HSP27表达与肿瘤耐药关系的研究进展

热休克蛋白27（heat shock protein 27，HSP27），又名热休克蛋白B1（heat shock protein B1，HSPB1）、热休克蛋白25（heat shock protein 25，HSP25），是热休克蛋白家族中的小分子热休克蛋白亚家族（sHSP亚家族）的重要一员。近年HSP27与肿瘤的关系引人注目，而肿瘤耐药是影响肿瘤临床预后的重要方面，本文就HSP27和肿瘤耐药的关系作一综述。

小鼠移植性肝癌不同局部治疗后p27、bcl-2及survivin表达的变化

目的探讨氩氦冷冻和局部乙醇注射治疗作用于小鼠移植性肝癌后,小鼠的生存情况及残存肝癌细胞生物学特性的差异。方法采用氩氦冷冻和局部乙醇注射治疗小鼠移植性肝癌,比较各组之间生存时间和残存组织p27、bc l-2及survivin免疫组织化学染色阳性单位的差异。结果治疗组与空白组之间生存时间存在显著性差异。氩氦冷冻治疗与乙醇注射组p27表达存在显著性差异,而bc l-2和survivin表达差异不显著。结论经局部治疗后小鼠生存时间延长,细胞生物学特性发生变化,氩氦冷冻治疗后肝癌细胞较乙醇注射后组织可能出现增殖能力下降。

顺铂诱导人宫颈癌细胞系P27表达及其超微弱发光测定的意义

目的:探讨化疗药物对肿瘤增殖活性的影响。方法:选择人宫颈癌细胞系Hela分为两组,分别采用MTT比色法分析测定顺铂处理Hela细胞的浓度;免疫组化SP法分别检测Hela细胞中P27蛋白表达;流式细胞仪分析加药前后细胞周期变化及凋亡情况;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测细胞的超弱发光强度。结果:顺铂处理Hela细胞48 h的IC50值为3 mg/L,当DDP浓度在3 mg/L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系(P<0.001);流式细胞仪分析细胞周期可见与Hela细胞相比较,Hela+DDP细胞的G2期细胞数增多,而G1、S期的细胞数明显减少(P<0.01);从细胞凋亡检测显示Hela与Hela+DDP相比,细胞凋亡率在不同时间点明显升高,在24 h、48 h、72 h结果分别为(11.4±5.8、21.8±7.9、32.5±11.6)%。免疫组化结果显示Hela+DDP与Hela细胞相比细胞膜上P27蛋白高表达;在10-4mol/L鲁米诺及0.3%的双氧水(H_2O_2)条件下Hela细胞超弱发光强度高于用Hela+DDP细胞(P<0.001)。结论:超弱发光能够快速、准确、有效地反映肿瘤细胞氧化代谢特点和增殖活动,也可用于筛选敏感的化疗药物。

p27^(KIP1)过表达对人胃癌细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响

目的 研究 p2 7KIP1基因对胃癌细胞的细胞周期和细胞凋亡的潜在作用。方法 采用脂质体转染法将 p2 7KIP1全长cDNA转入胃癌细胞系SCG790 1中 ,通过WesternBlot以及RNA斑点杂交检测 p2 7KIP1基因在蛋白质和mRNA水平的表达 ;细胞活力实验和软琼脂集落形成实验显示转染p2 7KIP1基因对细胞增殖的作用 ;DNA电泳、流式细胞仪、TUNEL染色及透射电镜等方法观察目的基因对该细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 转染 p2 7KIP1的SCG790 1细胞在mRNA和蛋白质水平均有高水平p2 7KIP1的表达。细胞活力检测显示在外加Zn离子 4 8h后细胞生长被抑制 4 2 % ;软琼脂集落形成率明显少于亲代细胞(P <0 .0 1) ;p2 7KIP1的过表达能够显著地增加G1期的细胞数 ,由 33.6 8%增加到 6 9.2 9% ,P <0 .0 1;在G1期前出现 1个亚二倍体的凋亡峰 ,占 14 .6 8% ,并且凋亡指数也显著增加 (P <0 .0 1)。结论 p2 7KIP1基因能够诱导SCG790 1细胞凋亡和细胞周期在G1期延长。因此 ,p2 7KIP1基因可能成为肿瘤基因治疗的靶基因。

子宫颈腺癌中COX-2与p27^(kip1)、MMP-2蛋白表达的关系

目的探讨子宫颈腺癌组织中环氧化酶2(COX2)与细胞周期调控因子p27kip1、基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达关系。方法采用组织微阵列技术结合免疫组化SP法检测106例子宫颈腺癌组织和22例慢性子宫颈炎组织中COX2与p27kip1、MMP2的表达。结果106例子宫颈腺癌组织COX2和MMP2的阳性表达率分别为86.8%和70.8%,均高于慢性子宫颈炎组织(P<0.01);p27kip1阳性表达率为58.5%,低于慢性子宫颈炎组织81.8%(P<0.05)。COX2和MMP2在子宫颈腺癌的病理分级中,G3组阳性表达率均明显高于G1组(P<0.05)。MMP2和p27kip1表达与子宫颈腺癌组织学类型有关,透明细胞腺癌MMP2阳性表达率高于子宫颈内膜腺癌和子宫内膜样腺癌(P<0.05),p27kip1阳性表达率低于子宫颈内膜腺癌和子宫内膜样腺癌(P<0.05)。COX2阳性表达强度与MMP2的阳性表达强度呈正相关(P<0.01)。COX2阳性表达强度与p27kip1的阳性表达强度呈负相关(P<0.05)。结论COX2与p27kip1、MMP2在子宫颈腺癌组织中的表达密切相关,p27kip1低表达与COX2、MMP2增强表达在子宫颈腺癌的发生发展中起重要作用,三者可能作为子宫颈腺癌恶性化的分子标志。

喉鳞状细胞癌中Skp2、PTEN及p27蛋白的表达及其意义

目的探讨Skp2、PTEN及p27蛋白表达与喉鳞状细胞癌(LSCC)发生、发展的关系。方法采用免疫组化SABC法检测65例LSCC组织中Skp2、PTEN及p27蛋白的表达情况。结果Skp2、PTEN及p27蛋白在LSCC组织中总的阳性表达率分别为60.0%,49.2%和41.5%,Skp2过表达与LSCC的临床分期及淋巴结转移正相关(P均<0.05),低分化、伴颈部淋巴结转移及Ⅲ～Ⅳ期LSCC组织中PTEN阳性率明显降低(P均<0.05),p27在颈部淋巴结转移组中阳性率显著降低(P<0.05)。结论联合检测Skp2、PTEN及p27的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为。

幽门螺杆菌对胃上皮细胞凋亡及p27^(kipl)表达的影响

凋亡是一种基因调控的程序性细胞死亡，正常情况下它与增殖一起维持人体细胞总数的相对恒定。细胞周期调控点是将细胞增殖和凋亡连在一起的枢纽，是控制细胞增殖与凋亡的双向开关。p27^kip1（p^27-kinase inhibition protein 1）基因是Polyka等于1994年发现的新的CKI基因．具有限制性调节细胞周期进程的作用.

Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌组织中p27^(Kip1)的表达及其临床意义

目的:乳腺癌患者的预后以肿瘤大小、淋巴结转移、激素水平等指标来评价,但结果并不理想,为了更加合理的指导和评价乳腺癌预后,提高患者生存期,探讨p27Kip1在临床Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌组织中的表达对预后的影响及其与临床病理特征之间的关系。方法:应用EnVision荧光免疫组化染色检测106例Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者细胞中p27Kip1的表达。结果:106例乳腺癌组织中p27Kip1核内低表达率为57.55%。p27Kip1核内高表达者与低表达者生存率差异显著有统计学意义(P<0.05)。28例出现了p27Kip1细胞质内表达,表达率为26.50%,细胞质内表达较核内表达预后差。p27Kip1在早期乳腺癌细胞的表达与年龄、月经状况、病理类型、肿瘤大小、临床分期、激素受体情况等无关(P>0.05),与淋巴结转移情况和组织分化程度有关(P<0.05)。结论:早期乳腺癌细胞中出现了p27Kip1的表达下降和错位分布,核内高表达者预后较好,p27Kip1可能是早期乳腺癌预后指标之一。p27Kip1表达与淋巴结转移和组织分化程度有关。

高表达p27基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响研究

目的:探讨高表达p27基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:利用PT-PCR技术从宫颈癌HeLaRNA中扩增p27cDNA,利用脂质体法转染子宫颈癌HeLa细胞,并利用Western blot法、RT-PCR法对p27基因高表达细胞株进行筛选,并利用流式细胞术、MTT法对p27基因高表达对细胞增殖的影响情况进行检测。结果:研究成功获取p27高表达HeLa细胞株,且研究结果显示p27基因高表达可在一定程度上对细胞增殖产生抑制功效,并可促使G1期细胞数显著增加。结论:HeLa细胞中p27基因高表达可在一定程度上对细胞增殖现象进行抑制,且p27基因可作为子宫颈癌基因治疗的靶基因。

人脑星形细胞瘤组织中p57^(kip2)、p27^(kip1)的表达及与预后相关性

目的 研究p5 7kip2 、p2 7kip1在人脑星形细胞瘤发生、发展中的作用及与预后相关性。方法 采用免疫组织化学方法(S P法)检测40例星形细胞瘤及2 0例正常脑组织中p5 7kip2与p2 7kip1的表达情况。结果 40例星形细胞瘤中p5 7kip2蛋白、p2 7kip1蛋白阳性表达率分别为45 .0 % (18/ 40 )、5 2 .5 % (2 1/ 40 ) ,显著低于正常脑组织(75 .0 %、85 .0 % ) (P均<0 .0 5 ) ,两者表达均与星形细胞瘤恶性程度相关(P均<0 .0 5 )。p5 7kip2表达与p2 7kip1表达密切相关(γs =0 .5 0 4,P <0 .0 1)。p5 7kip2、p2 7kip1蛋白阳性表达患者的预后均优于阴性表达者(P均<0 .0 5 )。结论 p5 7kip2 、p2 7kip1蛋白表达在人脑星形细胞瘤发生起重要作用。两者与人脑星形细胞瘤患者预后的密切相关。

上尿道移行细胞癌p27^Kipl蛋白的表达

研究认为，p27^Kipl作为一种细胞周期的负调节因子，与多种肿瘤的生物学行为和预后有关，然而，它在上尿道移行细胞癌（transitional cell carcinoma of the upper urinary tract,TCC-UUT)预后中的重要性尚无报道，我们通过免疫组织化学方法对132例TCC－UUT中p27^Kipl蛋白的表达及其与增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA),p53蛋白的免疫反应性，临床病理特点以及临床后果的关系进行了研究。其中，94．7％的病例呈阳性表达，核呈明显的阳性细胞。在正常的尿路上皮各层均发现有p27^Kipl的表达，27．2％的病例呈p53阳性，PCNA指数为7．4至93．1（平均66．4％），对p27^Kipl蛋白表达与临床病理表现，PCNA指数以及p53癌蛋白表达相关性的分析表明，p27^Kipl的表达随分期和分级而明显下降，在无瘤和总体生存率的单因素分析中未发现p27^kipl蛋白表达与预后之间有相关性，由此看来，p27^kipl蛋白的表达对TCC－UUT的预后几乎不能提供什么信息。

喉癌组织p27基因、VEGF蛋白的检测及临床意义

目的 对喉癌组织细胞 p2 7基因、VEGF(血管内皮生长因子 )蛋白的表达进行定性和定量研究。 方法 应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术。结果 喉癌细胞 p2 7基因蛋白的表达与原发灶肿瘤大小、大量吸烟、临床分期呈负相关 ;VEGF与原发灶肿瘤大小、病理分级、临床分期呈正相关。结论 二者在喉癌的发生发展中起一定作用 ,并可作为判断喉癌生物行为和预后的一个参考指标。

热休克蛋白27减轻组织氧中毒引起的细胞凋亡

热休克蛋白27（HSP27）是肺部发育的一个重要伴侣蛋白，然而在组织氧过多的情况下，HSP27在肺上皮细胞中的作用还不清楚。美国学者最近发现，组织氧中毒可降低新生大鼠肺HSP27表达。体外培养的人肺上皮细胞在高氧环境中HSP27表达显著降低；与对照组12.6％的凋亡率比较，暴露于高氧环境72h后，人肺上皮细胞凋亡率降至9.2％。

Skp2基因沉默对子宫内膜癌HEC-1A细胞p27蛋白表达及细胞增殖的影响

RNA干扰（RNAi）是一项新的使基因表达阻断的技术，一种广泛使体外基因失活或沉默的方法，足在转录水平抑制基因表达的一种研究基因功能的有力工具，不仅可用于研究基因功能，同时也为基因治疗提供丁一个新的重要技术。S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase-associated protein2，Skp2）是泛素连接酶复合物的组成部分F-box蛋自家族成员之一，通过特异性结合磷酸化的底物，引起底物的泛素化降解，对细胞周期的调控起重要作用，在肿瘤研究中日益受到关注。

ERK1/2对高糖刺激肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白1和p27^(Kip1)表达的作用

高糖是引起糖尿病肾病（DN）时肾脏肥大的始动因素。葡萄糖通过葡萄糖转运蛋白（GLUT）进入细胞。肾小球系膜细胞（GMC）主要表达GLUT1。细胞外高糖可以刺激GMC的GLUT1表达以及对糖的摄入。然而，高糖诱导GMC的GLUT1表达机制不甚明确。本研究利用大鼠GMC观察细胞外调节蛋白激酶（ERK1／2）对高糖诱导的GLUT1表达及细胞周期抑制蛋白（CKI）p27^Kip1的影响。旨在给DN时抑制ERK1／2的活性可以阻止GLUT1的表达增高而延缓GMC肥大的假设提供理论依据。

环氧合酶-2和p27^(kip1)蛋白在幽门螺旋杆菌感染胃癌变过程中的表达及其机制

目的探讨幽门螺旋杆菌(Hp)感染胃癌变过程中不同病理组织类型的环氧合酶2(COX2)和p27kip1蛋白表达及其分子生物学机制。方法经胃镜和病理诊断明确的Hp感染患者的不同胃黏膜组织标本共200例。包括慢性浅表性胃炎(CSG)、肠上皮化生(IM)、不典型增生(AH)、胃癌(GCA)各50例,分别以ABC法和SP法测定COX2和p27kip1蛋白表达情况。结果COX2随癌变过程中阳性率和表达强度不断提高,分别为12%、42%、52%、74%,GCA组与其他组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。而p27kip1随癌变过程,表达率逐步下降,分别为86%、46%、34%、26%。与其他组比较差异有统计学意义(P<0.05)。COX2和p27kip1表达呈显著负相关(r=-0.87,P<0.01)。结论COX2是Hp感染胃癌变过程的早期事件,并参与了胃癌变的全过程。COX2抑制了p27kip1的蛋白表达,两者负性相关。

丹皮酚和塞来昔布对大肠癌细胞环氧合酶-2和P27蛋白表达的影响

研究表明，诱导环氧合酶-2（COX-2）异常表达对消化系肿瘤的发生和演化具有重要的促进作用。COX-2特异性抑制剂塞来昔布可在一定程度上有效预防大肠癌，减少大肠癌发病率，但长期应用可带来一系列心血管不良反应。因此有必要进一步探讨用于大肠癌防治的不良反应小、安全有效的COX-2抑制剂。