DNA倍体定量分析结合P16蛋白在宫颈癌筛查中的意义

目的:探讨DNA定量分析结合P16蛋白免疫组化染色在宫颈筛查中的意义。方法:选取2020年3月~2021年3月淮安市肿瘤医院门诊及住院检查病例4334例为研究对象,对宫颈细胞学DNA定量分析提示异常者,在知情同意情况下,进行阴道镜下宫颈活检、组织学病理检查及P16蛋白染色检查,比较分析DNA倍体定量分析提示异常者与其组织学病理之间的关系,以及P16蛋白表达与病理组织学之间的关系,以评价衡量DNA定量分析结合P16染色在宫颈癌筛查中的意义。结果:4334例中369例查出倍体异常,369例倍体异常中202例建议阴道镜活检,发现150例为CIN1级以上,同时对活检202例进行P16蛋白染色发现随着病变级别增高,P16表达百分比也随之上升,通过χ2检验发现P16蛋白在宫颈上皮内瘤变中表达有明显统计学意义(P<0.05)。结论:DNA倍体定量分析在宫颈癌筛查中有一定意义,同时结合P16蛋白免疫组化染色及宫颈活检,对发现早期宫颈病变有意义。

阴道镜检查联合HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测筛查宫颈上皮内瘤变效果

目的:探讨宫颈病变筛查中阴道镜检查、人乳头瘤病毒L1(HPV L1)壳蛋白检测、多肿瘤抑制基因(MTS1,p16蛋白)检测和联合诊断在宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床应用效果。方法:收集2022年6月-2023年6月本院妇科门诊因疑存宫颈病变进行宫颈癌筛查的女性201例,均行HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测和阴道镜检查,以阴道镜下宫颈组织活检病理结果为诊断依据,对HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测、阴道镜检查及3项联合诊断的效果进行分析。结果:宫颈病理诊断无病变121例,病变80例(CIN1级54例、CIN2级25例、CIN3级1例)。阴道镜CIN检出率为53.7%,灵敏度81.3%,特异度64.5%,准确度为71.1%;HPV L1壳蛋白检测CIN检出率为55.2%,灵敏度73.8%,特异度为57.0%,精确度为63.7%。p16蛋白检测CIN检出率为53.7%,灵敏度83.8%,特异度66.1%,精确度73.1%。3项联合检测CIN检出率为64.2%,灵敏度97.5%,特异度57.9%,精确度74.6%。筛查灵敏度阴道镜、HPV L1壳蛋白、p16蛋白检测无差异(χ^(2)=2.667,P>0.05),但3项联合诊断的灵敏度高于各单独指标检测(χ^(2)=11.123、18.331、8.901,P<0.05),特异度3项联合诊断与单独指标无差异(χ^(2)=3.233,P>0.05)。结论:阴道镜检查联合HPV L1壳蛋白,p16蛋白检测筛查CIN的灵敏度可显著提高,可为临床提供有价值的诊断证据。

术前WLR及p16蛋白检测对阴茎癌患者生存情况的预测价值

目的评估术前白细胞与淋巴细胞比值(WLR)及p16蛋白表达检测对阴茎癌患者生存情况的预测价值。方法本研究为回顾性队列研究,选取2018年1月至2020年1月在咸阳市第一人民医院治疗的91例阴茎癌患者作为研究对象,所有患者均行阴茎部分切除术,术后对患者进行为期3年的随访,根据预后情况分为生存组(58例)和死亡组(33例)。生存组年龄(61.12±7.13)岁;死亡组年龄(60.88±7.22)岁。对比两组患者基线资料及术前影像学检查结果(肿瘤部位、肿瘤长径、神经侵犯、淋巴结转移、分化程度),测定血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1),并检测切除组织中p16蛋白表达情况,计算术前WLR、外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)。通过logistic回归分析评估患者生存情况的影响因素,并利用受试者操作特征曲线(ROC)评估WLR联合p16蛋白表达对阴茎癌患者术后死亡的预测价值。统计学方法采用t检验、χ^(2)检验。结果两组患者基线资料及肿瘤部位、肿瘤长径、分化程度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。死亡组神经侵犯、淋巴结转移及p16蛋白阳性表达占比均高于生存组[63.64%(21/33)比32.76%(19/58)、57.58%(19/33)比31.03%(18/58)、66.67%(22/33)比32.76%(19/58)],差异均有统计学意义(χ^(2)=8.140、6.141、9.769,均P<0.05)。死亡组患者术前WLR、NLR、PLR、MLR及VEGF、TRAPl水平均高于生存组[(5.62±0.91)比(4.11±0.75)、(5.27±0.88)比(3.91±0.71)、(181.06±25.13)比(145.32±20.64)、(0.58±0.20)比(0.32±0.12)、(539.03±52.48)ng/L比(442.18±47.36)ng/L、(58.01±6.63)ng/L比(45.25±5.82)ng/L],差异均有统计学意义(t=8.537、8.044、7.331、7.761、9.016、9.556,均P<0.05)。logistic回归分析显示,阴茎癌患者术前肿瘤神经侵犯和淋巴结转移情况,以及p16蛋白、VEGF、TRAPl、WLR、NLR、PLR、MLR均是影响其预后的重要因素(均P<0.05)。ROC显示,WLR联合p16蛋白表达对患者死亡的预测准确度为0.943(0.896~0.990)。结论术前检测WLR及p16蛋白表达有助于评估阴茎癌患者术后生存情况。

液基薄层细胞学检查联合人乳头状瘤病毒、P16蛋白免疫组化染色检测在宫颈癌筛查中的价值

目的分析液基薄层细胞学检查(TCT)联合人乳头状瘤病毒(HPV)、P16蛋白免疫组化染色检测在宫颈癌筛查中的价值。方法选取2021年7月至2023年5月于京山市人民医院接受宫颈癌筛查的180例女性,进行TCT、HPV、P16蛋白检测,以病理结果为金标准,分析不同检测方法的诊断效能。结果病理结果显示,180例中,阳性50例,阴性130例;TCT+HPV+P16检测的灵敏度、阳性预测值高于TCT+HPV检测、P16检测(P<0.05)。结论TCT联合HPV、P16蛋白检测在宫颈癌筛查中的价值较高,能提升灵敏度、阳性预测值。

miR-4645-5p通过靶向MUC16调控食管癌细胞的恶性生物学行为

目的 探讨微小RNA(miR)-4645-5p靶向黏蛋白16(MUC16)对食管癌细胞增殖、侵袭、上皮间充质转化的影响及其分子机制。方法 通过TCGA数据库在线分析miR-4645-5p在食管癌组织中的表达。利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)分析食管癌细胞系中miR-4645-5p的表达水平。通过脂质体转染技术将miR-4645-5p模拟物和阴性对照模拟物转染KYSE-30细胞,作为miR-4645-5p组和对照模拟物组。分别采用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分析转染KYSE-30细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力。通过生物信息学网站预测miR-4645-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-4645-5p对靶基因的结合。采用qPCR检测MUC16 mRNA的表达水平,Western blotting检测MUC16、转录因子-1(ZEB-1)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达水平。结果 食管癌组织中miR-4645-5p表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。与HET-1A比较,食管癌细胞系中miR-4645-5p呈低表达(P<0.05)。miR-4645-5p过表达后,KYSE-30细胞增殖能力降低(P<0.05),迁移能力降低(P<0.01),侵袭能力明显降低(P<0.01)。miR-4645-5p靶向负调控MUC16 mRNA的表达(P<0.01)。miR-4645-5p过表达后,MUC16、ZEB-1、α-SMA蛋白表达均下调,ZO-1、Claudin-1蛋白表达均上调。结论 miR-4645-5p通过靶向MUC16调控食管癌KYSE-30细胞的恶性生物学行为。

温石棉对内皮细胞Wnt5a、p16和p21表达的影响

目的探讨温石棉对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响。方法实验组以50、100、200 mg/L温石棉纤维液刺激HUVECs 24、48、72 h,对照组仅加RPMI 1640培养基培养细胞,观察细胞形态变化,β-半乳糖苷酶法分析细胞衰老情况,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率。采用实时荧光定量PCR法检测细胞中Wnt5a、p16和p21 mRNA的表达情况。结果实验组HUVECs多呈梭形,部分呈圆形或不规则形,出现裸核及空泡现象,可见死亡细胞。随温石棉质量浓度及暴露时间的增加,细胞活性逐渐降低,衰老细胞逐渐增多。100 mg/L温石棉处理HUVECs 24 h时,细胞生长较活跃。与对照组相比,实验组Wnt5a、p16和p21 mRNA表达水平均增高(P<0.05)。结论温石棉可促进HUVECs衰老,Wnt5a、p16和p21参与此过程。

P53、P16及Ki-67与早期食管癌患者ESD术后复发的关系分析

目的 分析研究抑制蛋白基因P53(P53)、抑制蛋白基因P16(P16)及细胞增殖核抗原Ki-67(Ki-67)与早期食管癌患者内镜黏膜下剥离术(ESD)术后复发的关系。方法 选取2019年1月至2023年1月三门峡市中心医院收治80例的早期食管癌患者作为研究对象,均进行ESD治疗。比较所有患者癌组织与癌旁组织(距肿瘤边缘>3 cm,镜下未见肿瘤组织或不典型增生组织)P53、P16、Ki-67蛋白表达。ESD术后对患者随访1年,根据有无术后复发食管癌,将患者分为复发组(n=20)与无复发组(n=60)。比较两组癌组织P53、P16、Ki-67蛋白表达。采用多因素Logistic回归分析早期食管癌患者ESD术后复发的影响因素,并绘制ROC曲线分析P53、P16、Ki-67蛋白表达与早期食管癌患者ESD术后复发。结果 与癌旁组织相比,癌组织P53、Ki-67蛋白表达升高,P16蛋白表达降低(t=9.276、13.987、10.595,均P<0.05);复发组的癌组织P53、Ki-67蛋白表达均高于无复发组,P16蛋白表达低于无复发组(t=5.086、4.648、5.139,均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,肿瘤低分化(OR=1.870)、肿瘤浸润侵犯黏膜下层(OR=1.808)、有淋巴结转移(OR=2.089)、P53蛋白高表达(OR=2.046)、P16蛋白低表达(OR=1.988)及Ki-67蛋白高表达(OR=1.761)均是早期食管癌患者ESD术后复发的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,P53、P16、Ki-67蛋白表达及联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.803、0.828、0.834、0.942,联合检测优于单一检测(P<0.05)。结论 P53、P16及Ki-67蛋白与早期食管癌患者ESD术后复发情况相关,可以作为辅助预测的相关诊断指标。

宫颈病变筛查中p16/mcm2、HPV检测的临床价值

目的:检测宫颈病变中宫颈脱落细胞p16/微小染色体维持蛋白(mcm2)的表达,探讨p16/mcm2与人乳头瘤病毒(HPV)检测在宫颈病变筛查的临床价值。方法:选取2023年5-10月在徐州市肿瘤医院妇科门诊或病房行宫颈癌筛查并符合入组标准的1045例女性,均行p16/mcm2免疫细胞化学双染检测及HPV检测,对p16/mcm2双染确诊为不明意义的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)及以上病变或HPV16/18阳性者行阴道镜检查、活检宫颈组织送病理检查。结果:p16/mcm2阳性率在HPV阴性组、低危HPV组、其他12种HPV阳性组和HPV16/18阳性组依次递增(P=0.000);p16/mcm2阳性表达在其他12种HPV阳性组和HPV16/18阳性组均高于HPV阴性组[OR=4.28(95%CI 2.02~9.04)、OR=76.64(95%CI 36.05~162.93)],在HPV16/18阳性组均高于其他12种HPV阳性组,且随宫颈病变程度加重p16/mcm2阳性表达增高(均P<0.05)。p16/mcm2检测筛查子宫颈上皮内瘤病变CIN1级、CIN2级和CIN3级的灵敏度和阳性预测值(85.0%、89.1%、94.3%,94.1%、97.0%、97.0%)均高于HPV。结论:p16/mcm2双染和HPV存在相关性,两者均可用于宫颈病变筛查;与HPV检测相比,p16/mcm2双染有较高灵敏度和阳性预测,p16/mcm2双染联合HPV检测有望成为有较好应用前景的宫颈癌筛查方案。

p16免疫组织化学作为CNS肿瘤中CDKN2A纯合性缺失的一种筛查工具

2021年《世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分类》强调了分子病理参数对于整合诊断的重要意义。在IDH突变的胶质瘤、幕上室管膜瘤、脑膜瘤和MPNST中,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2a(CDKN2A)的纯合性缺失是一个预后不良的因子。在这项研究中,作者研究了p16蛋白免疫组织化学作为一种快速的、高效费比的CDKN2A纯合性缺失筛查工具的价值。

美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p16^(INK4a)诱导SKOV3细胞衰老

目的探讨美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p16^(INK4a)蛋白诱导卵巢癌细胞SKOV3衰老的作用。方法通过CCK-8法测定不同浓度和时间美洲大蠊提取物CⅡ-3对SKOV3细胞增殖的作用;运用细胞集落形成实验测定美洲大蠊提取物CⅡ-3对SKOV3细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞周期的变化;衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞衰老变化;Western Blotting检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达的变化。结果美洲大蠊提取物CⅡ-3可有效抑制SKOV3细胞增殖,最佳作用浓度为80μg/mL,作用时间为48 h;CⅡ-3作用后,SKOV3细胞集落形成能力下降;阻滞于G_(0)/G_(1)期细胞比例增高,S期细胞比例减少;SA-β-Gal阳性细胞百分比增加;衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达上调。结论美洲大蠊提取物CⅡ-3通过调控衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达诱导SKOV3细胞衰老。

IDH突变型低级别星形细胞瘤p16蛋白表达与CDKN2A基因缺失状况的相关性

目的:以异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)突变型星形细胞瘤为研究对象,探讨利用p16蛋白免疫标记替代CDKN2A基因纯合性缺失检测的可行性。方法:收集我院既往组织学诊断为低级别星形细胞瘤(WHO 2级)且伴有IDH突变的胶质瘤42例,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中p16蛋白表达,分别依据其胞核或胞浆阳性表达率将肿瘤分为阴性(阳性率0%)、低表达(0%<阳性率≤10%)、中表达(10%<阳性率≤25%)、高表达(25%<阳性率≤50%)及过表达(阳性率>50%)5个组别;利用FISH方法检测肿瘤CDKN2A基因纯合性缺失与杂合性缺失状况;采用Fisher精确检验评价p16蛋白表达水平与CDKN2A基因缺失间的相关性。结果:胞核p16蛋白表达水平与CDKN2A基因纯合性缺失间存在显著相关(P<0.001)。阴性组(4/4,100%)均检测到CDKN2A纯合性缺失,中、高及过表达组(22/22,100%)均未检测到CDKN2A纯合性缺失。低表达组与CDKN2A纯合性缺失间缺乏明确对应关系,其中3例(3/16,18.75%)检出纯合性缺失,13例(13/16,81.25%)未检出纯合性缺失。胞核p16蛋白表达水平与CDKN2A杂合性缺失无相关(P=0.228)。胞质p16蛋白表达水平与CDKN2A纯合性(P=0.086)或杂合性(P=0.884)缺失均无相关。结论:IDH突变且组织学呈低级别的星形细胞瘤中,胞核p16蛋白阴性(阳性率0%)或中等及以上表达(阳性率>10%)分别提示存在或不存在CDKN2A纯合性缺失。在上述区间p16蛋白与CDKN2A纯合性缺失间存在良好匹配关系,可用于协助病理诊断与分级。胞核p16蛋白低表达(0%<表达率≤10%)则不能预测CDKN2A纯合性缺失状态,此时仍需进行CDKN2A基因层面检测。

p16^(INK4a)在细胞衰老调控中的作用

细胞衰老的原因通常包括外在和内在两个方面。外源性因素主要是细胞外基质的改变、炎症反应和衰老相关分泌表型的表达。内源性因素通常源于调节细胞周期基因的影响,如肿瘤抑制基因。p16^(INK4a)是一种肿瘤抑制因子和细胞周期调节因子,与细胞衰老密切相关。在衰老细胞和与年龄相关的病理过程中,p16^(INK4a)表达显著增加,p16^(INK4a)被认为是检测细胞衰老的标志物。p16^(INK4a)高表达是防止受损细胞继续分裂的保护机制,与细胞周期停滞相关,有助于防止癌症发展。因此,p16^(INK4a)的表达调控在衰老细胞的积累、细胞周期的控制和肿瘤抑制中发挥重要作用。

P16蛋白检测联合HR-HPV、TCT在宫颈癌前病变及宫颈癌诊断中的价值

目的:探讨P16蛋白检测联合高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)、液基薄层细胞学检测(thinprep cytologic test,TCT)在宫颈癌前病变及宫颈癌诊断中的临床价值。方法:选取2019年9月至2021年8月在承德市中心医院妇科门诊行宫颈癌筛查的390例患者为研究对象。所有患者均行P16蛋白、HRHPV及TCT检测。任一结果阳性者或高度怀疑宫颈恶性病变者行阴道镜下宫颈活检组织病理检查。探讨P16蛋白、HR-HPV、TCT检测及两两联合检测在宫颈癌中的诊断,并绘制诊断的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线。结果:390例患者中,HR-HPV阳性者101例,阳性率25.90%(101/390);TCT阳性者64例,阳性率16.41%(64/390);P16阳性者57例,阳性率14.62%(57/390)。任一阳性者133例,共召回100例行阴道镜活检,组织病理学结果为:正常或炎症62例,宫颈低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)19例,高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)14例,宫颈癌5例;组织病理学检测阳性19例,阴性81例。在组织病理学检测阳性中,HR-HPV阳性18例,TCT检测阳性14例,P16阳性者17例。HR-HPV、TCT及P16诊断HSIL及宫颈癌的敏感度分别为94.74%、73.68%、89.47%,差异无统计学意义(P>0.05);P16诊断HSIL及宫颈癌的特异度高于TCT与HR-HPV检测,差异有统计学意义(P<0.05)。在两两联合检测中,HR-HPV+P16诊断HSIL及宫颈癌的敏感度最高,但3种联合检测方式的敏感度比较无统计学意义(P>0.05);TCT+P16诊断HSIL及宫颈癌的特异度为86.39%,高于HR-HPV+TCT、HR-HPV+P16(P<0.05)检测。HR-HPV、TCT、P16、HR-HPV+TCT、TCT+P16及HR-HPV+P16诊断宫颈癌前病变及宫颈癌的AUC分别为0.880、0.814、0.915、0.858、0.879、0.902。结论:P16的表达与宫颈病变进展具有正相关性,其可提高HSIL及宫颈癌的诊断效能,降低误诊率。P16+TCT检测相较于HR-HPV+TCT在不损失敏感度的前提下,有更高的特异度。

p16蛋白与HPV mRNA检测在口咽部鳞状细胞癌诊断中的意义

目的探讨p16蛋白与HPV mRNA检测在口咽部鳞状细胞癌(oropharyngeal squamous cell carcinoma,OPSCC)诊断中的意义。方法收集2019年11月~2021年10月首都医科大学附属北京同仁医院诊治的105例OPSCC,采用免疫组化EnVision两步法检测p16、Ki-67、p53蛋白表达,并检测其中61例HPV16/18 mRNA的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果105例OPSCC中p16蛋白阳性58例(55.24%),阴性47例(44.76%);p16蛋白阳性患者比阴性患者的吸烟、饮酒史比例低(26/58 vs 37/47,16/58 vs 31/47),以扁桃体为常见发病部位(51/58 vs 18/47),易出现淋巴结转移(43/58 vs 23/47),Ki-67增殖指数较高(73.10%vs 47.45%),p53多为野生型(57/58 vs 16/47),形态学特征以非角化型鳞状细胞癌为主(29/58 vs 15/47),差异均有统计学意义(P<0.05)。61例HPV mRNA检测结果与p16蛋白表达完全一致(Kappa=1)。43例p16蛋白阳性OPSCC患者获得随访,3例复发/转移,1例肺转移后死亡;39例p16蛋白阴性OPSCC患者获得随访,8例复发/转移,7例死亡,其中2例为复发后死亡。结论HPV感染导致OPSCC发病率较高,以扁桃体为常见发病部位,p16蛋白表达与HPV mRNA表达具有较好的一致性,临床工作中可使用p16免疫组化检测代替HPV分子检测,进行HPV的感染筛查及辅助诊断。

LncRNA FGD5-AS1靶向miR-16-5p/CREB1轴减轻缺氧/复氧诱导大鼠H9c2心肌细胞凋亡的机制研究

目的:探究长链非编码RNA(LncRNA)FGD5反义RNA1(FGD5-AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的影响以及对微小RNA-16-5p/cAMP响应元件结合蛋白1(miR-16-5p/CREB1)轴的调节机制。方法:将H9c2细胞分为对照组和H/R组(缺氧6 h,复氧6 h),然后将H/R组细胞分别进行转染,分为oe-NC组、oe-FGD5-AS1组、oe-FGD5-AS1+miR-16-5p mimic-NC组、oe-FGD5-AS1+miR-16-5p mimic组。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测细胞中FGD5-AS1、miR-16-5p、CREB1的mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定裂解凋亡蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;CCK-8法测定细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶活性实验分别验证miR-16-5p和FGD5-AS1、CREB1的靶向关系。结果:与对照组比较,H/R组细胞中FGD5-AS1和CREB1的mRNA水平、细胞存活率、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),miR-16-5p mRNA水平、细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与H/R组和oe-NC组比较,转染过表达FGD5-AS1基因的H9c2细胞中FGD5-AS1和CREB1的mRNA水平、细胞存活率、Bcl-2蛋白表达增高,凋亡率及miR-16-5p、cleaved Caspase-3、Bax水平下降(P<0.05)。双荧光素酶活性实验验证了FGD5-AS1、CREB1均与miR-16-5p有结合位点。结论:过表达FGD5-AS1可能通过靶向下调miR-16-5p表达,上调CREB1表达,抑制H/R诱导的H9c2心肌细胞凋亡。

液基脱落细胞学检查联合人乳头状瘤病毒、P16蛋白免疫组化染色检测在宫颈癌筛查中的价值分析

目的:分析液基脱落细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)联合人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)、P16蛋白免疫组化染色检测在宫颈癌筛查中的价值。方法:选取2018年8月—2021年1月三明市中西医结合医院进行TCT和HPV检测的424例患者作为研究对象,将TCT和HPV任意一项检测阳性的138例患者进行P16蛋白免疫组化染色、阴道镜下宫颈组织活检。观察TCT、HPV及P16蛋白单项及联合诊断结果,计算各指标单项及联合诊断敏感度、特异度及准确度。结果:138例患者中病理诊断结果慢性炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC分别为63例、42例、23例、9例、1例;TCT诊断敏感度、特异度、准确度分别为76.00%(57/75)、57.14%(36/63)、67.39%(93/138);HPV诊断阴性、阳性分别为53例、85例;HPV诊断敏感度、特异度、准确度分别为77.33%(58/75)、57.14%(36/63)、68.12%(94/138);P16蛋白诊断阴性、阳性分别为69例、69例,P16蛋白诊断敏感度、特异度、准确度分别为66.67%(50/75)、69.84%(44/63)、68.12%(94/138);TCT联合HPV、P16蛋白诊断敏感度、特异度、准确度分别为90.67%(68/75)、87.30%(55/63)、89.13%(123/138);TCT联合HPV、P16蛋白诊断敏感度、特异度、准确度均高于各单项指标诊断结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TCT联合HPV、P16蛋白免疫组化染色检测是筛查宫颈癌较为准确的方法,能够提高宫颈癌检出率,对患者是否需要行阴道镜下活检具有指导意义。

非小细胞肺癌p14^(ARF) p16^(INK4a)蛋白共表达及其临床意义

目的:探讨p14ARF、p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达、意义及相关关系。方法:采用免疫组织化学SP方法对103例NSCLC组织中p14ARF和p16INK4a蛋白的表达进行检测。结果:103例NSCLC组织中p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性率分别为70.87%和43.69%,差异有显著性(P<0.01)。其中35例p14ARF、p16INK4a蛋白表达共阴性,共阴性率达33.98%(35/103),鳞癌中共阴性率明显高于其它组织类型(P<0.01)。p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性相互间无显著相关性(P>0.05)。临床Ⅲ+Ⅳ期病例两种蛋白表达阴性率明显高于临床Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05)。结论:NSCLC组织p14ARF、p16INK4a蛋白表达共阴性具有明显的组织学类型特异性,两种蛋白阴性表达是各自独立的事件。

血清INF-ε、P16、CRP与宫颈病变HPV感染的相关性

探讨血清INF-ε、P16、CRP水平与宫颈病变HPV感染的相关性。方法 选取2019年1月至2020年1月我院收治的女性宫颈病变患者202例为研究对象。根据HPV是否感染以及感染类型,分为高危型88例、低危型72例和未感染的对照组42例。分析HPV感染类型与血清INF-ε、P16、CRP水平的相关性,并采用受试者工作曲线分析血清INF-ε、P16、CRP在HPV感染类型预测中的效能。结果 HPV感染类型与血清INF-ε呈负相关(P<0.05),与P16阳性率、CRP水平呈正相关(P<0.05)。血清INF-ε、P16、CRP表达单一预测和三者联合预测宫颈病变HPV感染类型的AUC分别是0.785、0.718、0.779和0.819,联合预测AUC最大。结论 血清INF-ε、P16、CRP与宫颈病变HPV感染有关,联合预测可提高HPV感染类型预测效能,有利于临床上宫颈病变诊疗工作开展。

非小细胞肺癌中p14^(ARF)与p16^(INK4a)和p53蛋白表达及其相互关系的研究

目的:检测p14ARF、p16INK4a和p53蛋白在非小细胞肺癌中表达情况,对它们在非小细胞肺癌发生过程中的作用及其相互关系进行初步探讨。方法:应用免疫组化方法检测了40例非小细胞肺癌组织标本的p14ARF、p16INK4a和p53基因的表达水平。结果:非小细胞肺癌组织中p14ARF、p16INK4a和p53蛋白总阳性率分别是72.5%,50.0%和52.5%,与癌旁正常组织(分别是95.0%,92.5%,2.5%)有显著性差异(P<0.01);非小细胞肺癌中p14ARF和p53蛋白表达异常与肿瘤分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移情况无显著相关性;p16INK4a蛋白表达水平与组织分化程度相关(P<0.05),但与肿瘤分期、组织类型、淋巴结转移情况无关;p14ARF和p53蛋白在组织中表达呈负相关,r2=-0.475(P<0.01),而p14ARF和p16INK4a蛋白表达无关;p14ARF蛋白在Ⅰ期病例中强阳性(+++)占阳性比例为41.7%,在Ⅲ期中强阳性(+++)比例为10.0%。结论:p14ARF、p16INK4a和p53三个基因在NSCLC发生过程中起重要作用,特别在肿瘤早期可能起到更为重要的作用;p14ARF和p53基因在同一调节通路上;p14ARF、p16INK4a和p53蛋白可以作为非小细胞肺癌早期生物学检测指标。

乙型肝炎病毒X蛋白和p14^ARF依赖性、非依赖性途径对肝癌细胞生长的影响

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)是否通过p14ARF途径影响肝癌细胞生长及其作用机制。方法将HBx及p14ARF单转染及共转染含野生型p53但不表达p14ARF的肝癌细胞株HepG2。实验分为pcDNA3、pcDNA3HBx、pcDNA3p14ARF、pcDNA3HBx+pcDNA3p14ARF4组。通过流式细胞仪比较各转染组HepG2细胞凋亡、细胞周期的变化情况。用含p53结合位点p21WAF1启动子荧光素酶活性检测和Western blotting观察各转染组细胞p14ARF、MDM2、p53、p21WAF1蛋白表达水平的变化。结果HBx及p14ARF单转染及共转染含野生型p53但无p14ARF表达的HepG2细胞,单转染HBx及p14ARF组其细胞凋亡率(14.11%、13.72%)、G0/G1期阻滞细胞数(63.62%、61.75%)、p21WAF1启动子荧光素酶活性(1.25±0.05、1.09±0.06)及p53、p21WAF1蛋白的表达较对照组(10.66%、57.42%、0.77±0.03)明显升高,而共转染组与单转染p14ARF组相比其p14ARF蛋白表达及上述各项指标(18.61%、66.74%、3.53±0.43)又进一步升高。结论HBx通过依赖及非依赖p14ARF途径诱导p53表达从而导致激活p21WAF1,进而引起细胞周期G0/G1期的阻滞及细胞凋亡的增加。