基于嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7的资生肾气丸镇痛机制研究

目的:探索资生肾气丸对醋酸致小鼠扭体模型的镇痛作用。方法:将42只小鼠随机分为7组,分别给予相应药液灌胃,末次灌胃1 h后造模,建立醋酸致小鼠扭体模型。观察小鼠扭体次数,计算其扭体抑制率,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E 2(PGE 2)、神经生长因子(NGF)含量,采用实时PCR(RT-PCR)检测嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7(P2X7R)mRNA、Nod样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、NIMA相关激酶7(NEK7)mRNA的表达情况。结果:与模型组比较,随着时间的增加,资生肾气丸低剂量、中剂量、高剂量均可抑制小鼠扭体反应,降低扭体次数,增加小鼠扭体抑制率,降低小鼠血清中IL-1β、PGE_(2)、NGF的含量,降低P2X7RmRNA、NLRP3mRNA、NEK7mRNA的表达以抑制疼痛反应,以高剂量效果最优(P<0.05),与吲哚美辛、痛风舒片疗效相近。结论:资生肾气丸高剂量对小鼠血清疼痛因子的降低效果显著,其机制可能与嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7信号通路有关。

嘌呤受体P2X配体门控离子通道7与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的关系

目的 分析外周血胞膜上嘌呤受体P2X配体门控离子通道7(P2X7R)水平与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血及自主神经改变的关系。方法 前瞻性选取2020年8月至2022年8月三二〇一医院诊治的老年冠心病患者146例,根据心肌缺血情况分为心肌缺血组86例,非心肌缺血组60例。比较2组外周血P2X7R水平与心肌缺血总负荷(TIB)差异,分析P2X7R与TIB的相关性。采用ROC曲线分析P2X7R对心肌缺血的预测价值。以P2X7R预测心肌缺血的截断值分为高水平组76例,低水平组70例,比较2组心率变异性时域指标、频域指标差异。结果 心肌缺血组外周血P2X7R及TIB明显高于非心肌缺血组(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,P2X7R水平与TIB呈正相关(r=0.624,P<0.01)。ROC曲线分析显示,P2X7R预测老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的截断值为698.94 ng/L,曲线下面积为0.800(95%CI:0.726~0.874),敏感性、特异性分别为70.9%、88.3%。P2X7R、TIB是老年高血压合并冠心病患者心肌缺血发生的危险因素(OR=2.056,95%CI:1.373~3.079,P<0.01;OR=1.276,95%CI:1.128~1.444,P<0.01)。高水平组心率变异性时域指标明显低于低水平组,心率变异性频域指标明显高于低水平组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 外周血P2X7R是老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的影响因素,与心肌缺血严重程度相关,可反映自主神经功能损害程度。

ATP门控离子通道P2X_7受体在中枢系统的表达与功能

P2X受体是由ATP激发的离子通道,从中可渗透Na＋、K＋和Ca2＋,这些蛋白参与一系列生理过程,包括调节突触传输、平滑肌收缩、化学递质分泌和免疫反应调控。P2X7受体作为P2X受体家族最独特的成员,其与其它成员在结构和功能上有显著差异,属于低分子溶质转运的非选择性离子通道。

P2X配体门控离子通道7基因多态性在痛风发病机制中的作用

痛风是一组嘌呤代谢紊乱和/或尿酸排泄减少使尿酸盐结晶沉积导致关节肿痛的炎性反应性疾病。研究表明,仅有约10%的高尿酸血症人群会患痛风,提示痛风的发生还有其他因素。白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)作为痛风发作的重要促炎因子,其产生与P2X嘌呤受体家族中的P2X配体门控离子通道7 (purinergic receptor P2X ligand-gated ion channel 7,P2X7R)密不可分。目前发现与P2X7R相关的单核苷酸多态性位点超过13个,表明P2X7R基因多态性在痛风发病机制中起着至关重要的作用。本文综述痛风与P2X7R有关的单核苷酸多态性以及与痛风有关联的其他基因研究进展。

P2X7R过表达的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达观察

目的观察嘌呤能受体P2X配体门控离子通道7的配体(P2X7R)过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞单钠尿酸盐(MSU)晶体诱导痛风炎症反应过程中NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白、IL-1β、TNF-α表达情况。方法取人单核细胞白血病细胞系THP-1,并随机分为过表达组、空白组、模型组、对照组;过表达组和空白组分别转染P2X7R过表达质粒、空白载体质粒,转染5 d,将过表达组、空白组、模型组THP-1细胞用100 ng/mL的PMA刺激3 h后分化为巨噬细胞,另将MSU晶体用氢氧化钠溶解配制成浓度为100μg/mL的MSU乳糜状悬液加入培养液中孵育6 h;对照组正常培养。分别采用RT-PCR法和Western blot法测算巨噬细胞P2X7R mRNA、蛋白,ELISA法检测巨噬细胞上清液IL-1β、TNF-α,Western blot法测算巨噬细胞NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白。结果与对照组比较,过表达组、空白组、模型组P2X7R mRNA和蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与模型组、空白组比较,过表达组P2X7R mRNA、蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论P2X7R过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达增加,IL-1β、TNF-α水平升高可能通过激活NLRP3蛋白来实现。

离子通道受体p2X_7的研究进展

一、p2x，受体的发展史 1929年Druryt-Gyortyi首次发现静脉注射腺苷后可引起豚鼠心动过缓、尿分泌抑制和血管舒张等现象，同年Lohmann等发现ATP分子；1953年，Hollton等发现神经末梢可以释放ATP，随后ATP作为一种神经递质逐渐被揭示。1972年Burnstock提出了嘌呤能神经学说，1978年被正式命名嘌呤受体，

P2X_7受体在神经系统表达及功能的研究进展

P2X受体是对ATP及其类似物敏感的配体门控离子通道。迄今已从哺乳动物成功克隆出7种P2X亚单位（P2X1-7）。P2X7受体（P2X7 receptor，P2XTR，曾被称为P2Z）因其独特的结构和功能特点而倍受关注。P2X7R广泛分布于免疫细胞、造血细胞、上皮细胞、内皮细胞、骨组织等多种细胞和组织。在神经系统，P2X7R参与神经递质释放、胶质细胞活化，对病理状态下多个信号通路具有关键的调节作用。

人白血病细胞系P2X_7受体的表达及其介导的细胞内钙浓度变化

采用半定量RT-PCR和流式细胞术,在基因和蛋白水平研究了白血病细胞系U937、HL60和Ramos细胞P2X7受体的表达。荧光染料Fura-2/AM负载后,用荧光分光光度计测定P2X7受体激动剂三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)和苯甲酰苯甲酸ATP(2',3'-O-(4-benzoyl)benzoyl-ATP,BzATP)刺激前后细胞内钙离子浓度的变化,以确认其功能。结果表明:U937和HL60细胞系表达P2X7受体的mRNA和蛋白,Ramos不表达;在激动剂的刺激下,可引发U937和HL60细胞胞内钙浓度的显著升高,但对Ramos没有作用。当去除胞外钙离子时,ATP和BzATP刺激均不能引起U937和HL60细胞胞内钙离子浓度的升高。提示U937和HL60细胞表达P2X7受体的基因和功能蛋白,Ramos细胞则不表达该受体。

脑出血病人血清P2X7R水平与脑水肿程度及认知功能相关性研究

目的 检测脑出血病人血清胞膜上嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7(P2X7R)水平以及脑水肿程度,并分析二者与脑出血病人认知功能障碍的相关性。方法 前瞻性选取2019年7月~2021年7月本院收治的115例脑出血病人为研究组,另取同期体检健康者90例为健康对照组。检测血清P2X7R水平以及脑水肿体积;采用Pearson分析血清P2X7R水平与脑水肿体积的相关性;根据病人是否出现认知功能障碍分为无认知功能障碍组(78例)和认知功能障碍组(37例),多因素Logistic回归分析脑出血病人认知功能障碍的影响因素,绘制血清P2X7R水平与脑水肿体积对脑出血病人认知功能评估的ROC曲线。结果 研究组病人发病第1天时血清P2X7R水平高于健康对照组(P<0.05),脑出血病人血清P2X7R水平、脑水肿体积在1~5天出现逐渐升高的趋势,在第5天达到峰值然后降低(P<0.05);脑出血病人发病第1、3、5、7天血清P2X7R水平与脑水肿体积均呈正相关(r=0.712、0.583、0.589、0.472,P<0.05);认知功能障碍组血清P2X7R水平、脑水肿体积均高于无认知功能障碍组(P<0.05);血清P2X7R水平、脑水肿体积是影响脑出血病人认知功能的危险因素(P<0.05);血清P2X7R水平、脑水肿体积单独及联合预测病人认知功能障碍的曲线下面积分别是0.763、0.750和0.829。结论 脑出血病人血清P2X7R水平升高,脑水肿体积增大,二者呈正相关,联合检测可预测病人认知功能障碍的发生。

脑内P2X7受体研究进展

三磷酸腺苷（ATP）是细胞供能和储能的物质，在研究中发现它还是中枢神经系统的一种重要神经递质。1970年Burnstock G证实ATP是非胆碱能和非肾上腺素能神经释放的神经递质，正式提出了神经元细胞膜表面存在嘌呤受体。1985年他将ATP结合的受体命名为嘌呤能受体，并将其分为P1（腺苷）、P2（腺嘌呤核苷酸）两大类受体。

P2X7受体在人固有免疫中的作用

P2受体是嘌呤受体的一种。P2受体包括P2X和P2Y,P2X受体是一类离子型配体门控通道有7个不同的亚型（P2X1-7）[1],P2Y受体是一类与G蛋白偶联的代谢型受体,发现有8个亚型（P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11-14）。近年来,随着科研工作者对P2X7受体的研究深入,P2X7受体的功能得到了更全面的认识。

P2X7受体与宫颈癌相关性的研究进展

嘌呤类受体分为腺苷激活的P1受体和细胞外核苷酸激活的P2受体两大类。

特布他林辅助治疗支原体肺炎患儿的疗效及对CXCL8、P2X7受体的影响

目的:探究特布他林对支原体肺炎(MPP)患儿的CXC趋化因子配体8(CXCL8)、P2X7受体的影响。方法:选择2016年6月~2018年5月南通市第二人民医院收治的MPP患儿104例作为研究对象。采用随机数字表法将所选患者分为治疗组和对照组,各52例。常规治疗后对照组给予阿奇霉素序贯疗法治疗,治疗组在此基础上雾化吸入硫酸特布他林。观察两组患儿临床症状消失时间,并测定CXCL8、P2X7受体等的表达,评价临床疗效及不良反应。结果:治疗组患儿临床主要症状、体征消失时间均短于对照组(均P<0.05);治疗组临床治疗效果优于对照组(92.3%vs.76.9%,P<0.05);治疗前两组患儿的CXCL8、P2X7受体及TNF-α和IL-1β表达水平相近(均P>0.05),治疗后各细胞因子水平均降低(P<0.05),与同期对照组比较,治疗组下降幅度更明显(P<0.05);两组用药不良反应发生率比较差异无统计学意义[11.5%(6/52)vs.5.8%(3/52),(P>0.05)]。结论:特布他林辅助治疗MPP患儿可降低CXCL8、P2X7受体表达水平,疗效显著,安全性高。

ATP门控离子通道研究进展

ATP是细胞内组成成分和能源物质,但它也可以作为许多细胞表面P2受体的胞外配体[1].1972年,Geoffery 首次提出嘌呤受体的概念,用来描述细胞膜腺苷受体和ATP受体.Harden等1995从分子生物学上证实ATP受体的存在 [2] .

腺嘌呤核苷三磷酸-嘌呤受体P2X配体门控离子通道7-白细胞介素-1β通路参与痛风性关节炎发病的初步研究

目的 探讨腺嘌呤核苷三磷酸-嘌呤受体P2X配体门控离子通道7-IL-β（ATP-P2X7R-IL-1β）通路在调控痛风性关节炎发病中的作用.方法 分离痛风与高尿酸血症患者外周血白细胞,分别用尿酸钠盐（MSU）和MSU＋ATP（5＇-三磷酸腺苷二钠盐水合物）刺激细胞培养,ELISA检测培养上清液中IL-1β浓度;流式细胞术检测外周血CD14＋P2X7R＋细胞.统计学处理采用t检验、非参数检验、Pearson相关分析.结果 ①单独MSU刺激时,痛风和高尿酸血症患者细胞培养液中IL-1β 的浓度[（50.9±1.5）pg/ml,（6.5±7.1）pg/ml]差异无统计学意义（Z=-1.088,P＞0.05）;用MSU＋ATP共同刺激白细胞时,痛风患者细胞培养液中 IL-1β 的浓度[（148±218） pg/ml]显著高于高尿酸血症患者[（24 ±39） pg/ml]（Z=-2.177,P＜0.05）.②高尿酸血症患者中,MSU刺激组[（6±7） pg/ml]和MSU＋ATP共同刺激组[（24±39） pg/ml]细胞培养液 中 IL-1β浓度差异无统计学意义（Z=-1.514,P＞0.05）;痛风患者中MSU＋ATP共同刺激组IL-1β浓度[（148± 218） pg/ml],显著高于MSU刺激组[（50.9±1.5） pg/ml],差异有统计学意义（Z=-2.704,P＜0.05）.③痛风患者外周血中CD14＋P2X7R＋细胞的百分比显著高于高尿酸血症患者[（1.6±0.5）％,（1.0±0.5）％],差异有统计学意义（t=-3.567,P＜0.05）.④痛风和高尿酸血症患者CD14＋P2X7R＋细胞的百分比与细胞培养液IL-1β浓度相关性均无统计学意义（r=-0.504,P＞0.05;r=-0.379,P＞0.05）.结论 ATP参与了痛风的发病,可能是引起急性痛风性关节炎发病的重要信号;其受体P2X7R的功能状态可能是决定痛风能否发病的重要因素.

P2X受体研究进展

P2X受体为配体门控离子通道,属于P2受体家族.P2X受体的配体是ATP,胞外ATP结合时P2X受体通道打开,允许阳离子(Na+、Ca2+等)通过.目前已克隆了7个哺乳动物的P2X(P2X1～7)受体,并阐明了它们的药理学特性.天然P2X受体可以组装成同型或异型聚合体,形成功能性离子通道.对有关P2X受体的结构、分布、功能、生物物理学特性等研究的最新进展进行了综述.

嘌呤受体P2X配体门控性离子通道7在初发系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞的表达及意义

目的探讨嘌呤受体P2X配体门控性离子通道7（P2X7R）在初发系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞上的表达及其与部分炎症细胞因子的相关性。方法选择29例初发SLE患者及28名健康对照，分离外周血单个核细胞（PBMC），采用流式细胞术检测淋巴细胞、CD4＋淋巴细胞、CD19＋淋巴细胞上P2X7R的表达水平，酶联免疫吸附试验（EusA）检测P2X7R相关的细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6及肿瘤坏死因子（TNF）-α水平。采用t检验、Wilcoxon秩和检验和Spearman相关分析进行统计学分析。结果①SLE患者外周血CD4-淋巴细胞、CD19＋淋巴细胞表面P2X7R的表达明显高于健康对照组[CD4＋淋巴细胞：2．21（3．55）和0．89（1．15），Z=-1．527，P=0．015；CD19＋淋巴细胞：11．53（20．01）和6．66（6．27），Z=-2．091，P=-0．037]；②SLE患者血清中3种细胞因子水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义；SLE患者外周血淋巴细胞中P2X7R表达水平与IL-6呈正相关（r=0．449，P=0．015）；③SLE患者中，关节炎组淋巴细胞上P2X7R表达显著高于非关节炎组[3．84（11．53）与0．90（1．81），Z=-2．772，P=0．006]；P2X7R在淋巴细胞及CD19＋淋巴细胞中的表达均与SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分呈正相关；淋巴细胞上的P2X7R表达与抗B：糖蛋白I抗体呈正相关（r=0．575，P=0．008）。结论P2X7R可能通过介导炎症因子的释放参与SLE发病；可能与SLE患者的关节炎、狼疮肾炎及神经精神狼疮相关。

嘌呤受体P2X配体门控性离子通道7及相关炎症因子与系统性红斑狼疮抑郁障碍的发病关系

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是典型的自身免疫性疾病,免疫功能紊乱是其主要特点,有多种自身抗体和免疫炎性细胞参与其发病.SLE临床表现复杂多样,可以累及全身多个系统,神经精神狼疮（neuropsychiatric systemic lupus erythematosus,NPSLE）是最常见的临床表现之一并与预后密切相关,发病率为12%～71%.

P2X受体在血细胞中的表达及意义

P2X是ATP配体门控离子通道,属P2受体族。与细胞外ATP结合时P2X通道开放,允许阳离子(Na^+、Ca^(2+)等)通过。已克隆了7个哺乳动物的P2X(P2X_(1-7))受体,并阐明了其结构和功能。天然P2X可以同型或异聚体形式组成离子通道,在包括血液在内的多种组织中存在,与信号传导有关。P2X的异常与人类疾病的关系已引起关注,如慢性淋巴细胞白血病P2X的表达水平可能有预后意义。本文介绍P2X的结构、功能及其与血细胞关系的研究进展。