免疫PCR法检测乳腺癌患者血清抗p185抗体方法学研究

目的探讨免疫PCR法检测乳腺癌患者血清抗p185抗体的方法学。方法采用SaH IgG-DNA探针建立检测血清抗p185抗体的免疫PCR法,并与ELISA法进行比较。结果免疫PCR法检测乳腺癌患者血清抗p185抗体的敏感性高于ELISA法;其检测结果与ELISA法呈正相关。结论免疫PCR法检测乳腺癌患者血清抗p185抗体具有临床实用价值。

免疫PCR法检测乳腺癌患者血清p185抗体的临床价值

目的 以免疫PCR法来检测乳腺癌患者血清中的p185抗体,并研究血清p185抗体在乳腺癌血清学诊断、预后判断以及疗效判断中的临床价值.方法 选取2008年至2010年期间就诊的经病理确认手术切除乳腺癌患者60例,所有乳腺癌患者均在术后7～10天左右接受常规方案化疗.收集患者术前、术后并三次化疗结束后血清,同时收集健康体检者血清60份.利用本实验室建立的免疫PCR法分别检测样本的血清p185抗体,并分析血清p185抗体与患者肿块大小、临床分期、淋巴结转移情况、绝经状态、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的关系.用卡方检验同时分析检测p185抗体对乳腺癌不同化疗方案的疗效评判及与复发转移的关系.结果 乳腺癌患者血清p185抗体阳性率为30％（18/60）,明显高于非癌者（P＜0.01）;乳腺癌患者血清p185抗体与肿瘤大小（x2=11.428,P＜0.05）、临床分期（x2=9.965 8,P＜0.05）关系密切,但与绝经状态、雌激素受体状态（ER）、孕激素受体状态（PR）、淋巴结转移情况等因素均无关系（P＞0.05）.乳腺癌患者接受两种不同的化疗方案（CAF/CEF）治疗结束后血清p185抗体阳性表达二者之间无明显差异（x2 =0.051,P＞0.05）.乳腺癌患者血清p185抗体阳性患者复发转移率高于p185抗体阴性患者,二者之间有明显差异（x2=2.147,P＜0.05）.结论 免疫PCR法检测血清P185抗体可望为乳腺癌的早期诊断、复发转移的监测及预后判断提供了一种简单易行的方法.

用细胞-ELISA法检测抗P185抗体

以高表达P185蛋白的人乳腺癌细胞（SKBR-3）作为抗原,用固相-ELISA法检测抗P185单抗和免疫小鼠抗血清。比较了不同方法处理的固相细胞和待测血清经低表达P185的人乳腺癌细胞（MCF-7）吸收与未吸收对实验的影响。结果显示:待测样本用MCF-7预吸收后及用1％乙醛处理固相细胞组所得结果较理想。

抗乳腺癌导向药物-人源化抗p185单链抗体/hIL-2双功能融合蛋白的制备

肿瘤特异性载体结合细胞毒物质构成的导向制剂曾被称为生物"魔弹".抗体作为载体的主体一直是人们研究的重点,虽然仍面临诸多困难,如抗抗体反应及抗体大分子难以穿越微血管壁等,但随着技术进步正逐步得到解决.近年来,用于乳腺癌治疗的Herceptin及用于白血病及胃肠道肿瘤的Gleevec等导向制剂,相继获得FDA批准,已在国内外上市,它们的临床疗效获得了人们的极大重视,显示了良好的应用前景.本文报道一新抗乳腺癌导向药物,即人源化抗原癌基因HER-2/neu(c-erbB2)产物p185单链抗体/人白细胞介素2(hIL-2)双功能融合蛋白的研究工作.

基因工程抗体增强紫杉醇诱导乳腺癌细胞SKBr3凋亡的作用

目的探讨抗p185c-erbB-2/neu基因工程抗体增强化疗药物紫杉醇诱导p185高表达的人恶性乳腺癌细胞系SKBr3凋亡的效应及其机制。方法采用MTS法检测基因工程抗体、紫杉醇及两者联合对SKBr3细胞增殖的抑制作用;用AnnexinV-FITC/PI法和流式细胞术定量分析SKBr3细胞的凋亡率;用Western blot技术分别检测AKt的Ser473位点、NF-κBp65亚基的磷酸化水平;用EMSA分析SKBr3细胞核内NF-κB与DNA的结合活性。结果基因工程抗体可增强紫杉醇对SKBr3细胞增殖的抑制作用,并可诱导细胞凋亡;基因工程抗体联合紫杉醇并可显著抑制SKBr3细胞中AKt/NF-κB途径。结论紫杉醇诱导乳腺癌细胞SKBr3凋亡的同时,可能通过激活AKt/NF-κB途径使癌细胞对紫杉醇产生耐药性。抗p185c-erbB-2/neu基因工程抗体联合紫杉醇是通过抑制AKt/NF-κB途径而增强紫杉醇诱导癌细胞凋亡的作用。