P16^(INK4a)和P14^(ARF)蛋白在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨P16INK4a和P14ARF蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学EnVision法检测71例喉鳞状细胞癌组织中P16INK4a和P14ARF蛋白的表达。结果 71例喉鳞状细胞癌标本中,35例(49.3%)P16INK4a蛋白阴性,29例(40.8%)P14ARF蛋白阴性,15例(21.1%)P16INK4a和P14ARF蛋白表达均阴性。P16INK4a和P14ARF蛋白阴性间无相关性(P>0.05)。P16INK4a和P14ARF蛋白阴性率均与患者性别、年龄及临床分期无相关性(P>0.05)。P14ARF蛋白在I～II期病例中强阳性占阳性比例为41.7%,在III～IV期中强阳性比例为11.1%。结论 P16INK4a和P14ARF在喉鳞状细胞癌发生过程中起重要作用,两种蛋白的失活是各自独立的事件。P14ARF蛋白的缺失发生在喉鳞状细胞癌早期。

MDM2、P53与P14ARF在结肠肿瘤中的表达及意义

目的:探讨MDM2、P53和P14ARF在人结肠癌组织中的表达及其意义。 方法:用免疫组织化学方法检测36例癌旁正常结肠组织,28例结肠腺瘤及42例结肠癌中三者的表达及其相互关系。 结果:MDM2、P53、P14ARF在癌旁正常结肠组织,结肠腺瘤,结肠癌中的阳性表达率分别为0,0,21.4％;0.25％,67％和100％,82.1％,80.9％。P53和MDM2在结肠癌中的表达率均明显高于癌旁正常结肠组织(P<0.05),P14ARF在结肠腺瘤和结肠癌中的表达率均明显低于癌旁正常结肠组织(P<0.05)。P53、MDM2和P14ARF在不同分化程度结肠癌中的表达率分别为44.4％,68.0％,87.5％;11.1％,24.0％,25.0％和88.9％、92％、37.5％。P53和MDM2在不同分化程度结肠癌中的表达无明显差异(P>0.05),而P14ARF在低分化结肠癌中的表达明显低于高分化和中等分化的结肠癌(P<0.05)。三者的相关分析提示P53和MDM2之间存在正相关(r=0.8805),P53和P14ARF之间为负相关(r=-0.8169),MDM2和P14ARF之间亦存在负相关,但相关不显著(r=-0.5475)。 结论:P53、MDM2和P14ARF在人结肠癌中的表达异常可能与结肠癌的发生发展有关,联合检测三者的表达可作为早期诊断结肠癌的重要指标。

肝细胞癌组织STAT3和p14^(ARF)蛋白的表达和相关性研究

目的探讨STAT3和p14ARF蛋白在人肝细胞癌组织中的表达及相关性,分析其与肝细胞癌转移复发的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测60例肝细胞癌组织和癌旁组织中STAT3和p14ARF蛋白的表达情况。结果 STAT3及p14ARF蛋白在60例肝细胞癌及癌旁组织中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。STAT3的表达与脉管癌栓、术后复发、肿瘤直径、肿瘤细胞分化密切相关(P<0.05);p14ARF蛋白的表达与肿瘤分化程度密切相关(P<0.05)。STAT3和p14ARF蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.325,P=0.011)。结论 STAT3和p14ARF蛋白在肝细胞癌的发生及发展中起着重要作用。

肺癌p14ARF和p16INK4a基因协同表达缺失及其意义

目的 :研究抑癌基因位点INK4a ARF在肺肿瘤细胞中的表达状况 ,揭示p14ARF和p16INK4a协同表达缺失与肺癌发生发展的相关性。方法 :用RT PCR和Westernblot对 6株肺癌细胞 (SPC A 1,Calu 1,H44 6 ,SH77,A5 49,H46 0 )的INK4a ARF基因位点在mRNA、蛋白质水平上进行检测 ,对PCR产物进行纯化和测序分析。结果 :6株肺癌细胞中 ,有 3株细胞 (H46 0 ,Calu 1,A5 49)的p16INK4a基因表达缺失 ,其中 ,Calu 1表达正常p14ARF的mRNA ,而在H46 0和H5 49这两株非小细胞肺癌中 ,p14ARF和p16INK4a发生协同表达缺失。结论 :p14ARF基因与p16INK4a一样 ,是肺肿瘤细胞中的失活靶点之一。揭示了p14ARF缺失导致p5

P14ARF和E2F1在结直肠肿瘤中的表达及意义

目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为手术切缘组织、结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织,共6组的P14ARF、E2F1蛋白表达情况,采用半定量和图像分析定量测定含量。结果:①结直肠正常黏膜组织、腺瘤组织、癌组织P14ARF、E2F1的表达阳性率逐渐减少,差异存在统计学意义(P<0.05)。②P14ARF、E2F1在伴有淋巴结转移、肝转移的癌组织内表达阳性率与不伴转移的癌组织之间差异无统计学意义(P>0.05)。③P14ARF、E2F1蛋白表达在不同临床病理特征的关系之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①P14ARF、E2F1具有抑制癌发生作用,蛋白异常仅是结直肠癌癌变早期事件,与淋巴结、远处器官转移等侵袭活动无关,与临床病理特征无关。②P14ARF、E2F1相互协同抑制细胞生长和诱导凋亡,因而可以作为治疗结直肠癌的新靶点。

MDM2与P14ARF在结肠肿瘤中的表达及意义

目的 探讨MDM2和P14ARF(alternativereadingframe)在人结肠癌组织中的表达及其意义。方法 用免疫组织化学方法检测 3 6例癌旁正常结肠组织 ,2 8例结肠腺瘤及 42例结肠癌中二者的表达及其与组织分化程度的关系。结果 MDM2、P14ARF在癌旁正常结肠组织 ,结肠腺瘤 ,结肠腺癌中的阳性表达率分别为 0、0、2 1.4%和 10 0 %、82 .14 %、80 .95 %。MDM2在结肠腺癌中的表达率明显高于癌旁正常结肠组织及腺瘤组织 (P <0 .0 5 ) ,P14ARF在结肠腺瘤和结肠腺癌中的表达率均明显低于癌旁正常结肠组织 (P<0 .0 5 )。MDM2和P14ARF在不同分化程度结肠癌中的表达率分别为 11.1% ,2 4.0 % ,2 5 .0 %和 88.9%、92 .0 %、3 7.5 %。MDM2在不同分化程度结肠癌中的表达无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,而P14ARF在低分化结肠癌中的表达明显低于高分化和中等分化的结肠癌 (P <0 .0 5 )。

P14^(ARF)、P16^(INK4a)基因表达与高危型HPV感染的关系

目的探讨P14ARF、P16INK4a的基因表达与高危型人乳头瘤病毒DNA(HPV DNA)感染的关系。方法采用免疫组化EnVision法,对130例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变60例、20例正常宫颈组织进行P16INK4a、P14ARF蛋白基因检测,并采用原位杂交法检测130例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变60例、20例正常宫颈组织中的HPV DNA。结果宫颈鳞癌组中P16INK4a、P14ARF蛋白表达率分别为100.0%(130/130)和96.9%(126/130);在60例宫颈上皮内瘤变组中其表达率分别为85.0%(51/60)、81.7%(49/60);在20例正常宫颈组中其表达率分别为10.0%(2/20)、15.0%(3/20),宫颈鳞癌组显著高于正常对照组(P<0.01);正常宫颈组与宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组P16INK4a和P14ARF的表达呈显著差异(P<0.05)。HPV16/18在130例宫颈鳞癌中86例(66.2%)表达阳性;在宫颈上皮内瘤变中39例(65.0%)表达阳性;P16INK4a、P14ARF阳性率HPV DNA阳性宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组与HPV DNA阴性宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组比较无显著差异(P>0.05)。结论P16INK4a、P14ARF蛋白在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组织中呈高表达,有较高的特异性和敏感性,可作为宫颈癌前病变及宫颈癌的诊断指标。

p16^(INK4a)/p14^(ARF)基因在细胞衰老和肿瘤抑制中的作用研究进展

细胞衰老发生后细胞在形态和生化成分都发生改变,进而发生生理性功能障碍,最终进入凋亡和死亡程序。细胞衰老是生命体在细胞水平防止永生化和恶变、预防肿瘤发生的一种机制。细胞衰老由多种原因引起,近年来的研究发现,p16INK4a-pRb(视网膜母细胞瘤抗癌蛋白)和p14ARF-p53这2条途径的活化与细胞衰老的启动和调节过程密切相关,对细胞衰老的信号传导通路及其调节因子等方面的深入研究,可以进一步认识细胞增生、衰老进程,以及防治肿瘤的规律,并为衰老相关疾病的治疗提示研究方向。

非小细胞肺癌中p14^(ARF)与p16^(INK4a)和p53蛋白表达及其相互关系的研究

目的:检测p14ARF、p16INK4a和p53蛋白在非小细胞肺癌中表达情况,对它们在非小细胞肺癌发生过程中的作用及其相互关系进行初步探讨。方法:应用免疫组化方法检测了40例非小细胞肺癌组织标本的p14ARF、p16INK4a和p53基因的表达水平。结果:非小细胞肺癌组织中p14ARF、p16INK4a和p53蛋白总阳性率分别是72.5%,50.0%和52.5%,与癌旁正常组织(分别是95.0%,92.5%,2.5%)有显著性差异(P<0.01);非小细胞肺癌中p14ARF和p53蛋白表达异常与肿瘤分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移情况无显著相关性;p16INK4a蛋白表达水平与组织分化程度相关(P<0.05),但与肿瘤分期、组织类型、淋巴结转移情况无关;p14ARF和p53蛋白在组织中表达呈负相关,r2=-0.475(P<0.01),而p14ARF和p16INK4a蛋白表达无关;p14ARF蛋白在Ⅰ期病例中强阳性(+++)占阳性比例为41.7%,在Ⅲ期中强阳性(+++)比例为10.0%。结论:p14ARF、p16INK4a和p53三个基因在NSCLC发生过程中起重要作用,特别在肿瘤早期可能起到更为重要的作用;p14ARF和p53基因在同一调节通路上;p14ARF、p16INK4a和p53蛋白可以作为非小细胞肺癌早期生物学检测指标。

胃癌组织Pokemon和p14^(ARF)表达率及其在临床生物学行为中的意义

目的探讨胃癌组织中Pokemon、p14^(ARF)蛋白表达率及其与临床生物学行为的关系。方法取手术切除胃癌组织标本50例,正常胃黏膜组织标本20例,用免疫组织化学方法检测胃癌组织、正常胃黏膜组织Pokemon和p14^(ARF)蛋白的表达,并且分析二者表达情况与胃癌患者性别、年龄、肿瘤部位、瘤体大小、大体分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期等临床生物学特征的关系。结果①在胃癌组织和正常胃黏膜组织中Pokemon和p14^(ARF)均表达于细胞核,在阳性染色的细胞核中呈现棕黄色颗粒。Pokemon蛋白表达率在胃癌组织中为78%,在正常胃黏膜组织中为45%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。p14^(ARF)蛋白表达率在胃癌组织中为42%,在正常胃黏膜组织为90%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。②胃癌组织中Pokemon蛋白表达率在有淋巴结转移组为87.5%,在无淋巴结转移组为40%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。随着肿瘤增大、浸润程度加深及临床分期升高,胃癌组织中Pokemon蛋白表达有升高趋势。③胃癌组织中p14^(ARF)蛋白表达率在有淋巴结转移组为37.5%,在无淋巴结转移组为80%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。随着肿瘤分化程度的降低、浸润程度的加深及临床分期的升高,胃癌组织中p14^(ARF)蛋白表达有降低的趋势。④胃癌组织中,Pokemon与p14^(ARF)蛋白表达呈现负相关(r=-0.280,P=0.049)。结论胃癌组织Pokemon高表达和p14^(ARF)低表达可反映胃癌的发生发展、侵袭及转移等临床生物学行为的程度。

p14^(ARF) mRNA及其蛋白在肺鳞癌组织中的表达及意义

目的检测肺鳞癌组织中p14ARF mRNA及其蛋白的表达,探讨此因子在肺鳞癌发生和发展中的作用及临床应用价值。方法采用原位杂交方法检测56例肺鳞癌和13例癌旁鳞化及炎症肺组织(对照组)中p14ARF mRNA的表达,同时采用免疫组化方法检测相应标本中p14ARF蛋白的表达。结果在肺鳞癌和对照组中p14ARF mRNA的阳性表达率分别为44.6%和84.6%,两者比较差异有统计学意义(χ2=6.756,P=0.009)。p14ARF蛋白表达的阳性率分别为41.1%和76.9%,肺鳞癌组远低于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.435,P=0.020)。p14ARF mRNA和蛋白在肺鳞癌组织中的阳性表达具有一致性(rs=0.930,P<0.05),并且都随组织分化程度的降低而降低,高分化鳞癌与低分化鳞癌之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论p14ARF蛋白的表达异常可能与肺鳞癌的发生、发展有关,p14ARF蛋白的检测可能为临床判断组织恶性程度提供参考。

p16^(INK4A)、p14^(ARF)和Ki-67在宫颈癌中的表达特点

目的:研究p16INK4A、p14ARF蛋白和Ki-67在宫颈癌患者中的表达水平,探讨它们之间的相互关系及临床意义。方法:采用免疫组化法对55例宫颈癌标本,40例宫颈上皮内瘤变(CIN)标本和45例正常宫颈标本进行p16INK4A、p14ARF和Ki-67检测。根据细胞核中出现棕褐色染色为阳性细胞的比例分为(-)、(+)、(++)、(+++)。对比各组的阳性表达。结果:随着CIN分期的增高和宫颈癌的发生,p16INK4A、Ki-67的表达有逐渐增高的趋势,宫颈癌患者(-)、(+)、(++)、(+++)的比例与正常宫颈标本比较,差异有统计学意义(P<0.01),CINⅢ期和宫颈癌患者(++)、(+++)的比例与CINⅠ期比较,差异有统计学意义(P<0.01);宫颈癌发生p14ARF的表达有逐渐增高的趋势,但在CIN期(+++)的表达增高不明显,宫颈癌患者p14ARF的表达于正常宫颈标本比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:p16INK4A、p14ARF和Ki-67与宫颈癌的形成及进展密切相关。

中国北方人群p14^(ARF)启动子甲基化与原发性肝癌的临床相关性

目的通过对中国北方人群原发性肝癌p14ARF启动子甲基化的分析,探讨p14ARF基因启动子甲基化与原发性肝癌的临床相关性。方法通过甲基化特异性PCR(MSP)方法检测111例原发性肝癌组织和22例癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化状况,然后与肿瘤种类、病因、病理以及肿瘤分期等临床数据进行关联。结果肝细胞癌组织及癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化频率分别为33.7%(29/86)和5.0%(1/20),二者差异有统计学意义(P=0.010)。肝细胞癌p14ARF基因的启动子甲基化频率在不同肿瘤分期显著相关(P=0.027),而与肿瘤细胞分化程度以及是否感染HBV无关,肝内胆管细胞癌p14ARF基因启动子甲基化频率在不同肿瘤分期、有无HBV感染以及不同肿瘤细胞分化程度之间的差异均无统计学意义。结论肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化可能是p14ARF基因失活并影响TP53功能的方式之一,p14ARF基因启动子甲基化可能与肝细胞癌发生发展相关。

非小细胞肺癌中p14ARF和mtp53蛋白表达与临床病理参数的关系

目的探讨p14ARF和mtp53蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达与临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测15例正常肺组织、18例癌旁组织和98例NSCLC组织标本中p14ARF和mtp53的表达。结果(1)在正常肺组织、癌旁组织和NSCLC中p14ARF蛋白的阳性表达率分别为93.3%、83.3%、55.1%,mtp53蛋白的阳性表达率分别为6.7%、44.4%、79.6%;p14ARF蛋白和mtp53蛋白在NSCLC中的表达与正常肺组织和癌旁组织比较均有显著性差异(P<0.01);p14ARF蛋白表达与临床病理分期、有无淋巴结转移、有无脉管浸润无关(P>0.05),而与病理分化程度有关(P<0.01);mtp53蛋白表达与临床病理分期、病理分化程度(P<0.01)及有无脉管浸润(P<0.05)有关,而与有无淋巴结转移无关(P>0.05);(2)在NSCLC中,pl4ARF与mtp53蛋白共表达为36.7%,一致性为38.8%,二者表达呈负相关(r=-0.3553,P<0.001)。结论p14ARF表达下调及mtp53表达上调在NSCLC的发生、发展中发挥着一定的作用;联合检测p14ARF和mtp53有助于判断NSCLC的分级和转移情况。

P14^(ARF)和P16^(INK4a)基因在鼻咽癌组织中异常甲基化及其临床意义

目的:通过检测P14ARF和P16INK4a基因启动子区甲基化情况,分析探讨其在鼻咽癌临床诊断和治疗中的意义。方法:运用甲基化特异性PCR对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽上皮组织的P14ARF和P16INK4a基因启动子区甲基化状态进行检测。结果:鼻咽癌组织中P14ARF和P16INK4a基因启动子区甲基化阳性率分别为20.4%(11/54)和46.3%(25/54),二者总检出率为48.2%(26/54),26例甲基化的癌组织同时出现二者甲基化为10例;而在正常鼻咽上皮组织中未检测到P14ARF和P16INK4a基因启动子区甲基化。结论:鼻咽癌P14ARF和P16INK4a基因启动子区甲基化与患者临床病理特征无明显相关性,为早期事件,有望成为早期分子生物学诊断的标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点。二者在鼻咽癌发生发展中可能存在协同作用。

幽门螺旋杆菌和p14^(ARF)在蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中的表达变化及意义

目的探讨幽门螺旋杆菌(Hp)和抑癌基因p14^(ARF)在蒙古族、汉族胃癌患者癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达变化及意义。方法采用免疫组化SP法、改良的Warthin-Starry(W-S)银染色法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测Hp和p14^(ARF)在27例蒙古族胃癌患者和30例汉族胃癌患者癌组织、癌旁组织和正常组织中蛋白和mRNA表达。Spearman相关性分析汉族、蒙古族胃癌患者癌组织中Hp与p14^(ARF)表达的关系。结果p14^(ARF)在蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中的表达低于癌旁组织和正常组织,差异有统计学意义(P均<0.05),癌旁组织低于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),p14^(ARF)在蒙古族、汉族人群各组织中的表达差异无统计学意义(P均>0.05)。蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中Hp阳性率较高,两民族感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)。汉族胃癌患者p14^(ARF)mRNA相对表达量在癌、癌旁、正常组织中两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。蒙古族胃癌患者p14^(ARF)mRNA相对表达量在癌、癌旁、正常组织中两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。蒙古族、汉族胃癌患者p14^(ARF)mRNA相对表达量在癌、癌旁和正常组织中差异无统计学意义(P均>0.05)。Spearman相关性分析显示,汉族、蒙古族胃癌患者癌组织中Hp与p14^(ARF)阳性表达呈负相关(r分别为-0.406、-0.433,P均<0.05)。结论蒙古族、汉族胃癌患者癌组织中p14^(ARF)均呈低表达,Hp阳性率均较高,Hp阳性与p14^(ARF)表达呈负相关关系;Hp与p14^(ARF)在蒙古族、汉族胃癌中的发病机制可能相同,二者可能共同促进胃癌的发生。

口腔扁平苔藓组织中p73和p14^(ARF)基因表达与癌变的关系

目的探讨p73、p14ARF在口腔扁平苔藓组织中的表达与癌变的关系。方法采用免疫组化方法,分别检测口腔扁平苔藓、口腔鳞状细胞癌和正常口腔粘膜各30例组织中p73、p14ARF的表达情况;采用美国Media Cybernetics公司的Image Plus5.0专业图像分析软件进行IOD值(累计光密度值)的测量。结果p73表达的IOD值在正常口腔粘膜、口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌中不断增高,而p14ARF表达的IOD值在正常口腔粘膜、口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌中却逐渐下降。两组间有统计学意义(P<0.05)。p73、p14ARF在口腔扁平苔藓、正常口腔粘膜、口腔鳞状细胞癌组织中的表达呈负性相关性(P<0.05)。结论p73、p14ARF这两个基因在OLP的癌变过程中具有一定的作用。

小细胞肺癌p14^(ARF)、p16^(INK4a)蛋白表达及其临床意义

目的 研究p14 ARF、p16INK4a蛋白在小细胞肺癌 (smallcelllungcancer ,SCLC)中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学S P方法检测 2 4例SCLC癌组织标本中两种蛋白表达。结果 2 4例标本中 ,15例p14 ARF蛋白表达阴性( 62 .5 0 %) ,4例p16INK4a蛋白表达阴性 ( 16.67%) ,3例p14 ARF、p16INK4a蛋白表达均阴性 ( 12 .5 0 %)。p14 ARF、p16INK4a蛋白阴性率均与患者性别、年龄、临床分期及淋巴结转移无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 SCLC中p14 ARF、p16INK4a蛋白表达阴性是各自独立的事件 ,可能与SCLC的发生有关 ,其中p14 ARF表达阴性占主要地位。