苏云金芽孢杆菌以色列亚种P19基因的初步研究

以含有Ｐ１９和ｃｙｔ１Ａ基因的以色列亚种７２ＭＤ质粒的９７ｋｂＨｉｎｄⅢ片段为模板进行ＰＣＲ扩增，分别获得Ｐ１９基因和ｃｙｔ１Ａ基因片段。与表达载体ｐＵＨＥ２４连接转化大肠杆菌ＸＬ１，获得３个克隆株。ＬＺ１９含有Ｐ１９基因；ｐＬＺｃｙｔ１Ａ含有ｃｙｔ１Ａ基因；ＬＺ１９Ａ含有Ｐ１９和ｃｙｔ１Ａ两个基因。利用ｃｙｔ１Ａ蛋白质可使大肠杆菌细胞致死的特性，在ＩＰＴＧ诱导下，测定了各克隆基因表达对大肠杆菌有致死作用；ｐＬＺ１９Ａ对大肠杆菌的起始致死作用明显快于ｐＬＺｃｙｔ１Ａ，这种现象可能是Ｐ１９基因促进ｃｙｔ１Ａ基因高表达的结果。

禽白血病病毒p19基因末端片段在大肠杆菌中的表达

根据禽白血病病毒 (ALV) p19基因末端序列合成一条 82bp的双链DNA片段 ,将其克隆到表达质粒pGE MEX 1中 ,序列分析结果与设计的相符。重组表达质粒转化的大肠杆菌BL2 1(DE3)经IPTG诱导后产生 34kD融合表达产物 ,与理论值相符 ;Western

P19基因在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究P19基因的表达,进而探讨它们在非小细胞肺癌发生,发展及预后评估方面的作用以达到指导临床治疗的目的。方法P19蛋白检测采用免疫荧光法。选用已知阳性的乳腺癌组织为阳性对照,以TBS液代替一抗作为空白对照。结果P19蛋白的阳性表达与非小细胞肺癌组织分型无显著性差异与TNM分期有显著差异。结论P19蛋白在与非小细胞肺癌TNM分期有关。

表观弥散系数与胶质瘤IDH-1/1p19q基因型的相关性研究

目的探讨ADC值与胶质瘤IDH-1/1p19q基因型间的相关性。方法回顾性分析2013年3月—2020年12月经病理证实的69例WHOⅡ/Ⅲ级神经胶质瘤患者的MRI和分子病理学检测结果,采用ROC曲线评估ADC值对胶质瘤基因型(IDH-1、1p19q)的诊断性能。结果IDH-1突变组ADC_(mean)、ADC_(min)、rADC_(mean)、rADC_(min)均分别显著高于IDH-1野生组(P<0.05、P<0.01、P<0.05、P<0.01),以rADC_(min) 0.979×10^(3) mm^(2)/s为阈值诊断IDH-1突变型与IDH-1野生型胶质瘤的效能最高(AUC=0.770),其敏感度、特异性分别为84.61%和59.09%。结论ADC可以作为无创性预测IDH-1突变型与野生型Ⅱ/Ⅲ级胶质瘤的影像学生物标志物。

广州地区318例拟应用伏立康唑治疗的疑似侵袭性真菌感染患者CYP2C19^(*)2/^(*)3/^(*)17等位基因检测分析

目的了解广州地区人群CYP2C19^(*)2/^(*)3/^(*)17等位基因9154G>A、7948G>A和806C>T位点的多态性,为临床应用伏立康唑治疗侵袭性真菌感染提供参考依据。方法选取2022年1月至2023年2月在广州市胸科医院就诊、拟应用伏立康唑治疗且进行CYP2C19^(*)2/^(*)3/^(*)17等位基因检测的318例疑似侵袭性真菌感染患者纳入分析,其中男249例、女69例,年龄19~94岁,平均58岁。应用数字荧光分子杂交测序技术检测CYP2C19^(*)2(9154G>A)、CYP2C19^(*)3(7948G>A)、CYP2C19^(*)17(806C>T)位点的多态性,描述性分析伏立康唑快、中、慢代谢型患者的基因型、单倍型分布频率。结果在CYP2C19^(*)2(9154G>A)位点上检测到GG、AG、AA 3种基因型,分布频率分别为47.80%(152/318)、42.45%(135/318)、9.75%(31/318);在CYP2C19^(*)3(7948G>A)位点上检测到GG、GA、AA 3种基因型,分布频率分别为90.88%(289/318)、8.81%(28/318)、0.31%(1/318);在CYP2C19^(*)17(806C>T)位点上检测到CC、CT 2种基因型,分布频率分别为99.37%(316/318)、0.63%(2/318)。318例拟应用伏立康唑治疗的患者中,快、中、慢代谢型的患者分别有135例(42.45%)、140例(44.03%)和43例(13.52%),3个基因位点单倍型情况为:GG-GG-GC、GG-GG-CT 2种快代谢单倍型,分布频率分别为99.26%(134/135)和0.74%(1/135);AG-GG-CC、GG-GA-CC、AG-GG-CT 3种中间代谢单倍型,分布频率分别为87.86%(123/140)、11.43%(16/140)和0.71%(1/140);AA-GG-CC、AG-GA-CC、AA-GA-CC、GG-AA-CC 4种中间代谢单倍型,分布频率分别为69.77%(30/43)、25.58%(11/43)、2.33%(1/43)和2.33%(1/43)。结论从CYP2C19基因遗传背景看,广州地区人群虽多为伏立康唑快、中代谢型,但慢代谢型占有一定比例,在临床诊疗中应重视其基因多态性检测,进而指导伏立康唑的临床合理应用。

沈阳地区冠心病患者氯吡格雷药物代谢相关CYP2C19基因多态性分布分析

目的分析沈阳地区冠心病患者细胞色素P4502C19(CYP2C19)基因型的分布情况。方法选取2013年4月至2015年12月在该院进行经皮冠状动脉支架术(PCI)的冠心病患者2 601例为研究对象。采用聚合酶链反应微阵列基因芯片法检测氯吡格雷代谢相关的酶CYP2C19*1,*2,*3等位基因,其中CYP2C19*1编码正常酶活性。根据患者携带的CYP2C19等位基因不同,将患者分为不同氯吡格雷代谢型,其中快代谢型为(*1/*1)、中代谢型为(*1/*2、*1/*3),慢代谢型(*2/*2、*3/*3、*2/*3)。结果沈阳地区冠心病患者CYP2C19基因型分布由多到少分别为*1/*2、*1/*1、*2/*2、*1/*3、*2/*3及*3/*3,分别占患者总数的40.0%、39.1%、9.8%、7.4%、3.6%和0.1%;不同性别在CYP2C19基因型上分布比较,差异无统计学意义(χ~2=5.718,P=0.335);氯吡格雷快、中、慢代谢型分别占39.1%、47.4%和13.6%,不同代谢型中性别分布比较,差异无统计学意义(χ~2=2.310,P=0.315);不同年龄段患者氯吡格雷代谢型分布比较,差异无统计学意义(χ~2=11.543,P=0.317)。结论沈阳地区冠心病拟行PCI患者中约60%携带CYP2C19*2、*3功能缺失基因,但与性别无关,建议PCI术后个体化使用氯吡格雷抗血小板聚集治疗。

氯吡格雷抵抗细胞色素P4502C19基因多态性与复发性缺血性脑卒中的相关性研究

目的研究氯吡格雷抵抗细胞色素P4502C19（CYP2C19）基因多态性与复发性缺血性脑卒中的相关性。方法选取2015年4月至2017年3月天津市南开医院收治的38例复发性缺血性脑卒中患者，按照使用氯吡格雷后是否有抵抗将患者分为抵抗组（13例）和非抵抗组（25例）。分析2个单核苷酸多态性（SNPs）的等位基因频率和基因型频率，检测两组2个SNPs的分布情况。结果CYP2C19（636G〉A，rs4986893）和CYP2C19（681G〉A，rs4244285）等位基因和基因频率符合Hardy—Weinberg平衡（P〉0．05）。非抵抗组CYP2C19＊2（rs4244285）GG型分布率显著高于抵抗组（68．00％比30．77％，P〈0．05），GA＋AA型分布率显著低于抵抗组（32．00％比69．23％，P〈0．05），两组CYP2C19＊3（rs4986893）GG型（76．00％比92．31％）、AG＋AA型（24．00％比7．69％）分布率比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论氯吡格雷抵抗CYP2C19基因多态性和复发性缺血性脑卒中密切相关。

大鼠肺鳞癌中p16^(INK4a)和p19^(ARF)基因的缺失研究

目的 :研究p16 INK4a和p19ARF基因的缺失与大鼠肺鳞癌发生发展的关系。方法 :利用显微切割和聚合酶链反应 (PCR)技术 ,在 10例正常大鼠支气管黏膜上皮细胞、16例癌前病变细胞和 34例肺鳞癌组织分别检测p16 INK4aE1α和p19ARFE1β的缺失。结果 :10例大鼠正常支气管黏膜上皮细胞均未发现有p16 INK4aE1α和p19ARFE1β的缺失。在 16例癌前病变中发现p16 INK4aE1α和p19ARFE1β缺失的检出率分别为 12 5 0 % (2 16 )和 6 2 5 % (1 16 ) ;p16 INK4aE1α或 (和 )p19ARFE1β总缺失率为 18 75 % (3 16 )。 34例大鼠肺鳞癌中p16 INK4aE1α和p19ARFE1β缺失的检出率分别为 32 35 % (11 34)和 4 1 18% (14 34) ,其中有 9例两者同时缺失 ,p16 INK4aE1α或 (和 )p19ARFE1β总缺失率为 4 7 0 6 % (16 34)。肺鳞癌的p19ARFE1β的缺失率显著高于癌前病变 ,P =0 0 12。结论 :在诱发性大鼠肺鳞癌的发生发展中 ,p16 INK4a基因的缺失可能在早期已起作用 ,p19ARF的生物学活性可能强于p16 INK4a。p16 INK4a和p19ARF基因的同时缺失损伤了Rb和p5 32条肿瘤抑制途径 。

贵州少数民族CYP2C19基因多态性分布

目的:研究贵州少数民族的细胞色素P450 2C19(CYP2C19)基因多态性分布情况,为临床治疗提供更加可靠的依据。方法:选取2016年1月至2017年12月贵州地区代表性的世居及人数较多的少数民族作为研究对象,从苗族、布依族、侗族、土家族、彝族、回族无亲缘关系的健康人群中各选取100例进行研究,通过血液检测方法,分析入组少数民族人员的CYP2C19基因分型情况。结果:入组的100例土家族人群中快代谢型、中代谢型和慢代谢型的分布频率分别为54.00%、35.00%和11.00%;入组的100例苗族人群的分布频率分别为21.00%、61.00%和18.00%;100例侗人群的分布频率分别为28.00%、37.00%和35.00%;100例彝族人群的分布频率分别为16.00%、48.00%和36.00%;100例布依族人群的分布频率分别为20.00%、54.00%和26.00%;100例回族人群的分布频率分别为25.00%、41.00%和34.00%。结论:贵州地区少数民族中土家族人群CYP2C19基因代谢型中快代谢型占比较高,苗族人群中中代谢型占比显著,相对来说这两个民族对药物的代谢能力较好,其他民族的基因分型也较为显著,在临床用药治疗中应根据地区人群的基因多态性,采取针对性治疗措施。

中国福建泉州地区心脑血管患者CYP2C19,ABCB1基因多态性的检测分析

目的检测分析泉州地区心脑血管病患者氯吡格雷相关基因细胞色素P4502C19(CYP2C19)和三磷酸腺苷黏合转运体B1 (ABCB1)的突变情况。方法收集2018年5月~2019年5月到泉州第一医院住院接受治疗的2 029例心脑血管病患者的全血标本,采用sanger测序法检测CYP2C19,ABCB1基因型,应用Hardy-Weinberg遗传平衡吻合度检验方法,判断选取的标本是否具有群体代表性。根据性别、年龄因素对患者进行分组,采用四格表资料的χ^2检验,R×C表资料的χ^2检验比较各组间氯吡格雷代谢相关基因CYP2C19,ABCB1,氯吡格雷代谢型的分布差异。结果 CYP2C19*2(G681A),*3(G636A),*17(C806T),ABCB1(C3435T)的等位基因频率分别为57.1%,10.0%,1.5%和60.1%,每个等位基因分布的观察值和预期值差异有统计学意义(χ^2=0.000~3.316,均P>0.05),符合遗传平衡定律,具有群体代表性。CYP2C19*1/*1,CYP2C19*1/*2,CYP2C19*1/*3,CYP2C19*1/*17,CYP2C19*2/*2,CYP2C19*2/*3,CYP2C19*2/*17,CYP2C19*3/*17基因型频率分布分别为35.5%,42.1%,6.4%,0.9%,11.1%,3.4%,0.4%和0.2%,氯吡格雷超代谢型、快代谢型、中代谢型、慢代谢型的频率分别为0.9%,35.5%,49.1%和14.5%。CYP2C19基因型及氯吡格雷代谢类型在不同性别之间分布差异有统计学意义(χ^2=838.9~1361.134,均P<0.05),氯吡格雷代谢类型在男性不同年龄段的差异无统计学意义(χ^2=11.408,P>0.05),氯吡格雷代谢类型在女性不同年龄段的差异无统计学意义(χ^2=21.262, P>0.05)。ABCB1(C3435T)基因型CC,CT和TT的频率分别为39.9%,44.4%和15.7%,ABCB1基因型在不同性别之间分布差异有统计学意义(χ^2=139.445,P<0.05)。结论泉州地区心脑血管患者CYP2C19基因型主要以CYP2C19*1/*2 (42.1%)为主,ABCB1基因型主要以CT(44.4%)为主,氯吡格雷代谢表型以中代谢(49.1%)为主。CYP2C19基因型、ABCB1基因型及氯吡格雷代谢类型在不同性别之间是有差异的。氯吡格雷代谢类型在同性不同年龄段是没有差异的。

TEG-PM与药物相关基因检测指导颅内动脉瘤支架植入后抗血小板聚集治疗的应用价值

目的探讨颅内动脉瘤患者行支架植入术后分别在血栓弹力图血小板图(thromboelastography-platelet mapping,TEG-PM)检测与药物相关抵抗基因检测指导下的抗血小板聚集治疗用药的安全性及有效性。方法纳入2021年1月至2022年8月昆明医科大学第一附属医院收治的颅内动脉瘤患者65例,所有患者均行阿司匹林及氯吡格雷相关基因检测,并于服用抗血小板药物后行TEG-PM。将患者随机分为A组33例,B组32例。A组在药物相关基因检测指导下行抗血小板聚集治疗,B组在TEGPM指导下行抗血小板聚集用药。比较两组术后缺血性并发症及出血性并发症发生率。结果缺血性并发症B组0例,A组2例(RR=0.492,95%CI:0.383~0.632,χ2=0.485,P=0.468),A组2例患者分别于用药后3.4个月及1.6个月出现缺血性并发症。出血性并发症A组1例,B组3例(RR=0.302,95%CI:0.303~3.069,χ2=0.300,P=0.584);A组中1例患者于术后4.33个月出现牙龈出血,B组3例患者中,2例于术后2.2个月及1.6个月无明显诱因出现皮肤散在片状青紫,1例于术后2.3个月出现黑便,完善相关检查发现消化道溃疡。结论颅内动脉瘤行支架植入术后在TEG-PM及药物相关基因检测下指导抗血小板聚集治疗安全可行,临床应用时应据患者个体化选择,并检测其指标变化,及时调整用药。

p19-INK4家族的新成员

INK4a位点含有 2个重叠的基因 :p1 6基因和 p1 9基因。它们具有相同的 DNA序列 ,但氨基酸顺序完全不同。 p1 9基因是新近报道的肿瘤抑制基因 ,与细胞衰老有一定的相关性。本文就 p1

p19ARF对白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的 :克隆正常人p19ARF基因 ,探讨其对肿瘤细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法 :用流式细胞术、MTT测定及末端标记观察p19ARF基因对白血病细胞HEL和K5 62的作用。结果 :将p19ARF导入HEL细胞后可明显抑制细胞繁殖 ,细胞周期被阻滞在G1期并可导致部分细胞凋亡。但是p19ARF对于p5 3基因突变的K5 62细胞的增殖和细胞周期没有明显的影响 ,也不能诱导其凋亡。结论 :p19ARF可显著抑制人白血病细胞的增殖 ,其抑制作用依赖于p5

P4502C19基因多态性对滨州市急性冠状动脉综合征患者氯吡格雷反应性及预后的影响

探讨P4502C19基因多态性对急性冠状动脉综合征(ACS)患者氯吡格雷反应性及预后的影响。方法 选取2020年4月~2022年3月滨州市ACS患者98例,根据P4502C19基因多态性分为慢代谢型组(n=13)、中等代谢型组(n=42)、快代谢型组(n=43)。统计3组一般资料、氯吡格雷血小板聚集率、血小板抑制率及主要不良心血管事件(MACE)。并根据氯吡格雷血小板抑制率分为氯吡格雷低反应组(LCR,n=23)、氯吡格雷敏感组(NCR,n=75),对比两组P4502C19基因多态性分布特征,Logistic回归分析ACS患者LCR影响因素。结果 治疗后慢代谢组血小板抑制率低于中等代谢型组、快代谢型组,血小板聚集率高于中等代谢型组、快代谢型组(P<0.05);治疗后随访6个月,慢代谢型组MACE发生率25.00%(3/12)高于中等代谢型组5.00%(2/40)、快代谢型组2.44% (1/41)(P<0.05);LCR患者占比在中等代谢型、快代谢型中低于NCR患者(P<0.05);P4502C19基因慢代谢型是引起ACS患者LCR高危因素(P<0.05)。结论 P4502C19基因慢代谢型是导致ACS患者氯吡格雷低反应的主要因素,且会影响血小板生理活性,与MACE发生关系密切,临床检测P4502C19基因多态性对合理制定用药方案具有重要意义。

细胞色素P4502C19中间及慢代谢型的老年患者冠状动脉介入术后不同抗凝治疗的预后观察

目的:本研究是观察细胞色素P4502C19(CYP2C19)基因型的中间及慢代谢型的老年(≥75岁)急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后三种抗凝治疗的临床预后。方法:筛选2018年8月至2019年8月,于我院住院的98例经检测为CYP2C19中间及慢代谢型的PCI术后老年ACS患者(≥75岁),分为三组(阿司匹林+氯吡格雷1组,阿司匹林+替格瑞洛2组和阿司匹林+氯吡格雷+西洛他唑3组),对所有患者随访1年,观察三组患者主要心脑血管不良事件(MACCE)及出血发生率。结果:在主要终点中,三组的MACCE事件发生率,差异无统计学意义。对于次要终点和出血事件,2组的非致死性心肌梗死发生率低于1组(P=0.048),但轻微出血风险高于1组(P=0.044)。3组与1组相比,也有降低非致死性心肌梗死的趋势(P=0.062)且不增加出血风险。结论:对于CYP2C19中间及慢代谢基因型的老年ACS患者,PCI术后的抗凝治疗可采用个体化给药。

基于快速CYP2C19基因检测的颈内动脉重度狭窄患者双联抗血小板治疗1例报道

本文报道了一例老年女性院内卒中患者的临床诊疗过程。该患者于肛肠外科手术后2 d突发急性缺血性卒中,经影像学检查确诊为右侧颈内动脉起始部重度狭窄。在接受了1个月的卒中二级预防药物治疗后,择期行血管内治疗。术前该患者进行了快速细胞色素P450酶家族2亚家族C成员19(cytochrome P450 family 2 subfamily C member 19,CYP2C19)基因检测,结果为中间代谢型,提示应用氯吡格雷的效果可能不佳。基于这一检测结果调整抗血小板治疗方案,选择替格瑞洛联合阿司匹林作为替代治疗。治疗后,患者病情稳定,预后较好。本病例报道提示,在非轻型卒中患者中,快速CYP2C19基因检测可帮助选择抗血小板治疗策略,改善患者预后。

农杆菌介导的pCB302-3载体在本氏烟中瞬时表达条件优化

以GFP为报告基因构建植物表达载体pCB302-3-GFP,采用农杆菌叶片注射法对其在本氏烟叶片中瞬时表达条件进行优化。分析基因沉默抑制子p19、菌液不同浓度以及侵染时间对GFP荧光强度的影响,结果显示,当农杆菌菌液D600为0.8-1.0并与含有p19基因的载体共注射条件下,农杆菌注射3-5d后本氏烟草叶片表现出很强的绿色荧光,实现了GFP在本氏烟草中的高效瞬时表达。

细胞色素氧化酶P4502C19基因遗传多态性影响氯吡格雷联合阿司匹林治疗短暂性脑缺血发作的研究进展

短暂性脑缺血发作在老年人中最常见,发病率为12%~15%,随年龄增大发病率增高。1/3短暂性脑缺血发作患者会复发,有患脑血管意外(中风)的风险,发作后应尽早抗血小板治疗。目前国际指南推荐短暂性脑缺血发作的二级预防虽未用氯吡格雷联合阿司匹林治疗,但研究证明氯吡格雷联合阿司匹林可有效治疗短暂性脑缺血发作。细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)基因多态性是引起氯吡格雷抵抗最重要的内部因素。本文综述了近几年国内外CYP2C19基因遗传多态性对氯吡格雷联合阿司匹林治疗短暂性脑缺血发作的疗效和安全性的不同结果,以期为深入研究临床个体化用药提供参考。