液膜分离富集、测定水中痕量钍

用P2 91〔二 (二异丁基甲基 )磷酸〕、TRPO(三烷基氧膦 )协同流动载体 ,N2 0 5为表面活性剂 ,液体石蜡作膜的增强剂 ,磺化煤油作溶剂 ,(NH4 ) 2 CO3作内相试剂的乳状液膜体系 ,迁移富集钍。研究了乳状液膜的稳定性、温度、钍的浓度、外相 pH值、乳水比、油内比等因素对富集钍的影响。实验表明 ,在适宜条件下 ,钍的迁移富集率可达 99.5 %～ 10 0 .5 %。此法用于富集测定水和废水中的痕量钍 ,结果相当满意。

过表达miRNA-291b-3p诱导H9C2细胞胰岛素抵抗

目的研究过表达miRNA-291b-3p对诱导H9C2细胞胰岛素抵抗的影响。方法 1用10ng/ml TNF-α处理心肌细胞系H9C2细胞24h,通过Real time PCR检测miR-291b-3p表达水平,Western blot分析AKT/GSK信号通路活性,用蒽酮法检测细胞糖原水平;2构建miR-291b-3p mimics腺病毒载体,感染H9C2细胞48h,分析miR-291b-3p水平、AKT/GSK信号通路活性和糖原水平的变化。结果 1TNF-α处理H9C2细胞24h,miR-291b-3p的表达水平明显升高,同时AKT/GSK信号通路活性受到抑制,心肌细胞糖原水平升高;2miR-291b-3p mimics腺病毒感染H9C2细胞48h,miR-291表达水平升高,AKT/GSK信号通路活性降低,心肌细胞糖原水平升高。结论 H9C2细胞中TNF-α或过表达miR-291b-3p可抑制AKT/GSK信号通路活性,出现胰岛素抵抗。

抑制miRNA-291b-3p表达对H9C2细胞胰岛素信号通路活性的影响

目的本文探讨抑制miRNA-291b-3p表达在大鼠心肌细胞胰岛素抵抗中的作用,并分析其可能的作用机制。方法 1构建miR-291b-3p mimics和inhibitor腺病毒载体,感染H9C2细胞48h,分析miR-291b-3p水平、AKT/GSK信号通路活性和糖原水平的变化。2TNF-α刺激心肌细胞24h后,再用miR-291b-3p inhibitor腺病毒载体感染H9C2细胞24h,检测AKT/GSK信号通路活性和细胞糖原水平,验证TNF-α通过影响miR-291b-3p表达水平导致心肌细胞胰岛素抵抗。结果 1miR-291b-3p inhibitor腺病毒感染H9C2细胞48h,miR-291表达水平降低,AKT/GSK信号通路活性升高,心肌细胞糖原水平降低;2低表达miR-291b-3p能够逆转TNF-α引起的AKT/GSK通路活性和糖原水平降低。结论低表达miR-291b-3p可促进AKT/GSK信号通路活性,并改善TNF-α引起的胰岛素抵抗。

DNA聚合酶δ结合蛋白38是microRNA-291a-5p的一个靶基因

DNA聚合酶δ结合蛋白38(DNA Polymerase delta-interacting protein38,PDIP38)是2003年新鉴定的一个基因,目前认为其可能在DNA修复、有丝分裂以及血管平滑肌细胞迁移中起重要作用。根据本实验室前期在胚胎干细胞中对该基因的研究,认为microRNA可能在PDIP38的调控过程中发挥了重要作用。为证实这种推论,运用生物信息学方法预测发现在胚胎干细胞中高表达的microRNA--microRNA-291a-5p(miR-291a-5p)与PDIP38的开放阅读框(ORF)有一个配对非常理想的靶位点,通过构建该靶位点的报告基因载体以及ORF表达载体,分别进行荧光素酶报告基因分析以及细胞转染和Western blotting方法。结果证明miR-291a-5p能够直接调节PDIP38的蛋白表达。进一步运用real-time PCR和Western blotting分析证明了在胚胎干细胞中miR-291a-5p能够调节内源PDIP38的蛋白表达而对其mRNA表达无影响,这些都证明PDIP38确实是miR-291a-5p的一个靶基因。