腺病毒介导的p27kip1基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响

背景：近年来胃癌基因治疗的研究取得了一定的进展，但总体疗效尚不尽人意，目前正积极寻求组织特异性基因作为胃癌基因治疗的突破点。目的：以腺病毒为载体，研究p27kipl基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响。方法：将成功构建的携带人p27kipl基因的重组腺病毒载体Ad-p27kipl和LacZ重组腺病毒Ad-LacZ转染胃癌细胞系SGC-7901，并观察细胞形态的变化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，^3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入实验测定细胞DNA合成。结果：Ad-p27kip1转染SGC-7901细胞后，细胞变圆、呈葡萄串样聚集以致脱落，G0／G1期细胞比例增加，8期、G2／M期细胞比例降低，并有凋亡发生，^3H-TdR掺入量亦显著降低。结论：腺病毒介导的p27kipl基因能使SGC-7901细胞产生G0／G1期阻滞，并能诱导细胞凋亡，抑制DNA合成，表明该基因疗法能有效抑制体外胃癌细胞的生长。

重组腺病毒介导的人p27kip1基因高表达对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响

目的 探讨重组腺病毒介导的p2 7kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞 (VSMCs)迁移的抑制作用。方法 将含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Adhp2 7kip1)及含 β 半乳糖苷酶基因的重组腺病毒 (AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSMCs,用Westernblot及Boyden趋化小室检测外源性p2 7kip1蛋白在细胞内的表达及对VSM Cs迁移的影响。结果 转染后 2 4h ,Adhp2 7kip1转染的VSMCs内p2 7kip1蛋白高表达 ,而AdLacZ转染的VSMCs内仅显示极低水平的内源性p2 7kip1蛋白表达 ;Boyden趋化小室检测显示未转染的VSMCs、AdLacZ及Adhp2 7kip1转染的VSMCs血清诱导后的迁移细胞数分别为 139± 2 6、10 6± 16及 6 8± 14。结论 外源性p2

外源性p27kip1基因转染诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探索前列腺癌基因治疗的新途径。方法 用脂质体介导 p2 7kip1基因转染前列腺癌 PC- 3 M细胞 ,SABC免疫组化法检测癌细胞外源性 p2 7kip1基因表达 ;MTT比色分析检测癌细胞体外生长活性 ;流式细胞仪 ( FCM)分析细胞周期改变 ;DNA L adder、吖啶橙 -溴化乙啶荧光染色法检测细胞凋亡。结果 发现外源性 p2 7kip1基因转移后 ,前列腺癌细胞 p2 7kip1蛋白水平显著增强 ( P<0 .0 1) ,体外生长抑制 12 .2 4%～ 3 6.5 2 % ( P<0 .0 1) ,出现 G0 / G1 期细胞周期阻滞及凋亡性“亚 G1期”峰 ,电泳可见典型的“梯状”条带 ,凋亡比率为 18.5 % ( P<0 .0 1)。结论 转染外源性p2 7kip1基因能增强对细胞周期的负性调节 ,显著诱导前列腺癌细胞凋亡 。

p27 kipl与膀胱癌

p27 kipl是近年发现的具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、诱导分化等作用的抑癌因子。本文就有关膀胱癌中p27 kipl蛋白表达及抑癌作用进行综述。 1 p27 kipl基因及其蛋白 1994年,Polyak等在转化生长因子β和经细胞接触处理的生长抑制细胞中发现了一种热稳定蛋白,该蛋白能与细胞周期蛋白(cyclin)-细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)复合物(cyclin-CDK)紧密结合,抑制CDK的活性,称为p27 kipl。p27基因定位于人12号染色体的p12.

PTTG和p27Kipl在肝癌中的表达及其临床意义

目的分析垂体肿瘤转化基因(PTTG)和p27Kipl基因在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测48例HCC及癌旁肝癌组织中PTTG蛋白、p27Kipl蛋白的表达情况。结果 HCC、癌旁和正常肝组织的PTTG蛋白阳性表达率分别是70.8%(34/48)、91.7%(44/48),二者之间的差异有统计学意义(P<0.05),且PTTG蛋白在癌旁中的表达明显高于在HCC中的表达(P<0.05);HCC、癌旁组织的p27kip1蛋白阳性表达率分别是20.8%(10/48)83.3%(40/48),二者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。34例PTTG表达阳性组织中有10例见p27kip1表达阳性,而14例PTTG表达阴性组织中有9例见p27kip1阳性表达,二者比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论 PTTG和p27Kipl异常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中起重要的作用。

5-Aza-CdR对胃癌细胞系BGC823生长及p27kip1基因异常甲基化的影响

选择浓度为1×10-6mol/L的5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理体外培养的BGC823细胞后,用AO染色检测药物处理后细胞增殖情况;MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态;RT-PCR法检测用药前后细胞中p27kip1的mRNA表达的变化。结果显示,药物作用细胞增殖明显受到抑制,p27kip1基因的甲基化状态得到了逆转,p27kip1基因的mRNA表达得到增加。认为5-Aza-CdR对BGC823细胞具有增生抑制作用,p27kip1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关。

骨巨细胞瘤组织中Bax、p27^(kipl)的表达及意义

采用免疫组化法检测60例骨巨细胞瘤(GCTB)标本中Bax及p27^(kip1)蛋白。不同病理分级的GCTB中Bax和p27^(kip1)的阳性表达率相比,P<0.05;不同预后的GCTB中p27^(kip1)阳性表达率相比,P<0.05。认为Bax及p27^(kip1)的表达与GCTB的病理分级相关,但Bax不能作为判断GCTB预后的指标,而p27^(kip1)则可作为判断预后的指标之一。

腺病毒介导的p27kip1对食管癌裸鼠模型抑制的作用

目的:用腺病毒为载体,来研究p27kip1基因对食管癌的体内抑制作用.方法:用人食管癌细胞Eca109接种于裸鼠皮下,原代生长后在鼠间传代,再用组织块移植法构建食管癌裸鼠模型,应用直接注射法,将成功构建的携带人p27kip1基因的重组腺病毒及LacZ重组腺病毒导入裸鼠食管癌瘤体中,与对照组比较,绘制肿瘤生长曲线,并计算肿瘤生长抑制率.结果:p27kip1基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,与对照组比较,有显著性差异(P<0.001),肿瘤生长抑制率达64.1%.结论:腺病毒介导的p27kip1基因对食管癌具有较显著的体内抑制作用.

细胞周期蛋白p27和Cyclin D1在胃癌中的表达及其临床意义

目的通过研究细胞周期蛋白p27、Cyc lin D1在胃癌组织中的表达水平,探讨其与胃癌生物学行为的关系。方法免疫组化S-P法检测50例胃癌组织中p27K ip1、Cyc lin D1蛋白的表达水平。患者术前均行电子纤维镜检查,并经病理证实为胃癌。每例标本均含原发癌组织和周围正常组织,对照组周围正常组织距离癌组织5 cm以上。患者术前均未接受任何抗肿瘤治疗。结果50例胃癌中,癌组织p27K ip1蛋白阳性22例,占44.0%,与正常组织比较显著降低(P<0.001);Cyc lin D1蛋白表达阳性24例,占48.0%,与正常组织比较显著升高(P<0.001);p27K ip1蛋白表达水平与胃壁浸润深度、TNM分期、病理组织学分级、区域淋巴结转移均相关(P<0.05);而与肿瘤大小、部位、患者的年龄无显著相关性(P>0.05)。Cyc lin D1蛋白表达与病理组织学分级相关(P<0.05);p27K ip1与Cyc lin D1两者蛋白阳性表达无显著相关性(P>0.05);结论(1)p27K ip1蛋白表达可作为反映肿瘤恶性程度的指标,在一定程度上可反映胃癌病人的预后;(2)Cyc lin D1蛋白表达与胃癌病理组织学分级呈相关性,其过表达可能与胃癌的发生有关;(3)胃癌组织中p27K ip1与Cyc lin D1蛋白阳性表达两者无相关性;

p27kip1及p53基因蛋白与恶性卵巢上皮性肿瘤预后的关系

目的 探讨 p2 7kip1和 p5 3基因蛋白在恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与预后的关系。 方法 1992年 11月至 1999年 12月应用免疫组化检测 5 6例恶性卵巢上皮性肿瘤石蜡切片中 p2 7kip1和p5 3基因蛋白表达情况 ,并应用Kaplan -Mier法及多变量Cox比例风险回归模型分析患者预后。 结果 5 6例恶性卵巢上皮性肿瘤患者的 p2 7kip1基因蛋白表达率为 4 1 1% ;p5 3基因蛋白表达率为 4 8 2 % ,两种基因蛋白表达比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。p2 7kip1及 p5 3基因蛋白表达与肿瘤的病理分级有关 ( P <0 0 5 ) ,与其他临床病理特征无关。单因素分析 :p2 7kip1及 p5 3基因蛋白表达与患者的中位生存时间、生存曲线各时点生存率密切相关。 结论 p2 7kip1基因蛋白表达对恶性卵巢上皮性肿瘤的预后有显著影响 ,而 p5