维持性血液透析患者血清结缔组织生长因子、P-选择素糖蛋白配体-1的表达水平及临床意义

目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand 1,PSGL-1)在维持性血液透析患者中的表达及与残余肾功能(residual renal function,RRF)、炎症反应的相关性。方法选取2019年5月至2021年10月陕西省宝鸡市人民医院收治的102例维持性血液透析患者为研究组,根据透析前24h尿量将患者分两组:24h尿量≥200ml为有RRF组68例,24h尿量<200ml为无RRF组34例,选择年龄、性别相匹配的50例健康体检者为对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附法检测血清中CTGF、PSGL-1表达水平,Pearson法分析CTGF、PSGL-1与炎症反应指标的相关性,采用logistic回归分析影响RRF的因素。结果与对照组相比,无RRF组和有RRF组患者血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,Hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平均上升,血红蛋白和白蛋白表达水平均下降,差异有显著性(P<0.05);与有RRF组相比,无RRF组患者血清BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6水平均上升,血红蛋白和白蛋白水平均下降,差异有显著性(P<0.05);研究组患者血清中CTGF、PSGL-1表达水平均高于对照组,且无RRF组患者血清中CTGF、PSGL-1水平均高于有RRF组患者,差异有显著性(P<0.05);维持性血液透析患者血清中CTGF与PSGL-1表达呈正相关(r=0.472,P<0.05);维持性血液透析患者血清CTGF、PSGL-1水平与Hs-CRP、TNF-α、IL-6、BUN、Scr水平呈正相关(P<0.05),与血红蛋白、白蛋白水平呈负相关(P<0.05);Logistic回归结果显示BUN、SCr、Hs-CRP、TNF-α、IL-6、CTGF、PSGL-1、血红蛋白、白蛋白均是RRF的独立影响的因素(P<0.05)。结论CTGF、PSGL-1在维持性血液透析患者血清中高表达,与患者RRF及炎症反应密切相关。

P-选择素及P-选择素糖蛋白配体-1在大鼠深静脉血栓模型中的表达变化

目的建立并观察大鼠深静脉血栓（deep venous thrombosis，DVT）模型不同时段血栓的形成状态，检测组织因子（tissuefactor，TF）、P-选择素（P—selectin，PS）及P-选择素糖蛋白配体-1（PSGL-1）在血液、静脉壁组织中的表达变化，探讨其与血栓形成之间的关系。方法90只SD大鼠随机分为对照组（n=10）、假手术组（n=40）和实验组（n=40）；采用下腔静脉部分瘀滞法（狭窄法）制备深静脉血栓模型，分别于造模后6h、24h、48h和72h随机处死各组10只大鼠并取材，RealTime—PCR法分别检测TF、PS及PSGL-1基因在血液中的表达变化；Westernblot法检测静脉壁组织中PSGL-1的表达变化。结果大鼠DVT模型中，对照组与假手术组各项检测指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；实验组造模后6h时TF、PS及PSGL-1基因表达较对照组、假手术组明显升高（P〈0．05），24h时PSGL-1基因表达仍继续升高且差异有统计学意义（P〈0．05），随着造模时间的延长上述基因表达虽呈上升趋势，但与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。实验组PSGL-1在造模后6h、24h较对照组、假手术组表达升高（P〈0．05）。结论Ps和PSGL-1在大鼠DVT模型中呈高表达，并促进血栓形成。

P-选择素基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死临床关联性研究

目的探讨P-选择素(SELP)基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)基因M62I多态性与缺血性脑梗死的关系。方法选取148例缺血性脑梗死患者作为脑梗死组,并分为大动脉粥样硬化性(LAA)亚组、心源性脑栓塞(CE)亚组和小动脉闭塞性(SAO)亚组;88例正常人群作为正常对照组。运用基因测序方法检测所有受试者SELP基因S290N和PSGL-1基因M62I的基因多态性。结果与正常对照组比较,脑梗死组及其亚组S290N基因型和等位基因频率差异无统计学意义(均P>0.05);脑梗死组M62I基因型和等位基因频率差异有统计学意义(均P<0.01);LAA亚组M62I基因型差异无统计学意义(χ~2=5.889,P=0.053),但等位基因频率差异有统计学意义(χ~2=6.156,P=0.021);CE亚组基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(χ~2=1.693,P=0.429;χ~2=1.372,P=0.238);SAO亚组基因型和等位基因频率差异均有统计学意义(χ~2=12.572,P=0.002;χ~2=8.736,P=0.004)。S290N与缺血性脑梗死风险无相关性(均P>0.05)。M62I显性模型和超显性模型与缺血性脑梗死风险有相关性(OR=2.662,95%CI:1.531~4.630,P=0.000;OR=0.392,95%CI:0.219~0.701,P=0.001),而隐性模型和加性模型与缺血性脑梗死风险无相关性(OR=1.428,95%CI:0.528~3.862,P=0.630;OR=2.121,95%CI:0.766~5.872,P=0.156)。结论 PSGL-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死之间具有相关性。

P-选择素基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1基因M62I多态性与缺血性脑梗死血小板白细胞聚集体的相关性探讨

目的探讨血小板白细胞聚集体在缺血性脑梗死中的变化以及与P-选择素基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1基因M62I多态性的关系。方法选取58例缺血性脑梗死患者作为病例组,20例正常人群作为对照组。病例组分为大动脉粥样硬化性脑梗死(LAA)19例,小动脉闭塞性脑梗死(SAO)39例。运用流式细胞技术检测所有受试者的血小板白细胞聚集体(PLA)、血小板单核细胞聚集体(PMA)、血小板淋巴细胞聚集体(PLy A)和血小板中性粒细胞聚集体(PNA)水平。并运用基因测序方法检测P-选择素基因S290N和P-选择素糖蛋白配体-1基因M62I多态性。结果 PMA%在病例组与对照组、LAA与对照组、SAO与对照组间差异有统计学意义(P=0.000,P=0.018,P=0.000)。PNA%在病例组与对照组、LAA与对照组间差异有统计学意义(P=0.045,P=0.002)。PNA%在LAA组SELP基因S290N位点SS和SN基因型间差异有统计学意义(P=0.008)。PLA%在LAA组PSGL-1基因M62I位点MM、MI和Ⅱ基因型间差异有统计学意义(P=0.046)。结论 PMA和PNA与缺血性脑梗死发病有关,SELP基因S290N位点SN基因型以及PSGL-1基因M62I位点MM基因型会增加LAA发生风险。

P-选择素/P-选择素糖蛋白配体-1与骨髓祖细胞胸腺归巢

骨髓衍生的祖细胞归巢入胸腺是T细胞发育必需的过程,因为胸腺不包含具有自我更新能力的造血干细胞,它需要从血液中添补祖细胞,此过程依赖多级细胞粘附分子和趋化因子的衔接.细胞粘附分子选择素和它的配体PSGL-1在淋巴样祖细胞归巢入胸腺的过程中发挥重要作用.综述了选择素/配体PSGL-1的生物学特征及其相互作用对骨髓祖细胞胸腺归巢及胸腺-骨髓反馈环的影响和作用机制.

P-选择素和P-选择素糖蛋白配体-1血液水平及基因多态性与缺血性脑梗死

P-选择素(SELP)和P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)水平基因多态性,可能是缺血性脑梗死(ICI)发病的因素之一。本文综述SELP、PSGL-1的结构特点和功能,基因多态性位点分布及其外周血水平和基因多态性变化与ICI关联性的国内外研究进展。

P-选择素及P-选择素糖蛋白配体-1基因多态性与缺血性脑血管病关系的研究进展

P-选择素(SELP)作为细胞黏附分子中的一员,与其配体P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)的相互作用在缺血性脑血管疾病(ICVD)的发生发展过程中起重要作用。当血管内皮受损时,血小板内的SELP表达迅速增加,内皮细胞的SELP表达也增加,SELP与白细胞表面的PSGL-1结合可激活白细胞内的信号转导,使白细胞释放炎症因子,加重炎症反应,诱发动脉粥样硬化,而动脉粥样硬化是ICVD的发病基础。同时,SELP及PSGL-1的基因多态性可影响各自蛋白质的表达水平及两者的相互结合能力,并进一步对血小板的活化、血栓形成、炎症因子的趋化及动脉粥样硬化斑块的发生和发展产生影响。因此,未来应进一步探讨SELP及PSGL-1基因多态性在ICVD中的作用,以明确ICVD的发病机制。

P-selectin糖蛋白配体-1的基因克隆及其Ig融合蛋白的表达和纯化

目的:克隆P-selectin糖蛋白配体-1的基因,表达和纯化其Ig融合蛋白。方法:RT-PCR法克隆出P-选择素糖蛋白配体-1(CD162)cDNA,构建真核表达载体,DEAD-Dextran法转染COS7细胞,上清经纯化后,分别使用WesternBlot和流式细胞仪鉴定CD162-hIgFc融合蛋白的性质和活性。结果:RT-PCR克隆出801bp的CD-162cDNA片段,插入载体构建出pIg-CD162,将其转染COS7细胞后获得CD162-hIgFc融合蛋白,分子量为74KD。WesternBlot证实其为CD162-hIgFc融合蛋白,流式细胞仪证明获得的CD162-hIgFc融合蛋白能够识别血小板表面的CD62P。结论:本研究成功制备了CD162-hIgFc融合蛋白,为进一步探讨P选择素与其配体CD162之间的作用打下坚实的基础。

心外科ICU患者术后感染血清降钙素原、PSGL-1、sICAM-1与心肌肌钙蛋白Ⅰ的变化及意义

目的探讨心外科ICU患者术后感染血清降钙素原(PCT)、P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)、可溶性细胞间粘附因子-1(sICAM-1)与心肌肌钙蛋白I(cTnⅠ)的变化及意义。方法选取本院2016年1月至2019年3月心外科ICU患者108例,根据术后是否发生感染分为感染组37例、未感染组71例,另选择同期健康体检者48例作为对照组。比较3组血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、cTnⅠ水平,Logistic回归分析心外科ICU患者术后感染的影响因素,Pearson相关性分析血清PCT、PSGL-1、sICAM-1与cTnⅠ关联性,对比感染组不同预后患者血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、cTnⅠ水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析各血清因子对预后的预测价值,采用Kaplan-Meier曲线进行生存分析。结果感染组血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、cTnⅠ水平高于未感染组、对照组差异有统计学意义(P<0.05);合并基础性疾病、血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、cTnⅠ是心外科ICU患者发生术后感染的独立危险因素(P<0.05);血清PCT、PSGL-1、sICAM-1与cTnⅠ呈正相关(P<0.05);感染第3、5天生存者血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、cTnⅠ水平低于死亡者(P<0.05);感染第5 d cTnⅠ预测心外科ICU患者术后感染预后的AUC值最大,为0.804;随访28 d,血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、cTnⅠ低危组、高危组的生存曲线对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论心外科ICU患者术后感染会引起血清PCT、PSGL-1、sICAM-1、c TnI异常表达,且表达水平与感染发生发展及预后有一定相关性,临床可通过监测上述血清因子表达超早期予以干预治疗,以改善预后。

清肾颗粒对肾纤维化大鼠P-selectin/PSGL-1的干预作用

目的观察清肾颗粒对5/6肾切除肾纤维化模型大鼠肾组织P-选择素(P-selectin)/P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand1,PSGL-1)表达的影响及其抗肾纤维化的作用机制。方法将72只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,清肾颗粒高、中、低剂量组,氯沙坦组,每组12只;除正常组外,剩余60只大鼠均按手术方法制备5/6肾切除肾纤维化模型,各组动物均从模型复制1周后开始灌胃给药,清肾颗粒各剂量组和氯沙坦组分别予以一定比例的清肾颗粒和氯沙坦水溶液灌胃,模型组和正常组均以等比例温水灌服。12周后处死大鼠,取残余肾组织用于检测P-selectin/PSGL-1蛋白及其mRNA的表达水平。结果与正常组比较,模型组P-selectin、PSGL-1蛋白及其mRNA相对表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,清肾颗粒各剂量组和氯沙坦组P-selectin、PSGL-1蛋白及其mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组P-selectin、PSGL-1蛋白及其mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);清肾颗粒各组之间比较,清肾颗粒高剂量组P-selectin、PSGL-1蛋白及其mRNA表达水平最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论清肾颗粒能够降低5/6肾切除大鼠肾组织P-selectin及PSGL-1的表达,这可能是其抗肾纤维化的机制之一。

PSGL-1^(+/-);IL-2^(-/-)小鼠模型的构建

目的构建PSGL-1+/-;IL-2-/-小鼠模型。方法将白介素2敲除(IL-2 KO)小鼠与P-选择素糖蛋白配体-1敲除(PSGL-1 KO)小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基因型。结果 IL-2 KO小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交三代后,PSGL-1+/-;IL-2-/-小鼠模型构建成功。结论将IL-2 KO小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交三代后,成功建立了PSGL-1+/-;IL-2-/-小鼠模型。

抗炎、抗凝双效融合蛋白TAP-SSL5表达载体的构建及其功能研究

目的构建一种具有抗炎和抗凝双效功能的融合蛋白,并对其功能进行初步鉴定。方法将重组金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白-5(staphylococcal superantigen-like protein-5,SSL5)与蜱抗凝血肽(tick anticoagulant peptide,TAP)融合,从金黄色葡萄球NCTC8325菌株中克隆SSL5基因;经DNA重组技术,将编码pelB前导序列、SSL5和TAP的基因重组并克隆于原核表达载体pHOG21中,再转染于大肠杆菌BL21中扩增表达,制备融合蛋白SSL5-TAP或TAP-SSL5,采用流式细胞仪检测融合蛋白是否和SSL5一样,具有与粒细胞表面P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)结合的特性;采用反应底物法在体外检测融合蛋白对活化的凝血因子X(factor Xa,FXa)活性的抑制作用。结果TAP-SSL5保留了SSL5与PSGL-1结合的特性,并且融合蛋白TAP-SSL5可显著抑制FXa的活性(P<0.01),抑制率达39.5%。结论融合蛋白TAP-SSL5是一种以PSGL-1为靶向的新型抗炎、抗凝双效分子。

融合蛋白TAP-SSL5对血小板与粒细胞结合的影响

目的探讨融合蛋白TAP-SSL5对血小板与粒细胞结合作用的影响。方法采用CCK-8试剂盒检测TAP-SSL5对细胞活力的影响;流式细胞仪检测THP-1细胞表面CD162(PSGL-1)的表达,及TAP-SSL5对小鼠抗人CD162单抗KPL-1与THP-1细胞结合的抑制作用。以20μmol/L ADP激活人血小板,采用流式细胞仪、瑞氏-姬姆萨染色检测血小板与THP-1细胞或人中性粒细胞的结合情况,并研究TAP-SSL5的干预作用。结果 TAP-SSL5浓度在30 mg/L或以下时对THP-1细胞或中性粒细胞的活力无明显影响。流式细胞仪检测显示,TAP-SSL5(终浓度10 mg/L)能显著抑制KPL-1与THP-1细胞的结合;20μmol/L ADP激活的血小板与THP-1细胞或中性粒细胞的结合率分别为(31.3±8.4)%和(35.6±5.9)%;细胞经10 mg/L TAP-SSL5预先处理后,其结合率分别降至(13.4±6.7)%和(10.4±6.4)%(P<0.01)。瑞氏-姬姆萨染色的结果表明,TAP-SSL5和SSL5均可抑制激活的血小板与中性粒细胞的结合(P<0.05)。结论 TAP-SSL5可通过与PSGL-1的结合,而直接抑制激活的血小板与粒细胞的结合。

Rip1-Tag2;PSGL-1^(-/-)小鼠模型的构建

目的构建Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型。方法将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素糖蛋白配体敲除(PSGL-1 KO)小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基因型。结果 Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交3代后,Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型构建成功。结论将Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交3代后成功建立了Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型,并进行繁育。

炎症反应中选择素粘附分子与配体间相互作用的研究

在炎症反应中,白细胞在内皮细胞上滚动由选择素分子与其配体分子相互作用所导致,选择素分子有3种,P选择素分子(P-selectin)、E选择素分子(E-selectin)、L选择素分子(L-selectin),选择素分子与其对应的P-选择素糖蛋白配体-1(PS- GL-1)的相互作用起着重要的作用。用等离子共振、流动腔、原子力显微镜等技术能定量分析选择素分子与其配体分子相互作用的动力学反应。

融合蛋白TAP-SSL5抑制动静脉血栓形成

目的:探讨重组抗炎、抗凝双效融合蛋白蜱抗凝血肽(TAP)-金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白-5(SSL5)对动静脉血栓形成的影响和机制。方法:采用基因重组技术构建TAP-SSL5基因,进而制备融合蛋白TAPSSL5,通过流式细胞检测技术研究重组蛋白TAP-SSL5与粒细胞表面P-选择素糖蛋白配体1(P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)结合的特性;采用反应底物法在体外检测融合蛋白TAP-SSL5对活化的凝血因子Xa(factor Xa,FXa)活性的抑制作用。采用Fe Cl3诱导的SD大鼠下腔静脉血栓模型,研究TAP-SSL5对静脉血栓形成的影响;采用Fe Cl3诱导的C57BL/6J小鼠肠系膜动脉血栓模型,在双光子显微镜下连续检测TAP-SSL5对动脉血栓形成的影响。结果:TAP-SSL5可与粒细胞表面PSGL-1结合,并抑制粒细胞与P-selectin和血小板的结合。TAP-SSL5呈剂量依赖性地抑制FXa活性(P <0. 01)。体内实验中TAP-SSL5可明显抑制Fe Cl3诱导的SD大鼠下腔静脉及C57BL/6J小鼠肠系膜动脉血栓的形成。结论:融合蛋白TAP-SSL5具有抗炎和抗凝双重效果,可以明显抑制动静脉血栓的形成。

消栓通脉颗粒对深静脉血栓形成大鼠模型静脉壁中VCAM-1和PSGL-1表达的影响

目的:探讨消栓通脉颗粒对深静脉血栓形成模型大鼠静脉壁血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、P选择素糖蛋白配体-1(PSGL-l)表达的影响。方法:将180只Wistar大鼠随机分为6组:消栓通脉组、血府逐瘀组、穿王消炎组、肝素组、模型组与假手术组。采用下腔静脉结扎法制备模型,检测血栓形成后不同时期大鼠下腔静脉壁中VCAM-1、PSGL-1表达水平。结果:随着血栓形成天数的增加,下腔静脉壁中VCAM-1、PSGL-1表达明显增加,并在术后第3天达到最高,消栓通脉颗粒能明显抑制VCAM-1、PSGL-1在内皮细胞的表达,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:消栓通脉颗粒能抑制细胞黏附分子表达,保护血管内皮细胞功能,从而达到治疗深静脉血栓形成的目的。

P-选择素糖蛋白配体-1在急性重症胰腺炎发生中的作用

目的探讨P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)在急性重症胰腺炎发生发展中的作用。方法取6~8周龄PSGL-1敲除基因小鼠8只(购自中国医学科学院医学实验动物研究所),C57BL/6小鼠8只(购自北京华阜康生物科技股份有限公司),随机分为PSGL-1敲除基因对照组、PSGL-1敲除基因造模组、野生型对照组、野生型造模组,采用雨蛙肽(Caerulein)和脂多糖(LPS)联合腹腔注射构建急性重症胰腺炎小鼠模型;蛋白质印迹法(Western blot)检测胰腺组织白细胞介素(IL)-6和IL-1β的表达;苏木精-伊红(HE)染色检测胰腺组织病理损伤程度;免疫组织化学法检测胰腺组织中髓过氧化物酶(MPO)和F4/80的表达。组间比较采用单因素方差分析和LSD-t检验;计数资料采用率值表示,组间比较采用χ2检验。结果野生型小鼠造模组胰腺组织中IL-6(5.32±0.08)、IL-1β(1.54±0.19)的表达高于对照组(1.00±0.15、1.00±0.23),差异有统计学意义(t=6.707,P<0.01;t=5.828,P<0.01);PSGL-1敲除基因小鼠造模组的胰腺病理损伤(1.2±0.8)低于野生型小鼠造模组(3.4±0.5),差异有统计学意义(t=4.914,P<0.01);PSGL-1敲除基因小鼠造模组胰腺中性粒细胞[(0.12±0.09)个]和单核细胞[(0.18±0.06)个]的浸润低于野生型小鼠造模组[(0.53±0.23)、(0.55±0.03)个],差异有统计学意义(单核细胞t=4.220,P<0.01;中性粒细胞t=4.211,P<0.01);PSGL-1敲除基因小鼠造模组胰腺组织IL-6(0.89±0.20)和IL-1β(2.54±0.17)的表达低于野生型小鼠造模组(5.32±0.08、1.54±0.19),差异有统计学意义(t=4.843,P<0.01;t=3.326,P<0.05)。结论PSGL-1可能通过诱导中性粒细胞和单核细胞浸润参与急性重症胰腺炎的发生发展。

COPD并发感染患者PSGL-1、IL-6、膜联蛋白A1的临床价值研究

目的探讨慢性阻塞性肺病(COPD)并发感染患者血清中白介素-6(IL-6)、外周血中性粒细胞表面P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)、及外周血单个核细胞中膜联蛋白A1的临床价值。方法选取2018年6月至2020年11月在定安县人民医院呼吸内科治疗的COPD患者84例,COPD并发感染患者85例,同时选取83例健康体检者作为对照组。检测三组患者血清中IL-6水平,中性粒细胞表面PSGL-1表达,同时检测膜联蛋白A1 mRNA及蛋白水平。结果COPD并发感染组血清中IL-6水平明显高于COPD组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);COPD并发感染组中性粒细胞表面PSGL-1表达较COPD组和对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);COPD并发感染组患者外周血单个核细胞中膜联蛋白A1 mRNA及蛋白均较COPD组和对照组高,差异有统计学意义(P<0.05);COPD合并感染组死亡患者血清IL-6、PSG-1、膜联蛋白A1 m RNA相对表达量和膜联蛋白A1蛋白相对表达量明显高于存活患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC分析显示:外周血膜联蛋白A1 mRNA、蛋白水平和IL-6、PSG-1及其联合应用对COPD合并感染患者预后有一定的评估价值(P<0.05)。结论COPD并发感染患者血清中IL-6明显升高,中性粒细胞表面PSGL-1表达增加,外周血单个核细胞中膜联蛋白A1 mRNA及蛋白表达水平明显升高,有利于对COPD并发感染患者的预后做出评估。

金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白-5抑制人脐血源性内皮祖细胞黏附功能及其机制研究

目的研究金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白-5(staphylococcal superantigen-like prote in-5,SSL5)与人脐血源性内皮祖细胞(endothelial progen itor cells,EPCs)表面P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprote in ligand-1,PSGL-1)的结合情况,及其对内皮祖细胞黏附功能的影响。方法从金黄色葡萄球菌NCTC 8325菌株的基因组中,扩增ssl5基因,并进行重组SSL5蛋白表达载体的构建。采用密度梯度离心法分离得到脐血中的单个核细胞并进行体外培养,对贴壁细胞在激光共聚焦显微镜下观察其摄取乙酰化低密度脂蛋白(D iI-acLDL)和结合荆豆凝集素(FITC-UEA-1)的情况。以流式细胞仪分析SSL5与EPCs表面PSGL-1的结合情况;以calce in-AM负载EPCs后,定量分析SSL5对EPCs在P-选择素包被表面黏附的抑制作用。结果 D iI-acLDL/FITC-UEA-1双染阳性的细胞为EPCs。PSGL-1在EPCs表面有较丰富的表达,阳性细胞率为76.6%。SSL5与EPCs的结合随着SSL5浓度的增加而显著升高;并且,SSL5可竞争性抑制抗PSGL-1单克隆抗体(KPL-1)与EPCs的结合。SSL5可显著抑制EPCs在P-选择素表面的黏附,终浓度为30 mg/L的SSL5对EPCs在P-选择素表面黏附的抑制率已接近10 mg/L的KPL-1的效应,两者与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 SSL5可与EPCs表面的PSGL-1结合,而抑制EPCs在P-选择素表面的黏附,提示SSL5可能通过抑制EPCs与损伤内皮或激活的血小板之间的黏附,进而抑制EPCs对损伤内皮的修复作用。