青蒿素对狼疮性肾炎小鼠外周血单个核细胞GRα mRNA、GRβ mRNA及肾组织P300/CBP蛋白表达的影响

目的:探讨青蒿素对狼疮性肾炎小鼠外周血单个核细胞GRαmRNA、GRβmRNA及肾组织P300/CBP蛋白表达的影响。方法:40只雌性B6D2F1代杂交小鼠随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组(泼尼松混悬液灌养:6.45 mg/kg)及青蒿素组(青蒿素混悬液灌养:150 mg/kg)。通过诱导方法建立狼疮性肾炎小鼠模型,分别采用RT-PCR及免疫组化(SP)法等检测技术测定外周血单个核细胞GRα mRNA、GRβ mRNA表达及肾组织转录共激活因子P300/CBP蛋白表达情况,观察青蒿素对上述指标的影响。结果:与模型组比较,青蒿素组动物外周血单个核细胞GRαmRNA和肾组织转录共激活因子P300/CBP蛋白表达均有不同程度升高(P<0.01),GRβ mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),且青蒿素对GR αmRNA和转录共激活因子P300/CBP蛋白表达的影响明显优于泼尼松组(P<0.01)。结论:青蒿素治疗狼疮性肾炎的作用机制可能与调节外周血单个核细胞GRα mRNA、GRβ mR-NA及肾组织P300/CBP蛋白表达有关。

A-485通过抑制P300/CBP诱导的H3K18ac/H3K27ac减轻糖尿病肾小管细胞脂质沉积

目的观察A-485对糖尿病小鼠肾小管损伤的保护作用及机制。方法将18只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)组和A-485治疗组。DKD小鼠模型构建采用高脂饲料饲喂8周联合腹腔注射链脲佐菌素5天的方法。随后,A-485治疗组隔日给予1次A-485(10 mg/kg)腹腔注射,共4周。治疗结束后,检测小鼠肾功能、P300酶活性及脂质沉积情况;Western blot法检测SREBP-1、FASN、ACC、ChREBP、P300、CBP、H3K18ac和H3K27ac蛋白的表达水平。结果与对照小鼠相比,DKD小鼠FBG(2.52倍)、BUN(2.89倍)、Scr(2.13倍)及UAE(4.21倍)显著升高(P<0.01);A-485干预能够降低BUN(0.511倍)、Scr(0.636倍)及UAE(0.574倍)的水平(P<0.01)。电镜及油红O染色结果显示,A-485干预抑制糖尿病小鼠肾小管细胞内脂滴形成及SREBP-1(0.544倍)、FASN(0.449倍)、ACC(0.306倍)、ChREBP(0.317倍)蛋白高表达(P<0.01)。同时,A-485干预下调P300酶活性(0.546倍),抑制H3K18ac(0.337倍)和H3K27ac(0.308倍)的表达(P<0.01)。结论A-485能够明显改善糖尿病小鼠肾组织脂代谢紊乱,该作用可能是通过抑制P300诱导的H3K18ac和H3K27ac实现的。

组蛋白乙酰转移酶P300和去乙酰化酶SIRT2在乳腺浸润性导管癌中的表达

目的 探讨乳腺浸润性导管癌中组蛋白乙酰转移酶P300(P300)和去乙酰化酶SIRT2(SIRT2)的表达及其与临床病理特征的关系。方法 选取385例乳腺浸润性导管癌组织为病例组,36例癌旁组织为对照组,制成组织芯片,采用免疫组化En Vision二步法检测两组中P300和SIRT2的蛋白表达水平并比较其表达差异;分析病例组中P300和SIRT2蛋白水平与患者临床病理特征的关系,采用Spearman法分析乳腺癌患者中P300和SIRT2蛋白的相关性;采用Kaplan-Meier和Log rank test统计学方法分析P300和SIRT2蛋白与乳腺癌患者预后的关系。结果 病例组P300蛋白低表达率高于对照组、SIRT2蛋白低表达率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织中,P300蛋白在肿瘤最大径>5 cm的低表达率高于≤5 cm、在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的低表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、在有淋巴结转移的低表达率高于无淋巴结转移、在Ki67高表达的低表达率高于Ki67低表达、在LuminalB型中的低表达率高于三阴性乳腺癌(TNBC),差异有统计学意义(P<0.05);SIRT2蛋白在组织学分级3级中的低表达率低于1~2级、在肿瘤最大径>5 cm的低表达率高于≤5 cm、在Ki67高表达的低表达率低于Ki67低表达、在LuminalA型和LuminalB型中的低表达率低于HER2阳性型和TNBC,差异有统计学意义(P<0.05);P300和SIRT2蛋白的表达呈负相关(r=-1.77,P<0.001);P300蛋白低表达比高表达总体无病生存率低(P=0.046)。结论 P300和SIRT2蛋白可能与乳腺浸润性导管癌的发生、发展相关,P300蛋白低表达可能提示乳腺浸润性导管癌患者预后较差。

p300/CBP核蛋白与基因转录活化

CREB结合蛋白和p300都是分子量很大的核蛋白质。由两个特殊基因编码,但两者在结构模体上高度相似,均具有调节基因转录和细胞生长的功能,而且,其基因在所有的哺乳动物细胞中表达(至少现在还没有例外)。p300/CBP在细胞中可与多种基因转录活化因子结合而形成辅活化子复合体,在介导各种转录因子的基因转录活化作用中起着重要作用。

P300/CBP相关因子在BCa细胞DNA损伤修复与肿瘤干细胞干性维持中的作用

目的探究P300/CBP相关因子(PCAF)在人膀胱癌(BCa)细胞DNA损伤修复与肿瘤干细胞干性维持中的作用。方法利用Ad-PCAF RNAi转染人膀胱癌细胞系5637,荧光显微镜和Western blot检测转染效果,选择顺铂诱导膀胱癌细胞DNA损伤,MTS法检测损伤细胞的增殖活性,免疫荧光染色检测损伤细胞内PCAF与γ-H2AX的募集情况,细胞彗星实验分析顺铂诱导细胞DNA损伤的程度;从膀胱癌细胞中分选CD44^(+)标记的肿瘤干细胞,Western blot检测Bca干细胞标志物67LR、OCT4及YAP1蛋白表达水平变化,细胞成球实验检测细胞干性变化。结果Ad-PCAF RNAi转染5637细胞后,明显抑制了细胞中PCAF表达(P<0.05);在下调PCAF表达后,20、40、60、80、100 nmol/L的顺铂处理下5637细胞活性下降,增强了5637细胞对顺铂的敏感性,细胞内γ-H2AX焦点形成明显增加,细胞拖尾较长,拖尾细胞数目和尾距均增加(P<0.05);经分选得到CD44^(+)比例为93%且67LR、OCT4及YAP1蛋白呈阳性表达的膀胱癌干细胞,通过下调PCAF表达,肿瘤干细胞的球体体积变小,成球个数也减少(P<0.05)。结论通过下调PCAF的表达能够抑制膀胱癌细胞DNA损伤修复,调控肿瘤干细胞的干性维持。

CBP/P300介导的组蛋白H3K9乙酰化修饰对GATA4表达的影响

目的明确GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中的时序表达,并阐明其组蛋白修饰调控机制。方法选取胎龄11.5 d(E11.5)至新生0.5 d胎鼠心脏,RT-PCR检测胎鼠心肌细胞中GATA4mRNA表达水平,CHIP-QPCR检测GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平及与CBP/P300的结合水平。用CBP30干预心肌祖细胞,RT-PCR检测心肌祖细胞在不同浓度CBP30(0.5、1、2、4μmol/L)干预不同时间点(6、12、24、36 h)后GATA4 mRNA表达水平,CHIP-QPCR检测心肌祖细胞中GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平及与CBP/P300的结合水平。结果 1小鼠胚胎心脏发育过程中GATA4表达量,E14.5明显高于E11.5(P<0.05);CHIP结果显示E14.5GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平高于E11.5(P<0.05);E14.5与CBP/P300的结合水平亦高于E11.5(P<0.05)。2CBP30干预心肌祖细胞后,GATA4表达量较对照组明显降低(P<0.05)。CHIP结果显示CBP30组GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平及与CBP/P300的结合水平较对照组显著降低(P<0.05)。结论 CBP/P300可通过介导组蛋白H3K9乙酰化修饰参与调控GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中的时序表达。

胃癌组织中p300/CBP、Smad2蛋白表达及其临床意义

目的检测胃癌组织中p300/CBP、Smad2蛋白的表达,探讨p300/CBP在胃癌的发生与发展中的作用。方法采用免疫组化S-P法,检测51例胃癌和51例正常胃黏膜组织中p300/CBP、Smad2蛋白的表达;结果p300/CBP、Smad2在胃癌组织中的免疫组化染色强度分别为(5.2635±1.0047),(5.7027±0.6330),均明显低于相应正常胃黏膜组织分别为(12.9769±0.9274),(15.2297±0.8871),P<0.01。进展期胃癌组织中p300/CBP、Smad2的染色强度分别为(4.4274±1.3970),(4.6574±1.1281),均显著低于早期胃癌组织分别为(6.6684±1.0341),(7.4632±1.2856),P<0.05;伴淋巴结转移组p300/CBP、Smad2的染色强度分别为(4.4092±0.8203),(4.4115±0.7737)显著低于无淋巴结转移组分别为(6.8263±2.0127),(8.0699±0.7854),P<0.05;p300/CBP、Smad2染色强度与胃癌分化程度、患者年龄及性别无显著相关性。胃癌组织中p300/CBP的低表达与Smad2的低表达呈正相关。结论p300/CBP、Smad2在胃癌中的表达水平明显降低,并与胃癌的分期以及淋巴结的转移有关,提示p300/CBP、Smad2低表达使TGF-β信号传导通路受阻,可能参与胃癌的发生发展过程。

凋亡抑制蛋白Survivin和p300/CBP相关因子在宫颈癌组织中的表达以及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Survivin和p300/CBP相关因子在宫颈癌组织中的表达情况,以及两者之间的关联性。方法选取2016年2月~2020年2月东营市东营区人民医院收治的40例宫颈癌患者和10例非宫颈癌患者作为研究对象,分为宫颈癌组和非宫颈癌组。应用免疫组织化学SP法检测Survivin蛋白和p300/CBP相关因子在宫颈组织中的表达,比较分析两组Survivin蛋白和p300/CBP相关因子表达的特点以及临床意义。结果宫颈癌组Survivin蛋白阳性表达率(72.5%)高于非宫颈癌组(0.0%),差异有高度统计学意义(χ^2=17.262,P<0.001);Survivin蛋白的阳性表达率随宫颈癌肿瘤分期及病理分级的增高而逐渐增高(P<0.05),与患者年龄和组织学类型无关(P>0.05);宫颈癌组p300/CBP相关因子阳性表达率(40.0%)低于非宫颈癌组(80.0%),差异有统计学意义(χ^2=5.128,P=0.024);p300/CBP相关因子在子宫颈癌组织中的阳性表达率随宫颈癌肿瘤分期及病理分级的增高而逐渐降低(P<0.05),与患者年龄和组织学类型无关(P>0.05)。Survivin蛋白和p300/CBP相关因子在宫颈癌组织中的表达有较密切的关联性。结论Survivin蛋白的异常高表达和p300/CBP相关因子的低表达甚至不表达在宫颈癌的发展中起一定作用,与宫颈癌的临床分期和病理分级有关,并且提示宫颈癌预后不良。两种蛋白之间亦存在着关联性。

TSG101与P21及P300/CBP在肺鳞癌和肺腺癌中的表达及意义

背景与目的在成纤维细胞3T3随机突变试验中证实肿瘤易感基因TSG101(tumor suscepti-bility gene101)是一个潜在的肿瘤抑制基因。本研究的目的旨在探讨TSG101在肺鳞癌和肺腺癌组织中的表达,以及与性别、年龄、肿瘤大小、组织类型、肿瘤分化、分期、淋巴结转移的关系,分析其与P21及P300/CBP是否存在相关性。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测79例肺鳞癌和肺腺癌组织及相应癌旁正常肺组织中TSG101、P21及P300/CBP的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。采用Western blot方法检测TSG101在26例肺癌及其在相应正常肺组织中蛋白的表达情况。结果TSG101、P21及P300/CBP在肺鳞癌和肺腺癌组织中的表达率分别为59.49%、60.76%及56.96%,TSG101的表达与P21、P300/CBP的表达呈显著正相关。TSG101、P21及P300/CBP在中高分化肺癌中的表达显著高于低分化肺癌(P均<0.05);不伴有淋巴结转移的肺癌组织中TSG101、P21及P300/CBP的表达显著高于伴有淋巴结转移者(P<0.05)。TSG101在肺鳞癌和肺腺癌中的蛋白水平显著低于其在相应正常肺组织中的表达。结论TSG101、P21及P300/CBP的表达与肺鳞癌和肺腺癌组织的分化、转移密切相关,且三者在肺癌中的表达呈显著正相关,可作为评价肺癌浸润、转移的生物学标志。

小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白乙酰化酶亚型p300调控心脏特异转录因子的动态表达

目的:观察小鼠胚胎心脏发育过程中GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的动态表达和这些基因的启动子区域组蛋白H3乙酰化修饰状态的变化,以及组蛋白乙酰化酶亚型p300对这些基因启动子的直接调控作用,为进一步研究先天性心脏疾病的发生机制奠定基础。方法:选取胎龄(Embryoday,E)10.5d和16.5d小鼠正常胚胎心脏,用实时荧光定量PCR(RealTimePCR)的方法观察上述基因mRNA的动态表达;采用染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation,ChIP),用ChIP级抗乙酰化H3和抗p300抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用RealTimePCR扩增抗体所富集的上述基因启动子的DNA量,观察胚胎心脏发育过程中乙酰化组蛋白及组蛋白乙酰化酶亚型p300是否参与调控上述四种心脏特异转录因子的表达。结果:①胎龄E10.5d和E16.5d小鼠胚胎心脏的GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因的mRNA表达水平都有明显差异(P<0.05),其中GATA4和MEF2C mRNA相对β-actin的表达水平,E10.5明显低于E16.5,而Nkx2.5和Tbx5mRNA相对表达水平,E10.5明显高于E16.5;并且ChIP结果显示这些基因启动子的乙酰化水平也随着时间而改变,但差异无统计学意义。②E10.5和E16.5胚胎小鼠心脏中,p300抗体均能免疫沉淀GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5基因启动子,其沉淀的基因量在这两个小鼠心脏发育的关键时间点有所不同,但差异无统计学意义。结论:小鼠胚胎心脏发育过程中,心脏发育相关基因GATA4、Nkx2.5、MEF2C、Tbx5呈现动态表达,提示这些基因在心脏发育不同阶段具有重要作用。ChIP结果提示p300介导的组蛋白乙酰化修饰可能为调节这些基因动态表达的机制之一。

HIF-1α与P300/CBP在肺鳞癌和肺腺癌中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子(HIF-1α)和P300/CBP在肺鳞癌和肺腺癌中的表达及其与分型、分化、转移的关系。方法:采用免疫组织化学(SP)法检测60例肺鳞癌和肺腺癌组织中HIF-1α及P300/CBP的表达。结果:HIF-1α蛋白表达的阳性率在癌组织中为48.33%,显著高于正常支气管黏膜组织(P<0.01),P300/CBP的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和患者吸烟与否显著相关,但与年龄性别无关,肺鳞癌和肺腺癌组织中HIF-1α表达与P300/CBP表达呈显著负相关(P<0.01)。结论:肺鳞癌和肺腺癌组织中HIF-1α蛋白表达与靶蛋白P300/CBP蛋白降解有关,提示HIF-1α蛋白过表达在肺癌的发生和发展中起重要作用。

胃癌组织中COX-2与P300/CBP表达的研究

目的研究胃癌组织中环氧化酶-2(COX-2)和核蛋白P300/CBP的表达变化,并探讨两者与胃癌生物学行为的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测不同分化程度胃癌组织和正常胃黏膜组织中COX-2和P300/CBP的表达变化。结果(1)COX-2在胃癌组织的表达阳性率为37.8%,明显高于正常胃黏膜组织(0.0),P<0.05;在低分化型胃癌阳性率为56.1%,明显高于高中分化型胃癌组织(8.0%),P<0.05。(2)P300/CBP在胃癌组织的表达阳性率为10.6%,明显低于正常胃黏膜组织(72.2%),差异有显著性(P<0.05);在低分化型胃癌阳性率为4.9%,低于高中分化型胃癌组织(20.0%),但差异无显著性(P>0.05)。(3)COX-2表达阳性率在胃癌淋巴结转移组和远处转移组均显著高于非转移组,差异有显著性(P<0.05);P300/CBP表达阳性率在胃癌的淋巴结转移组和远处转移组均低于非转移组,但差异无显著性(P>0.05)。(4)胃癌组织中COX-2和P300/CBP表达呈现负相关倾向。结论COX-2和P300/CBP在胃癌组织中表达异常,在胃癌的发生、发展中起重要作用,可作为辅助临床判断胃癌分化程度和转移生物学行为的有用指标。

P300／CBP 在恶性肿瘤中的研究进展

P300/CBP是组蛋白乙酰转移酶（ HAT）中重要的大分子蛋白之一，P300/CBP具有高度的同源性，虽然由不同的基因编码，但因其有相近的氨基酸排序和功能，而且又属于同一类的蛋白质，所以经常把它们写为P300/CBP。 P300/CBP参与了很多种转录因子的激活，它本身也存在着乙酰转移酶活性，能够乙酰化4种核心组蛋白和多种转录因子。越来越多的研究证实P300/CBP的变异与人类多种疾病，糖尿病，炎症、心脏病，特别是肿瘤的发病相关，P300/CBP在肿瘤中也与一些通路有相关性，而这些通路在肿瘤中扮演着不同的角色。 P300/CBP虽然通常被看做是肿瘤抑制因子，但是在不同的肿瘤中P300/CBP也起着不同的作用，本文主要介绍了P300/CBP与一些实体肿瘤发病相关的基因之间的作用以及有关的转录因子和相关的转导通路。

p300介导高糖和甲基乙二醛糖化终产物致人系膜细胞氧化应激及纤维连接蛋白表达

目的观察转录共激活子p300和蛋白激酶C(PKC)β2在高糖及甲基乙二醛糖化终产物(AGEs)诱导人系膜细胞(HMCs)活性氧(ROS)产生和纤维连接蛋白(FN)蛋白表达中的作用及相互关系。方法将培养的HMCs分为以下几组:①正糖组(NG)、高糖组(HG)、渗透压组(LG)、正糖+血清白蛋白组(BSA)、正糖+糖化终产物组(AGEs);②高糖+空载体组(HN)、高糖+PKCβ2转染组(PO)、高糖+PKCβ2抑制剂CGP53353组(PI)、糖化终产物+空载体组(AN)、糖化终产物+PKCβ2转染组(APO)、糖化终产物+PKCβ2抑制剂CGP53353组(API);③正糖+p300抑制剂组(NG+Gar)、高糖+p300抑制剂组(HG+Gar)、血清白蛋白+p300抑制剂组(BSA+Gar)、糖化终产物+p300抑制剂组(AGEs+Gar),以上各组细胞均培养2 d。荧光显微镜及荧光酶标仪检测细胞内ROS水平;Western blot法检测各组细胞p300、PKCβ2及FN蛋白表达。结果 HG组及AGEs组p300、PKCβ2蛋白表达及ROS水平增加,分别较NG组及BSA组增加了1.04倍、1.26倍、0.78倍和1.45倍、1.07倍、0.71倍(P<0.05)。同HG组及AGEs组相比,HG+Gar组及AGEs+Gar组ROS水平显著降低,分别为HG组及AGEs组的43%和39%(P<0.05)。PO组及APO组分别较HG组和AGEs组p300、PKCβ2蛋白表达进一步上调,分别为HG组及AGEs组的1.19倍、1.73倍和1.23倍、1.69倍(P<0.05);PI组和API组p300、PKCβ2蛋白表达显著下调(P<0.05);HN组和AN组p300、PKCβ2蛋白表达分别较HG组及AGEs组差异无统计学意义;HG+Gar组及AGEs+Gar组p300、FN蛋白表达显著下降,分别为HG组及AGEs组的31%、43%和37%、29%(P<0.05)。结论高糖及MGO-糖化终产物通过诱导HMCs转录共激活子p300激活参与系膜细胞氧化应激水平上调及FN蛋白表达。

p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

目的探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及机制。方法组织块贴壁法获取大鼠原代VSMCs,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMCs抑制PCAF表达。选择1μg/mL的脂多糖(LPS)作为VSMCs增殖诱导剂。将实验分为6组:对照组(A组)、对照组+1μg/mL脂多糖刺激组(B组)、Ad-GFP腺病毒转染组(C组)、Ad-GFP腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组(D组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染组(E组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组(F组),使用CCK-8和流式细胞周期检测细胞增殖情况,各组中PCAF表达采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测,蛋白免疫印迹法检测各组丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)表达水平。结果1μg/mL脂多糖明显促进VSMCs增殖;同时,下调PCAF表达后,VSMCs增殖活性明显降低(P<0.05)。流式细胞周期检测结果显示,脂多糖可促进VSMCs由S期向G2期转化,而下调PCAF后可明显抑制脂多糖的作用(P<0.05)。同时,脂多糖诱导后VSMCs中PCAF mRNA表达水平明显增强;转染Ad-PCAF RNAi腺病毒后可明显降低VSMCs内PCAF mRNA的表达水平(P<0.05)。此外,脂多糖诱导后VSMCs中p-p38 MAPK、p-AKT表达水平均明显升高(P<0.05);而下调PCAF表达后,p-p38 MAPK、p-AKT表达均明显降低(P<0.05)。结论下调PCAF的表达对VSMCs增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制细胞内p-p38 MAPK、p-AKT表达有关。

三磷酸腺苷结合盒转运子E1与P300/CBP相关因子在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨三磷酸腺苷结合盒转运子E1(ABCE1)和P300/CBP相关因子(PCAF)在食管鳞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化法检测60例食管鳞癌患者癌组织及癌旁正常组织中ABCE1和PCAF的表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系,以及两者在食管鳞癌组织中表达的相关性。结果:食管鳞癌组织中ABCE1表达的阳性率高于癌旁正常组织,而PCAF阴性率高于癌旁正常组织(P<0.05)。ABCE1表达与TNM分期、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度和淋巴有无转移存在相关性,而PCAF表达与肿瘤分化程度存在相关性(P<0.05)。ABCE1和PCAF在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。结论:ABCE1和PCAF可能在食管鳞癌的发生、发展、转移和预后等方面发挥协同作用。

HER2和p300/CBP在非小细胞肺癌中表达及意义

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中HER2和p300/CBP蛋白的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学Evision二步法,检测71例NSCLC患者肿瘤组织和20例正常肺组织标本中HER2和p300/CBP蛋白表达水平。结果正常肺组织未见HER2和p300/CBP蛋白过表达,NSCLC中存在HER2和p300/CBP蛋白过表达,过表达率分别为34%和76%(24/71,54/71)。肿瘤组织中HER2蛋白表达情况与肿瘤组织学类型、TNM分期、淋巴结转移情况有相关性(P=0.039、0.003、0.033),与肿瘤细胞分化程度、性别、年龄未见相关性。p300/CBP与肿瘤各临床病理参数无相关性。结论NSCLC患者肿瘤组织中HER2、p300/CBP蛋白过表达。HER2过表达程度与NSCLC淋巴结转移、TNM分期和组织学类型有相关性。p300/CBP与肿瘤各临床病理参数无相关性。

姜黄素对胃癌细胞P300、P53、c-myc及乙酰化组蛋白H3和H4表达的影响

目的了解姜黄素对胃癌细胞P300、P53、c-myc以及乙酰化组蛋白H3和H4表达的影响,探讨其抗胃癌的分子机制。方法用不同浓度的姜黄素作用人胃腺癌细胞系SGC-7901,作用24、48 h后,Rt-PCR法检测P300、P53c、-myc mRNA的表达;蛋白免疫印迹法检测乙酰化组蛋白H3、H4、P300、P53、c-myc蛋白的表达。结果在胃癌细胞SGC-7901中P300和c-myc的表达随姜黄素浓度的改变而改变,在20μmol/L 24 h时抑制作用较为明显,且两者具有相关性(r=0.976),而野生型p53则没有明显变化;姜黄素对乙酰化的组蛋白H3、H4都有抑制作用。也以20μmol/L 24 h的作用最强。结论姜黄素能抑制P300表达,进而抑制组蛋白H3和H4的乙酰化以及原癌基因c-myc的表达,但不影响抑癌基因P53的表达。提示姜黄素抑制组蛋白乙酰化酶P300可能是其抗癌的分子机制之一。

脑白质变性与诱发电位P300、脑电图、血浆载脂蛋白B的相关性研究

目的:探讨头颅CT未显示脑白质变性的轻度认知损害(MCI)患者的事件相关电位(ERP)P300、脑电图(EEG)和血浆载脂蛋白B的特点,为早期血管性痴呆的诊断提供帮助。方法:对60例MCI患者行头颅CT检查,根据有无脑室周围、半卵圆区、皮质下白质斑片状影,将上述患者分为脑白质变性组及非脑白质变性组,均进行P300、EEG及血浆载脂蛋白B检查,进行相关性分析,并与健康老年组32例做比较。结果:脑白质变性组与非脑白质变性组P300检查比较,P300峰潜伏期有显著延长,部分非脑白质变性患者P300峰潜伏期有轻度延长,与健康组相比有显著差异;脑电图检查,脑白质变性组以δ、θ波为主,轻-中度异常比例显著高于非脑白质变性组,非脑白质变性组以α、β波为主;健康老年组以α波为主;血浆载脂蛋白B化验,各组之间无显著差异。结论:P300潜伏期延长提示MCI患者可能有早期血管性痴呆;EEG颞部θ波增多提示MCI患者可能有早期血管性痴呆。载脂蛋白B化验未见明显差异,在本次研究中对于早期血管性痴呆诊断无确切临床意义。

P300/CBP相关因子在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:检测P300/CBP相关因子(P300/CBP-associated factor,PCAF)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,分析其与肝癌临床病理特征之间的相关性。方法:收集40例HCC及对应癌旁组织,运用RT-PCR、免疫组化技术检测PCAF在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况,研究PCAF蛋白表达与肝癌临床病理特征之间的相关性;应用Western blot技术检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2和SMMC-7721中PCAF蛋白的表达。结果:PCAF mRNA及蛋白在肝癌组织中的表达低于对应的癌旁组织(P=0.000);PCAF蛋白低表达与肿瘤肝内转移(r s=0.413,P=0.037)、门脉侵犯(r s=0.589,P=0.011)和高TNM分期(r s=0.513,P=0.029)相关;人肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721中PCAF蛋白的表达较正常肝细胞株LO2降低(P=0.000)。结论:肝癌细胞系及肝癌组织中PCAF表达下调,且PCAF的表达下调与肝癌的恶性病理特征相关。