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弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析
被引量:
2
1
作者
易俊波
王晓红
+3 位作者
买制刚
章刚
李凌云
林枫
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2012年第2期178-182,共5页
目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序...
目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET KDO中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析。结果从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白。结论运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白。
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关键词
刚地弓形虫
p35表面抗原
基因表达
免疫印迹
原文传递
题名
弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析
被引量:
2
1
作者
易俊波
王晓红
买制刚
章刚
李凌云
林枫
机构
深圳大学生化工程技术研究中心
出处
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2012年第2期178-182,共5页
基金
深圳大学科研启动基金(200822)
文摘
目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET KDO中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析。结果从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白。结论运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白。
关键词
刚地弓形虫
p35表面抗原
基因表达
免疫印迹
Keywords
Toxo
p
lasmosis
p
35
Gene ex
p
ression
Western blot
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析
易俊波
王晓红
买制刚
章刚
李凌云
林枫
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2012
2
原文传递
已选择
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参考文献
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