用低G/C%含量引物通过PCR扩增家蝇细胞色素P-450 cDNA

根据昆虫细胞色素Ｐ－４５０基因的多型性和遗传多态性，以苯巴比妥钠诱导、室内饲养的杀虫剂敏感种群雌性家蝇ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｖｉｃｉｎａＭａｃｑｕａｒｔ为材料，提取总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－纤维素亲和层析分离出总ｍＲＮＡ；以此为模板反转录合成总ｃＤＮＡ。再以总ｃＤＮＡ为模板，以Ｐ－４５０ＣＹＰ６Ａ１ｃＤＮＡ序列为参考设计一对低Ｇ／Ｃ％含量引物，进行ＰＣＲ扩增，获得１．５ｋｂ左右的预期目的片段。

棉酚和烟碱对棉铃虫的生长和细胞色素P-450单加氧酶活性的影响

以人工饲料添加法测定了 0 5%的棉酚和烟碱对棉铃虫的生长和细胞色素P 4 50单加氧酶 (简称P 4 50酶系 )活性的影响。研究结果显示 ,在测定浓度下 ,高龄棉铃虫短期取食含棉酚和烟碱的人工饲料后 ,对幼虫的生长没有显著影响 ,由此表明 ,棉铃虫对其主要寄主植物中的次生物质棉酚和烟碱具有很好的适应能力。与此同时 ,棉铃虫中肠微粒体P 4 50酶系的蛋白组成和酶活性发生了不同的变化 ,有升有降 ,有的没有变化。棉铃虫可能通过调整P 4 50酶系的各种蛋白含量和酶的活力水平 ,来适应对植物次生物质的代谢解毒的需要。另外 ,棉铃虫取食棉酚和烟碱后 ,细胞色素B5含量均显著提高 ,而细胞色素P 4 50含量均显著降低 。

中草药对细胞色素P-450酶调控研究进展

对近 5年国内外关于中草药对细胞色素P 4 5 0酶调控的文献进行检索、整理分析和归纳总结 ,综述了有关中草药及其单体化合物对细胞色素P 4 5 0酶调控方面的研究进展并评述了对P 4 5 0酶调控的研究策略。提出加强中草药对P 4 5 0酶作用的研究有重要意义 ,有助于指导中药的安全合理应用和发现新药。

担载金属卟啉模拟细胞色素P-450的催化丙烯环氧化

制备了SiO2化学键合金属卟啉Mn（TPP）Cl，Mn（TDCPP）Cl的担载配合物催化剂，并与单氧给体次氯酸钠（NaClO）构造了细胞色素P－450单加氧酶模拟体系，并考察了该体系的反应性能及其影响因素．金属卟啉经化学修饰的SiO2担载之后，由于表面官能团与金属中心的轴向配位及刚性载体SiO2对金属卟啉在载体表面很好的位置分离作用，使得金属卟啉的抗氧化性及稳定性显著增加，表现出优良的催化丙烯环氧化反应性能．

地塞米松对大鼠肝脏微粒体细胞色素P-450的诱导效应

目的:观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对细胞色素P-450(cytochrome P450,CYP450)的诱导效应,并探讨其诱导机制。方法:雄性Wistar大鼠分别以DEX 0,25,50和100mg·kg^(-1)·d^(-1)诱导处理(ip)4d后,测定大鼠肝脏总CYP450含量,CYP3A1,CYP3A2和CYP2B1/2的mRNA及蛋白的表达水平,肝脏ERD(CYP3A活性),PROD(CYP2B活性)和BROD(总CYP450活性)。结果:CYP450含量、ERD、PROD和BROD活性在DEX多次诱导后都有升高。CYP3A1 mRNA表达水平、蛋白含量和酶活性有明显的升高,剂量效应关系明显;CYP3A2蛋白明显升高,但mRNA表达水平却无明显变化。PROD和CYP2B1/2的mRNA表达水平以及总CYP450含量均在50mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量组达到最高值。结论:DEX对雄性大鼠主要诱导CYP3A1和CYP3A2两个CYP450成员表达上调,对CYP2B1/2也有一定的诱导作用,其诱导作用主要表现在酶活性、酶蛋白含量和mRNA表达水平的升高。CYP3A1和CYP3A2的诱导方式可能不同。

罗格列酮对大鼠肝细胞色素P-4502E1活性的影响

目的 :探讨罗格列酮对细胞色素P 4 5 02E1活性的影响。方法 :在正常大鼠肝细胞微粒体中加入浓度为 0 ,0 .10 ,0 .2 5 ,0 .5 0 ,1.0 0mmol·L- 1罗格列酮 ,以N 二甲基亚硝胺为底物 ,测定细胞色素P 4 5 0 2E1活性。另外用 0 ,0 .2 ,2 ,2 0mg·kg- 1剂量的罗格列酮分别对用乙醇诱导和未用乙醇诱导的大鼠灌胃 ,然后取大鼠肝细胞微粒体 ,以N 二甲基亚硝胺为底物 ,测定细胞色素P 4 5 0 2E1活性。结果 :在体外试验中 ,加入不同浓度罗格列酮的大鼠肝微粒体中细胞色素P 4 5 0 2E1活性差异无显著意义。在体内试验中 ,给予不同剂量罗格列酮的大鼠的肝细胞色素P 4 5 0 2E1活性差异也无显著意义 ;结论 :罗格列酮对大鼠的肝细胞色素P 4 5 0

细胞色素芳香化酶P-450在正常、子宫内膜异位症子宫内膜的表达及意义

目的 :探讨细胞色素芳香化酶P - 45 0在子宫内膜异位症 (内异症 )发病中的作用 ,检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达用于诊断内异症的可行性。方法 :应用免疫组化方法检测正常子宫内膜和内异症的在位及异位内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达。结果 :细胞色素芳香化酶P - 45 0在正常子宫内膜无表达 ,在内异症的在位和异位内膜均有强表达 ,增殖期与分泌期无差别。检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达 ,用于诊断内异症的敏感度为 91 5 % ,特异度为 10 0 % ,阳性预测值为 10 0 %。内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达与AFS分期无相关性。结论 :子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0分泌增加促进内异症的发生 ;内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P -45

大鼠肝脏微粒体中3种细胞色素P-450同工酶活性研究

目的 研究大鼠肝脏微粒体中CYP2D1/ 2、CYP2C11、CYP1A2 3种细胞色素P 4 5 0同工酶的活性。方法 用诱导剂和抑制剂分别在体内和体外调节大鼠肝脏P 4 5 0同工酶活性 ,并用高效液相法检测同工酶底物的特异性代谢产物来计算同工酶活性。结果 3种同工酶底物的特异性代谢产物的分离度达到了 1.5 ;天内、天间精密度均小于 10 .2 2 % ,天内、天间准确度均小于 14 .95 % ;相关系数都达到 0 .999。在体内腹腔注射地塞米松能使CYP1A2、CYP2D1/ 2、CYP2C11活性分别增加 1.3倍 (P <0 .0 5 )、1倍 (P <0 .0 1)和 2 .3倍 (P <0 .0 1)。β 萘黄酮可使CYP1A2活性增加 13.7倍 (P <0 .0 1)。在体外 ,呋拉茶碱可以不同程度地抑制CYP1A2、CYP2C11活性 ;普罗地芬、α 萘黄酮可以抑制CYP1A2活性 ;奎宁可以抑制CYP2D1/ 2活性。结论 甲苯磺丁脲、右美沙芬和非那西汀可以作为人体的探药 ,因而实验建立的方法有望用于检测人血浆或尿液中 3种探药的特定代谢产物 ,分别用于估测人肝脏CYP2C9、CYP2D6和CYP1A2的活性。

大鼠心肌组织与肝脏组织中细胞色素P-450的含量测定

对大鼠心肌组织中细胞色素Ｐ４５０含量的测定国内未见报道。本方法利用双光束紫外分光光度计测定了正常大鼠的心肌组织中Ｐ４５０的含量，并与肝组织Ｐ４５０的含量进行比较，以期探讨细胞色素Ｐ４５０与心脏疾病的关系。Ｗｉｓｔａｒ大鼠８只，雄性，体质量２０...

乙醇对肝细胞色素P-450氧化酶2E1的诱导

目的 :研究摄入乙醇对肝脏CYP450 2E1的诱导。方法 :1 8例不同程度酒精性脂肪性肝炎患者 ,其中 1 2例酗酒持续至肝活检术前 1 - 3日内 ,6例则已戒酒 3周至 7个月 ;4例病因不明脂肪性肝炎患者 ,但无酗酒史。采用免疫组化方法对肝组织切片进行CYP450 2E1染色及程度评估。结果 :近日仍酗酒的患者中肝组织切片CYP450 2E1的免疫组化染色显著强于已戒酒、无酗酒者。结论 :持续摄入乙醇能显著诱导CYP450 2E1 ,但戒酒后乙醇的诱导作用可以随之减弱。

河南汉族人群细胞色素P-450 1A1与肺癌易感性的关系

目的:探讨CYP1A1基因多态与支气管肺癌癌变关系。方法:采用病例-对照设计和PCR-RFLP方法,检测肺癌组103例和对照组138例CYP1A1基因多态,以logistic回归模型计算比数比(odds ratios,OR)及95%可信区间(confidential intervals,CI)。结果:CYP1A1m1突变型等位基因频率在对照组和肺癌组分别为27.6%和42.7%。logistic回归分析表明,CYP1A1(w1/m1)杂合型(B型)和(m1/m1)纯合突变型(C型)患肺癌的危险度分别升高3.19和2.61倍,差异显著。结论:CYP1A m1突变型等位基因是患肺癌的危险因素。

丹参酮对大鼠细胞色素P-450酶系和谷胱甘肽转移酶的作用

目的探讨丹参有效成分丹参酮 (Tan)对大鼠肝、肾组织内的细胞色素P 450酶 (cytochromeP 450,CYP)系和谷胱甘肽转移酶(GT)的影响。方法给予SD雄性大鼠丹参酮 (100mg·kg-1 )灌胃,每日 1次,连续10天后,选用CYP1A1、1A2、2B1、2E1及 3A特异性代谢底物,检测它们在肝和肾微粒体中的活性,同时检测肝、肾微粒体中的GT水平变化。结果实验表明,丹参酮可诱导肝微粒体内的CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1活性显著升高(均P<0. 01),同时显著抑制CYP2E1的活性 (P<0. 01),也可诱导肝微粒体中GT的活性升高 (P<0.05)。结论丹参酮对CYP亚型的不同调节作用可能会影响与其合用药物在体内的代谢消除,丹参酮对GT的影响也具有一定的临床意义。

单加氧酶细胞色素P-450的模拟

本文评述了用金属卟啉模拟单加氧酶细胞色素P－450的研究现状及其在有机合成和生物医学等方面的应用．

细胞色素P-450对β-阻滞剂类药物代谢物与鼠肝微粒体大分子形成络合物的选择作用

目的 :探讨不同来源鼠肝微粒体对 β-阻滞剂类药物代谢形成络合物的选择能力和可能机制。方法 :将经 β-萘黄酮 (BNF)、苯巴比妥 (PB)、地塞米松 (DEX)、普萘洛尔 (PROP)、阿替洛尔(ATE) 5种药物处理的鼠肝微粒体及对照组微粒体分别与β-阻滞剂类药物共孵育 ,测定孵育后代谢络合物形成的差示光谱。结果 :与对照组相比 ,经 PROP处理的鼠肝微粒体降低 PROP代谢络合物形成 ,但增加美托洛尔 (METO)代谢络合物形成 ;PB抑制 PROP代谢 ;而 BNF诱导 METO代谢。 S-PROP在不同微粒体中形成络合物能力较 R-PROP强。结论 :细胞色素 P-4

香豆素醚的O-脱烷基化作用及诱导剂、抑制剂和磺酰脲对水稻细胞色素P-450的作用

通过对7－乙氧基香豆素O－脱乙基酶（ECOD）和7－甲氧基香豆素－脱甲基酶（MCOD）在水稻靶标微粒体中活性的测定，获得了磺酰脲类除草剂对水稻中O－脱烷基化作用的选择性和安全作用的基本数据。通过测定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸细胞色素P－450（c)还原酶（HADPH cyt.c.red)，证实了电子转移系统对细胞色素P－450反应的影响。安全剂：核酸（NA）和乙醇；抑制剂：1－氨基苯并三唑（1－ABT）和增效醚（PBC）；除草剂：哌草丹、1－（α，α二甲基苄基）－3（p-甲苯基）脲、吡嘧黄隆（PSE）和苄嘧黄隆（BSM）的使用，控制了细胞色素P－450相关的反应。经过安全剂（NA、乙醇）和除草剂（哌草丹、1－（α，α二甲基苄基）－3－（p-甲苯基）脲、PSE、BSM）的处理，诱导了O－脱烷基化作用，因此，可通过使用磺酰脲类除草剂（PSE、BSM）和诱导细胞色素P－450酶的抑制剂（1－ABT、PBO）来调节抑制的程度。相对而言，NADPH细胞色素阴极还原酶并没有因受到诱导或抑制作用而发生明显变化，这些结果表明：细胞色素P－450与PSE和BSM磺酰脲类除草剂的氧化代谢机理有关。这些除草剂可以是一个基质或微粒体氧化酶的竞争抑制剂。

双核金属卟啉模拟细胞色素P-450催化环己烷单充氧反应的研究

合成了Fe(Ⅲ )_Fe(Ⅲ ) 3种双核金属卟啉配合物 ,用元素分析、紫外可见光谱进行表征 .另外还有单核金属卟啉配合物和 6个中间体 .研究了这些双核金属卟啉模拟细胞色素P - 4 5 0催化环己烷单充氧作用及金属卟啉在两种反应体系中催化性能的研究 .同时还与单核金属卟啉的催化性能进行比较 .实验结果表明 ,双核金属卟啉的催化活性随着两个金属卟啉之间碳链的增长而增长 ,反应体系的改变会引起金属卟啉催化活性的变化 .总体上 ,双核金属卟啉的催化活性要高于单核金属卟啉 .

心脏不同细胞色素P-450亚型的作用机制

细胞色素P450（CYPs）酶是一种多功能酶系，是生物体内参与内源性化合物（激素、脂肪酸）和外源性化合物（药物、前致癌物和前毒物）主要生物转化的酶系。CYPs为整个酶系中的末端氧化酶，不仅负责活化氧分子，同时负责与底物结合，并决定酶系底物的专一性，在整个酶系功能中起着尤为关键的作用。目前，大约有1000种已知的细胞色素P450，这些已知的细胞色素P450能够分成17个家族（如：CYP1），进而分成亚家族（如：CYP1A）和同工酶（如：CYP1A1）。最新试验表明，CYPs已经确定存在于心脏和血管内，通过抑制选择性CYPs能够对心肌缺血和再灌注损伤产生防护作用。

对模拟细胞色素P-450的卟啉类化合物的研究

本文评述和总结了细胞色素P-450模型体系研究现状。

模拟细胞色素P-450的仿生氧化反应研究 Ⅲ.有关用TPPFe(Ⅲ)Cl及TPPMn(Ⅲ)Cl催化的环己烷充氧化反应机理的初步探讨

在TPPFe（Ⅲ）或TPPMn（Ⅲ）Cl催化下烷烃用亚碘酰苯充氧化成醇的反应作为细胞色素P－450的模拟酶催化氧化反应已广为人知，有关这一反应的机理虽已有不少研究，但迄今未有一致看法，具有代表性的有Groves等提出的通过中间体TPPO／‖/M（V）Cl(1)或TPPO.^+/|/m(Ⅳ）Cl(2)(M=Fe,Mn)再与烷烃进一步发生游离基反应的机理和Hill等提出的M＝Mn时经中间体[Ar(Cl)IOMn]2O(3)再与烷烃反应的机理，我们曾用带不同取代基的亚碘酰苯在TPPFe（Ⅲ）及TPPMn（Ⅲ）Cl催化下对环己烷进行充氧化反 应，发现二种催化条件下具有不同的取代基效应，提出了可能是不同的反应机理，本文研究了ArIO充氧化环己烷的反应体系，在TPPFe（Ⅲ）及TPPMn（Ⅲ）Cl催化下进行了动态UV－Vis谱和ESR分析，提出了二种催化体系可能用二种不同递氧中间体的反应机理。