姜黄素衍生物FM17对K562细胞增殖影响及其与P210^bcr/ab1激活的信号途径关系

目的探讨姜黄素衍生物FM17对体外培养的慢性粒细胞白血病（CML）急变期细胞K562细胞增生的影响，及其-9p210^bcr/ab1激活的信号途径的关系。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测姜黄素衍生物不同时间点和不同的浓度对K562细胞增殖的抑制作用。Western blot的方法分析姜黄素衍生物FM17不同浓度、不同时间点对P210b刊曲。激活的信号的影响。结果2-8μg／mL浓度的FM17在12h、24h、36h及48h均可明显抑制K562细胞增殖，并在一定范围内呈时间和剂量依赖性；FM17可抑制P210^bcr/ab1蛋白的含量，且可下调P210^bcr/ab1激活的下游信号分子PKC和p—Erk。结论姜黄素衍生物FM17较姜黄素有更强的抗增殖能力，对P210^bcr/ab1及其激活的信号途径也有较强的抑制作用。

姜黄素对K562细胞增殖的影响及其与P210^(bcr/abl)激活的Ras信号途径的关系

目的 研究姜黄素 (Cur)对慢性粒细胞白血病 (CML)细胞株K5 62增殖的影响 ,并且探讨这种影响与P2 10 bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系。方法 应用MTT法检测Cur对细胞增殖的影响 ,应用Westernblot的方法检测蛋白含量的变化。结果 Cur对P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞抑制作用呈量效、时效关系 ,Cur 10mg·L-1作用 48h对K5 62细胞的抑制率高达 (81 9± 1 0 ) % ;相比之下 ,已知对P2 10 bcr/abl无影响的VP 16作为抗癌药对照 ,对K5 62细胞的抑制作用明显较弱。Cur和VP 16对K5 62细胞的不同作用提示Cur对K5 62细胞作用可能有特异性 ,而这个特异的作用靶点可能就是引起CML对多种化疗药物耐药的CML特征性的P2 10 bcr/abl蛋白。Westernblot的实验结果表明Cur使K5 62细胞P2 10 bcr/abl、MEK 1和c Jun蛋白含量明显减少 ,且呈量效关系 ,相比之下 ,VP 16对K5 62细胞P2 10 bcr/abl的蛋白含量无影响而仅轻微减少MEK 1和c Jun的蛋白含量 ,提示MEK 1和c Jun蛋白含量的减少是非特异性的 ,并且 ,在P2 10 bcr/abl阳性的K5 62细胞 ,Cur除了非特异性地抑制细胞中MEK 1及c Jun的表达外 ,Cur还可能通过特异性地抑制K5 62细胞的特异性靶点P2 10 bcr/abl的表达 ,从而下调其下游的Ras信号途径中的其它信号分子。

慢性髓系白血病细胞中SphK-1/S1P信号通路的初步研究

慢性髓系白血病(CML)是一种以髓系细胞受累为主的多能造血干细胞的克隆性疾病。为探讨SphK-1/S1P信号通路元件在CML细胞中的表达情况,研究P210bcr/abl是否涉及到SphK-1/S1P信号通路,首先采用RT-PCR检测bcr/abl阳性的K562细胞和bcr/abl阳性的原代CML细胞中SphK-1和S1P受体mRNA的表达。进一步利用P210bcr/abl特异抑制剂甲磺酸伊马替尼处理bcr/abl阳性的K562细胞和CML原代细胞,然后通过32P-ATP掺入法测定细胞内SphK-1的酶活性。结果表明:K562细胞经2.5μmol/L甲磺酸伊马替尼处理0.5、2、6、24和48小时后,对SphK-1活性抑制强度分别为0.007%、38.9%、34.6%、28.1%和76.1%;CML原代细胞在使用2.5μmol/L甲磺酸伊马替尼处理后SphK-1活性较对照下降(16.8-41.9)%。结论:CML细胞中存在SphK-1和S1P的表达,P210bcr/abl具有激活SphK-1的作用。