褐飞虱体内Himetobi P病毒的检测及组织定位

通过对Himetobi P病毒(HiPV)在褐飞虱[Nilaparvata lugens(Stl)]不同地理种群之间的差异、不同发育阶段的感染水平及不同器官组织的感染情况等方面的研究,为进一步研究HiPV与褐飞虱的互作及HiPV的应用奠定基础.对采自亚洲各地的10个褐飞虱种群进行实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitationpolymerase chain reaction,FQ-PCR)检测,发现所有检测的种群都携带有HiPV.根据HiPV衣壳蛋白编码序列进行聚类分析表明,不同地理来源宿主的病毒聚类与采集的地理远近并不一致.该病毒对褐飞虱没有明显的致病作用,可能是一种共生病毒.FQ-PCR分析表明,褐飞虱体内HiPV的相对含量随褐飞虱龄期的增大而缓慢增加,在成虫期达到高峰,且成虫中雄虫的带毒量高于雌虫.以FQ-PCR和免疫组织化学对宿主不同组织的病毒感染水平进行检测表明,HiPV在宿主的中肠后端部分感染水平最高,马氏管次之,而卵巢、精巢、唾液腺、脂肪体中含量较低.

重组人p53腺病毒注射液联合TP化疗方案治疗晚期宫颈癌的疗效

目的研究重组人p53腺病毒(rAd-p53)注射液联合顺铂+紫杉醇(TP)化疗方案对晚期宫颈癌(CC)患者疾病控制率及无进展生存时间的影响。方法以2019年10月至2021年10月该院收治的116例晚期CC患者为研究对象,根据治疗方案将患者分为对照组与联合组,每组58例。对照组采用TP化疗方案治疗,联合组采用rAd-p53注射液联合TP化疗方案治疗。比较两组疾病控制率,治疗前、治疗2个周期后欧洲癌症研究与治疗组织生命质量测定量表(EORTC QLQ-C30)、癌症疲乏量表(CFS)评分,血清肿瘤标志物[鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)]、血清成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)、脊椎蛋白2(Spondin-2)水平,无进展生存时间。结果联合组疾病控制率为84.48%,高于对照组的67.24%(P<0.05);治疗2个周期后联合组EORTC QLQ-C30评分高于对照组(P<0.05),CFS评分低于对照组(P<0.05);治疗2个周期后联合组血清CYFRA21-1、CA125、CEA、SCCA、FGFR4、Spondin-2水平低于对照组(P<0.05);联合组无进展生存时间为7.12(95%CI:5.83~9.41)个月,长于对照组的5.77(95%CI:4.08~7.36)个月(P<0.05)。结论在TP化疗方案治疗晚期CC的基础上,加用rAd-p53注射液可有效控制疾病进展,缓解临床症状,降低血清肿瘤标志物水平,改善无进展生存时间。

移动P2P网络中的病毒传播建模

对移动P2P网络的体系结构和关键协议进行了深入研究分析;在此基础上,根据病毒传播特点并利用流行病学理论,提出了移动P2P网络中病毒的传播数学模型。基于提出的病毒传播模型,使用专门的数字分析软件进行了大量仿真实验,实验主要考查了各P2P参数对病毒传播的影响。实验分析表明,通过控制固定节点的下载率和恢复率这两个影响病毒传播最关键的参数能有效遏制移动P2P病毒传播。

重组人P53腺病毒增强肝癌细胞放疗的敏感性

目的:探讨重组人P53腺病毒(recombinant human adenovirusP53,rAd-P53)对不同P53状态肝癌细胞生长的抑制和放射增敏作用。方法:以重组人P53腺病毒分别感染突变型P53肝癌细胞PLC/PRF/5和野生型P53肝癌细胞SMMC-7721,Western blotting检测肝癌细胞P53蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,台酚蓝染色绘制细胞生长曲线。肝癌细胞感染rAd-P5348h后照射不同剂量的X射线,克隆形成法检测放射增敏比,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:50MOIrAd-P53转染PLC/PRF/5和SMMC-7721细胞后转染效率分别为89.37%和87.53%,转染48h可见P53蛋白高表达,MTT法显示细胞存活率分别为3.41%和35.44%,细胞生长曲线显示感染后第5天两种细胞生长抑制率分别为41.91%和17.03%(P<0.01),PLC/PRF/5细胞的凋亡率[(8.8±1.4)%]显著高于SMMC-7721[(4.1±1.1)%](P<0.01)。应用20MOI的rAd-P53转染细胞48h后加X射线(4Gy)照射,PLC/PRF/5细胞的凋亡率为(26.9±5.6)%,显著高于SMMC-7721细胞凋亡率(16.4±2.9)%(P<0.01);20MOI的rAd-P53转染后加照射PLC/PRF/5和SMMC-7721,细胞的放射增敏比SER(Dq)值分别为1.30和1.16;SER(D0)值分别为1.57和1.25。结论:rAd-P53能显著抑制人肝癌细胞生长、诱导细胞凋亡并提高细胞的放射敏感性,其对PLC/PRF/5细胞作用显著强于SMMC-7721细胞;表明不同内源性P53状态的肝癌细胞对rAd-P53治疗及其协同的放疗敏感性可能不同。

超声引导下瘤体内注射重组人p53腺病毒治疗晚期肝癌

目的评价超声引导下瘤体内注射重组人p53腺病毒治疗晚期难治性肝癌的临床疗效及超声导入基因治疗的临床应用价值。方法对57例晚期肝癌患者行超声引导下瘤体内注射重组人p53腺病毒(rAd-p53),每次剂量1×1012VP或2×1012VP,每周1次,4次1疗程,治疗后选择完成1个疗程及以上,并符合基因治疗入选标准者38例,采用彩色多普勒超声(彩超)及病理学检查评估其临床疗效。结果彩超结果示:肝脏肿块均有不同程度缩小,其中4例患者肿块缩小明显(>50%);16例患者肿块周边和内部彩色血流信号减少或消失。大部分患者病情稳定,症状好转,一般状况改善,Karuafsky评分明显提高[术前(55.79±11.30)vs术后(61.05±21.64),P<0.05]。11例患者行肝穿刺活检组织病理学检查,7例可见肿瘤组织纤维化伴淋巴细胞浸润及肿瘤组织明显变性坏死。治疗的不良反应主要为一过性自限性发热。结论超声引导瘤内注射既能控制肝癌基因治疗的靶向性,又能对基因药物疗效进行影像学评估,具有较高的临床应用价值。

重组人p53腺病毒注射液联合顺铂治疗肺癌所致胸腔积液的临床研究

背景与目的:肿瘤抑制基因p53是目前研究最为广泛和系统的抑癌基因之一,p53基因突变或缺失导致肿瘤的形成。本研究评价重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)导入野生型p53基因抑癌基因治疗同时联合顺铂治疗肺癌所致胸腔积液的临床疗效和毒副反应。方法:将35例肺癌合并胸腔积液患者随机分为联合组和单药组两组。所有患者应用长春瑞滨25mg/m2静脉点滴,第1、8天,每3周重复一次。前述治疗基础上,联合组胸腔内灌入rAd-p531×1012VP和顺铂注射液40mg/m2;单药组胸腔内灌入顺铂注射液40mg/m2,每周重复一次,连用4次后观察疗效。结果:联合组和单药组的有效率分别为82.35%和50.00%(P<0.05);联合组和单药组的一般状况改善率分别为64.70%和33.33%(P<0.05);两组患者主要不良反应为发热、胸痛、消化道反应及白细胞减少,联合组发热的发生率高于单药组(P<0.05),主要为自限性发热,36h后自行恢复正常。结论:重组人p53腺病毒注射液联合顺铂治疗肺癌所致胸腔积液疗效确切,且毒副反应较低,值得临床推广应用。

重组人p53腺病毒注射液在原发性肝癌介入化疗中的应用价值

目的:前瞻性研究重组人p53腺病毒注射液(重组人p53腺病毒)在肝癌介入化疗中的应用价值.方法:分析2008-01-01/2010-12-31期间在上海长海医院和中国人民解放军第113医院行肝癌介入治疗的162例肝癌,随机分为A实验组(n=56)采用重组人p53腺病毒注射液瘤体内注射加肝动脉介入化疗、B实验组(n=62)采用重组人p53腺病毒注射液亦经肝动脉灌注和C对照组(n=44)单纯肝动脉介入化疗,随访24mo观察其疗效及不良反应发生情况.结果:近期疗效1mo后评估A实验组完全缓解6例,部分缓解42例,稳定5例,进展3例;B实验组完全缓解7例,部分缓解42例,稳定8例,进展5例;C对照组完全缓解1例,部分缓解22例,稳定13例,进展8例;就有效率来评估,A、B实验组之间无明显差异(P>0.05),2个实验组疗效均明显优于对照组(P<0.01).远期疗效6、12、24mo生存率分别为:A实验组:80.4%、72.7%和23.6%;B实验组:77.4%、67.7%和21.3%;C对照组:56.8%、47.7%和14%;每个观察点的生存率,A、B实验组之间无明显差异(P>0.05),2个实验组在6和12mo生存率均明显优于对照组(P<0.05),在24mo时生存率之间无明显差异.实验组均未发生严重不良反应.结论:重组人p53腺病毒注射液可以增强肝癌介入化疗的疗效,没有严重不良反应发生;瘤体内注射疗效要并不优于肝动脉灌注,但仍需进一步的研究评估.

重组人p53腺病毒注射液联合放疗治疗鼻咽鳞癌的临床观察

目的评价重组人p53腺病毒(rAd-p53)注射液结合放疗治疗鼻咽鳞癌的疗效及安全性。方法 50例鼻咽鳞癌患者随机分成基因治疗+放疗(GTRT)组24例和单纯放疗(RT)组26例。2组放疗剂量和方法相同。rAd-p53注射液用法:每周1次,每次1×1012VP(病毒颗粒),共9～10次。常规放疗加三维适形放射治疗方案:每次2Gy,每周5次,共7周。观察肿瘤变化和不良反应,并以CT评价疗效。结果 8周后GTRT组完全缓解(CR)9例(38%),部分缓解(PR)13例(54%),稳定(SD)2例(8%),有效率92%;RT组CR 3例(12%),PR 13例(50%),SD 7例(27%),PD 3例(12%),有效率62%;2组有效率比较有显著性差异(P<0.01)。RT组1 a生存17例(71%),2 a生存16例(67%),3 a生存13例(54%);GTRT组1 a生存20例(91%),2 a生存19例(86%),3 a生存17例(77%);2组生存率相比具有显著性差异(P<0.01)。GTRT组除了6例出现一时性发热外,未发现其他不良反应。结论 rAd-p53结合放疗治疗鼻咽鳞癌是安全而有效的。

重组人p53腺病毒联合治疗晚期恶性肿瘤的临床观察

目的:探讨重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)治疗恶性肿瘤的疗效及安全性。方法:对67例晚期无法行手术切除的恶性肿瘤患者,或术后肿瘤转移、无法再手术的患者,采用瘤内注射、血管介入和静脉滴注rAd-p53联合化疗和放疗,至少1个疗程以上,通过临床观察、KPS评分、CT或MRI检查以及随访,评价rAd-p53联合化、放疗的临床疗效。结果:67例患者治疗有效率为47.8%,疾病控制率为89.6%,其中CR患者4例,分别为卵巢癌1例,皮肤癌1例,鼻咽癌2例。rAd-p53联合放疗41例,联合化疗26例,有效率分别为56.1%和34.6%(P<0.05),疾病控制率分别为95.1%和80.8%(P<0.05)。全组中位生存时间为60个月(6～117个月);联合治疗后,全组中位生存时间为24个月(2～34个月)。不良反应主要为自限性发热,另有个别胃肠道反应及肌肉酸痛。结论:rAd-p53对多种恶性肿瘤具有一定疗效,临床应用安全;局部给药联合放疗可能比联合化疗更能提高肿瘤的局控率。

重组人p53腺病毒改善晚期肝癌患者的生存质量研究

目的:评价重组人p53腺病毒(recombinan adenovirus-p53)注射液治疗晚期肝癌对患者生存质量的改善作用。方法:自2003年10月至2006年10月,临床观察晚期肝癌病例共69例,其中应用重组人p53腺病毒注射液治疗39例,一般营养支持治疗30例作为对照组。每次基因治疗剂量1×1012VP或2×1012VP,每周1次,4次为1个疗程。记录患者生存质量评分。结果:重组人p53腺病毒注射液治疗晚期肝癌,大部分患者病情稳定,生存质量评分增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用重组人p53腺病毒注射液可以改善晚期肝癌患者的生存质量。

胸腔内注射重组人p53腺病毒治疗肺癌恶性胸腔积液的临床研究

目的探讨胸腔内注射重组人腺病毒(r Ad-p53)对肺癌恶性胸腔积液的疗效。方法 36例伴有恶性胸腔积液的肺癌患者随机分为2组,采用胸腔内注射r Ad-p53联合静脉输注奈达铂治疗为观察组(n=20),采用单纯静脉输注奈达铂治疗为对照组(n=16)。比较2种方案的胸腔积液的控制有效率,并检测最大自主通气量(MVV)和Kamofsky评分(KPS),比较2组治疗前后的肺功能和生活质量的改变。结果观察组胸腔积液有效控制率85%(17/20)高于对照组50%(8/16),差异显著(P<0.05)。观察组治疗后KPS≥80分者由25%(5/20)上升至55%(11/20),P<0.05;对照组治疗前后差异不明显,P>0.05。结论胸腔内注射r Ad-p53联合化疗更能有效控制肺癌恶性胸腔积液的产生,并提高患者生活质量。

重组人p53腺病毒注射液治疗颈部肿瘤30例疗效观察

目的:观察重组人p53腺病毒注射液治疗颈部肿瘤的可行性。方法:鼻咽癌颈部肿瘤患者60例分为观察组与对照组,每组30例,两组患者均接受放疗,观察组给予重组人p53腺病毒注射液,对两组患者进行一定护理。结果:观察组显效率为70%,有效率为30%。对照组显效率为17%,有效率为63%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:通过重组人p53腺病毒注射液治疗颈部肿瘤,进行心理护理、健康教育等正确的护理措施,使患者积极主动配合治疗,保证了治疗计划顺利进行,提高了中晚期鼻咽癌患者的治疗疗效和生存率。

重组人p53腺病毒注射液联合顺铂治疗95例恶性胸腔积液

目的探讨重组人p53腺病毒注射液联合顺铂胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的疗效及安全性。方法 95例恶性胸腔积液患者,经皮胸腔置管引流后分别注入重组人p53腺病毒(Ⅰ组)、顺铂(Ⅱ组)及两者联用(Ⅲ组),每周1次,3周后评价疗效、生活质量及安全性。结果Ⅰ组与Ⅲ组、Ⅱ组与Ⅲ组间治疗恶性胸腔积液有效率比较差异有统计学意义(P=0.032,P=0.016),Ⅰ组和Ⅱ组间差异无统计学意义(P>0.05);在生活质量改善方面,Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅲ组与Ⅱ组间差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ组和Ⅲ组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组不良反应都较轻,差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人p53腺病毒注射液联合顺铂局部治疗恶性胸腔积液疗效显著,且能提高患者生活质量,不增加化疗的不良反应。

重组人p53腺病毒注射液联合胸腔热灌注化疗治疗肺癌所致胸腔积液的临床研究

目的评价重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)联合胸腔热灌注化疗治疗肺癌合并胸腔积液的临床疗效、不良反应及对生活质量的影响。方法将43例肺癌合并胸腔积液患者随机分为2组:联合组(n=22)和单药组(n=21)。所有患者应用紫杉醇135mg/m^2静脉滴注(第1天),每3周重复1次;同时胸腔内给予顺铂注射液40mg/m^2热灌注化疗,每周重复1次,连用3次。联合组每次热灌注化疗后胸腔内灌入rAd-p53(1×10^(12)VP),每周重复1次,连用3次;对治疗前、后症状和生活质量的改变进行评价。结果联合组和单药组的有效率分别为86.4%和57.2%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组患者功能状态(躯体、情感、认知、社会)及整体生活质量评分值均显著增加,与单药组相比差异有统计学意义(P<0.05)。联合组治疗后乏力症状评分、肺癌相关症状(咳嗽、呼吸困难)评分均降低,与单药组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者主要不良反应为发热、消化道反应及白细胞减少,联合组发热的发生率高于单药组(P<0.05),后二者无明显差异(P>0.05)。结论重组人p53腺病毒注射液联合胸腔热灌注化疗治疗肺癌所致胸腔积液疗效确切,同时可改善患者生活质量,且不良反应较少,值得临床推广应用。

放疗联合p53腺病毒治疗中晚期宫颈癌近期疗效分析

目的评价调强放疗联合重组人p53腺病毒注射液治疗中晚期宫颈癌的近期临床疗效。方法 46例中晚期宫颈癌患者随机分为治疗组(调强放疗联合p53基因治疗)21例和对照组(单纯调强放疗)25例。治疗组给予重组人p53腺病毒注射液瘤内注射每周1次,两组患者放疗剂量和放疗方法相同,治疗结束2个月后,复查评估治疗疗效;并于放疗前后刷取宫颈细胞,行DNA倍体定量分析,比较两组患者宫颈细胞DNA指数≥2.5的细胞个数。结果治疗组完全缓解(CR)13例(61.9%),部分缓解(PR)6例(28.6%),有效率90.5%;对照组CR 7例(28%),PR 9例(36%),有效率64.0%;治疗组有效率明显高于对照组(P<0.05)。DNA倍体定量分析放疗后治疗组与对照组差异有统计学意义(χ~2=4.544,P=0.033)。结论影像学及DNA倍体定量分析结论一致,提示重组人p53腺病毒联合调强放疗治疗中晚期宫颈癌近期疗效优于单独放疗组。

重组人p53腺病毒注射液(今又生)临床研究进展

p53基因被称为"基因保护神",它的失活与半数以上肿瘤的发生发展密切相关,修正导致异常生物学行为的p53基因缺陷是一种新的抗肿瘤途径。2003年重组人p53腺病毒注射液上市,商品名"今又生",是世界上第一个获准上市的肿瘤基因治疗药,由正常人p53肿瘤抑制基因和改构的5型腺病毒基因重组而成。前者是"今又生"发挥肿瘤治疗作用的主体结构,后者主要起载体作用,携带治疗基因p53进入肿瘤细胞内发挥作用。重组人p53腺病毒(rAd-p53)是一种广谱的抗肿瘤药物,目前已有多篇"今又生"治疗全身各主要系统恶性实体瘤的研究论文在国内外发表,现综述其临床研究进展。

重组人p53腺病毒治疗肺腺癌恶性胸腔积液的临床疗效

目的观察短期内胸腔内注射重组人p53腺病毒缓解肺腺癌所致恶性胸腔积液的效果和毒副作用。方法纳入肺腺癌所致恶性胸腔积液的患者226例,随机分成Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,均给予胸腔置管,反复引流并尽可能排净胸腔积液。Ⅰ组76例,胸腔内注入重组人p53腺病毒注射液1×1012VP;Ⅱ组82例,胸腔内注入顺铂30 mg/m2;Ⅲ组68例,注入重组人p53腺病毒注射液1×1012VP 72 h后注入顺铂30 mg/m2,1次/w,共注射4 w。结果Ⅰ组有效率(CR+PR)84.2%,Ⅱ组46.3%,Ⅲ组85.3%,Ⅰ组、Ⅱ组,Ⅲ组和Ⅱ组比较具有显著差异(P<0.05),Ⅰ组和Ⅲ组间无明显差异(P>0.05);3组生活质量均有提高,而Ⅰ组和Ⅲ组提高幅度明显优于Ⅱ组(P<0.05),Ⅰ组和Ⅲ组比较差异无统计学意义(P>0.05);副作用方面,除发热外,食欲下降、白细胞下降Ⅰ组明显少于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05)。结论重组人p53腺病毒注射液短期内注射入胸腔对于缓解肺腺癌所致恶性胸腔积液有效,毒副作用较少,可提高生活质量,是一种治疗肺腺癌恶性胸腔积液的新方法。

重组人p53腺病毒诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡的作用

目的观察重组人p53腺病毒(Ad-p53)对人乳腺癌细胞MCF-7细胞形态、细胞生长、细胞凋亡和p53蛋白表达的影响。方法观察细胞形态学变化;MTS比色法观察Ad-p53对体外培养MCF-7细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测Ad-p53作用于MCF-7细胞72小时后细胞凋亡率和细胞周期的变化;Ad-p53作用于MCF-7细胞72小时后,Western blot法检测p53蛋白表达的情况。结果倒置显微镜下细胞形态发生明显的变化;MTS法观察到Ad-p53对乳腺癌细胞的抑制作用明显,且有时间依赖性;流式细胞术检测结果显示,Ad-p53作用于MCF-7细胞后其增殖抑制率与对照组相比明显增加。通过Western blot证实外源p53基因能在MCF-7细胞表达。结论 Ad-p53可抑制人乳腺癌细胞MCF-7的生长,促进其凋亡,其机制可能通过p53依赖途径实现。

类猪圆环病毒 P1转录的 Northern Blot 分析

为鉴定类猪圆环病毒P1的转录本,采用地高辛标记的RNA探针,通过Northern Blot方法,对转染PK15细胞的类猪圆环病毒P1进行了RNA转录分析。结果表明,Northern杂交可检测到2个RNA转录本,包括正链上ORF3的RNA和负链上ORF1的RNA。同时,ORF3 RNA表达时间比ORF1的短,且丰度也大大低于ORF1。类猪圆环病毒P1至少存在ORF1和ORF3 2个转录本。

类猪圆环病毒因子P1核酸链型和极性的研究

研究报道类猪圆环病毒因子P1的核酸链型和极性的研究结果。采用氯化铯平衡密度梯度离心获得较为纯净的病毒粒子后,提取病毒DNA,经S1核酸酶消化、特异性单引物第一轮PCR扩增结合常规第二轮PCR扩增等研究,结果表明,类猪圆环病毒因子P1为单股、负链基因组。