健脾化瘀解毒法对结肠癌裸鼠模型癌及癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1表达的影响研究

目的研究健脾化瘀解毒法对结肠癌原位种植瘤癌及癌旁组织中蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化真核细胞起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)表达的影响。方法建立裸鼠结肠癌模型,随机分为空白组、模型组、健脾益气组、化瘀解毒组、健脾化瘀解毒组、雷帕霉素组及5-氟尿嘧啶组,每组5只。干预各组4周后,检测各组癌组织与癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平。结果与空白组比较,模型组癌组织与癌旁组织中AKT1、mTOR、p-4EBP1的表达均上调,差异有显著性(P<0.05),且AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平均为癌组织>癌旁组织>正常肠黏膜组织。与模型组比较,健脾化瘀解毒法能在一定程度上抑制结肠癌癌组织及癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);健脾益气法、化瘀解毒法均能下调癌组织与癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1蛋白,但其降低水平不如健脾化瘀解毒法。结论健脾化瘀解毒法能够降低AKT、mTOR、p-4EBP1蛋白的表达,健脾益气法与化瘀解毒法协同增效,以获得最佳疗效。

双环醇片联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者血清P-选择素及细胞间黏附分子-1表达的影响

目前全世界约有2.5亿乙型肝炎病毒(HBV)感染者,大多集中在非洲与东南亚地区,已经成为引起全球范围关注的重大公共卫生问题之一[1]。我国现阶段HBV感染者约有9000万,其中慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者约占1/3[2]。目前针对CHB尚无根治性方法,其治疗主要是抗HBV,抑制肝细胞变性坏死,从而延缓病情进展,延长患者生存期[3]。

P-选择素、肾脏损伤分子1对肾病综合征并发急性肾损伤的早期诊断价值

目的探究P-选择素、肾脏损伤分子1(KIM-1)对肾病综合征并发急性肾损伤的诊断效能,分析肾病综合征并发急性肾损伤的相关因素。方法回顾性分析南京中医药大学附属南京医院2019年1月—2022年6月收治的100例肾病综合征患者的病历资料,根据病理活检结果分为急性肾损伤组和非急性肾损伤组。比较两组的一般资料、实验室指标(血清P-选择素、尿KIM-1、白蛋白、24 h尿量、24 h尿蛋白定量、血红蛋白、血肌酐、尿素氮、尿酸、D-二聚体、甘油三酯、总胆固醇)、入院用药史(利尿剂、质子泵抑制剂、抗血小板药);采用多因素一般Logistic回归分析肾病综合征并发急性肾损伤的相关因素;绘制ROC曲线,分析血清P-选择素、尿KIM-1对肾病综合征并发急性肾损伤的诊断效能。结果100例肾病综合征患者中合并急性肾损伤28例(28.00%),其中,肾小球轻微病变13例、IgA肾病8例、膜性肾病4例、增生性肾小球肾炎2例、节段性肾小球肾炎1例。72例(72.00%)肾病综合征患者未合并急性肾损伤。急性肾损伤组的血清P-选择素、尿KIM-1、血肌酐、尿素氮、尿酸、24 h尿蛋白定量和使用利尿剂占比均高于非急性肾损伤组(P<0.05),白蛋白、24 h尿量均低于非急性肾损伤组(P<0.05)。多因素一般Logistic回归分析结果显示,血清P-选择素升高[OR=4.464(95%CI:1.526,13.059)]、尿KIM-1升高[OR=3.963(95%CI:1.355,11.594)]、血肌酐升高[OR=4.059(95%CI:1.387,11.876)]、24 h尿量减少[OR=3.778(95%CI:1.291,11.051)]、24 h尿蛋白定量升高[OR=4.100(95%CI:1.401,11.996)]和白蛋白减少[OR=4.836(95%CI:1.653,14.147)]均是肾病综合征并发急性肾损伤的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清P-选择素、尿KIM-1单独及联合诊断肾病综合征并发急性肾损伤的敏感性分别为64.29%(95%CI:0.441,0.806)、60.71%(95%CI:0.407,0.778)、82.14%(95%CI:0.624,0.932),特异性分别为76.39%(95%CI:0.646,0.852)、73.61%(95%CI:0.617,0.829)、79.17%(95%CI:0.676,0.875),曲线下面积分别为0.702、0.715、0.829。结论血清P-选择素、尿KIM-1可用于辅助诊断肾病综合征并发急性肾损伤,且诊断效能良好。

维持性血液透析患者血清结缔组织生长因子、P-选择素糖蛋白配体-1的表达水平及临床意义

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand 1,PSGL-1)在维持性血液透析患者中的表达及与残余肾功能(residual renal function,RRF)、炎症反应的相关性。方法选取2019年5月至2021年10月陕西省宝鸡市人民医院收治的102例维持性血液透析患者为研究组,根据透析前24h尿量将患者分两组:24h尿量≥200ml为有RRF组68例,24h尿量<200ml为无RRF组34例,选择年龄、性别相匹配的50例健康体检者为对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法检测血清中CTGF、PSGL-1表达水平,Pearson法分析CTGF、PSGL-1与炎症反应指标的相关性,采用logistic回归分析影响RRF的因素。结果与对照组相比,无RRF组和有RRF组患者血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,Hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平均上升,血红蛋白和白蛋白表达水平均下降,差异有显著性(P<0.05);与有RRF组相比,无RRF组患者血清BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6水平均上升,血红蛋白和白蛋白水平均下降,差异有显著性(P<0.05);研究组患者血清中CTGF、PSGL-1表达水平均高于对照组,且无RRF组患者血清中CTGF、PSGL-1水平均高于有RRF组患者,差异有显著性(P<0.05);维持性血液透析患者血清中CTGF与PSGL-1表达呈正相关(r=0.472,P<0.05);维持性血液透析患者血清CTGF、PSGL-1水平与Hs-CRP、TNF-α、IL-6、BUN、Scr水平呈正相关(P<0.05),与血红蛋白、白蛋白水平呈负相关(P<0.05);Logistic回归结果显示BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6、CTGF、PSGL-1、血红蛋白、白蛋白均是RRF的独立影响的因素(P<0.05)。结论CTGF、PSGL-1在维持性血液透析患者血清中高表达,与患者RRF及炎症反应密切相关。

lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴研究P-15对软骨损伤的保护作用

目的探究P-15对人骨关节炎软骨细胞(HC-OA)的保护作用及与lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴的关系。方法分离HC-OA胞核、胞质RNA,RT-qPCR检测lncRNA NEAT1在细胞中的分布;P-15处理HC-OA细胞,转染siRNA NC和siRNA SFPQ后,RT-qPCR检测lncRNA NEAT1表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测RUNX2、SFPQ、Beclin-1、LC3B和P62表达水平。结果lncRNA NEAT1同时存在于HC-OA胞质和胞核,且更多分布于细胞核;P-15可降低胞内lncRNA NEAT1水平(P<0.05),抑制骨关节炎软骨细胞凋亡(P<0.05);P-15可通过调控lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴上调SFPQ表达和抑制RUNX2表达(P<0.01);P-15调控lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴促进软骨细胞发生自噬(P<0.05)。结论P-15可调控lncRNA NEAT1/SFPQ/RUNX2轴抑制HC-OA凋亡并促进自噬,保护软骨细胞免受损伤。

血清sP-selectin、sICAM-1水平变化在肝硬化患者中的临床意义

目的分析血清可溶性P-选择素(sP-selectin)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平变化在肝硬化患者中的临床意义。方法选取2018年1月—2022年7月肝硬化患者94例作研究组,选取同期肝硬化所致肝癌患者51例作为对照组,对比两组以及不同Child-Pugh分级血清sP-selectin、sICAM-1水平,并分析血清水平和分级相关性、肝癌诊断效能。结果随Child-Pugh分级增加,血清sP-selectin、sICAM-1水平增加,即C级高于A级、B级,B级高于A级(P<0.05);经Pearson分析结果显示,血清sP-selectin水平(r=0.698)、血清sICAM-1水平(r=0.714)与肝硬化Child-Pugh分级呈正相关(P<0.05);研究组血清sP-selectin、sICAM-1水平低于对照组(P<0.05);以肝癌患者作为阳性样本,以肝硬化患者作为阴性样本,依据血清sP-selectin、sICAM-1水平变化趋势制为ROC曲线,结果为,联合诊断AUC为0.834、敏感性98.04%、特异性95.74%,sP-selectin的AUC为0.828、敏感性90.20%、特异性85.11%,sICAM-1的AUC为0.803、敏感性86.27%、特异性82.98%,其中联合诊断敏感性、特异性最高(P<0.05)。结论肝硬化患者随病情加重,血清sP-selectin、sICAM-1水平随之升高,且动态监测可早期诊断肝癌。

二烯丙基二硫增强DJ-1过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU的敏感性

目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是否增强DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil, 5-氟尿嘧啶)的敏感性。方法 实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincristine,长春新碱)组、VCR+DADS组、DJ-1组、DJ-1+DADS组;MTT检测DADS对5-FU抑制细胞增殖的影响;流式细胞术检测DADS对细胞凋亡的影响;qRT-PCR、Western blot、免疫荧光检测DADS对耐药相关基因表达的影响。结果 DADS增强5-FU对VCR耐药细胞和DJ-1过表达细胞增殖的抑制作用;DADS诱导VCR耐药细胞凋亡;DADS下调DJ-1表达、诱导DJ-1过表达细胞凋亡;过表达DJ-1上调P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、Bcl-2、XIAP(X连锁凋亡抑制蛋白),下调caspase-3表达;DADS降低DJ-1过表达细胞和VCR耐药细胞P-gp、Bcl-2、XIAP,升高caspase-3表达。结论 DADS能增强DJ-1过表达细胞对5-FU的敏感性,与其拮抗DJ-1介导的P-gp、Bcl-2、XIAP上调、caspase-3下调有关。

消化道肿瘤MDR1基因和P-糖蛋白的表达与化疗药物耐药的关系

目的探讨消化道肿瘤多药耐药基因MDR1基因和P-糖蛋白(P-gp)的表达与肿瘤化疗药物耐药之间的关系。方法选择72例消化道肿瘤患者的手术标本,采用荧光定量PCR检测MDR1 mRNA表达量,ELISA法检测P-gp表达水平,并与ATP-TCA化疗药物敏感性试验结果作对照。结果 72份消化道肿瘤组织中,MDR1 mRNA阳性表达率为75%,P-gp阳性表达率为67%。72份消化道肿瘤组织中,对10种化疗药物均不敏感的有12份,对1种化疗药物敏感的有15份,对2种化疗药物敏感的9份,对3种化疗药物敏感的有9份,对5种化疗药物敏感的有15份,对8种化疗药物敏感的有9份,对所有化疗药物均敏感的有3份。消化道肿瘤MDR1mRNA、P-gp的阳性表达率与其对化疗药物敏感程度呈负相关(r s值分别为-0.672、-0.715,均P<0.05)。结论 MDR1基因、P-gp表达与肿瘤耐药性相关,MDR1基因、P-gp阳性表达提示患者可能对化疗药物存在获得性耐药。

Sirt1、P53及P-gp在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨沉默信息调节因子1(Sirt1)、P53及P-糖蛋白(P-gp)在胃癌组织中的表达、临床病理意义及对生存预后的影响。方法采用免疫组化方法检测胃癌组织及正常组织石蜡切片中的Sirt1、P53及P-gp的表达,KaplanMeier生存曲线分析68例患者生存时间与上述指标的表达水平的关系。结果肿瘤组织中Sirt1、P53及P-gp的表达较正常组织表达增高(P<0.001)。Sirt1的高表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,且浸润深度越深、有淋巴结转移及临床分期升高时表达随之升高(P<0.05)。Sirt1阳性表达和P53、P-gp之间存在一定的相关性(P<0.001)。Sirt1阳性表达的患者生存时间较Sirt1阴性表达者低(P<0.001)。结论 Sirt1、P53及P-gp在胃癌组织中呈现高表达,且与胃癌的病理学特征有相关性;联合检测Sirt1、P53及P-gp表达可作为一组判断患者生存时间及预后的指标。

MDR1/P-gp在膀胱移行细胞癌中的表达及与Fas和Survivin蛋白表达的关系

目的:探讨膀胱移行细胞癌中MDR1基因(P-糖蛋白)与Fas、Survivin表达的相互关系及其与膀胱癌生物学行为的相关性。方法:应用免疫组织化学方法检测64例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱粘膜中P-GP、Fas、Survivin的表达。结果:膀胱移行细胞癌中P-GP、Survivin的表达阳性率高于正常粘膜,与膀胱癌的分级有关(P<0.01);而Fas在膀胱正常粘膜中表达高于移行细胞癌,差异有统计学意义(P<0.01)。复发性膀胱癌P-GP的阳性表达率高于初发膀胱癌(P<0.01)。膀胱移行细胞癌P-GP的表达与Fas呈负相关,而与Survivin表达无关。结论:膀胱移行细胞癌的MDR1(多药耐药基因)与Fas的表达密切相关,而与凋亡抑制蛋白Survivin的表达无关。本研究为采用MDR逆转剂或Fas干扰剂以增加膀胱移行细胞癌的化疗敏感性提供实验依据。

氧化苦参碱对放疗鼻咽癌HNE-1细胞P-糖蛋白表达影响

目的(1)氧化苦参碱对放射前后鼻咽癌HNE-1细胞有无生长抑制作用;(2)研究天然产物氧化苦参碱对鼻咽癌HNE-1细胞株放射前、后P-糖蛋白表达的影响。方法(1)MTT法检测长春新碱、维拉帕米、氧化苦参碱对放射前HNE-1细胞、放射后HNE-1(200)细胞生长抑制情况;(2)免疫化学法检测氧化苦参碱、维拉帕米对HNE-1(200)细胞P-糖蛋白表达的影响。结果(1)长春新碱、维拉帕米、氧化苦参碱对放射前、后细胞生长均有抑制作用,呈浓度依赖关系,随着浓度的增加抑制作用也增加;(2)高浓度VCR对放射治疗后细胞HNE-1(200)的抑制率比对HNE-1细胞的抑制率降低了近50%,P值小于0.01,有显著差异;氧化苦参碱、维拉帕米对两种实验细胞抑制没有显著差异。(3)免疫组化检测细胞P-糖蛋白表达,结果为HNE-1阴性,HNE-1(200)阳性,维拉帕米、氧化苦参碱分别作用于HNE-1(200)细胞后P-gp表达弱阳性。结论(1)氧化苦参碱对放射前后鼻咽癌HNE-1细胞有明显生长抑制作用;(2)放射后细胞HNE-1(200)对长春新碱产生耐药;(3)低毒性浓度氧化苦参碱具有与维拉帕米相似的作用,能使放射照射后鼻咽癌HNE-1细胞株P-糖蛋白的表达下降。

P-选择素基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死临床关联性研究

目的探讨P-选择素(SELP)基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)基因M62I多态性与缺血性脑梗死的关系。方法选取148例缺血性脑梗死患者作为脑梗死组,并分为大动脉粥样硬化性(LAA)亚组、心源性脑栓塞(CE)亚组和小动脉闭塞性(SAO)亚组;88例正常人群作为正常对照组。运用基因测序方法检测所有受试者SELP基因S290N和PSGL-1基因M62I的基因多态性。结果与正常对照组比较,脑梗死组及其亚组S290N基因型和等位基因频率差异无统计学意义(均P>0.05);脑梗死组M62I基因型和等位基因频率差异有统计学意义(均P<0.01);LAA亚组M62I基因型差异无统计学意义(χ~2=5.889,P=0.053),但等位基因频率差异有统计学意义(χ~2=6.156,P=0.021);CE亚组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(χ~2=1.693,P=0.429;χ~2=1.372,P=0.238);SAO亚组基因型和等位基因频率差异均有统计学意义(χ~2=12.572,P=0.002;χ~2=8.736,P=0.004)。S290N与缺血性脑梗死风险无相关性(均P>0.05)。M62I显性模型和超显性模型与缺血性脑梗死风险有相关性(OR=2.662,95%CI:1.531~4.630,P=0.000;OR=0.392,95%CI:0.219~0.701,P=0.001),而隐性模型和加性模型与缺血性脑梗死风险无相关性(OR=1.428,95%CI:0.528~3.862,P=0.630;OR=2.121,95%CI:0.766~5.872,P=0.156)。结论 PSGL-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死之间具有相关性。

清肾颗粒对湿热型慢性肾衰竭急剧加重患者血浆P-选择素及细胞间黏附分子-1的干预作用

目的观察湿热型慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)急剧加重患者血浆P-选择素(CD62P)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平及清肾颗粒的干预作用。方法60例湿热型CRF急剧加重患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例,并选取20名健康体检者作为健康组。治疗组与对照组均在西药常规治疗同时使用中药解毒泄浊Ⅱ号保留灌肠,治疗组加用清肾颗粒,每次1袋(20g),每日3次口服,疗程1个月。检测两组临床疗效及治疗前后血浆CD62P、ICAM-1水平变化情况,并与健康组比较。结果治疗组临床疗效和中医证候疗效总有效率[均为90·0%(27/30)]明显高于对照组[60·0%(18/30)和63·3%(19/30)](P<0·05)。两组患者治疗前血浆CD62P、ICAM-1水平明显高于健康组(P<0·01);治疗后两组此二指标水平均下降(P<0·05),且治疗组下降幅度大于对照组(P<0·05)。结论湿热型CRF急剧加重患者血浆CD62P、ICAM-1水平较正常人组明显升高,清肾颗粒合用中药解毒泄浊Ⅱ号保留灌肠及常规西药较未使用清肾颗粒者可显著降低其水平,改善肾功能,减轻临床症状。

左乙拉西坦对难治性癫痫患儿外周血单个核细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响

目的观察左乙拉西坦对难治性癫痫患儿外周血单个核细胞多药耐药基因1(MDR1)mRNA和P-糖蛋白(P-gp)表达的影响,并探讨其临床意义。方法选取难治性癫痫患儿50例,在原抗癫痫方案基础上添加左乙拉西坦治疗,分别于添加左乙拉西坦治疗前及治疗6、12个月,采集外周静脉血,提取单个核细胞,采用RT-PCR法检测MDR1 mRNA表达,采用Western blotting法检测P-gp表达。结果难治性癫痫患儿在添加左乙拉西坦治疗6、12个月外周血单个核细胞MDR1 mRNA与P-gp相对表达量均较添加左乙拉西坦治疗前明显降低(P均<0.05);添加左乙拉西坦治疗6、12个月外周血单个核细胞MDR1 mRNA与P-gp相对表达量比较虽无统计学差异(P均>0.05),但随着治疗时间延长,二者相对表达量有下降趋势。结论难治性癫痫患儿添加左乙拉西坦治疗能明显下调外周血单个核细胞MDR1 mRNA与P-gp表达,这为难治性癫痫治疗提供了新的思路。

六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2及肠道P-gp活性的影响

目的:考察六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2及肠道P-gp活性的影响。方法:两组(各5只)大鼠分别灌胃给予六味地黄丸生理盐水7 d后,静脉给予咖啡因,用HPLC法测定咖啡因的血药浓度,获得药-时曲线,计算药动学参数,以咖啡因t1/2的变化来评价六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2活性的影响;采用在体肠循环法,通过分析P-gp底物地高辛肠吸收参数的变化来考察六味地黄丸对P-gp活性的影响。结果:生理盐水组、六味地黄丸组大鼠体内探针药物咖啡因的t1/2分别为(2.61±0.98)h、(5.14±0.21)h;地高辛在给药组和对照组肠吸收百分率分别为(6.54±0.71)%、(5.42±0.23)%,吸收速率常数分别为(0.030±0.005 7)h-1、(0.024±0.003 9)h-1。结论:六味地黄丸对大鼠肝CYP1A2活性具有一定抑制作用,对肠道P-gp活性具有较弱的诱导作用。

P-选择素及P-选择素糖蛋白配体-1在大鼠深静脉血栓模型中的表达变化

目的建立并观察大鼠深静脉血栓（deep venous thrombosis，DVT）模型不同时段血栓的形成状态，检测组织因子（tissuefactor，TF）、P-选择素（P—selectin，PS）及P-选择素糖蛋白配体-1（PSGL-1）在血液、静脉壁组织中的表达变化，探讨其与血栓形成之间的关系。方法90只SD大鼠随机分为对照组（n=10）、假手术组（n=40）和实验组（n=40）；采用下腔静脉部分瘀滞法（狭窄法）制备深静脉血栓模型，分别于造模后6h、24h、48h和72h随机处死各组10只大鼠并取材，RealTime—PCR法分别检测TF、PS及PSGL-1基因在血液中的表达变化；Westernblot法检测静脉壁组织中PSGL-1的表达变化。结果大鼠DVT模型中，对照组与假手术组各项检测指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；实验组造模后6h时TF、PS及PSGL-1基因表达较对照组、假手术组明显升高（P〈0．05），24h时PSGL-1基因表达仍继续升高且差异有统计学意义（P〈0．05），随着造模时间的延长上述基因表达虽呈上升趋势，但与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。实验组PSGL-1在造模后6h、24h较对照组、假手术组表达升高（P〈0．05）。结论Ps和PSGL-1在大鼠DVT模型中呈高表达，并促进血栓形成。

非小细胞肺癌中缺氧诱导因子-1α和p-糖蛋白的表达及其与人乳头状瘤病毒感染的相关性

目的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、p-糖蛋白(p-glycoprotein,p-gp)的表达,HPV感染在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生发展中的作用及三者的相互关系尚不清楚。文中研究NSCLC中HIF-1α和p-gp的相关性,探讨HIF-1α和p-gp在NSCLC发生发展及多药耐药(multidrug resistance,MDR)中的作用,并初步分析HIF-1α和p-gp与人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的相关性。方法收集秦皇岛市第一医院2012年1-5月NSCLC新鲜标本60例作为NSCLC组,20例肺良性病变组织作为肺良性病变组,应用PCR方法选用HPV16、18型特异性引物检测2组中HPV DNA的表达,应用免疫组化法检测HIF-1α、p-gp的表达。结果 NSCLC中HIF-1α阳性率为48.3%(29/60),肺良性病变未见阳性表达(χ2=15.163,P<0.05);p-gp的阳性率为60.0%(36/60),肺良性病变未见阳性表达(χ2=21.818,P<0.05);HIF-1α阳性者中p-gp的表达率明显高于HIF-1α阴性者,两者呈正相关(r=0.313,P<0.05);NSCLC组中HIF-1α表达与组织分化程度及淋巴结转移相关;p-gp表达与组织学分型相关,肺腺癌p-gp阳性表达率(83.3%)高于肺鳞癌(50.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC高分化型HPV DNA检出率(8.3%)低于中、低分化型(50.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移者HPV DNA检出率(60.6%)高于无淋巴结转移者(23.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α与p-gp参与了NSCLC的发生发展及MDR;HPV感染可能是NSCLC发生的病因学因素之一,但NSCLC中HIF-1α、p-gp表达与HPV感染均无协同作用。

JNK信号通路介导MDR1/P-gp调控人结肠癌多药耐药

目的:探讨在人结肠癌多药耐药细胞株HCT8/V中JNK信号传导通路与多药耐药1(MDR1)基因表达的关系.方法:MTT法检测人结肠癌多药耐药细胞株HCT8/V及其敏感株HCT8细胞对多种抗肿瘤药物的敏感性;抑制JNK信号通路的激活后,采用双荧光素酶活性报告基因检测MDR1启动子转录活性的表达;实时荧光定量PCR检测MDR1mRNA的表达;Westernblot分析对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.结果:HCT8/V细胞对长春新碱(VCR)的耐药倍数为10.49倍.加入JNK特异性抑制剂sp600125(20μmol/L)抑制后,HCT8/V细胞对VCR的半数抑制浓度(IC50)由191.08mg/L±18.18mg/L降低到50.34mg/L±15.71mg/L,逆转指数为3.80(P<0.01).HCT8/V细胞加入JNK抑制剂后,MDR1启动子活性从0.03647±0.00191降低到0.01362±0.00196,下降了2.52倍(P<0.01).实时荧光定量PCR、Westernblot检测结果提示,抑制JNK通路的激活后,HCT8/V细胞的MDR1mRNA从0.34275±0.0339下降到0.13625±0.0196(P<0.01),P-gp表达从0.88132±0.1026下降到0.56174±0.1014(P<0.01).结论:JNK信号通路通过介导MDR1/P-gp调控人肠癌多要耐药,抑制JNK信号通路可降低MDR1/P-gp的水平,逆转人结肠癌HCT8/V细胞的多药耐药性.

p-mTOR和p-4EBP1在横纹肌肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨p-mTOR、p-4EBP1在横纹肌肉瘤组织中的表达及临床意义,并探讨其相关性。方法:采用免疫组化(SABC法)检测70例横纹肌肉瘤组织p-mTOR、P-4EBPl的表达,分析其与横纹肌肉瘤患者临床病理特征及预后的关系。结果横纹肌肉瘤组织中p-mTOR、p-4EBP1蛋白阳性表达率分别为75.7%和65.7%,均呈正相关(P<0.05)。p-mTOR蛋白表达与其病理亚型相关性有统计学意义(P<0.05),p-mTOR蛋白阴性组患者3年总生存率、无疾病进展生存率均优于阳性组患者(P=0.001,P=0.014)。P-4EBPl蛋白表达与患者的肿瘤大小的相关性有统计学意义(P<0.05),p-4EBP1蛋白阴性组患者3年总生存率、无疾病进展生存率均优于阳性组患者(P=0.017,P=0.052)。单因素分析显示,p-mTOR、p-4EBP1、分期、病理类型、肿瘤大小是不良预后因素(P<0.05),而淋巴结转移情况、性别、年龄与预后无关(P>0.05)。结论:横纹肌肉瘤组织中存在p-mTOR、p-4EBPl蛋白的高表达与肿瘤临床特点有关,p-mTOR、p-4EBP1的表达存在相关性,p-mnTOR和p-4EBP1表达是横纹肌肉瘤的不良预后因素。

胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞多耐药基因1和P-糖蛋白的表达

目的:探讨胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞中多耐药基因1(mdr1)和P糖蛋白(P gp)的表达。方法:常规培养胃上皮永生细胞系(GES-1)、胃腺癌细胞系(BGC823)和胃腺癌淋巴结转移细胞系(SGC7901)细胞,用RT PCR和原位杂交检测此3种细胞的mdr1mRNA表达,用免疫印迹和免疫组化检测它们的P gp表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积以判断它们的P gp功能状态。结果:在原位杂交的标本上,杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质。GES1细胞颗粒数量少,BGC823颗粒数量多,细胞轮廓十分明显;SGC7901颗粒细小而少,少数细胞杂交信号丰富。免疫印迹显示GES1P gp的表达较BGC823和SGC7901弱;GES1P- gp积分光密度为46.36±19.24,BGC823为61.32±28.46,SGC7901为50.45±21.36,BGC823的P gp表达强于SGC7901和GES1(P<0.05),SGC7901和GES1的差异无统计学意义(P>0.05)。GES1阿霉素特异荧光强度为10.12±4.18,BGC823为27.44±7.06,SGC7901为35.88±14.55,3者相比差异有统计学意义(P<0.001)。结论:在胃癌的发生发展中,细胞对抗肿瘤药的反应性不同,随着细胞恶性变,P gp介导的耐药性增加。