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复方七芍降压片对SHR大鼠P2Y6、MEK1/2、ERK1/2及血管重塑标志物MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响 被引量:6
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作者 任卫琼 李弘 +5 位作者 刘叶倩 龚姗 刘林 曾勇 张稳 王宇红 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期156-162,共7页
目的研究复方七芍降压片对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉中G蛋白偶联受体P2Y6、酪氨酸激酶受体(MEK1/2)、丝裂原活化蛋白激酶(ERK1/2)及血管重塑标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)等蛋白表达的影响... 目的研究复方七芍降压片对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉中G蛋白偶联受体P2Y6、酪氨酸激酶受体(MEK1/2)、丝裂原活化蛋白激酶(ERK1/2)及血管重塑标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)等蛋白表达的影响,探讨复方七芍降压片干预血管重塑的作用机制。方法将雄性SHR大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦片组(13.5 mg·kg^-1)、复方七芍降压片组(8.73 g·kg^-1),每组10只,另设10只WKY大鼠为正常对照组;灌胃给药,每日1次,连续给药6周。采用无创血压仪测定每周大鼠尾动脉血压;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;免疫组化法检测肠系膜动脉中P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9及TIMP-1蛋白的表达;肠系膜动脉组织HE染色后进行体视学分析,测量肠系膜动脉血管中膜厚度及相同位置的管腔直径,计算两者比值作为动脉壁厚度(WT)值。结果与正常对照组比较,模型组大鼠各周血压明显上升(P<0.01);肠系膜动脉P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值、WT值明显升高(P<0.05,P<0.01),TIMP-1表达明显降低(P<0.01);血清中IL-1β水平明显升高(P<0.01)。药物干预后,与模型组比较,复方七芍降压片组各周血压均明显降低(P<0.01);肠系膜动脉P2Y6、MEK1/2、ERK1/2、MMP-9蛋白表达及MMP-9/TIMP-1比值、WT值均明显降低(P<0.05,P<0.01),TIMP-1表达明显升高(P<0.05);血清中IL-1β水平明显降低(P<0.05)。结论复方七芍降压片能够显著降低SHR大鼠血压,改善血管重塑,可能与调控肠系膜动脉中P2Y6、MEK1/2、ERK1/2蛋白表达,减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 复方七芍降压片 高血压 血管重塑 炎症 p2y6 MEK1/2 ERK1/2
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膜周蛋白PICK1促进细胞膜上P2Y6受体表达及小胶质细胞的吞噬功能
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作者 朱佳 徐水凌 蒋小红 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期783-789,共7页
膜周蛋白PICK1(protein interacting C-kinase-1)参与多种膜受体与膜上蛋白的运输并影响细胞的功能。本研究旨在探索小胶质细胞PICK1与P2Y6受体之间的相互作用是否可改变P2Y6受体在细胞膜上的表达,以及对小胶质细胞吞噬功能的影响。采... 膜周蛋白PICK1(protein interacting C-kinase-1)参与多种膜受体与膜上蛋白的运输并影响细胞的功能。本研究旨在探索小胶质细胞PICK1与P2Y6受体之间的相互作用是否可改变P2Y6受体在细胞膜上的表达,以及对小胶质细胞吞噬功能的影响。采用小鼠脑内皮层原代培养的小胶质细胞进行免疫共沉淀实验揭示,与PICK1敲除小鼠比较,野生小鼠皮层小胶质细胞内存在PICK1-P2Y6受体相互作用。生物素化、密度梯度离心结合蛋白质印迹实验证明,PICK1基因敲除小鼠的小胶质细胞膜表面P2Y6受体表达水平降低。荧光胶珠吞噬实验结合免疫组织化学染色显示,PICK1基因敲除小鼠的小胶质细胞对UDP(刺激)引起的荧光胶珠吞噬作用减弱。蛋白质印迹实验显示,与野生型小鼠比较,PICK1基因敲除小鼠小胶质细胞中的Akt-308T磷酸化水平明显降低;使用Akt抑制剂API-2能有效抑制Akt在小胶质细胞内的(磷酸化)激活及UDP刺激引起的吞噬作用。上述结果表明,敲除PICK1能下调小胶质细胞膜上P2Y6受体的表达,并降低小胶质细胞的吞噬功能,且这一过程依赖Akt磷酸化修饰。总之,PICK1可促进P2Y6受体在细胞膜上的表达,是小胶质细胞吞噬功能的重要调节子;敲除PICK1可下调P2Y6膜受体表达,并降低小胶质细胞的吞噬功能。这一结果可加深对小胶质细胞的吞噬功能及机制的认识。 展开更多
关键词 膜周蛋白pICK1 p2y6受体 小胶质细胞 吞噬
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嘌呤P2Y受体激动剂ADPβS对脊髓来源小胶质细胞产生IL-1β、IL-6和TNF-α的刺激作用 被引量:6
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作者 刘培雯 牛娟 +6 位作者 徐陶 罗培 周瑞 乐明霞 黄杜娟 刘晓红 曾俊伟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期711-716,共6页
目的:观察嘌呤P2Y受体激动剂ADPβS对脊髓背角来源小胶质细胞炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达和释放的影响。方法:培养新生SD大鼠脊髓背角小胶质细胞,PCR检测ADPβS作用下小胶质细胞IL-1β、IL-6和TNF-α在mRNA水平表达变化;ELISA检测... 目的:观察嘌呤P2Y受体激动剂ADPβS对脊髓背角来源小胶质细胞炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达和释放的影响。方法:培养新生SD大鼠脊髓背角小胶质细胞,PCR检测ADPβS作用下小胶质细胞IL-1β、IL-6和TNF-α在mRNA水平表达变化;ELISA检测ADPβS作用下小胶质细胞IL-1β、IL-6和TNF-α释放变化。结果:与正常对照组相比,ADPβS(10μmol/L)可以刺激脊髓背角小胶质细胞Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达上调。P2Y_(12)受体拮抗剂MRS2395和P2Y_(13)受体拮抗剂MRS2211部分阻断ADPβS刺激小胶质细胞IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达上调,MRS2395和MRS2211联合预处理几乎全部阻断ADPβS刺激小胶质细胞Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达上调。结论:P2Y_(12)/P2Y_(13)受体激活可以促进脊髓背角小胶质细胞激活和IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达上调及释放。 展开更多
关键词 p2y受体 小胶质细胞 IL-1Β IL-6 TNF-Α 大鼠
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AM1241抑制ADPβS诱发培养大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体表达及炎症因子释放 被引量:2
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作者 乐明霞 徐陶 +5 位作者 周瑞 黄杜娟 杨俊娜 何丽 刘晓红 曾俊伟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期34-40,共7页
目的:离体条件下,观察大麻素CB2受体激动剂AM1241对嘌呤P2Y受体激动剂ADPβS诱发的脊髓背角小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体mRNA表达以及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α释放的影响。方法:培养纯化新生SD大鼠(<3 d)脊髓背角小胶质细... 目的:离体条件下,观察大麻素CB2受体激动剂AM1241对嘌呤P2Y受体激动剂ADPβS诱发的脊髓背角小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体mRNA表达以及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α释放的影响。方法:培养纯化新生SD大鼠(<3 d)脊髓背角小胶质细胞,荧光定量PCR技术检测AM1241(10^(-5)mol/L,1 h)对ADPβS(10^(-5)mol/L,3 h)诱发的背角小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体mRNA表达的影响;ELISA技术检测AM1241(10^(-5)mol/L,1 h)对ADPβS(10^(-5)mol/L,3 h)诱发的小胶质细胞IL-1β、IL-6和TNF-α释放的影响。结果:与正常对照组相比,ADPβS(10^(-5)mol/L,3 h)可以刺激脊髓背角小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体在mRNA水平表达上调(P<0.05),IL-1β、IL-6和TNF-α释放相应增加(P<0.05)。AM1241(10^(-5)mol/L,1 h)几乎完全阻断ADPβS刺激小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体mRNA表达上调以及IL-1β、IL-6和TNF-α释放的效应(P<0.05);AM1241的这种抑制效应可以被CB2受体拮抗剂AM630(10^(-5)mol/L,1 h)反转(P<0.05)。结论:大麻素CB2受体激活可以抑制ADPβS诱发的脊髓背角小胶质细胞P2Y_(12)和P2Y_(13)受体mRNA水平表达上调以及IL-1β、IL-6和TNF-α释放。 展开更多
关键词 p2y12受体 p2y13受体 小胶质细胞 IL-1Β IL-6 TNF-α 大鼠
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复方七芍降压片对TNF-α诱导的与平滑肌细胞共培养的血管内皮细胞P2Y6信号通路相关因子表达的影响 被引量:3
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作者 刘叶倩 李弘 +7 位作者 龚姗 陈春茗 马丹凤 刘林 王志琪 曾勇 王宇红 任卫琼 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2020年第11期58-65,共8页
目的观察复方七芍降压片对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的与平滑肌细胞共培养的血管内皮细胞中炎症因子与P2Y6、MEK1/2、ERK1/2蛋白表达的影响,探讨其治疗高血压的机制。方法采用内皮细胞和平滑肌细胞构建共培养体系,利用炎症因子TNF-... 目的观察复方七芍降压片对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的与平滑肌细胞共培养的血管内皮细胞中炎症因子与P2Y6、MEK1/2、ERK1/2蛋白表达的影响,探讨其治疗高血压的机制。方法采用内皮细胞和平滑肌细胞构建共培养体系,利用炎症因子TNF-α建立高血压炎症微环境。将共培养好的细胞随机分为正常组、模型组、空白血清组、MRS2578组、厄贝沙坦药物血清组、复方七芍药物血清组、MRS2578+复方七芍药物血清组。MRS2578组和MRS2578+复方七芍药物血清组加入10μmol/L MRS2578。正常组和模型组加入等量培养液,余各组加入10%药物血清及空白血清。采用倒置显微镜观察内皮细胞和平滑肌细胞形态;采用ELISA检测细胞上清液炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-10水平;采用免疫荧光、Western blot、RT-qPCR技术检测内皮细胞P2Y6、MEK1/2、ERK1/2的表达。结果与正常组比较,模型组和空白血清组内皮细胞和平滑肌细胞数量明显减少,细胞轮廓不清晰,折光性降低,漂浮的死细胞团块增多;IL-1β含量显著增加,IL-10含量显著减少(P<0.01);P2Y6、MEK1/2、ERK1/2荧光强度、灰度值、mRNA水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,复方七芍药物血清组内皮细胞和平滑肌细胞折光性增强,细胞形态恢复正常;IL-1β水平明显降低(P<0.05);P2Y6、MEK1/2、ERK1/2荧光强度、灰度值、mRNA水平明显降低(P<0.01)。结论复方七芍降压片可明显调控TNF-α诱导的内皮炎症反应,改善内皮炎症导致的平滑肌细胞损伤,维持其正常功能,其机制可能与调控内皮细胞P2Y6受体及其下游信号通路MEK1/2、ERK1/2蛋白表达,改善炎症反应有关。 展开更多
关键词 复方七芍降压片 内皮细胞 平滑肌细胞 p2y6-mek1/2-erk1/2 炎症反应 血管重塑 大鼠
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P2 Y12受体对骨癌痛大鼠及其脊髓炎症因子表达的调节 被引量:4
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作者 王寒琪 许世杰 +4 位作者 姚明 刘明娟 徐龙生 倪华栋 连庆泉 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第32期2531-2534,共4页
目的:观察鞘内注射P2Y12受体抑制剂MRS2395对骨癌痛大鼠痛阈及其脊髓炎症因子表达的影响,探讨P2 Y12受体与炎症因子在骨癌痛发病机制中的可能作用。方法雌性SD大鼠32只,随机数字表法随机分为4组:假手术组( S组)、MRS2395组( M组... 目的:观察鞘内注射P2Y12受体抑制剂MRS2395对骨癌痛大鼠痛阈及其脊髓炎症因子表达的影响,探讨P2 Y12受体与炎症因子在骨癌痛发病机制中的可能作用。方法雌性SD大鼠32只,随机数字表法随机分为4组:假手术组( S组)、MRS2395组( M组)、胫骨癌痛组( A组)、胫骨癌痛MRS2395组( MA组)。 S组、M组左胫骨上端骨髓腔各注入Hank′s液10μl,A组、MA组左胫骨上端骨髓腔各注入Walker256癌细胞悬液10μl。骨癌痛造模同时均进行L3-4间隙鞘内置管,模型制备成功后第9~12天, S 组、A 组鞘内注射0.9%生理盐水15μl/d, M 组、MA 组鞘内注射 MRS2395(400 pmol/μl)15μl/d。术后第9~12天鞘内注药前、后每10分钟测试1次大鼠左后足机械痛阈值,术后第12天鞘内注药测定机械痛阈值后,取L4-L6左侧脊髓背角,采用酶联免疫吸附测定法测脊髓炎症因子IL-1β、IL-6的表达情况。结果建模后第9天,S组、M组、A组、MA组给药后20 min机械痛阈值分别为(34.2±5.8)g、(34.4±5.7)g、(21.0±2.0)g、(25.4±2.3)g,差异有统计学意义(F=18.679,P<0.01);与S组、M组比较,A组机械痛阈值下降;与A组比较,MA组机械痛阈值增高。建模后第12天,S组、M组、A组、MA组大鼠脊髓IL-1β含量分别为(74.0±18.6)pg/ml、(98.4±17.3) pg/ml、(253.5±66.4)pg/ml、(146.3±22.3) pg/ml,差异有统计学意义(F=18.221,P<0.01);与S组、M组比较,A组大鼠脊髓IL-1β含量明显升高;S组、M组、A组、MA组大鼠脊髓IL-6含量分别为(377.4±65.8)pg/ml、(331.6±67.9) pg/ml、(856.1±53.4) pg/ml、(596.1±34.9) pg/ml,差异有统计学意义(F=70.880,P<0.01);与S组、M组比较,A组大鼠脊髓IL-6含量明显升高;与A组比较, MA组大鼠鞘内注射MRS2395后IL-1β和IL-6含量均明显降低。结论鞘内注射MRS2395可缓解骨癌痛大鼠的痛觉过敏,抑制骨癌痛大鼠脊髓内炎症因子表达上调,P2Y12受体可能通过调节IL-1β、IL-6的表达参与骨癌痛的发生。 展开更多
关键词 骨肿瘤 疼痛 受体 嘌呤能p2y12 白细胞介素1Β 白细胞介素6
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