疏肝消脂胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素P450-2E1的影响

目的观察疏肝消脂胶囊对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织细胞色素P450-2E1(cytochromeP450 2E1,CYP2E1)的影响。方法用高脂乳剂灌胃7周建立NAFLD大鼠模型,于灌胃第3周末形成高脂血症后,给予疏肝消脂胶囊和复方蛋氨酸胆碱片4周后,观察大鼠一般情况,组织病理检测肝细胞脂肪变性程度,采用酶联免疫法检测肝组织匀浆中CYP2E1的含量。结果各药物组肝组织CYP2E1水平较模型组显著降低(P<0.01);各药物组肝细胞脂肪变性程度较模型组显著减轻(P<0.01)。结论疏肝消脂胶囊能有效降低NAFLD肝组织中CYP2E1水平,这可能是其防治NAFLD的机制之一。

茵陈蒿汤对非酒精性脂肪性肝病大鼠细胞色素氧化酶P450-2E1影响研究

目的探讨细胞色素氧化酶 P450-2E1(CYP2E1)在非酒精性脂肪性肝病大鼠中的作用机制,以及茵陈蒿汤对非酒精性脂肪肝病的治疗效果。方法把50只SD大鼠用随机法分成空白对照组15只和实验组35只,空白对照组大鼠饲喂普通饲料,实验组大鼠饲喂改良以后的高脂饲料,并且进行非酒精性脂肪肝病大鼠造模,饲喂24周。待造模成功后,将剩余的实验组大鼠随机分为3组,非酒精性脂肪肝组、辛伐他汀对照组(SVT)和茵陈蒿汤组,每组10只,对大鼠进行灌胃,给予相应的药物治疗,6周后处死大鼠,检测大鼠的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)含量、肝质量、三酰甘油(TG)、体质量、肝指数、总胆固醇(TC),使用PCR检测肝组织中CYP2E1的表达。结果与空白对照组比较,非酒精性脂肪肝组大鼠的TG、LDL-c、体质量、肝指数、肝质量、TC、CYP2E1的表达均升高(P<0.05);与非酒精性脂肪肝组比较,SVT组、茵陈蒿汤组大鼠各项指标及CYP2E1表达均降低(P<0.05);与SVT组比较,茵陈蒿汤组各项指标及CYP2E1表达均降低(P<0.05)。结论茵陈蒿汤可通过调节大鼠CYP2E1的表达水平,减轻脂质异常代谢,降低组织炎症反应,改善肝功能,保护肝组织。

细胞色素P450-2E1基因型对2-乙氧基乙醇代谢影响的研究

目的 探讨细胞色素P45 0 -2E1(CYP2E1)不同基因型代谢 2 -乙氧基乙醇 (EE)能力是否存在差异。方法 采用个体采样 ,毛细柱气相色谱分析技术及聚合酶链反应 (PCR)检测方法 ,比较不同基因型个体累计接触EE剂量与 2 乙氧基乙酸 (EAA)浓度对数值回归直线的回归系数。结果 CYP2E1不同基因型个体累计接触EE剂量与EAA浓度对数值存在线性关系 ,B、C基因型回归系数大于A基因型。结论 CYP2E1B。

乙醛脱氢酶2、细胞色素P4502E1-RsaI基因多态性和饮酒与口腔鳞状细胞癌发病风险的关系

目的探讨乙醛脱氢酶2(ALDH2)、细胞色素P4502E1-RsaI(CYP2E1-RsaI)基因多态性和饮酒与口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病之间的关系。方法采用病例-对照研究方法,以320例OSCC患者及320名健康体检者的外周血白细胞为样本,应用聚合酶链反应(PCR)技术分析ALDH2和CYP2E1-RsaI基因多态性。结果 ALDH2变异基因型和CYP2E1-RsaI突变纯合型(c2/c2)频率分布在OSCC组分别为70.94%和39.06%,在对照组分别为43.44%和20.62%,差异均有统计学意义(P均<0.01)。ALDH2变异基因型(OR=3.178,95%CI=1.917～4.749)和CYP2E1-RsaI(c2/c2)者(OR=2.467,95%CI=1.783～4.045)患OSCC的风险均显著增加。基因突变协同分析发现,ALDH2变异基因型/CYP2E1-RsaI(c2/c2)在OSCC和对照组的分布频率分别为32.19%和6.25%,差异有统计学意义(P<0.01)。ALDH2变异基因型/CYP2E1-RsaI(c2/c2)患OSCC的风险显著增加(OR=9.792,95%CI=3.583～12.472)。OSCC组的饮酒率显著高于对照组(OR=2.861,95%CI=1.541～4.781,P<0.01),ALDH2变异基因型及CYP2E1-RsaI(c2/c2)与饮酒有协同作用(OR=41.152,95%CI=19.903～67.551)。结论 ALDH2和CYP2E1-RsaI基因多态性和饮酒均是OSCC的易患因素,基因和饮酒的协同作用可明显提高OSCC的发病风险。

细胞色素P450 2E1抑制剂DDC上调人星状细胞基质金属蛋白酶-1表达

目的细胞色素P450 2E1(CYP2E1)可以诱导肝星状细胞合成I型胶原增加,而此效应可被CYP2E1抑制剂阻断,但其机制仍不清楚。本研究旨在研究CYP2E1抑制剂DDC可能的抗纤维化机制。方法将稳定表达CYP2E1的人肝细胞系C3A-CYP2E1与人星状细胞系LX-2共培养,并给予CYP2E1抑制剂DDC处理。DDC处理24h后收取共培养上清及LX-2细胞。ELISA检测共培养上清中前I型胶原含量,半定量PCR及实时荧光定量PCR测定LX-2细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、I型胶原和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TI MP-1)的相对转录水平。结果 ELISA结果显示,与未加DDC的对照组相比,DDC处理组共培养上清中的前I型胶原含量下降,差异具有统计学意义。半定量PCR及实时荧光定量PCR均显示,与未加DDC的对照组相比,DDC处理组LX-2细胞中MMP-1的相对转录水平明显增加,差异具有统计学意义;而I型胶原和TIMP-1的相对转录水平无明显改变。结论 CYP2E1抑制剂DDC主要通过上调MMP-1的表达,以发挥其抑制I型胶原合成的作用,而对I型胶原和TI MP-1的转录无明显影响。

人细胞色素P450 2E1 cDNA在鼻咽癌细胞系CNE-2的稳定表达

目的 :为进一步研究人细胞色素P45 0E1 (cytochromeP45 0 2E1 ,CYP2E1 )蛋白对相关化学致癌物的体外代谢功能及其在化学物质鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma ,NPC)变中的作用机制提供体外模型。方法 :应用基因重组技术构建人CYP2E1cDNA真核表达载体pcDNA3 .1 - 2E1 ,并经脂质体介导转入CNE2细胞 ,通过G41 8筛选后挑选若干抗性细胞克隆扩大培养。结果 :经Southernblot和Westernblot对一系列抗性克隆细胞进行检测 ,获得 2个具有外源CYP2E1cDNA基因稳定整合和表达的细胞克隆CNE2 - 2E1 - 1及CNE2 - 2E1 - 2。结论 :建立了可供CYP2E1代谢相关的化学致癌物筛选及CYP2E1在NPC癌变中作用机制研究的体外模型。

细胞色素P450 2E1基因多态与肝癌遗传易感性研究

目的：探讨细胞色素 P450 2E1基因多态与肝癌的关系。方法：应用 PCR RFLP方法对 84例肝癌患者和 144例健康对照的细胞色素 P450 2E1基因 Rsa I多态进行检测。结果：病例组基因型 A频率为 71.43％，等位基因 c1频率为 84.52％，对照组则分别为 55.56％和 75.35％，两组差别均有统计学意义 (P0.05)。结论：细胞色素 P450 2E1基因 Rsa I多态位点的基因型 A或等位基因 c1增加了个体患肝癌的危险性。

肝细胞色素P450 2E1在实验性肝纤维化组织中的表达

目的 研究肝细胞色素P4502E1在实验性肝纤维化组织中的表达。方法 8只Wistar大鼠,建立四氯化碳(CCl4)肝纤维化模型,用免疫组织化学方法观察肝纤维化模型肝组织中肝细胞色素P4502E1。结果 正常肝组织内,CYP2E1表达仅见于中央静脉周围区,主要表达于肝腺泡Ⅲ区,2～3层细胞厚,肝细胞浆和细胞膜可见CYP2E1表达。在CCl4模型肝组织中,CYP2E1表达的强度增加,分布的方式亦发生改变,可见于肝腺泡Ⅰ和Ⅱ区,与肝细胞脂肪变分布相一致,在假小叶的肝细胞中不见其表达。CYP2E1在肝细胞内分布以胞浆型为主,亦可见膜型和核型。8只实验动物肝纤维化组织中,2只强阳性,3只中等程度阳性,3只弱阳性。结论 CYP2E1表达与肝纤维化的发生有关,动物个体间存在CYP2E1多态性。

RT-PCR法检测非酒精性脂肪肝细胞中P450 2E1基因的表达与普洱茶、铁观音、红茶的关系

探讨普洱茶(熟茶)、铁观音、红茶对高脂饮食诱发的大鼠非酒精性脂肪肝中P450 2E1基因表达的影响。将Wistar大鼠随机分为正常对照组、高脂模型组、药物组以及(低、中、高剂量)普洱茶(熟茶)、铁观音、红茶组[0.5、1.0、2.0 g/(kg·bw)]。试验大鼠灌胃授试茶样水浸提物35天后采血牺牲,分离血清测定抗氧化指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;采摘肝脏并进行肝脏病理检测;用RT-PCR检测试验大鼠肝脏细胞中P450 2E1的表达量。与高脂模型组相比,(低剂量组)普洱茶(熟茶)降低MDA效果显著(P<0.05);普洱茶(熟茶)、红茶和铁观音组中GSH-Px酶活力、SOD酶活性显著提高;(高剂量)普洱茶(熟茶)、红茶显著降低P450 2E1表达量(P<0.05);通过试验大鼠病理检测发现,普洱茶(熟茶)和(高剂量组)铁观音能明显改善由高脂饮食引起的肝脏脂肪病变。普洱茶(熟茶)、铁观音、红茶对P450 2E1在非酒精性脂肪肝中的基因表达具有不同程度的积极作用,但普洱茶(熟茶)的作用最显著。

Hepatoprotective effects of S-adenosyl-L-methionine against alcohol-and cytochrome P450 2E1-induced liver injury

S-adenosyl-L-methionine (SAM) acts as a methyl donor for methylation reactions and participates in the synthesis of glutathione. SAM is also a key metabolite that regulates hepatocyte growth, differentiation and death. Hepatic SAM levels are decreased in animal models of alcohol liver injury and in patients with alcohol liver disease or viral cirrhosis. This review describes the protection by SAM against alcohol and cytochrome P450 2E1-dependent cytotoxicity both in vitro and in vivo and evaluates mechanisms for this protection.

人细胞色素P450 2E1基因在胚胎鼻咽组织、鼻咽癌细胞和组织中的表达

背景与目的:有研究表明,亚硝胺类化学物质能诱导体内外鼻咽细胞癌变,但作为间接致癌物,其活化主要依赖细胞色素P4502E1(CYP2E1)的代谢。本研究旨在探讨人细胞色素P4502E1(hCYP2E1)基因在化学物质二亚硝基哌嗪(N,N-dinitrosopiperazine,DNP)致鼻咽癌变中的可能作用,为鼻咽癌病因和发病学机制提供新的证据。方法:采用RT-PCR方法检测8例胚胎鼻咽组织,10例鼻咽癌活检组织,5株鼻咽癌细胞系(CNE-1,CNE-2,HNE-1,HNE-2,HNE-3)和1株体外恶性转化的鼻咽细胞系(7429)CYP2E1mRNA水平的表达。用不同浓度(200,250,300μg/ml)化学致癌物DNP作用于体外培养的正常鼻咽细胞后,也用RT-PCR检测其CYP2E1mRNA表达。结果:(1)100%胚胎鼻咽组织(8/8)和鼻咽癌细胞系(6/6,含7429细胞系)、80%(8/10)的鼻咽癌活检组织均存在CYP2E1的表达;(2)经DNP处理的胚胎鼻咽细胞CYP2E1表达增高。结论:鼻咽部存在可诱导的CYP2E1基因表达,提示该基因在亚硝胺类间接致癌物(如DNP)致鼻咽癌变过程中可能发挥重要作用。

电针对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P450 2E1表达及氧化抗氧化的影响

目的:研究电针对非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝细胞色素P450 2E1(CYP2E1)表达及氧化抗氧化的影响.方法:用高脂饲料诱导大鼠脂肪肝模型,同时给予电针治疗,观察肝组织病理形态的变化和肝CYP2E1表达.测定肝内丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)以及谷胱甘肽(GSH)含量的变化.结果:与脂肪肝模型组比较,电针组的肝组织脂肪变性和炎性损伤得以改善.免疫组化证明电针治疗能抑制脂肪肝肝细胞色素CYP 2E1的表达,同时肝内MDA,TG,TC显著降低(P<0.01),SOD,GSH活性升高(P<0.01).结论:电针通过抑制脂肪肝细胞色素CYP 2E1的表达,从而减轻脂质过氧化反应,增强抗氧化能力,使肝组织的脂肪变性和炎性损伤得以改善.

细胞色素P4502E1基因多态性与胃癌易患性

目的研究与前致癌物亚硝胺类代谢活化有关的细胞色素P4502E1(cytochromeP4502E1,CYP2E1)基因多态性与胃癌易患性的关系,探讨环境因素与遗传因素在胃癌发病中的作用。方法采用病例-对照分子流行病学方法,调查原发性胃癌患者和对照各48例,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)检测被调查者的CYP2E1基因RsaI位点的多态性,条件Logistic回归模型进行资料分析。结果CYP2E1A、B和C3种基因型在病例组中的构成比分别为68.8%,29.2%和2.1%,对照组分别为45.83%,47.92%和6.25%,2组差异无统计学意义(χ2=5.389,P=0.068)。而病例和对照组CYP2E1基因RsaI位点等位基因c1和c2频率分别为83.3%,16.7%和69.8%,30.2%,差异有统计学意义(χ2=5.241,P<0.05)。环境因素中食盐、香肠和熟食的过多摄入以及肿瘤家庭史和c1等位基因作为胃癌的危险因素进入回归模型,而经常喝茶作为保护性因子可能降低胃癌的发生危险。结论CYP2E1基因RsaI位点等位基因c1与胃癌易感性相关联;某些饮食因素与胃癌的发生有关。

肝细胞色素P4502E1在大鼠非酒精性脂肪肝发生中的作用

目的 研究大鼠非酒精性脂肪肝肝细胞色素P45 0 2E1表达变化及其在脂质过氧化反应中的作用。方法 Wistar大鼠 40只 ,随机分为正常对照组和高脂饮食诱导脂肪肝组 ,用免疫组织化学和Westernblot方法测定肝细胞色素P45 0 2E1表达变化 ,酶学测定丙二醛含量。结果 脂肪肝大鼠丙二醛含量较正常对照组增高 ,以高脂饮食 8、12周为甚 (P<0 0 5 ) ,肝细胞色素P45 0 2E1表达亦明显增强 (P <0 0 1)。结论 肝细胞色素P45 0

三七总甙对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素P450 2E1表达的影响

目的研究三七总甙对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素P450 2E1表达的影响。方法用脂肪乳剂灌胃法诱导大鼠非酒精性脂肪肝模型,并给予三七总甙干预,观察肝组织病理学形态的变化,采用免疫组化法检测肝组织细胞色素P450 2E1的表达,酶标仪法测定肝内丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、游离脂肪酸(FFA)含量。结果与模型组比较,三七总甙干预组肝细胞的脂肪变程度明显减轻,脂滴减少,CYP2E1的表达受到明显抑制,肝内SOD活性升高,MDA、FFA显著降低。结论三七总甙能显著抑制大鼠脂肪肝CYP 2E1的表达,减轻脂质过氧化反应,因而具有防治脂肪肝的作用。

细胞色素P450 2E1在脂肪性肝炎大鼠肝组织的表达及作用

目的探讨细胞色素P4502E1(CYP2E1)在脂肪性肝炎大鼠肝组织内的表达和作用。方法通过高脂饮食和逐渐增加酒精灌胃量持续16周建立Wister大鼠脂肪性肝炎动物模型,造模结束时检测模型组和正常组动物血脂、游离脂肪酸(FFA)和肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量;免疫组化标记检测肝组织CYP2E1表达;RT-PCR法检测CYP2E1 mRNA的水平。结果实验结束时,模型组大鼠血脂和血清FFA较正常组显著增高(P<0.01);肝组织MDA较正常组显著增高(P<0.01),而SOD和GSH较正常组明显减低(P<0.01);肝组织内CYP2E1及其基因表达较正常组显著升高(P<0.01),并与肝组织内MDA、脂肪变程度、炎症计分呈明显正相关(r值分别为0.652,0.913和0.943,P值均<0.05),与SOD、GSH呈显著负相关(r值分别为-0.916,-0.766,P<0.01)。结论脂肪性肝炎大鼠肝脏内CYP2E1呈诱导表达状态,后者可能通过增强氧应激,降低抗氧化能力,加重脂质过氧化等过程参与了脂肪性肝炎的形成。

细胞色素P450 2E1在利福平减弱异烟肼引起肝脏发生氧化应激中的作用

目的研究利福平(RIF)减弱异烟肼(INH)引起小鼠肝脏发生氧化应激的作用机制。方法将♀ICR成年健康小鼠随机分为4组:50mg/kgINH组;100mg/kgRIF组;INH+RIF组:同时给予INH(50mg/kg)和RIF(100mg/kg);对照组:给予等容量的溶剂,所有小鼠每日均给予处理1次,连续处理1周。分析血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆红素(TB)和总胆汁酸(TBA)水平,Griffith法测定肝脏组织谷胱甘肽(GSH)含量,TBARS比色法分析肝脏组织脂质过氧化水平,RT-PCR技术检测肝脏组织细胞色素P4502E1(CYP2E1)mRNA水平,Westernblot检测肝脏组织CYP2E1蛋白表达水平。结果 INH、RIF及RIF与INH共处理组小鼠血清中ALT均轻度升高,INH处理显著升高肝脏组织脂质过氧化水平并降低GSH含量,RIF共处理显著减弱INH升高肝脏组织脂质过氧化水平并降低GSH含量。单纯RIF处理显著下调肝脏组织CYP2E1蛋白表达水平,且RIF共处理显著减弱INH对肝脏组织CYP2E1蛋白表达的诱导作用;所有处理对CYP2E1mRNA水平无明显影响。结论 RIF减弱INH引起肝脏组织发生氧化应激中,CYP2E1发挥了一定作用。

细胞色素P450 2E1在依达拉奉减轻免疫性肝损伤氧化应激中的作用

目的观察细胞色素P450 2E1(CYP 2E1)在依达拉奉作用于刀豆蛋白A(Con A)致小鼠免疫性肝损伤模型中的变化。方法先期给予依达拉奉,之后用Con A腹腔注射致敏小鼠产生急性免疫性肝损伤,观察肝脏病理变化,分光光度法测血清AST和ALT浓度,肝匀浆中SOD、MDA、GSH含量,RT-PCR技术检测肝脏组织CYP 2E1 mRNA水平,Westernblot技术检测肝脏组织CYP 2E1蛋白表达水平。结果与模型组比较,依达拉奉能降低免疫性肝损伤小鼠血清中升高的ALT、AST含量;降低肝匀浆中的MDA水平,升高其降低的SOD、GSH水平;CYP 2E1 mRNA水平明显降低,CYP 2E1蛋白表达水平明显下调。结论依达拉奉对小鼠急性免疫性肝损伤具有一定的保护作用,这可能与它降低CYP 2E1的表达,清除自由基,增强机体抗脂质过氧化能力有关。

银杏叶提取物对乙醇、鱼油诱导的E47细胞内细胞色素P450 2E1表达的影响

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对乙醇、鱼油诱导后的E47细胞内细胞色素P450 2E1(CYP2E1)表达的影响。方法:E47细胞随机分为5组接种培养。对照组:用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基培养。乙醇组:接种24h后换含100mmol/L乙醇、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基培养。鱼油组:接种24h后换含3μmol/L鱼油、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基培养。GBE+乙醇组:接种24h后用150g/LGBE作用3h,用PBS洗2次后换用100mmol/L乙醇、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基培养。GBE+鱼油组:接种24h后用150g/L的GBE作用3h,用PBS洗2次后换用含3μmol/L鱼油、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基培养。培养24h后,Western blot法观察E47细胞CYP2E1蛋白的表达,用对硝基苯酚探针测定全细胞CYP2E1的活性,测定丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果:与对照组比较,乙醇组、鱼油组细胞CYP2E1蛋白表达量及活性、MDA含量升高,SOD含量降低(P均<0.05)。与乙醇组、鱼油组比较,GBE+乙醇组、GBE+鱼油组细胞CYP2E1蛋白表达量及活性、MDA含量降低,SOD含量增高(P均<0.05)。结论:GBE能抑制CYP2E1的表达和活性,减轻脂质过氧化反应。

大鼠肝细胞色素P450 2E1酶活性的气相色谱法测定

本文报告了用气相色谱法测定大鼠肝细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１的酶活性。在一定的实验条件下，使丁醇在微粒体中被氧化为丁醛，用顶空气相色谱法测定产生的丁醛量，并测定肝微粒体中的蛋白质及细胞色素Ｐ４５０总量，可算出细胞色素Ｐ４５０催化丁醇氧化的速率，实验表明，乙醇诱导的细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１明显增大了丁醇氧化的速率，而其他典型诱导剂诱导的细胞色素Ｐ４５０异构酶不增大丁醇氧化速率，所以，细胞色素Ｐ４５０催化丁醇氧化的速率可作为判断细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１酶活性的指标。