几种表面活性剂对P-gp底物罗丹明123经肠黏膜透过性的影响

目的观察低浓度表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油,Labrasol和聚山梨酯80对肠黏膜P-gp的调控作用。方法使用体外扩散池法评价罗丹明123(R123)经空肠、回肠和结肠黏膜的经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数(Papp),并测定不同浓度表面活性剂对R123和荧光素钠(CF)经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道黏膜的透过性存在部位差,即以空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少。另一方面,R123经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性。低浓度的CEL和Labrasol可显著增强R123经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性;而低浓度的聚山梨酯80可显著增强R123经吸收方向的透过性,但对经分泌方向的透过性无显著影响。但实验浓度的表面活性剂对CF的肠道转运没有影响。结论低浓度的聚氧乙烯蓖麻油、Labrasol和聚山梨酯80可通过对P-gp功能的抑制而用于改善受P-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。

EMT经p38-MAPK调节乳腺癌MCF-7细胞P-gp介导的多药耐药

目的:探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与P-糖蛋白(P-glucoprotein,P-gp)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)的关系及其可能的机制。方法:将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳腺癌细胞MCF-7,用多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导各组细胞耐药。免疫细胞荧光检测上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间质标志物波形蛋白(vimentin)以及P-gp的表达,MTT检测耐药细胞的增殖,RT-PCR检测Snail、MDR1、p38-MAPK mRNA的表达。结果:细胞免疫荧光显示,转染pcDNA-Snail载体后,MCF-7细胞发生EMT,E-cadherin表达显著降低,vimentin表达显著升高;P-gp在发生EMT的MCF-7细胞中表达显著升高。经DOX诱导,MCF-7/Snail细胞的耐药能力较MCF-7/DOX细胞显著增强(P<0.05)。RT-PCR显示,MCF-7细胞发生EMT后,p38-MAPK表达显著升高(P<0.05),MDR1表达较亲本细胞明显升高(P<0.01)。结论:MCF-7细胞发生EMT后,可能通过p38-MAPK引发P-gp介导的MDR。

益气活血解毒法对溃疡性结肠炎复发患者结肠组织P-糖蛋白的影响

[目的]探讨益气活血解毒法对溃疡性结肠炎(UC)复发患者结肠组织P-糖蛋白影响。[方法]90例UC复发患者随机分为2组,中药治疗组45例,西药对照组45例。治疗3个月后对完全缓解及有效病例(其中治疗组39例,对照组32例)进行为期6个月的随访。治疗组给予益气活血解毒立法的中药汤剂,对照组给予柳氮磺胺吡啶治疗,并与20例作正常对照。[结果]治疗前UC组结肠组织P-糖蛋白水平明显高于正常健康人(P<0.01);复发组水平明显高于未复发组(P<0.01);治疗组治疗后及随访时结肠组织P-糖蛋白水平明显低于对照组(P<0.01)。[结论]以益气活血解毒立法的中药溃结复发方,与西药柳氮磺胺吡啶比较,可有效降低结肠组织P-糖蛋白水平,减少耐药性,提高药物的治疗效果从而降低复发率。

胃癌多层CT增强征象与组织分化及p53、P-糖蛋白表达相关性初步探讨

目的初步研究进展期胃癌的多层CT增强征象与肿瘤组织分化及p53、P-糖蛋白(P-gp)表达的关系。资料与方法手术切除且资料完整的胃癌患者66例。所有病例术前均行上腹部多层CT常规及双期增强检查,观察内容包括肿瘤部位、最大直径、胃壁浸润厚度、双期强化率、淋巴结转移等。术后标本经10%甲醛固定、石蜡包埋、组织切片,采用常规HE染色确定组织分化和免疫组织化学检测p53、P-gp在胃癌中表达。比较胃癌的多层CT增强征象与组织分化及p53、P-gp在胃癌表达间的关系。结果73.1%(19/26)均匀强化的胃癌为高/中分化腺癌,75%(30/40)分层强化或不均匀强化的胃癌为低分化腺癌,两者比较差异有统计学意义(P=0.000)。CT双期增强的强化率与胃癌组织分化无关(P>0.05);p53、P-gp在分层强化或不均匀强化的胃癌中阳性表达率显著高于在均匀强化的胃癌中阳性表达(P<0.05)。p53阳性表达还与动脉期强化率、肿瘤大小和淋巴结转移有关(P<0.05),与胃壁浸润厚度、门静脉期强化率无关(P>0.05);而P-gp表达与门静脉期强化率有关(P=0.005),与动脉期强化率、胃壁浸润厚度、肿瘤大小和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论胃癌不同的强化方式和双期强化率反映了胃癌的不同组织分化和p53、P-gp阳性表达,提示胃癌的多层CT增强征象与其组织分化及p53、P-gp表达有较密切的相关性。

天佛参逆转K_(562)/ADM细胞株耐药性的作用及机制探讨

目的 :研究复方天佛参口服液 (TFS)逆转人红白血病耐药细胞株K56 2 /ADM耐药性的作用 ,探讨该药对K56 2 /ADM细胞膜P -糖蛋白 (P -gp)的功能及表达的影响。方法 :体外培养K56 2 /ADM细胞 ,分别用MTT法、流式细胞仪、免疫组化法等方法观察TFS对K56 2 /ADM细胞生长的抑制作用 ,检测K56 2 /ADM细胞膜上P -gp的功能及表达情况。结果 :TFS在非毒性浓度以下能逆转细胞耐药 ,与ADM合用能抑制K56 2 /ADM细胞生长 (P <0 .0 0 5 ) ;K56 2 /ADM细胞内药物浓度升高 ;K56 2 /ADM细胞上P -gp的高表达 ,经TFS作用后其表达下降 ,且 48h后完全消失 ,呈时间依赖性。结论 :TFS能逆转K56 2 /ADM耐药性 ,其机制与抑制K56 2 /ADM细胞膜上P -gp高表达有关。

肠胃清对KB-A-1细胞P-糖蛋白ATP酶活性及MDR1基因转录水平的影响

目的:探讨肠胃清(黄芪、党参、白术等)逆转肿瘤多药耐药的作用机制。方法:制作肠胃清药物血清,观察药物血清对多药耐药细胞KB-A-1P-糖蛋白ATP酶活性及MDR1基因转录水平的影响。结果:肠胃清药物血清对P-gp的ATP酶活性具有抑制作用,并呈剂量依赖性;2.5和5药物血清对MDR1基因转录水平的抑制作用分别达到了58和100。结论:肠胃清逆转肿瘤耐药与其抑制P-gp的酶活性、降低MDR1mRNA表达有关。

P-gp170、GST-π、TOPOⅡ在外周T细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的:探讨多药耐药(MDR)相关的P糖蛋白(P-gp170)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)、拓扑异构酶(TOPOⅡ)在不同亚型外周T细胞淋巴瘤(PTCL)的表达情况以及和化疗反应性、预后的关系。方法:应用免疫组化方法检测64例经病理确诊的PTCL患者病理组织P-gp170、GST-π、TOPOⅡ的表达情况,并分析它们之间的相关性以及与病理亚型、化疗效果、预后的关系。结果:64例患者中PTCLP-gp170、GST-π、TO-POⅡ表达阳性率分别为57.8%(37/64)、51.6%(33/64)和53.1%(34/64)。三者的表达无显著的相关性(P>0.05)。P-gp170在PTCL-U和ALK+ALCL两组中的表达具有显著性差异(P=0.0182)。P-gp170表达强阳性和首程化疗后完全缓解(CR)、部分缓解(RR),均呈显著负相关(P=0.000)。本文综合定义的MDR高危组(≥2分)和RR具有显著负相关(P=0.002)。P-gp170表达强阳性和MDR高危组和预后相关(P=0.000;P=0.0145)。PTCL的病理亚型、对化疗的反应性(包括CR和RR)为外周T细胞淋巴瘤的独立预后因素。P-gp170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ尚不能作为独立预后因素。结论:P-gp170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ的表达在PTCL的不同亚型中有一定的差异,在一定程度上和PTCL的耐药性以及不良预后有关。

吐温-80对p-糖蛋白底物罗丹明123经肠粘膜透过性的影响

目的观察低浓度吐温-80对肠粘膜P-gp的调控作用。方法使用体外扩散池评价罗丹明123(R123)经空肠,回肠和结肠粘膜的经时吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数,并测定不同浓度吐温-80对R123和荧光素钠经肠粘膜透过性的影响。R123和荧光素钠在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道粘膜的透过性存在部位差,即以空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少。另一方面,R123经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性。低浓度的吐温-80具有增加R123经吸收方向的透过性。但实验浓度的吐温-80对荧光素钠的肠道转运没有影响。结论低浓度的吐温-80可通过对P-gp功能的抑制而用于改善受P-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。

P-糖蛋白、谷胱甘肽-s转移酶的表达与胃癌细胞耐药的关系研究

目的初步探索胃癌多药耐药细胞系SGC7901／VCR的耐药机制。方法间歇诱导法，胃癌细胞系SGC7901经长春新碱（VCR）短时间诱导后，对长春新碱产生耐药。MTT法检测对VCR、5-氟尿嘧啶、表阿霉索的耐药性。Western blot检测P-糖蛋白（P—glucoprotein，P—gp）、谷胱甘肽-s转移酶（ghtathione—s transferring enzyme，GST—s）的表达。结果耐药细胞SGC7901／VCR对长春新碱耐药提高16．56倍，此耐药株同时对5-氟尿嘧啶、表阿霉素呈交叉耐药，耐药指数分别达6．9、13．05。SGC7901／VCR的P—gP、GST—s出现表达增强。结论长春新碱短时间诱导后，SGC7901产生多药耐药性（multi—drug resistance，MDR），且P—gp、GST—s表达增强。反之，抑制P—gP、GsT—s蛋白的表达，则有可能降低细胞耐药从而逆转胃癌MDR。

P-gp与GST-π在鼻咽癌多药耐药细胞中的表达及其意义

目的比较P-糖蛋白(P-gp)与谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)在鼻咽癌细胞TW03及其多药耐药细胞TW03/DDP中的表达差异,进一步探讨鼻咽癌多药耐药的机制。方法制备鼻咽癌细胞TW03及其多药耐药细胞TW03/DDP的细胞爬片,利用免疫细胞化学技术,检测P-gp与GST-π在两种细胞中的表达情况。结果 GST-π在TW03/DDP中表达明显高于TW03(P<0.01),而P-gp在TW03/DDP中表达明显低于TW03(P<0.01)。结论 GST-π可能是TW03/DDP导致多药耐药中的重要原因之一,P-gp降低的原因需要进一步研究。

脑梗死患者血小板活化状态及血小板参数的研究

目的:探讨脑梗死患者血小板膜糖蛋白P选择素(CD62P)、溶酶体蛋白(CD63)以及血小板3项参数即血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)和血小板最大聚集率(MAR)的变化及意义。方法:采用流式细胞术测定168例脑梗死患者血小板活化指标CD62P、CD63的表达,同时对其进行血小板3项参数PLT、MPV和MAR的测定,并与对照组比较。结果:(1)脑梗死患者急性期CD62P、CD63、MPV及MAR较健康对照组以及恢复期患者显著升高,而且恢复期患者上述指标仍高于健康对照组(均为P<0.01),而PLT在脑梗死急性期、恢复期及健康对照组之间均无显著性差异(均为P>0.05)。(2)CD62P、CD63、MPV及MAR与神经功能缺损程度评分呈显著直线正相关(r=0.84、0.817、0.684和0.698,均为P<0.01),而PLT与神经功能缺损程度评分间无相关性(r=0.32,P>0.05)。结论:脑梗死患者血小板大量活化及其体积和最大聚集率的升高参与了脑梗死的病理过程,MPV和MAR较PLT更能反映脑梗死的严重程度。

左乙拉西坦治疗小儿癫痫研究进展

癫痫是儿科神经系统疾病中的常见疾病之一,是大脑神经元突发性异常放电,导致短暂的大脑功能障碍的一种慢性脑功能障碍综合征。左乙拉西坦为吡拉西坦的类似物,是一种具有全新抗癫痫作用机制的新型抗癫痫药物。近年来,已广泛用于小儿癫痫包括4岁以下的小儿癫痫的治疗,显示了较好的抗癫痫疗效和安全性。本文就其独特的作用机制、体内药动学特征及国内近年来以左乙拉西坦治疗小儿癫痫的临床研究进行综述。

肝细胞肝癌组织中COX-2与P-糖蛋白的表达及意义

目的探讨肝细胞肝癌组织中COX-2和P-糖蛋白的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测41例肝细胞肝癌及其癌旁组织中COX-2和P-糖蛋白的表达情况。结果COX-2和P-糖蛋白在肝细胞肝癌中的表达均高于癌旁及正常组织,COX-2在不同分期肝细胞肝癌组织中有显著差异;COX-2与P-糖蛋白在肝细胞肝癌组织中的表达呈显著正相关。结论肝细胞肝癌组织中COX-2和P-糖蛋白处于过度表达状态,且具有相关性,两者可能参与肝细胞肝癌的发生、发展及癌细胞的多药耐药。

耐药基因P-GP在肺癌中表达及其临床意义

目的 探讨耐药基因P -GP在肺癌中的表达及其临床意义。方法 6 0例肺癌经免疫组化染色 ,分成P -GP阴性组 (N组 =30例 )与阳性组 (P组 =30例 ) ;P组中 2 0例 (P1组 )化疗合用氯丙嗪 ,其余 10例 (P2 组 )及N组单纯化疗。于化疗前后检测尿肿瘤代谢产物观察疗效 ,并随访各组远期效果。结果 ①化疗前后尿肿瘤代谢产物差值阳性率 ,N组与P组及P1组与P2 组均有显著性差异 (P <0 .0 5) ;②有效率 N组为 83.3% (2 5 30 ) ,P组为 56 .7% (17 30 ) ,二者相比P <0 .0 5。P1组为 70 % (14 2 0 ) ,P2 组为 30 % (3 10 ) ,二者相比P <0 .0 5。随访结果表明 ,P1组与P2 组 1年SR差异显著 (P <0 .0 5) ,2年及 3年无显著性差异 (P >0 .0 5)。结论 P -GP阳性肺癌化疗疗效差、生存率低 ,但合用氯丙嗪者会增加化疗疗效 ,提高生存率。

低浓度聚氧乙烯蓖麻油对p-gp底物罗丹明123经肠黏膜透过性的影响

目的观察低浓度聚氧乙烯蓖麻油对肠黏膜p-gp的调控作用。方法使用体外扩散池法评价罗丹明123(R123)经空肠、回肠和结肠黏膜的经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数(Papp),并测定不同浓度表面活性剂对R123和荧光素钠(CF)经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道黏膜的透过性存在部位差,空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少;R123经肠道分泌方向的透过性显著高于其吸收方向的透过性。低浓度的聚氧乙烯蓖麻油具有增加R123经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性。但试验浓度的表面活性剂对CF的肠道转运没有影响。结论低浓度的聚氧乙烯蓖麻油可通过对p-gp功能的抑制而用于改善受p-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。

增殖细胞核抗原和P糖蛋白在胃癌中的表达和意义

目的 :探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)和P糖蛋白在判断胃癌预后、指导化疗中的意义。方法 :采用S -P免疫组化染色法。结果 :低分化腺癌PCNA阳性率 (97 4% )明显高于高分化腺癌PCNA阳性率 (75 0 % ) ,两者具有极显著性差异 (P <0 0 1 ) ;低分化腺癌的PCNA表达强度高于高分化腺癌 ,且差异具有显著性 (P <0 0 5 )。P糖蛋白表达与淋巴结转移及肿瘤细胞的恶性程度无关 (P >0 0 5 )。结论 :对胃癌病人进行PCNA、P糖蛋白检测 ,在判断预后。

胃癌组织中环氧化酶2与血管内皮因子、P-糖蛋白的表达及意义

目的探讨胃癌组织中环氧化酶-2(COX-2)与VEGF、P-糖蛋白的表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测57例胃癌及其癌旁组织中COX-2与VEGF、P-糖蛋白的表达情况。结果COX-2、VEGF与P-糖蛋白在胃癌组织中的表达均高于癌旁组织;COX-2与VEGF及P-糖蛋白在胃癌组织中的表达呈显著正相关。结论胃癌组织中COX-2与VEGF、P-糖蛋白处于过度表达状态且具有相关性,可能参与胃癌的发生、发展及癌细胞的多药耐药。

P-170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ及PCNA在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨耐药因子:P-170糖蛋白、谷胱甘肽硫转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶(TOPO)以及增殖细胞核抗原(PC-NA)在非小细胞癌(NSCLC)中的表达及意义。方法 1990年1月～1996年12月取76例术前未经化疗,术后经病理证实的NSCLC患者的病理组织蜡块,用常规免疫组化SP法,检测P-170糖蛋白、GST-π、TOPO及PCNA的表达。结果 P-170糖蛋白的阳性率、GST-π高表达率、TOPO的阴性率、PCNA的高表达率分别为53.7%(41/76)、77.6%(59/76)、30.3%(23/76)、76.3%(58/76)。而且P-170糖蛋白与GST-π的表达呈正相关(rs=0.281,P<0.05)。P-170糖蛋白、GST-π分别与PCNA呈负相关趋势(rs=-0.265,0.05<P<0.10;rs=-0.259,0.05<P<0.10)。PCNA高表达组较低表达组生存率差异显著(P<0.05)。PCNA和GST-π两组均高表达较两组均低表达生存率亦有显著差异(P=0.045)。结论 P-170糖蛋白、GST-π、TOPO在NSCLC中的异常表达,与其原发性耐药有关。检测三种耐药因子及PCNA有助于临床上制定更合理的化疗方案和更加准确地估计预后。

MFC方案术前化疗对胃癌组织中Pgp及TopoⅡ表达的影响

目的:探讨MFC方案术前化疗对胃癌组织中Pgp及TopoⅡ表达的影响。方法:应用免疫组化方法研究MFC方案术前化疗的胃癌患者组织中Pgp及TopoⅡ的表达情况,并与未化疗者进行比较。结果:Pgp表达率、TopoⅡ阳性率两者均无统计学差异P=0.082。CG临床Ⅲ～Ⅳ期Pgp表达高于NCG(x2=4.821,P=0.028)。肿瘤≥5cm及临床分期Ⅲ～Ⅳ期患者TopoⅡ阳性表达CG低于NCG。结论:MFC方案术前化疗可使胃癌组织中Pgp表达升高,TopoⅡ表达降低。但化疗与否对胃癌患者多数临床病理参数无显著影响,仅在临床Ⅲ～Ⅳ期患者中可能促使肿瘤获得耐药性的形成。

Labrasol对p-糖蛋白底物紫杉醇经肠黏膜透过性的影响

目的:观察低浓度表面活性剂Labrasol对p-糖蛋白(p-gp)底物紫杉醇经肠黏膜透过的增加作用。方法:使用体外扩散池法评价紫杉醇经肠黏膜经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数(Papp),并测定不同浓度Labrasol对紫杉醇和荧光素钠(CF)经肠黏膜透过性的影响。紫杉醇和CF在接受室中的浓度分别用HPLC法和荧光分光光度法测定。结果:紫杉醇经肠道黏膜的透过性存在部位差。另一方面,紫杉醇经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性。低浓度Labrasol可增强紫杉醇经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性。但试验浓度的Labrasol对CF的肠道转运没有影响。结论:低浓度的Labrasol可通过对p-gp功能的抑制而用于改善受p-gp介导药物紫杉醇的透过,有望提高紫杉醇的口服生物利用度。