基于P-糖蛋白信号通路研究龙血竭对大鼠失重空肠屏障损伤的保护机制

传统中药龙血竭在航天肠道损伤的防护中发挥重要作用,但其保护失重屏障损伤的作用机制尚不清楚.P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是肠上皮细胞膜上的外排转运体,能够将毒素、有害菌等外排以维持肠屏障完整性.文中采用大鼠尾吊模型模拟微重力效应,灌胃给药龙血竭(Dragon’s Blood,DB)21d后,观察大鼠空肠组织形态、测定肠屏障通透性标志物质量浓度、检测P-gp与Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白的表达.结果表明,龙血竭可通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进空肠中P-gp基因及蛋白的表达,能够缓解模拟微重力效应下的大鼠空肠屏障损伤.研究结果或可为航天员在轨肠道损伤防护提供基础研究数据.

中药附子对P-糖蛋白活性和紧密连接蛋白的影响及与地高辛的相互作用

目的:探讨中药附子对Caco-2细胞中P-糖蛋白(P-gp)外排活性和紧密连接蛋白的影响,研究附子合并用药对地高辛的影响和作用机制。方法:通过测定附子对罗丹明123(Rh123)的外排、摄取及Caco-2细胞内ATP水平的影响,研究附子对P-gp外排活性和功能的影响;通过细胞免疫荧光实验,考察附子对紧密连接蛋白表达的影响;通过Caco-2细胞模型吸收转运实验及分子对接,阐明附子合并用药对地高辛在细胞内转运的影响和作用机制。结果:附子对P-gp的作用具有双向调节作用,并可能与作用时间有关;附子可通过调节ATP水平从而影响P-gp的外排功能。附子长时间作用(72 h)可能会促进地高辛的外排。附子可以提高Caco-2细胞紧密连接蛋白ZO-1与Occludin蛋白的表达量,可能通过抑制细胞旁路途径减弱地高辛的吸收。结论:附子与地高辛合并用药时,可能通过减少吸收及促进外排来影响地高辛的血药浓度。

维持性血液透析患者血清结缔组织生长因子、P-选择素糖蛋白配体-1的表达水平及临床意义

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand 1,PSGL-1)在维持性血液透析患者中的表达及与残余肾功能(residual renal function,RRF)、炎症反应的相关性。方法选取2019年5月至2021年10月陕西省宝鸡市人民医院收治的102例维持性血液透析患者为研究组,根据透析前24h尿量将患者分两组:24h尿量≥200ml为有RRF组68例,24h尿量<200ml为无RRF组34例,选择年龄、性别相匹配的50例健康体检者为对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法检测血清中CTGF、PSGL-1表达水平,Pearson法分析CTGF、PSGL-1与炎症反应指标的相关性,采用logistic回归分析影响RRF的因素。结果与对照组相比,无RRF组和有RRF组患者血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,Hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平均上升,血红蛋白和白蛋白表达水平均下降,差异有显著性(P<0.05);与有RRF组相比,无RRF组患者血清BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6水平均上升,血红蛋白和白蛋白水平均下降,差异有显著性(P<0.05);研究组患者血清中CTGF、PSGL-1表达水平均高于对照组,且无RRF组患者血清中CTGF、PSGL-1水平均高于有RRF组患者,差异有显著性(P<0.05);维持性血液透析患者血清中CTGF与PSGL-1表达呈正相关(r=0.472,P<0.05);维持性血液透析患者血清CTGF、PSGL-1水平与Hs-CRP、TNF-α、IL-6、BUN、Scr水平呈正相关(P<0.05),与血红蛋白、白蛋白水平呈负相关(P<0.05);Logistic回归结果显示BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6、CTGF、PSGL-1、血红蛋白、白蛋白均是RRF的独立影响的因素(P<0.05)。结论CTGF、PSGL-1在维持性血液透析患者血清中高表达,与患者RRF及炎症反应密切相关。

多西他赛治疗老年前列腺癌患者的疗效及其对患者P-糖蛋白表达的影响分析

目的 探讨老年前列腺癌患者治疗中多西他赛的应用效果及其对P-糖蛋白表达的影响。方法 73例老年前列腺癌患者,经随机数字表法分为对照组(36例)与研究组(37例)。对照组采用比卡鲁胺治疗,研究组采用比卡鲁胺联合多西他赛治疗。对比两组P-糖蛋白表达、临床疗效及治疗前后生活质量。结果 治疗后,研究组治疗总有效率81.08%高于对照组的55.56%,差异有统计学意义(P<0.05);研究组P-糖蛋白阳性表达率18.92%低于对照组的58.33%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组物质生活、躯体功能、社会功能及心理功能评分均明显高于本组治疗前,研究组物质生活评分(74.26±3.46)分、躯体功能评分(86.14±5.31)分、社会功能评分(81.36±3.61)分、心理功能评分(79.84±4.51)分均明显高于对照组的(62.14±3.47)、(76.58±5.28)、(72.64±3.56)、(71.16±4.48)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 老年前列腺癌患者治疗中应用多西他赛,可有效降低P-糖蛋白阳性表达率,有效提高治疗效果,生活质量明显改善,具有推广价值。

天然植物活性成分通过下调P-糖蛋白逆转肿瘤多药耐药的研究进展

多药耐药(multidrug resistance, MDR)是临床上肿瘤患者复发及化疗失败的主要因素,其发生机制较为复杂,目前研究最为深入的机制之一为肿瘤细胞膜上P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)过表达所致。大多数化疗药物为P-gp的底物,肿瘤细胞会通过P-gp介导的主动转运将化疗药物转运到胞外,使细胞内有效药物浓度降低,从而产生耐药性,导致临床疗效下降。P-gp的逆转剂可通过下调P-gp表达和转运活性,减少化疗药物从胞内泵出,增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,从而提高治疗效果。本文将对可逆转P-gp介导的MDR的天然植物活性成分及其调控机制进行总结,为临床及相关研究提供参考。

中枢神经系统药物转运体P-糖蛋白的表达水平变化对儿童药物代谢的影响

药物转运体P-糖蛋白属于结合盒式蛋白转运体蛋白家族,其可将小分子物质等排出大脑,有效地减少或阻止药物进入脑组织,从而发挥中枢神经系统保护作用。但对脑组织的药物转运体P-糖蛋白在新生儿出生后表达水平变化的研究较少。本文综述了药物转运体P-糖蛋白在中枢神经系统的外排转运功能、儿童中枢神经系统表达量变化、中枢神经系统发育早期阶段P-糖蛋白表达量对脑组织药物浓度的影响、动物外推至人类药代动力学模型以及内含P-糖蛋白的中枢神经系统生理药代动力学模型研究,为药物转运体P-糖蛋白底物在儿童生理药代动力学研究提供参考。

血清HMGA2、P-gp与老年进展性脑梗死患者预后相关研究

目的探讨血清高迁移率族蛋白A2(HMGA2)、P-糖蛋白(P-gp)在老年进展性脑梗死患者中的表达水平及其与预后的关系。方法收集2020年2月—2023年2月大连市中心医院神经内科收治老年进展性脑梗死患者67例为进展组,老年非进展性脑梗死患者79例为非进展组;进展组根据治疗后3个月神经功能恢复情况分为预后良好亚组(n=39,mRS评分0~2分)和预后不良亚组(n=28,mRS评分3~6分)。采用酶联免疫吸附法检测血清HMGA2、P-gp水平,Pearson积矩相关分析血清HMGA2、P-gp与NIHSS评分的关系,Logistic回归分析进展性脑梗死患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线(ROC)评估血清HMGA2、P-gp对预后不良的预测价值。结果进展组血清HMGA2、P-gp水平及NIHSS评分高于非进展组(t/P=13.672/<0.001,8.095/<0.001,8.226/<0.001)。进展性脑梗死患者血清HMGA2、P-gp与NIHSS评分均呈正相关(r/P=0.732/<0.001、0.708/<0.001);预后不良亚组患者年龄大于预后良好亚组,血清HMGA2、P-gp水平及NIHSS评分高于预后良好亚组(t/P=5.092/<0.001、5.103/<0.001、4.449/<0.001、2.357/0.021)。多因素Logistic回归结果显示,高龄和血清HMGA2、P-gp水平及NIHSS评分升高是进展性脑梗死患者预后不良独立危险因素[OR(95%CI)=1.429(1.093~1.869),1.288(1.082~1.533),1.586(1.161~2.165),1.483(1.120~1.963)];血清HMGA2、P-gp及二者联合预测进展性脑梗死患者预后不良的AUC分别为0.738、0.740、0.895,二者联合优于各自单独预测效能(Z/P=2.031/0.002、2.006/0.003)。结论血清HMGA2、P-gp在老年进展性脑梗死患者中异常升高,并与病情严重程度以及预后不良有关,早期联合检测两项指标可预测患者预后不良风险发生。

P-gp、GSTπ联合TOPOⅡα检测对三阴性乳腺癌新辅助化疗病理完全缓解的预测价值

目的分析P⁃糖蛋白(P⁃gp)、谷胱甘肽转移酶(GSTπ)联合拓扑异构酶Ⅱα(TOPOⅡα)检测对三阴性乳腺癌(TNBC)患者新辅助化疗(NAC)病理完全缓解(pCR)的预测价值。方法本研究为一项回顾性、单中心、双盲法的试验,选取郑州大学第一附属医院自2020年3月至2022年10月,经纳入、排除标准共筛查135名TNBC患者作为研究对象,均为女性。采用SP免疫组化法检测P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα,分析TNBC患者NAC疗效,行单因素、多因素分析P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα表达与NAC pCR的关系,绘制ROC曲线分析P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα单一及联合检测对TNBC患者NAC pCR的预测价值。结果NAC后,cCR者47例(34.81%),cPR者72例(53.33%),SD者12例(8.90%),PD者4例(2.96%),总有效率88.14%;pCR者21例(15.55%)。经单因素分析,P⁃gp、GSTπ阳性表达pCR率低于P⁃gp、GSTπ阴性表达pCR率,TOPOⅡα阳性表达pCR率则高于阴性性表达pCR率,差异均有统计学意义(P<0.05)。P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα表达与pCR具有显著相关性[OR(95%CI)分别为1.446(1.127~1.858)、1.640(1.304~2.063)、1.548(1.227~1.984),P<0.05]。P⁃gp、GSTπ、TOPOⅡα联合检测对NAC pCR灵敏度、特异度分别为90.73%、86.73%,AUC(95%CI)为0.813(0.743~0.908),均高于上述指标单一检测(P<0.05)。结论P⁃gp、GSTπ和TOPOⅡα表达与TNBC患者NAC pCR有一定关联,且通过联合上述指标检测NAC pCR有着较高预测价值,有利于帮助临床医生为TNBC患者进一步制定更合适的治疗策略。

P-糖蛋白在肿瘤中的研究新进展

P-糖蛋白是一种位于细胞膜上,对疏水性及两性化合物具有特异性的一类转运蛋白。在生理条件下,P-糖蛋白分布在机体内多种组织、器官中,在药物的吸收、分布、代谢及排泄过程中都发挥着重要的作用。P-糖蛋白广泛存在于各种肿瘤细胞,与其发展密切相关。P-糖蛋白可加速机体抗癌药物产生耐药,调控P-糖蛋白水平可以调控肿瘤的发展和减少肿瘤药物耐药性。

C_3-C_4中间型植物Flaveria anomala中甘氨酸脱羧酶P-蛋白亚基上游调控序列在转基因水稻中的表达

将 Ｃ３－Ｃ４中间型植物 Ｆｌａｖｅｒｉａ ａｎｏｍａｌａ中甘氨酸脱羧酶（ＧＤＣ）Ｐ－蛋白亚基基因（ｇｄｃｓＰ）的上游调控 序列与β－葡萄糖苷酸酶（ＧＵＳ）基因编码区以及ＣａＭＶ终止子融合，构建植物表达载体．采用农杆菌介导 方法转化水稻，并在转基因水稻中分析了ＧＵＳ的表达活性和特异性．结果表明，在水稻中ｇｕｓ嵌合基因 特异地在木质部和韧皮部表达，在不同器官及组织中表达活性也有所差异，其中以根中最高，茎秆次 之，叶再次，而在成熟胚乳中没有表达．在转基因水稻中，ｇｄｃｓＰ启动子的表达也受水稻发育时期的调 控，随植物组织成熟度的增加而降低．

甘草与芫花对P-糖蛋白底物罗丹明123经空肠黏膜透过性的影响

目的:观察甘草与芫花合用前后对P-糖蛋白(P-gp)的调控作用,探讨甘草、芫花及其合用影响药物经胃肠道渗透的可能作用机制。方法:将25只Wistar大鼠分为5组,分别给大鼠口服甘草液、芫花液、甘草芫花合煎液、合并液以及生理盐水,1周后用体外扩散池法(ussing chamber)评价各种药液对罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经空肠黏膜透过性的影响,用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度,并分析各组表观渗透系数(Papp)差异。结果:4种药液均具有增加R123经吸收方向的透过性,与生理盐水组比较,P<0.05,且芫花液、合煎液以及合并液还可减少分泌方向的透过(P<0.05,与生理盐水组比较),甘草对分泌方向透过影响无统计学意义。甘草对CF透过无影响,而其他3组药液则可减少CF吸收和分泌方向的透过性。结论:甘草和芫花对P-gp均有抑制作用,但后者作用较强。芫花某些化学成分抑制P-gp,而另一些成分可能使细胞之间紧密连接加强,引起旁细胞途径药物CF渗透的降低。甘草与芫花合用后对P-gp抑制作用增强,可能是甘草对芫花有协同作用,使一些毒性成分吸收增加,这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。

回、汉族癫痫患者血清、脑脊液中P-糖蛋白表达与癫痫耐药的相关性研究

目的研究回、汉族癫痫患者血清、脑脊液中P-糖蛋白(P-gp)表达与癫痫耐药之间的关系。方法选取187例符合标准的癫痫患者,其中回族敏感患者28例、回族耐药患者31例;汉族敏感患者59例、汉族耐药患者69例。采用ELISA法测定癫痫患者血清和脑脊液中P-gp浓度。结果敏感组癫痫患者脑脊液、血清中P-gp浓度,以及二者的比值均低于耐药组,差异存在统计学意义(P<0.05)。回族和汉族癫痫患者脑脊液中P-gp浓度、以及脑脊液与血清中P-gp浓度比值比较,差异无统计学意义(P>0.05),但是二者血清中P-gp浓度比较,具有统计学差异(P<0.05)。结论癫痫患者血清和脑脊液中P-gp过表达与癫痫耐药密切相关。

黄连素对P-糖蛋白底物在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响

目的研究黄连素(berberine,Ber)对P-糖蛋白底物环孢素(cyclosporine A,CsA)和地高辛在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响。方法以Caco-2、L-MDR1细胞为模型,在50μmol·L-1～5mmol·L-1Ber作用后,测定地高辛和CsA跨膜转运的转运率和表观渗透系数。结果Ber在50μmol·L-1～5mmol·L-1范围内可剂量依赖性地降低地高辛在Caco-2和L-MDR1细胞单层底端(B侧)至顶端(A侧)的转运。对于CsA在Caco-2细胞的转运,50μmol·L-1～5mmol·L-1的Ber不但剂量依赖性地降低CsA从B→A方向的转运,而且也明显增加其在A→B方向的转运。在Caco-2和L-MDR1细胞,Ber抑制地高辛B→A方向转运的IC50值分别为1.44mmol·L-1和1.24mmol·L-1。Ber抑制CsA在Caco-2细胞转运的IC50值为607μmol·L-1。结论Ber和CsA相互作用的机制可能涉及P-gp功能的抑制和饱和。

血脑屏障中P-糖蛋白的调节机制

P-糖蛋白属于ABC转运蛋白超家族。它在脑微血管中大量表达,限制毒性物质和大量治疗中枢神经系统的药物进入脑内,因此弄清P-糖蛋白在血脑屏障中的调节机制对疾病的治疗尤为重要。该文总结了P-糖蛋白基本结构、分布、功能,并讨论了P-糖蛋白在血脑屏障中调节机制的研究进展。

安息香醛、香草醛和β-细辛醚对P-糖蛋白功能的影响

目的研究芳香开窍药物苏合香、安息香和石菖蒲主要成分安息香醛、香草醛和β-细辛醚对P-糖蛋白(P-gp)功能的影响。方法培养Caco-2细胞,加入β-细辛醚、香草醛和安息香醛作用2.0 h后,加入Rho-123,继续培养0.5 h和1.0 h,HPLC测定细胞培养液中Rho-123的含有量。结果 Rho-123低、中、高3个质量浓度的回收率为(69.37±3.82)%、(72.33±6.75)%和(70.73±5.94)%,精密度和稳定性RSD均小于7.0%;与对照孔比较,安息香醛、香草醛和β-细辛醚孔细胞培养液中Rho-123的质量浓度明显降低。结论安息香醛、香草醛和β-细辛醚可明显促进Caco-2细胞对Rho-123的摄取,对P-gp外排功能有明显抑制作用。

消化道肿瘤组织中P-gp、凋亡抑制蛋白表达与体外化疗药敏性的关系及其意义

背景与目的:P-糖蛋白(P-gp)介导的经典耐药途径和细胞凋亡抑制是肿瘤多药耐药(MDR)研究最多的两种机制,肿瘤细胞多种MDR相关基因/蛋白共同表达、相互作用而出现多态性耐药。本研究通过分析肿瘤P-gp和凋亡抑制蛋白p53、Survivin、bcl-2表达与化疗药敏性的关系,探讨消化道肿瘤组织MDR相关因子表达能否反映肿瘤的化疗耐药性。方法:84例胃癌、大肠癌标本进行MTT法体外化疗药物敏感性实验,免疫组化染色检测组织中P-gp、p53、Survivin、bcl-2的表达,分析4种多药耐药相关因子表达与9种药物对肿瘤细胞抑制率的关系。结果:肿瘤组织中P-gp、p53、Survivin、bcl-2表达率分别为96.4%、64.3%、89.3%、60.7%;P-gp与bcl-2表达、Survivin与bcl-2表达具有正相关性(r=0.5072,r=0.3027,P<0.05)。在肿瘤组织耐药因子表达程度与药物对肿瘤细胞抑制率的关系中,P-gp强表达组PTX、OXA、DDP对肿瘤细胞的抑制率明显低于弱表达组(P<0.05);p53强表达与PTX、DDP对肿瘤细胞的抑制率明显降低有关(P<0.05);Survivin强表达时,VCR、DDP对肿瘤细胞的抑制率明显降低(P<0.05),但OXA对肿瘤细胞的抑制率明显增加(P<0.01);bcl-2强表达时,5-FU、VCR、EADM、OXA对肿瘤细胞的抑制率明显低于弱表达组(P<0.05)。结论:消化道肿瘤P-gp、p53、Survivin、bcl-2表达程度仅与其对部分化疗药物的耐药性有关,评价消化道肿瘤组织某种耐药因子表达与化疗药物耐药性的关系必须考虑多种因素调节的影响。

化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白的表达及其与癌干细胞的相关性

目的通过对比化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)、P-糖蛋白(P-gp)表达差异,探讨其与乳腺癌干细胞(BCSCs)的相关性。方法免疫组织化学检测化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp及BCSCs标志物CD44及CD24蛋白的表达;免疫荧光检测"BCSCs微球体"细胞中CD44及CD24蛋白表达;有限稀释法检测"BCSCs微球体"细胞单克隆形成能力;Western blot检测"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp、CD44及CD24蛋白的表达。结果与化疗前乳腺癌组织相比,化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp表达与CD44蛋白表达呈正相关(χ2=41.34,r=0.83;χ2=22.81,r=0.61);而其与CD24蛋白表达呈负相关(χ2=-21.25,r=0.72;χ2=-17.26,r=0.65);差异均有统计学意义(P<0.05)。化疗后残存乳腺癌组织中"BCSCs微球体"直径明显增加,且化疗后BCSCs含量是化疗前BCSCs含量的2.5倍;Western blot显示化疗后残存乳腺癌组织"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp及CD44蛋白表达明显升高(P<0.05),而CD24蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论化疗赋予残存乳腺癌组织"癌干细胞样"特征,导致乳腺癌多药耐药产生。