TβR1和p-Smad2/3蛋白在哈萨克族食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨TGF-β信号通路关键分子转化生长因子β-1型受体(transforming growth factor-βreceptor 1,TβR1)和磷酸化Smad2/3(phosphorylated Smad2/3,p-Smad2/3)蛋白在哈萨克族(哈族)食管鳞状细胞癌(鳞癌)中的表达及其临床意义。方法采用GEO和TCGA数据库分析食管鳞癌标本与癌旁正常组织中TβR1和p-Smad2/3的表达;运用免疫组织化学技术检测127例哈族食管鳞癌组织和82例癌旁正常组织中TβR1和p-Smad2/3的蛋白表达状况,分析及探讨TβR1、p-Smad2/3蛋白表达水平与哈族食管鳞癌患者临床病理参数及预后的关系。结果TβR1和p-Smad2/3蛋白在哈族食管鳞癌中表达上调(P=4.79×10^(-7);P=2.21×10^(-9)),且两者的表达呈正相关(r=0.322,P=0.002);TβR1、p-Smad2/3蛋白表达水平与食管鳞癌的浸润深度密切相关(P=0.003;P=0.005),且有淋巴结转移的样本中TβR1、p-Smad2/3蛋白表达水平明显高于无淋巴结转移的样本(P=0.028;P<0.001),而TβR1、p-Smad2/3蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别和肿瘤分化程度无明显相关(均P>0.05);Kaplan-Meier生存分析显示TβR1和p-Smad2/3蛋白高表达食管鳞癌患者生存时间明显短于低表达患者(P=0.0013;P=0.0017)。结论TβR1和p-Smad2/3蛋白表达与哈族食管鳞癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及预后密切相关。

化瘀泻浊方对肾间质纤维化实验大鼠TGF-β1、p-Smad2/3的影响

目的:观察化瘀泄浊方对肾间质纤维化实验大鼠TGF-β1、p-Smad 2/3的影响。方法:选用健康、雌性SD大鼠50只,用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为缬沙坦组[给予缬沙坦5.3mg/(kg.d)经口灌服]、化瘀泄浊方组[化瘀泄浊方5.7g/(kg.d)经口灌服]、阿魏酸哌嗪分散片组[给予阿魏酸哌嗪分散片6.7mg/(kg.d)]与模型组[给予同等量生理盐水经口灌服],并设假手术组,每组10只大鼠。行HE、Masson染色观察实验大鼠梗阻侧肾脏组织形态学改变并用免疫组化方法检测观察实验大鼠梗阻侧肾脏转化生长因子-β1(TGFβ1)及p-Smad 2/3在蛋白水平的表达。结果:模型组及各治疗组与假手术组相比均呈现程度不同的病理损害,梗阻肾间质TGFβ1、p-Smad 2/3蛋白的表达也增加(P<0.05)。各治疗组与模型组比较,TGFβ1、p-Smad 2/3表达明显减少(P<0.05)。治疗各组间比较,化瘀泄浊方组优于阿魏酸哌嗪分散片组(P<0.05),其他各组间均无明显差异(P>0.05)。结论:输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,肾纤维化面积明显增加,这可能与TGFβ1、p-Smad 2/3表达增加有关,化瘀泄浊方对其有一定的抑制作用。

发酵虫草菌粉Cs-4对UUO大鼠肾间质p-Smad2/3表达的影响

目的通过发酵虫草菌粉Cs-4干预UUO大鼠模型,动态观察TGF-β1、p-Smad2/3在梗阻侧肾组织中的表达。方法54只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组和Cs-4治疗组。于术后第7、14、21 d每组分别处死6只大鼠。HE、PAS、Masson染色观察肾间质纤维化指数,免疫组织化学染色法检测肾间质中COL-IV、TGF-β1和p-Smad2/3蛋白的表达,RT-PCR法检测肾组织TGF-β1mRNA的表达。结果Cs-4治疗组肾小管间质纤维化指数、肾间质COL-IV、TGF-β1和p-Smad2/3的蛋白表达以及肾组织TGF-β1的mRNA表达均较模型组明显降低。结论Cs-4能通过抑制小管间质中的细胞内TGF-β依赖性Smad信号通路延缓肾间质纤维化的进展。

皮肤纤维瘤中Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4蛋白质表达的检测

目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)信号转导途径中Smad1、Smad2、Smad3(Smad1/2/3),磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)和Smad4蛋白在皮肤纤维瘤中的表达特点及其意义。方法:采用EliVisionTMplus免疫组化技术检测皮肤纤维瘤与正常对照皮肤中Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4的表达情况。结果:与正常皮肤相比,Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4蛋白在皮肤纤维瘤的增殖表皮中表达下调,但在真皮内瘤体中大量增殖的梭形细胞中表达却显著上调。结论:皮肤纤维瘤瘤体中梭形细胞Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达上调可促进TGF-β信号转导,有助于皮肤纤维瘤中纤维增殖状态的形成。

益肾化瘀方含药血清对NRK52E细胞转分化过程中p-Smad2/3、Smad7表达的影响

目的:观察益肾化瘀方含药血清对TGF-β1诱导的体外培养的肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化过程中p-Smad2/3、Smad7表达的影响。方法:将体外培养的NRK52E细胞随机分为6组:正常对照组,TGF-β1刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组,缬沙坦含药血清组,培养48h后取出。观察各组细胞形态变化,采用免疫细胞化学法检测NRK52E细胞p-Smad2/3、Smad7的表达。结果:NRK52E细胞经TGF-β1刺激后,失去原有的铺路石样形态,拉长增大呈梭形,而与益肾化瘀方含药血清共同作用后,细胞形态有所修复,细胞梭形改变减轻;免疫组化显示与正常对照组比较,TGF-β1刺激组细胞p-Smad2/3核表达明显增强(P<0.01),Smad7表达却减弱(P<0.01)。而各药物干预组与单纯TGF-β1刺激组相比,p-Smad2/3的表达随药物浓度增加呈下降趋势(P<0.01),而Smad7表达的阳性率明显增强(P<0.01)。其中20%益肾化瘀方含药血清组与缬沙坦含药血清组的表达无显著差异。结论:益肾化瘀方含药血清通过抑制Smad2/3的磷酸化,上调Smad7表达,显示出对TGF-β1刺激的NRK52E细胞转分化过程的阻抑作用,并与剂量呈正相关。

脂溢性角化病、基底细胞癌和鳞状细胞癌中几种Smad蛋白质表达的检测

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β信号转导途径中Smad1、Smad2、Smad3(Smad1/2/3),磷酸化Smad2,磷酸化Smad3(p-Smad2/3)和Smad4蛋白在脂溢性角化病、基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达特点及其意义。方法:采用EliVisionTMplus免疫组化技术分别检测脂溢性角化病、基底细胞癌、鳞状细胞癌以及正常对照皮肤中Smad1/2/3、p-Smad2/3、和Smad4的表达情况。结果:Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4蛋白在脂溢性角化病、基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达较正常表皮显著降低。结论:脂溢性角化病、鳞状细胞癌和基底细胞癌中Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达降低可能通过阻断TGF-β信号转导,有助于上述表皮肿瘤的形成和发展。

金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响

为探索金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响,用热灭活金黄色葡萄球菌(0、10~4、10~5、10~6、10~7和10~8 CFU·mL^(-1))刺激BMFB,24h后采用Real-time PCR方法检测TGF-β1、α-SMA和collagen-ⅠmRNA的转录量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3蛋白的表达量。使用TGF-β1受体特异性抑制剂SB-431542预处理细胞,再用10~5 CFU·mL^(-1)热灭活金黄色葡萄球菌刺激细胞,24h后采用Real-time PCR方法检测α-SMA和collagen-ⅠmRNA的转录量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3蛋白的表达量,免疫荧光法检测collagen-Ⅰ蛋白的表达量。结果显示,不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理细胞的TGF-β1mRNA的转录量显著升高(P<0.05或P<0.01),其中以10~5CFU·mL^(-1)刺激组的TGF-β1mRNA的转录量最高。不同浓度灭活的金黄色葡萄球菌处理细胞的α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3的表达量均能显著升高(P<0.05或P<0.01),其中以10~5 CFU·mL^(-1)刺激组的α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3的表达量最高。抑制剂SB-431542能够极显著抑制α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3的表达量(P<0.01)。结果提示,金黄色葡萄球菌能够通过TGF-β1/Smad信号通路诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞,本研究为揭示金黄色葡萄球菌性乳腺炎发生硬化的机制奠定基础。

寻常性银屑病皮损表皮中TGF-β受体活化Smad蛋白表达的检测

目的:探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β受体活化Smad——[Smad1、Smad2、Smad3(Smad1/2/3)]和磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白在寻常性银屑病皮损中的表达及其意义。方法:采用EliVision法免疫组化技术分别检测寻常性银屑病皮损与正常对照皮肤中Smad1/2/3和p-Smad2/3蛋白的表达情况。结果:与正常对照皮肤相比,Smad1/2/3和p-Smad2/3蛋白在寻常性银屑病皮损表皮中的表达显著降低。结论:寻常性银屑病皮损表皮中Smad1/2/3和p-Smad2/3蛋白表达降低,可通过阻断TGF-β信号转导,有助于寻常性银屑病皮损角质形成细胞过度增殖状态的发生和发展。

丹皮酚联合三七总皂苷对AngⅡ诱导的心脏成纤维细胞增殖及TGF-β/Smads信号通路的影响

目的探讨丹皮酚联合三七总皂苷应用对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导新生大鼠的心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖及TGF-β/Smads信号通路的影响。方法采用胰酶消化法分离培养的CFs随机分为6组:正常对照组,模型组,三七总皂苷组,丹皮酚组,丹皮酚与三七总皂苷联合用药大、小剂量组。采用MTT比色法测定各组培养液中CFs增殖情况,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平,RTPCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,Tgfb1)的mRNA表达水平,Western blot法检测TGF-β1、磷酸化的Smad2/3(p-Smad2/3)的蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠CFs增殖明显增高,Tgfb1的mRNA表达显著增加,α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达显著增加;与模型组比较,丹皮酚组、三七总皂苷组、联合用药的大剂量和小剂量组均可抑制由AngⅡ诱导的CFs的增殖,Tgfb1的mRNA表达显著减少,α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达显著减少;与丹皮酚组、三七总皂苷组比较,联合用药大、小剂量组在抑制CFs增殖的作用上显著增强,抑制Tgfb1的mRNA表达效果显著增强,抑制α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达效果显著增强;与联合用药小剂量组比较,联合用药大剂量组对以上指标的抑制效果更佳,显示一定的剂量依赖性。结论丹皮酚与三七总皂苷联合应用对抑制CFs增殖,呈现明显的协同作用。其作用机制与抑制TGF-β/Smads信号通路的传导有关。

地西他滨抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的实验研究

目的探讨地西他滨对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达的影响。方法 CCK8法检测不同浓度地西他滨对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响。Western blotting检测药物作用前后瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad4、Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)和Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)的表达;采用免疫共沉淀法及Smad4 siRNA转染研究p-Smad2/3-Smad4共聚体在瘢痕疙瘩形成中的作用,Real-time PCR检测下游转录因子的表达情况。结果 CCK8法检测结果显示:干预后48 h,随着地西他滨浓度的升高,成纤维细胞生长抑制率总体呈上升趋势,实验选择半数抑制浓度4.38μmol/L作为地西他滨对耳垂瘢痕疙瘩成纤维细胞的干预浓度。药物干预后,瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β1、p-Smad2/3、COL1A1和COL3A1表达及p-Smad2/3-Smad4共聚体形成显著减少。Smad4被沉默后,瘢痕疙瘩成纤维细胞COL1A1表达减少,转录因子c-jun、runx2、irf-7 mRNA的表达下调。结论地西他滨抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,使胶原蛋白合成受限,其机制可能与抑制Smad2/3的磷酸化及p-Smad2/3-Smad4蛋白复合体的形成有关。

脂溢性角化病皮损区受体活化Smad的变化

目的探讨转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号转导通路中受体活化Smads(Smad2,Smad3)在脂溢性角化病皮损区的表达及其意义。方法采用反转录-实时定量聚合酶链式反应(RT and quantitative Real-Time PCR)和免疫组化技术分别检测脂溢性角化病皮损和正常对照皮肤中Smad2及Smad3的mRNA和Smad1/2/3及磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白的表达情况。结果与正常对照皮肤组相比,脂溢性角化病皮损中Smad2、Smad3的mR-NA以及Smad1/2/3、p-Smad2/3的表达水平下降。结论脂溢性角化病中受体活化Smads(Smad2、Smad3)和p-Smad2/3表达下调可阻断TGF-β信号转导,可能使TGF-β抑制上皮增生的作用不能有效发挥,从而促进了脂溢性角化病表皮的过度增生。

氯沙坦对癫痫大鼠转化生长因子-β信号通路的影响

目的:探讨氯沙坦对癫痫大鼠转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的影响。方法:选取建模成功的大鼠75只,随机分为5组,每组15只,分别为:模型对照组、拉莫三嗪组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1))、氯沙坦低(15 mg·kg^(-1)·d^(-1))、中(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))、高(45 mg·kg^(-1)·d^(-1))剂量组,另取未建模大鼠15只为空白对照组。各给药组灌胃给予相应药物,空白对照组及模型对照组给予等体积生理盐水,持续给药11 d。观察各组癫痫大鼠一般情况与行为变化,利用实时荧光定量和蛋白免疫印迹检测TGF-β、Smad7、p-Smad2/3、Smad4的转录和翻译水平。结果:与空白对照组相比,模型对照组大鼠精神萎靡,皮毛脏乱,饮食量下降,体质量增加量显著减少(P<0.05);TGF-β、p-Smad2/3、Smad4的表达量显著升高,Smad7的表达量显著降低(P<0.05)。与模型对照组相比,氯沙坦干预组大鼠一般情况明显得到改善,体质量增加量显著上升(P<0.05);大鼠癫痫发作级别显著降低(P<0.05);TGF-β、p-Smad2/3、Smad4的表达量显著降低,Smad7的表达量显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。氯沙坦中、低剂量组的以上各指标均与拉莫三嗪组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:氯沙坦可能通过调节TGFβ/Smads信号通路参与控制大鼠癫痫发作。

Role of TGF-β1/Smads pathway in carotid artery remodeling in renovascular hypertensive rats and prevention by Enalapril and Amlodipine

ObjectiveTo 调查转变生长 factor-&#x003b2 的角色； 1 (TGF-&#x003b2； 1 ) ，在在 renovascular 改变高血压的老鼠的颈动脉动脉的 Smad2/3 和 Smad7 表情，并且另外高血压的老鼠(RHR ) 与 &#x0201c 建模的 Enalapril 和 Amlodipine.MethodsThe renovascular 的治疗学的效果；二肾并且 one-clip&#x0201d；被建立，包括模型组( n = 6 )，假冒操作组( n = 6 )， Enalapril 组( 10 mg/kg 每天， n = 6 )， Amlodipine 组( 5 mg/kg 每天， n = 6 )并且联合组( Amlodipine 2.5 mg/kg 每天+ Enalapril 5mg/kg 每天， n = 6 )。药是连续的为六管理了星期。词法的颈动脉动脉和在媒介的结构的变化被观察由他染色，马森染色和免疫组织化学的染色。媒介厚度( MT )， MT 和腔直径比率( MT/LD )，和表示媒介铺平 &#x003b1 ；光滑的肌肉肌动朊( &#x003b1 ；-actin),增殖房间原子抗原( PCNA )， TGF-&#x003b2 ； 1 ， phosphorylated Smad2/3 ( p-Smad2/3 )和在颈动脉动脉的 Smad7 是在 RHR 的颈动脉动脉的 measured.ResultsThe 媒介模型组显著地被变厚，光滑的肌肉房间的卷被增加，并且数组在混乱；MT， MT/LD，光滑的肌肉房间的增长索引和在模型组的颈动脉动脉的骨胶原纤维区域百分比比在假冒操作组的那些显著地高(P &#x0003c；0.01 ) 。把组比作假冒操作，模型组有 TGF-&#x003b2 的显著地更高的表情； 1 并且 p-Smad2/3 (P &#x0003c；0.05 ) 并且更低的 Smad7 表示。改进的 Enalapril 和 Amlodipine 弄平肌肉肥大和骨胶原免职，减少的 RHR 颈动脉 MT， MT/LD，光滑的肌肉房间的增长索引，骨胶原纤维区域百分比和 TGF-&#x003b2 的表情； 1 并且 p-Smad2/3 (P &#x0003c；0.05 ) ，增加的 Smad7 表示(P &#x0003c；0.05 ) 。而且， Enalapril 和 Amlodipine 的联合处理比单个 Amlodipine 有显著地更好的效果组(P &#x0003c；0.05 ) ，然而并非单个 Enalapril group.ConclusionsTGF-&#x003b2； 1/Smads 小径可以参予颈动脉动脉在 RHR 改变的机制；在 inversing 颈动脉动脉改变的 Amlodipine 和 Enalapril 的角色可能与 TGF-&#x003b2 的变化有关； 1/Smads 小径， Amlodipine 和 Enalapril 的联合处理最好比 Amlodipine 的单个管理完成。

脯氨酸羟化酶-2对肝细胞肝癌生物学行为的影响及其机制

目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株,建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型,PHD-2沉默组利用瘤体内注射的方式将胆固醇修饰的PHD-2 RNA干扰(RNAi)注射入瘤体内,同时设立空白组(不做处理)和生理盐水对照组(注射生理盐水)进行对照研究,每4 d注射1次,观察并记录裸鼠的瘤体生长变化,开始注射药物后第16天处死裸鼠,采集瘤体标本用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测PHD-2、p-Smad2/3及癌基因c-Myc的表达。采用免疫组织化学技术(IHC)检测220例HCC临床标本中c-Myc的表达,分析其与PHD-2以及HCC患者临床病理特征的相关性。计数资料进行χ^2检验,相关性分析采用Spearman等级相关检验。结果(1)在HCC裸鼠移植瘤模型中PHD-2沉默组裸鼠瘤体增长缓慢(F=15.607,P<0.05),差异有统计学意义。瘤体标本中PHD-2沉默组p-Smad2/3表达水平明显高于空白组和对照组(0.589±0.074比0.086±0.012、0.091±0.008,F=286.537,P<0.05),差异有统计学意义,而PHD-2沉默组c-Myc的表达水平明显低于其他两组(0.108±0.004比0.539±0.023、0.592±0.087,F=189.468,P<0.05),差异有统计学意义。(2)IHC技术检测220例HCC临床标本中PHD-2及c-Myc的表达,c-Myc的高表达与肿瘤体积较大、分化程度较低、TNM分期较晚、高水平的甲胎蛋白显著相关,与PHD-2的表达显著相关(r=0.557,P<0.01)。结论PHD-2的高表达可以促进HCC细胞在体内的增殖,PHD-2促进HCC进展的作用有可能是通过抑制TGF-β1-Smad信号通路中的p-Smad2/3表达,进而上调癌基因c-Myc的表达来实现的。

依那普利和厄贝沙坦对肾血管性高血压大鼠颈动脉重构及转化生长因子β_1/Smads表达的影响

目的观察依那普利和厄贝沙坦单用及联用对肾血管性高血压大鼠(RHR)颈动脉重构及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads表达的影响。方法 8～12周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只。建立"两肾一夹"RHR模型,设立模型组、假手术组、依那普利组[10mg/(kg·d)]、厄贝沙坦组[50mg/(kg·d)]、联合用药组[厄贝沙坦25mg/(kg·d)+依那普利5mg/(kg·d)],每组6只大鼠。药物连续干预6周。采用HE染色、Masson染色法及免疫组化染色检测颈动脉中膜形态及结构变化并测量中膜厚度、中膜厚度/腔径以及颈动脉中膜α肌动蛋白(α-actin)、增殖细胞核抗原(PCNA)、TGF-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad7的表达水平。结果 RHR模型组颈动脉中膜明显肥厚,平滑肌细胞体积增大,排列紊乱;中膜厚度、中膜厚度/腔径、颈动脉中膜平滑肌细胞的增殖指数及胶原纤维面积百分比均高于假手术组[中膜厚度(91.28±11.17)比(52.15±7.18)μm,中膜厚度/腔径(20.75±3.07)%比(9.94±1.52)%,增殖指数(35.31±12.97)%比(1.84±0.52)%,胶原纤维面积百分比(67.53±7.68)%比(15.35±4.47)%,均P<0.01];TGF-β1和p-Smad2/3的表达较假手术组均增多(均P<0.05),Smad7表达较假手术组减少(P<0.01)。依那普利和厄贝沙坦均能改善颈动脉平滑肌肥大和胶原沉积,减小RHR颈动脉中膜厚度、中膜厚度/腔径、平滑肌细胞的增殖指数、胶原纤维面积百分比及TGF-β1和p-Smad2/3的表达(P<0.05),增加Smad7表达(P<0.01),且两药联用较单用更能改善颈动脉重构,降低TGF-β1和p-Smad2/3的表达(P<0.05),增加Smad7表达(P<0.05)。结论依那普利和厄贝沙坦通过影响TGF-β1/Smads信号通路中TGF-β1、p-Smad2/3和Smad7的表达而改善RHR颈动脉重构,且两药联用有协同作用。

芪苈强心可减弱房颤家兔心房结构重构

本研究旨在考察芪苈强心对房颤家兔心房结构重构的影响。将30只家兔随机分成假手术组、模型组和芪苈强心组,每组10只。建立心房颤动家兔模型前1周及建模后4周,每天按2.5 g/kg的剂量对芪苈强心组家兔灌胃芪苈强心。实验结束时检测三组家兔的超声心动图指标,然后应用组织学、免疫组化和蛋白质印迹分析检测心房组织中的DHPR、TGF-β1、P-smad 2/3、collagenⅢ和MMP9蛋白表达。研究显示,芪苈强心组家兔的LVEDD和IVSd显著低于模型组(p<0.05),而LVEF显著高于模型组(p<0.05)。芪苈强心组的纤维化面积和心肌细胞凋亡比例显著低于模型组。芪苈强心处理可显著增加DHPR的蛋白水平。芪苈强心处理显著降低了TGF-β1和P-smad 2/3蛋白表达的水平。芪苈强心处理可显著下调collagenⅢ和MMP9蛋白的水平。本研究表明,芪苈强心可通过抑制TGF-β1/P-smad 2/3信号通路及其下游纤维化分子来减轻心房颤动家兔模型的心房组织纤维化并抑制心肌细胞凋亡,从而减弱心房结构重塑和电重构。

色素上皮衍生因子对高糖诱导人肾小球系膜细胞转化生长因子-β1／Smad信号转导途径的影响

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对高糖诱导人肾小球系膜细胞（HMCs）转化生长因子-β1（TGF-β1）／Smad信号转导途径的影响。方法体外培养HMCs并将其分为正常对照组（5．6mmol／L葡萄糖）、渗透压对照组（5．6mmol／L葡萄糖＋24．4mmol／L甘露醇）、高糖组（30mmol／L葡萄糖）、干预1组（30mmol／L葡萄糖＋10nmol／LPEDF）、干预2组（30mmol／L葡萄糖＋40nmol／LPEDF）和干预3组（30mmol／L葡萄糖＋100nmol／LPEDF），分别作用24h后收集样本，采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测TGF-β1、纤维连接蛋白（FN）及Smad7 mRNA表达，Western blot检测Smad7蛋白的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测TGF-β1、FN蛋白水平，免疫细胞化学检测p-Smad2／3蛋白的表达。结果与正常对照组比较，高糖组TGF-β1、FN表达明显增加，Smad7表达明显减少（P〈0．05或P〈0．01），p-Smad2／3蛋白表达增加，而渗透压对照组与正常对照组比较无明显改变。与高糖组比较，PEDF干预组TGF-β1、FN表达减少，Smad7表达增加（P〈0．05或P〈0．01），p-Smad2／3蛋白表达呈下降趋势。结论PEDF能抑制高糖诱导的TGF-β1、FN和p-Smad2／3蛋白过度表达及上调Smad7表达。PEDF可能通过影响TGF-β1／Smad信号转导途径达到抗纤维化的作用，延缓糖尿病肾病的进程。