乌头汤联合甲氨蝶呤治疗大鼠类风湿关节炎的疗效及其与p38MAPK通路的相关性

目的:探讨乌头汤(WTD)联合甲氨蝶呤治疗大鼠类风湿关节炎(RA)的效果及其与p38MAPK通路的相关性。方法:将75只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、RA模型组、甲氨蝶呤组、WTD组、WTD+甲氨蝶呤组,每组15只。除空白组外,其余各组通过足跖面皮下注射弗氏佐剂及牛Ⅱ型胶原建立大鼠胶原性关节炎(CIA)模型。甲氨蝶呤组大鼠予甲氨蝶呤灌胃,WTD组予WTD灌胃,WTD+甲氨蝶呤组大鼠予WTD、甲氨蝶呤灌胃,空白组及RA模型组灌胃等量生理盐水。28 d后对大鼠踝关节结构和病理改变进行评分,采用聚合酶链反应(PCR)检测Ⅱ型胶原mRNA及p38MAPK mRNA表达水平,Western blotting法检测滑膜组织p38MAPK蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELIAS)检测血清TNF-α、IL-6水平。结果:RA模型组、甲氨蝶呤组、WTD组、WTD+甲氨蝶呤组大鼠Pelletier和Mankin评分均高于空白组(P<0.05);甲氨蝶呤组、WTD组、WTD+甲氨蝶呤组大鼠Pelletier和Mankin评分均低于RA模型组(P<0.05);WTD+甲氨蝶呤组大鼠Pelletier和Mankin评分低于WTD组、甲氨蝶呤组(P<0.05)。RA模型组大鼠软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA相对表达量低于空白组(P<0.05),软骨细胞p38MAPK mRNA相对表达量、滑膜组织p38MAPK蛋白相对表达量及血清TNF-α、IL-6水平均高于空白组(P<0.05);甲氨蝶呤组、WTD组、WTD+甲氨蝶呤组大鼠软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA相对表达量高于RA模型组(P<0.05),软骨细胞p38MAPK mRNA相对表达量、滑膜组织p38MAPK蛋白相对表达量及血清TNF-α、IL-6水平均低于RA模型组(P<0.05);WTD+甲氨蝶呤组大鼠软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA相对表达量高于WTD组、甲氨蝶呤组(P<0.05),软骨细胞p38MAPK mRNA相对表达量、滑膜组织p38MAPK蛋白相对表达量及血清TNF-α、IL-6水平均低于WTD组、甲氨蝶呤组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,各组大鼠血清TNF-α、IL-6水平与关节软骨中p38MAPK mRNA相对表达量呈正相关(P<0.05)。结论:WTD联合甲氨蝶呤治疗大鼠RA的效果佳,其作用机制可能与抑制p38MAPK信号通路有关。

小檗碱调控TLR4/p38MAPK通路促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复

目的 观察小檗碱对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用并探索其作用机制。方法 SD大鼠45只,随机分为假手术组(sham)、模型组(MCAO/R)、小檗碱治疗组(Ber)。通过线栓法建立脑缺血再灌注模型。Ber组给药剂量为140 mg/kg。给药28 d后应用Zea-longa评分和旋转棒实验评估大鼠神经功能。给药24 h后通过TTC染色观察并统计梗死面积。给药24 h后取材大鼠脑组织,应用免疫荧光染色观察白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)的表达,应用免疫酶联吸附实验(enzyme linked immunosorbent assa, ELISA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)的含量,通过Western Blot方法检测各组脑组织中TLR4、P-p38MAPK、p38MAPK蛋白含量。结果 Zea-longa评分和旋转棒实验结果证明小檗碱显著改善脑缺血再灌注损伤大鼠的运动能力。TTC染色结果表明小檗碱减少梗死面积。免疫荧光染色和ELISA实验结果证实小檗碱能够减少缺血损伤脑组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的含量,增加抗炎因子IL-10的含量。Western Blot结果提示小檗碱影响TLR4/p38MAPK通路蛋白的表达。结论 小檗碱通过TLR4/p38MAPK信号通路抑制MCAO/R大鼠脑组织中炎症因子的分泌,促进缺血再灌注大鼠神经功能恢复。

氟氯氰菊酯通过GADD45B介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响

目的 探讨氟氯氰菊酯暴露通过影响生长停滞和DNA损伤诱导β(GADD45B)水平并介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响。方法 将40只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为4组,即对照组、氟氯氰菊酯低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。隔天灌胃连续染毒28 d,取肾脏组织称量后计算脏器系数。HE染色光镜下观察大鼠肾脏组织病理形态变化;透射电镜观察肾脏细胞超微结构变化;应用试剂盒检测肾脏组织中氧化损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化;应用Western blot、qPCR检测GADD45B、p38MAPK、p-p38MAPK、JNK、p-JNK mRNA及蛋白表达水平变化。结果 与对照组相比,氟氯氰菊酯染毒大鼠体质量增长、肾脏质量和脏器系数的差异均无统计学意义(P均>0.05);HE染色结果显示:与对照组相比,随着氟氯氰菊酯染毒剂量的增加,肾小管肿胀越发明显,肾小管上皮细胞大量脱落,肾小球萎缩。透射电镜结果显示:与对照组相比,随着氟氯氰菊酯染毒剂量的增加,基底膜逐渐增厚,线粒体和内质网出现不同程度损伤。与对照组比较,低、中、高剂量组MDA含量均升高(P均<0.05)、SOD活力均降低(P均<0.05)。与对照组相比,氟氯氰菊酯低、中、高剂量组中GADD45B的mRNA表达水平均升高(P均<0.05);JNK和p38MAPK的mRNA表达水平均降低(P均<0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,氟氯氰菊酯低、中、高剂量组中GADD45B、p-JNK、p-p38的蛋白表达水平均升高(P均<0.05);JNK和p38的蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。结论 在氟氯氰菊酯致大鼠肾脏损伤中,GADD45B可通过激活JNK/p38MAPK通路诱导大鼠肾脏损伤。

ROS-NF-κB-p38MAPK通路探索榄香烯联合硼替佐米抗多发性骨髓瘤的机制研究

目的:基于ROS-NF-κB-p38MAPK信号通路探讨榄香烯(ELE)联合硼替佐米(BTZ)抗多发性骨髓瘤的作用机制。方法:CCK-8法检测细胞活性。SPF级裸鼠构建人源性骨髓瘤移植瘤模型,设立对照组(NC组)、BTZ组、ELE组及联合处理组。Tunel染色观察肿瘤组织凋亡,Western Blot检测Caspase-3、Bcl-2、NF-κB及p38 MAPK表达,流式细胞术检测人源性骨髓瘤U266细胞周期、凋亡及活性氧(ROS)表达。结果:当4.0μmol/L ELE联合50 nmol/L BTZ处理U266时,细胞活性均显著低于其他组。BTZ组、ELE组及联合组裸鼠肿瘤体积明显小于NC组(P<0.05),联合组体积最小;Tunel染色显示NC组凋亡水平低于BTZ组、ELE组及联合组(P<0.05),联合组最低;Western Blot结果显示BTZ组、ELE组及联合组Caspase-3及p38 MAPK表达显著高于NC组,Bcl-2及NF-κB表达显著低于NC组。BTZ组、ELE组及联合组细胞凋亡水平及细胞内ROS表达显著高于NC组(P<0.05)。结论:ELE可能通过调控ROS/NF-κB/p38 MAPK信号通路增强BTZ促骨髓瘤细胞凋亡,从而实现其抗肿瘤作用。

柴贝止痫汤调控P38MAPK通路改善难治性癫痫大鼠行为学及对海马神经元超微结构的影响

目的:探讨柴贝止痫汤是否通过调控P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)通路改善难治性癫痫大鼠行为学及海马神经元超微结构。方法:SPF级SD大鼠通过注射海人酸建立癫痫模型。按照Racine分级法判断癫痫发作级别,Ⅳ级以上的大鼠记为建模成功,将癫痫建模成功大鼠每日灌胃125 mg/kg卡马西平,连续治疗28 d。观察大鼠若出现Ⅰ级以上癫痫发作且脑电图异常(频率大于20 Hz或波幅大于80μV)即纳入难治性癫痫。将难治性癫痫建模成功大鼠随机分为5组:模型组、卡马西平(125 mg/kg)组及柴贝止痫汤高(32 g/kg)、中(16 g/kg)、低(8 g/kg)剂量组,另设假手术组。各给药组灌胃给药,模型组和假手术组灌胃相应体积生理盐水,1次/d,连续给药2个月。治疗前后观察大鼠癫痫发作次数、持续时间和发作级别;HE染色观察大鼠海马组织病理变化;透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构;TUNEL法检测大鼠海马CA3区神经元凋亡;RT-qPCR检测大鼠海马CA3区组织中P38MAPK、C-myc mRNA表达;Western Blot检测大鼠海马CA3区组织中P38MAPK、p-P38MAPK、C-myc蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠癫痫发作次数、持续时长、等级评分显著升高(P<0.05),HE染色观察模型组可见部分坏死细胞,细胞间隙增大,排列较乱,部分细胞出现核固缩,电镜下观察模型组可见神经元出现明显肿胀,包膜断裂,线粒体肿胀且嵴消失,海马CA3区组织中P38MAPK、C-myc mRNA及蛋白表达和p-P38MAPK蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠癫痫发作次数、持续时长、等级评分显著降低(P<0.05),海马组织病理学及超微结构明显改善,海马CA3区组织中P38MAPK、C-myc mRNA和蛋白表达及p-P38MAPK蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:柴贝止痫汤可改善难治性癫痫大鼠行为学、海马组织病变及海马神经元超微结构,抑制神经元凋亡。推测其机制可能与抑制P38MAPK信号通路激活,下调P38MAPK、C-myc mRNA及蛋白表达,抑制p-P38MAPK蛋白表达有关。

水飞蓟素通过共同抑制TLR4/NF-κB和TNF-α/ROS/P38MAPK通路减轻糖尿病肾病大鼠肾脏损伤的研究

目的:探讨水飞蓟素通过共同抑制Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)和肿瘤坏死因子α/活性氧簇/P38丝裂原活化蛋白激酶(TNF-α/ROS/P38MAPK)通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏损伤的机制。方法:选取健康SD大鼠50只,按随机数字表法分为对照组、模型组、低剂量水飞蓟素组、中剂量水飞蓟素组、高剂量水飞蓟素组,每组10只。建模成功并治疗8周后,生化分析仪测定各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C(Cys-C)、β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、24 h尿蛋白(UTP)水平;计算肾脏指数;试剂盒检测各组大鼠肾组织丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)水平;RT-PCR检测各组大鼠TLR4,NF-κB,TNF-α和P38MAPK等mRNA的表达水平。结果:与对照组相比,模型组体质量、T-AOC均降低(P<0.05),肾脏指数和FBG,Scr,BUN,Hcy,Cys-C,β_(2)-MG,24 h UTP,MDA,TLR4 mRNA,NF-κB p65 mRNA,TNF-αmRNA,P38MAPK mRNA均升高(P<0.05)。低、中、高剂量水飞蓟素组体质量、T-AOC水平均低于对照组,且均高于模型组(P<0.05);低、中、高剂量水飞蓟素组肾脏指数和FBG,Hcy,Cys-C,β_(2)-MG,24 h UTP,MDA,TLR4 mRNA,NF-κB p65 mRNA,TNF-αmRNA,P38MAPK mRNA均高于对照组,且均低于模型组(P<0.05);低、中剂量水飞蓟素组Scr,BUN水平均高于对照组,且低于模型组(P<0.05);高剂量水飞蓟素组Scr,BUN水平均低于模型组(P<0.05),高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:水飞蓟素可调控TLR4/NF-κB和TNF-α/ROS/P38MAPK通路,可通过抑制其激活减轻氧化应激、减轻DN大鼠的肾脏损伤。

糖尿病肾病患者外周血LncRNA KCNQ1OT1表达与氧化应激水平及TGF-β1/p38MAPK通路的关系

目的探讨分析糖尿病肾病(DN)患者外周血长链非编码RNA(LncRNA)、电压门控钾通道亚家族Q1重叠转录物(KCNQ1OT)1表达与氧化应激水平及转化生长因子(TGF)-β1/p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)通路的关系。方法选择2型糖尿病患者162例,其中2型糖尿病合并DN患者75例作为DN组,其余单纯2型糖尿病患者87例作为DM组;选择同期医院健康体检人员80例作为对照组。采用qRT-PCR检测3组受试者外周血LncRNA KCNQ1OT1、TGF-β1、P38MAPK、半胱天冬酶(Caspase)-3 mRNA相对表达及血清氧化应激指标,分析LncRNA KCNQ1OT1表达与TGF-β1/p38MAPK通路及氧化应激指标相关性,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA KCNQ1OT1对DN诊断价值。结果糖尿病患者外周血LncRNA KCNQ1OT1相对表达量显著高于对照组(P<0.05),其中DN组外周血LncRNA KCNQ1OT1相对表达量显著高于DM组(P<0.05)。糖尿病患者外周血TGF-β1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),其中DN组外周血TGF-β1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA相对表达量显著高于DM组(P<0.05)。糖尿病患者血清丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)显著高于对照组(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)显著低于对照组(P<0.05),其中DN组血清MDA、ROS显著高于DM组(P<0.05),DN组血清SOD显著低于DM组(P<0.05)。DN患者外周血LncRNA KCNQ1OT1表达与TGF-β1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA、MDA、ROS呈显著正相关关系(P<0.05),外周血LncRNA KCNQ1OT1表达与SOD呈显著负相关关系(P<0.05)。采用ROC曲线分析2型糖尿病患者中LncRNA KCNQ1OT1对DN的诊断价值,ROC曲线下面积为0.875。结论DN患者可出现外周血LncRNA KCNQ1OT1异常表达,且其表达情况与患者氧化应激水平及TGF-β1/p38MAPK信号转导通路激活有关,LncRNA KCNQ1OT1对DN具有良好的诊断价值。

基于p38MAPK通路的电针扬刺对全层皮肤缺损创面早期血管化及触觉改善的影响

目的探讨基于p38MAPK通路下的电针扬刺法对大鼠全层皮肤缺损创面早期血管化及触觉改善的影响。方法选择健康SD大鼠40只,将其按随机数字表法随机分为4组,分别为模型组、电针组、抑制组和电针+抑制组,每组各10只。模型组制备全层皮肤缺损SD大鼠模型后每天只给予碘伏消毒包扎。电针组给予模型处理后,当日即开始电针扬刺治疗,其后1次/d,共14次。抑制组在造模前10 min腹腔注射SB2035805 mg/kg,其后1次/d。电针+抑制组在每次电针扬刺治疗前10 min腹腔注射SB2035805 mg/kg。术后每天对4组大鼠进行一般行为观察,术后3 d、14 d对4组大鼠创面愈合面积,创面相关血管标志物(CD31、VEGF、vWF)和触觉感知标志物CK20表达进行比较。结果①一般行为:在精神状况、反应能力、摄食量等方面,术后第2天4组均恢复至术前水平。②创面愈合面积:3 d后4组创面均有所愈合,但不明显,差异均无统计学意义(P>0.05)。14 d后电针组的创面愈合面积比其他3组更高,且随着时间推移,创面愈合面积逐渐提高,差异有统计学意义(P<0.01)。③创面相关血管标志物:电针组3 d创面CD31、VEGF、vWF表达量最多,而14 d表达量最少,与其他3组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。④触觉感知标志物:14 d后电针组CK20的表达量相对较多,与其他3组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论电针扬刺可抑制p38MAPK通路过度活化,提高创面CD31、VEGF、vWF和CK20表达,在整体上促进皮肤缺损创面血供与触觉修复,最终加速创面愈合。

铒激光与E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白治疗面部痤疮凹陷性瘢痕的疗效及对p38MAPK通路蛋白的影响

目的:探讨铒激光与E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白治疗面部痤疮凹陷性瘢痕的疗效及对痤疮瘢痕权重评分(Echelle d'Evaluation Clinique des Cicatrices d'acne,ECCA)、p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)通路蛋白的影响。方法:选取笔者医院2018年1月-2019年12月面部痤疮凹陷性瘢痕患者195例,按照随机数字法分为3组,各65例。对照1组给予E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白,对照2组给予铒激光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白,研究组给予铒激光与E光联合重组人源Ⅲ型胶原蛋白。比较三组治疗效果、治疗前后温哥华瘢痕量表(Vancouver scar scale,VSS)变化情况、ECCA评分、视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)、血清p38MAPK通路蛋白(ERK1、ERK2、MEK1、MEK2)、炎性因子[肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)]及患者满意度。结果:研究组总有效率(95.38%)高于对照1组(81.54%)、对照2组(84.62%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后三组瘢痕厚度、血管分布、色泽、柔软度评分、ECCA、VAS评分低于治疗前,研究组低于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后三组血清MEK1、MEK2、ERK1、ERK2、TNF-α、IL-6、CRP低于治疗前,研究组低于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者满意度(93.85%)高于对照1组(80.00%)、对照2组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:联合采取铒激光、E光、重组人源Ⅲ型胶原蛋白治疗面部痤疮凹陷性瘢痕效果显著,且患者满意度较高。

缺氧对人肝癌HepG2细胞凋亡及p38MAPK通路的影响

目的:探讨缺氧对人肝癌HepG2细胞凋亡及p38MAPK通路的影响。方法:用三气培养箱培养肝癌细胞HepG2,建立缺氧细胞模型,CCK-8法检测HepG2细胞的增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Realtime PCR分析p38MAPK mRNA的表达,Western blot法检测p38MAPK及p-p38MAPK蛋白的表达变化。结果:缺氧可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,抑制细胞凋亡(P<0.05);缺氧处理人肝癌HepG2细胞后,p38MAPK mRNA的表达量下调(P<0.05);Western blot结果显示缺氧可下调p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表达(P<0.05)。结论:缺氧通过抑制p38MAPK通路抑制人肝癌HepG2细胞凋亡。

艾塞那肽通过p38MAPK通路对成骨细胞促增殖和抗凋亡的作用研究

目的探讨艾塞那肽通过p38MAPK通路对成骨细胞促增殖和抗凋亡的作用机制。方法将小鼠成骨细胞MC3T3-E1 Subclone 14分为对照组、艾塞那肽组、棕榈酸钠组、棕榈酸钠组+艾塞那肽组,分别使用相应试剂培养48 h。通过CCK-8和流式细胞术检测细胞活力与凋亡。通过Western blot检测细胞中P38MAPK、Cyclin D1、Caspase-3的蛋白水平。结果艾塞那肽对正常细胞活力无显著影响(P>0.05),棕榈酸钠组的细胞活力显著低于对照组(P<0.01),艾塞那肽+棕榈酸钠组的细胞活力显著高于棕榈酸钠组(P<0.01);艾塞那肽对正常细胞凋亡无显著影响(P>0.05),棕榈酸钠组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01),艾塞那肽+棕榈酸钠组的细胞凋亡率显著低于棕榈酸钠组(P<0.01);艾塞那肽对正常细胞中P38MAPK、Cyclin D1和Caspase-3蛋白水平无明显影响(P>0.05),棕榈酸钠组的P38MAPK和Caspase-3显著高于对照组而Cyclin D1显著低于对照组(P<0.01),艾塞那肽+棕榈酸钠组的P38MAPK和Caspase-3显著低于棕榈酸钠组而Cyclin D1显著高于棕榈酸钠组(P<0.01)。结论艾塞那肽可以通过p38MAPK通路,减少Caspase-3蛋白并上调Cyclin D1蛋白的表达,抑制高脂环境下成骨细胞的凋亡并提高细胞活力。

超脉冲二氧化碳点阵激光治疗对女性凹陷性痤疮瘢痕患者p38MAPK通路蛋白的影响

目的探讨超脉冲二氧化碳点阵激光治疗女性凹陷性痤疮瘢痕的效果及对p38MAPK通路蛋白的影响,为临床治疗提供参考。方法将诊治的60例女性凹陷性痤疮瘢痕患者随机分为两组,采用波长为超脉冲二氧化碳点阵激光进行治疗:A组(n=30)患者给予能量10 MJ,密度10%参数进行治疗,B组(n=30)患者给予能量20 MJ,密度20%参数进行治疗。分析治疗效果及治疗前后血清中p38MAPK通路蛋白MEK1、MEK2、ERK1、ERK2以及炎症因子水平变化。以医院同期健康体检者60例为对照组。结果超脉冲二氧化碳点阵激光对女性凹陷性痤疮瘢痕具有较好的治疗效果,且B组患者治疗效果较A组好(P<0.05);同时,B组患者的水肿持续时间、VAS疼痛评分、脱痂时间及炎症后色素沉着持续时间明显高于A组患者(P<0.05);治疗后患者血清中白细胞介素(IL)-1、IL-2、IL-6及IL-11和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白水平明显降低而转化生长因子-β(TGF-β)水平明显升高,且B组患者治疗后上述IL水平下降更明显(P<0.05)。结论超脉冲二氧化碳点阵激光能够有效治疗女性凹陷性痤疮瘢痕,可能与其影响p38MAPK信号通路相关。

血管性痴呆患者p38MAPK通路变化及参茸养心益肾胶囊干预作用

目的观察参茸养心益肾胶囊对血管性痴呆(AD)患者脑脊液和外周血p38MAPK通路主要因子P-p38MAPK/p38MAPK蛋白表达的影响。方法血管性痴呆患者31例为病例组,给予参茸养心益肾胶囊治疗,对比治疗前后简易智能量表(MMSE)评分和长谷川痴呆量表(HDS)评分变化;治疗前后以Western blot检测患者脑脊液和空腹静脉血P-p38MAPK/p38MAPK蛋白表达量。以同期入院的26例非痴呆患者为对照组,进行对比分析。结果病例组治疗前MMSE、HDS评分分别为(21.3±3.5)分、(19.6±3.4)分,治疗后分别上升至(28.2±4.8)分、(24.3±4.2)分,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗前病例组脑脊液、血P-p38MAPK/p38MAPK表达水平为(0.983±0.106)、(0.867±0.113),明显高于对照组的(0.248±0.042)及(0.336±0.146)(P<0.01);治疗后病例组P-p38MAPK蛋白表达量明显降低,P-p38MAPK/p38MAPK表达水平显著低于治疗前(P<0.05)。结论参茸养心益肾胶囊可能通过抑制血管性痴呆患者p38MAPK磷酸化激活,干预p38MAPK信号通路级联反应而获得临床疗效。

氯喹通过激活P38MAPK通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

目的:研究氯喹对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,并初步研究其可能的机制。方法:体外培养HepG2细胞,采用MTT法检测不同浓度(0、10、20和40μmol/L)氯喹作用不同时间(24、48和72h)后对细胞增殖的影响;用DAPI染色观察氯喹处理细胞24h后细胞核的变化;流式细胞术检测氯喹对HepG2细胞凋亡的影响;Westernblot技术检测氯喹对HepG2细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bax、P-P53、P38MAPK和P-P38MAPK蛋白表达的影响。结果:与对照组比较,在上述3个时间点10、20、40μmol/L氯喹(10μmol/L氯喹作用24h组除外)对人肝癌HepG2细胞的增殖均有明显抑制作用(P均<0.05);荧光显微镜下发现,10、20、40μmol/L氯喹处理24h后均可引起HepG2细胞不同程度的核浓集、固缩等典型凋亡形态变化;流式细胞术结果提示10、20、40μmol/L氯喹能诱导HepG2细胞凋亡(P均<0.05);Westernblot结果显示20和40μmol/L氯喹作用HepG2细胞后,P-P53、P-P38MAPK、剪切后活化型Caspase-3和Bax蛋白表达量增加(P均<0.05),Bcl-2表达下降,Caspase-3和P38MAPK表达无明显变化(P>0.05)。结论:氯喹能够抑制人肝癌HepG2细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与P38MAPK通路有关。

基于TGF-β1/p38MAPK通路探讨益血降浊汤对UUO大鼠肾纤维化的作用机制

目的探讨益血降浊汤对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾纤维化的作用及TGF-β1/p38MAPK通路相关蛋白的影响,阐明其作用可能的机制。方法建立UUO大鼠模型,将42只大鼠随机平均分为假手术组、UUO组、UUO+依那普利组、UUO+益血降浊汤低、中和高剂量组。于2周后处死,记录尿量、体重数据,采集血液检测氧化应激相关指标MDA、ROS和SOD含量。并取肾组织,Masson染色观察肾组织病理改变;免疫组织化学染色检测COX-2、Collagen I和p-p38MAPK表达情况;蛋白免疫印迹检测炎症、细胞外基质(ECM)以及TGFβ1/p38MAPK通路相关蛋白的表达。结果与UUO组相比,益血降浊汤(低、中、高)均能逆转大鼠尿量和体重的下降;降低ROS和MDA的水平,促进SOD的增加;减轻肾组织病理改变;下调炎症相关蛋白的表达,使抗炎因子的表达增加;减少ECM的沉积;抑制TGF-β1/P38MAPK通路活性;其中,高剂量组效果最为显著。结论益血降浊汤可能通过调控TGF-β1/p38MAPK通路活性改善炎症和氧化应激、抑制肾纤维化来发挥肾保护作用。

p38MAPK通路在脑缺血再灌注损伤中的研究进展

p38MAPK通路是MAPK通路的重要组成部分,介导多种转录因子的表达,在细胞炎症、侵袭、凋亡中发挥着重要作用。脑缺血再灌注损伤是缺血的脑组织在恢复供血的情况下,损伤程度加重的病理现象。近些年研究发现p38MAPK通路与脑缺血再灌注损伤息息相关。本文就近年来对p38MAPK通路与脑缺血再灌注损伤的机制研究进展进行综述。

七叶皂苷钠调控p38MAPK通路改善癫痫大鼠认知功能的作用及机制

目的探讨七叶皂苷钠(SA)调控p38MAPK通路,改善癫痫大鼠认知功能的作用及机制。方法将3周龄的雄性SD幼鼠56只,随机分为对照组、模型组、模型+SA组、AAV-NC组、AAV-NC+模型组、AAV-NC+模型+SA组、AAV-p38MAPK+模型+SA组,每组各8只。采用单次腹腔注射戊四氮的方式建立癫痫模型,造模后进行SA腹腔注射给药、阴性对照腺相关病毒(AAV-NC)或p38MAPK腺相关病毒(AAV-p38MAPK)海马局部注射给药。采用Morris水迷宫检测学习记忆功能,采用TUNEL染色检测海马中细胞凋亡率,采用western blot检测cleaved caspase-3、p-p38MAPK的表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期延长,第一象限停留时间缩短,海马组织中细胞凋亡率及cleaved caspase-3、p-p38MAPK的表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,模型+SA组大鼠的逃避潜伏期缩短,第一象限停留时间延长,海马组织中细胞凋亡率及cleaved caspase-3、p-p38MAPK的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与AAV-NC+模型+SA组比较,AAV-p38MAPK+模型+SA组大鼠的逃避潜伏期延长,第一象限停留时间缩短,海马组织中细胞凋亡率及cleaved caspase-3、p-p38MAPK的表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SA具有改善癫痫大鼠认知功能的作用,该作用与抑制海马组织中p38MAPK通路的激活有关。

低氧降低大鼠肺动脉平滑肌细胞Kv1.5通道表达的p38MAPK通路机制

目的 探讨低氧对肺细小动脉平滑肌细胞Kv1.5通道表达的影响及其与p38 MAPK通路的关系,明确低氧性肺动脉高压（HPH）的发病机制.方法 SPF级雄性SD大鼠,超净工作台内分离3～4级肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）.采用p38MAPK通路抑制剂SB203580和激活剂茴香霉素干预低氧过程.细胞传至3～6代后随机分为5组：正常对照组（N）,低氧组（H）,低氧＋ DMSO组（HD）,低氧＋SB203580组（HS）,低氧＋茴香霉素组（HA）,其中N组继续5％ CO2培养箱培养.其他组于低氧培养箱培养（5％ CO2,2％O2,PO2：25 ～ 35mmHg）,均培养60h.采用RT-PCR法测定PASMCs Kv1.5 mRNA含量,采用Western blot法测定PASMCs Kv1.5蛋白含量.结果 与N组相比,H组、HD组、HA组Kv1.5mRNA和蛋白表达均明显降低（P＜0.05）.较之H组和HD组,HS组Kv1.5 mRNA和蛋白表达明显上升,差异有统计学意义（P＜0.01）,H组和HD组间差异无统计学意义（P＞0.05）,与HS组相比,HA组Kv1.5mRNA和蛋白表达明显降低（P＜0.01）.结论 低氧通过激活p38 MAPK信号通路降低Kv1.5通道表达,这可能是（HPH）的发病机制.

FGF21对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK通路的影响

目的探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对谷氨酸钠(MSG)诱导非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞炎症及TLR4/p38MAPK信号通路的影响。方法新生SD大鼠随机分成正常对照组、MSG组和FGF21组(n=10)。MSG组和FGF21组大鼠于生后第2、4、6、8、10天皮下注射MSG 4g/(kg·d)喂养至13周,FGF21组大鼠腹腔注射FGF21 1mg/(kg·d)32天。HE染色分析肝脏病理学改变;观察肝重、肝功能;qRT-PCR和Western blot法检测肝组织IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK表达情况。结果与正常对照组比较,MSG组大鼠肝细胞发生脂肪变性伴炎性细胞浸润,肝重、ALT、AST、ALP水平升高(P<0.01),肝细胞IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK mRNA表达增加(P<0.01),TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达升高(P<0.01);与MSG组比较,FGF21组大鼠肝细胞脂泡和炎性细胞减少,肝重、ALT、AST、ALP降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05),IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK mRNA表达下降(P<0.01),TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白水平降低(P<0.01)。结论 FGF21可能通过调节TLR4/p38MAPK信号转导通路,抑制NAFLD炎性反应。

大鼠骨骼肌挫伤修复过程中p38MAPK通路、炎症反应的作用

目的研究冲击波对大鼠骨骼肌钝挫伤修复过程中p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,观察冲击波对骨骼肌钝挫伤治疗效果及调控机制。方法将雄性SD大鼠60只,随机分为正常组(n=12)、损伤组(n=24)和治疗组(n=24),后两组采用重物装置砸击腓肠肌造成急性钝挫伤。治疗组大鼠于损伤24 h后给予冲击波,每间隔4 d进行1次治疗,于1 d、3 d、7 d、14 d时取大鼠腓肠肌中段肌腹进行检测。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肌纤维变化,Western印迹检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、肌细胞生成素(Myogenin)的蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β炎症因子含量。结果与正常组相比,损伤组肌纤维排列紊乱,炎症细胞大面积浸润;治疗组肌纤维逐渐排列较规则,炎症细胞减少。各个时间点,损伤组较正常组p38MAPK、p-p38MAPK、Myogenin表达量增加(P<0.01),同一时间点下,治疗组较损伤组p38MAPK、p-p38MAPK、Myogenin表达量升高(P<0.05)。损伤组各个时间点较正常组TNF-α、IL-1β明显升高(P<0.01),但治疗组除了1 d高于损伤组,3 d、7 d、14 d均低于损伤组(P<0.05),差异具有统计学意义。结论冲击波通过p38MAPK信号通路促进肌卫星细胞增殖,同时减少炎症反应,从而治疗骨骼肌钝挫伤修复。