼠海马CA1区微血管内皮细胞MDR1表达下降,30d时表达与15d相比明显增多,有显著性差异(P<0.05),表现为时间依赖性升高。针刺内关穴后P-gp的表达显著增多,并且针刺天数不同疗效也不同。结论:针刺对MCAO大鼠海马CA1区P-gp的表达有良性调节作用。

丹参酮ⅡA对化疗治疗非小细胞肺癌的疗效及P-gp表达的影响

目的观察丹参酮ⅡA对TP方案治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效的影响。方法将患者随机分为两组,治疗组给予TP方案化疗配合丹参酮ⅡA;对照组只使用TP方案化疗。观察2个周期。结果治疗组实体瘤有效率为56.25%,高于对照组的37.50%。且治疗前后P-gp变化,治疗组和对照组之间差异有统计学意义。结论丹参酮ⅡA可以提高TP方案治疗NSCLC的疗效,丹参酮ⅡA不能显著改善NSCLC化疗后的生活质量,也不会增加TP治疗NSCLC的毒副反应,是临床上可以选择的肺癌化疗增效、安全的药物之一。