膀胱癌中p53突变及Bcl-2、PCNA表达与细胞的增殖和凋亡

目的 探讨膀胱癌中p5 3突变和Bcl 2、增殖细胞核抗原 (PCNA)表达与细胞增殖、凋亡和临床病理学参数之间的关系。方法 SABC免疫组化检测 6 2例膀胱癌标本Bcl 2、p5 3和PCNA的表达。计算肿瘤细胞中PCNA阳性细胞百分比即增殖指数 (PI)。TUNEL法检测细胞凋亡 ,计算肿瘤细胞中凋亡细胞的百分比即凋亡指数 (AI)。结果 6 2例膀胱癌中 ,5 0例 (80 6 % )发生 p5 3突变 ,其中G3 级的突变率为 91 3% ,较G1级 (72 7% )和G2 级(78 5 % )更多见 ,但差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;T2 期 p5 3突变率 (95 7% )较Ta 1期 (71 8% )高 (P <0 0 1)。14例 (2 2 5 % )发现有Bcl 2表达 ,Bcl 2表达阳性率在G3 级中明显高于G1和G2 级 (P <0 0 5 ) ,但与分期无相关性(P >0 0 5 )。Bcl 2表达与p5 3突变无关。PI为 17 3%～ 4 1 8% (平均为 2 2 4 % ) ,AI为 1 9%～ 3 5 % (平均为2 9% ) ,PI与肿瘤分级、分期相关 ,AI与肿瘤的分级明显相关。结论 p5 3突变与浸润性行为呈正相关。在膀胱癌中 p5 3和PCNA过表达可提示预后。随着肿瘤的进展 ,肿瘤细胞过度增殖可能伴有频繁的凋亡 ,但增殖指数的增加明显强于凋亡指数的增加。

结肠肿瘤cFLIP基因表达与p53突变的关系

目的:检测 cFIP_(short/long)在结肠肿瘤和癌旁组织的表达状况及其与p53基因突变的关系,初步探讨cFLIp在结肠肿瘤发生发展中的意义及p53对其调控作用。 方法:采用免疫组织化学法检测cnLIP在45例结肠腺癌、癌旁组织和42例结肠腺瘤组织中的表达,同时对以上45例结肠腺癌组织行免疫组化染色检测突变p53的表达状况。 cFLIP_(short/long)在结肠腺癌、癌旁组织和腺瘤中的表达差异采用多个样本两两比较的秩和检验(Nemenyi法),cFLIP_(short/long)和突变p53的表达关系采用t检验分析。 结果:cFLIP_(short/long)在结肠腺癌、癌旁组织和腺瘤中都有阳性表达,其染色记分均数分别为3.28±0.37、1.25±0.64和1.13±0.64。结肠腺癌组织的表达强度明显高于癌旁正常组织(3.28±0.37 vs 1.25±0.64,p<0.01)和腺瘤组织(3.28±0.37 vs 1.13±0.64,P<0.01)。60％结肠腺癌突变型p53呈阳性表达,cFLIP_(short/long)在突变型p53阳性组结肠腺癌中的表达水平明显高于突变型p53阴性组(3.74±0.35 vs 2.58±0.59,P<0.01)。 结论:cFLIP_(short/long)特异性高表达于结肠腺癌组织且在结肠肿瘤转化过程中是一较晚期事件,可能与肿瘤的进展有关。P53突变可使结肠腺癌cFLIP_(short/long)表达水平升高。

直肠癌Dixon术后直肠下端切缘p53突变基因分析

目的:探讨Dixon手术直肠下端切缘p53基因突变情况及其与肿瘤预后的关系.方法:分析1990年以来Dixon直肠癌根治手术病人术后三年以内死亡和生存五年以上两组病例的临床情况,采用免疫组化的方法,检测两组不同生存期病人的直肠癌下段切缘p53基因突变率.结果:两组病例在肿瘤位于直肠的位置和病理的淋巴转移率有显著差异.在两组直肠下端病理均未见癌细胞的情况下,三年组p53突变检测分析3/19阳性,而五年组为2/24阳性.无显著性差异.结论:病理检查肿瘤切缘为正常细胞的部位,确实存在分子水平的、肿瘤相关异常基因细胞,表现为散在性点状、巢状分布.这应非一种孤立的、偶然的表现.

肝癌细胞中p53突变的检测及其意义

p53蛋白和基因最早发现于1979年,曾经被认为是肿瘤抗原、原癌基因,直到1991年才确证为抑癌基因。p53的功能是监视基因组的完整性,维持细胞的正常增殖。当细胞DNA遭受破坏时,p53通过p21使DNA复制终止,细胞停在G1期,从而使破坏的DNA得以修复;如果修复失败,p53启动程序死亡,引发细胞自杀。这样基因组DNA的改变就被消除,防止了癌症的发生。 如果p53发生突变,抑癌功能丧失,就会导致细胞恶性转化,容易发生癌症。人类所有肿瘤中p53突变平均发生率为50％左右,HCC组织的p53突变率为16％～50％(平均30％),突变的种类和频率与HCC的诱发因素及分化程度密切相关。随着p53研究的深入,p53突变检测在HCC的发病。

启东肝癌高发区肝癌患者血清中p53突变研究(英文)

目的 研究启东地区肝癌患者血清中 p5 3基因突变 ,并确定其对肝癌诊断的意义。 方法 收集 2 5例肝癌 ,2 0例肝硬化 ,30例健康对照者的血标本 ,提取DNA ,应用限制性酶切及直接序列分析方法测定 p5 3基因第七外显子突变。 结果 显示 p5 3基因第七外显子的 2 49密码子产生突变 ,ARG变为SER ,肝癌 ,肝硬化 ,健康者中发生率分别为 44 % ( 11/2 5 ) ,2 0 % ( 4/2 0 ) ,7% ( 2 /30 ) (P <0 .0 1)。结论 启东地区肝癌患者血清中p5 3突变与肝癌发生密切相关 ,其可作为新的肝癌早期诊断标志。

p53突变和STK15过表达与肿瘤中心体不稳定的相关性

中心体异常与肿瘤发生的相关性已越来越受到人们的重视。本文综述了中心体异常与肿瘤发生的关系 ,论述了与中心体异常和肿瘤发生相关的基因 p5 3和 STK1 5以及二者相关性 ,对研究中心体在肿瘤的发生机制、诊断、治疗中的应用前景作以展望 。

肺癌与抑癌基因p53突变的研究

肺癌与抑癌基因ｐ５３突变的研究关赛芳，许凯黎，陈复华上海市肿瘤研究所（上海２０００３２）通过对３５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及其癌旁正常组织ｐ５３基因点突变的变化测定，探讨肺癌的发生与抑癌基因ｐ５３突变之间的相关性。材料与方法３５例经病理证实为ＮＳ...

p53突变蛋白在甲状腺组织中的表达及意义

目的 :探讨抑癌基因 p5 3突变蛋白在甲状腺良恶性病变组织中表达的意义。 方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测术前未行特殊治疗 48例甲状腺癌和 15例良性病变中 p5 3突变蛋白的表达。 结果 :p5 3突变蛋白在良性病变中无阳性表达 ,恶性肿瘤中为16/4 8(3 3 .3 % ) ,其中 ,分化性腺癌为 12 /4 3 (2 7.9% ) ,未分化癌为 4/5 (80 % )。在恶性肿瘤中 ,其表达高于良性病变 (P <0 .0 5 )。但与年龄、性别、肿瘤直径、AMES分级无明显相关。结论 :p5 3突变蛋白表达于甲状腺恶性肿瘤 ,在细胞恶性转化中发挥重要作用。

特异性染色体易位相关与非相关软组织肉瘤间p53突变的比较研究

研究特异性染色体易位相关与非相关软组织肉瘤间p53突变情况及差异。选取软组织肉瘤样本82例,其中特异性染色体易位相关软组织肉瘤样本40例特异性染色体易位非相关软组织肉瘤样本42例;运用PCR-SSCP和DNA序列测定的方法检测p53基因突变。在82例软组织肉瘤中共检测出22例p53基因突变,其突变率为26.8%(22/82)。40例特异性染色体易位相关型软组织肉瘤中发现6例p53基因突变,其突变率为15%(6/40);42例特异性染色体易位非相关型软组织肉瘤中发现16例p53基因突变,其突变率为38.1%(16/42)。二类软组织肉瘤p53基因突变有差异,PCR-SSCP技术是筛选大宗标本基因结构微小改变的好方法。

p53突变型结直肠癌组织中miR-4484的表达变化及意义

目的观察p53野生型和p53突变型结直肠癌组织中微小RNA-4484(miR-4484)的表达及转染抗miR-4484后癌细胞增殖的变化。方法采用实时定量PCR方法检测p53野生型和突变型结直肠癌组织及癌旁组织中miR-4484的表达;将抗miR-4484和空载体分别转入p53野生型结直肠癌细胞HCT116和p53突变型结直肠癌细胞HT29中,采用MTT法检测细胞增殖情况。结果 p53突变型、野生型结直肠癌组织中miR-4484高表达者分别占68.1%、14.4%,二者比较P<0.05。转染抗miR-4484后,HCT116细胞OD值无明显变化(P>0.05),HT29细胞OD值显著下降(P<0.05)。结论 p53突变型结直肠癌组织中miR-4484呈高表达,转染抗miR-4484可抑制HT29细胞增殖,miR-4484可能成为p53突变型结直肠癌的治疗靶点。

在结肠癌细胞中P53突变调控KLF5功能及表达变化的实验研究

目的探讨在结肠癌细胞株中P53基因突变对KLF5基因功能及表达变化的影响。方法通过对常见结肠癌细胞株的筛选,选取P53野生型及KLF5基因蛋白表达相对较低的细胞株作为研究对象,应用质粒构建过表达载体转染目的细胞,运用PCR及Western blot技术进行验证,再用细胞迁移、侵袭、增殖实验观察结肠癌细胞株中P53突变与否对KLF5基因功能及表达的影响。结果通过应用Western blot技术对常见的7株结肠癌细胞株中KLF5基因蛋白表达以及应用Sanger测序对细胞株中P53突变情况的筛选,选取结肠癌细胞株RKO作为研究对象,在成功构建P53^(R175H)过表达载体及KLF5干扰和过表达载体,并转染到RKO细胞株中,并行Western-blot验证后,运用细胞迁移、侵袭及增殖实验,发现在没有P53^(R175H)突变的RKO结肠癌细胞株中,KLF5的过表达能抑制细胞的迁移、侵袭及增殖的能力,而敲除KLF5的表达后,可以发现细胞的迁移、侵袭及增殖能力明显增加;而在P53^(R175H)突变后的结肠癌细胞株RKO中,KLF5的过表达则会导致RKO的迁移、侵袭及增殖能力明显增强,而敲除KLF5的表达后迁移、侵袭及增殖能力下降。同时也发现RKO细胞中P53的突变会导致KLF5的表达水平的下降。结论在高表达P53突变的结肠癌细胞株RKO中,KLF5的蛋白表达水平下降,而且其基因功能则从抑癌向促癌方向转换。

基于生信分析筛选影响p53突变型乳腺癌患者程序性细胞死亡-配体1表达的关键基因及相关信号通路

目的通过生信分析筛选p53突变型乳腺癌患者中,影响程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)表达的关键基因及TP53-PDL1之间的信号调控网络,从而挖掘p53突变型乳腺癌患者潜在的治疗靶点。方法下载TCGA数据库乳腺癌原始的mRNA表达数据。利用WGCNA-R包构建数据集中所有基因的共表达网络。使用R包“ClusterProfiler”对模块基因进行功能注释,以全面探讨这些模块基因的功能相关性。生物过程分析(GO)和通路富集分析(KEGG)被用来评估相关的功能类别。使用蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析数据库STRING构建靶点互作(PPI)网络模型。结果根据患者的表达谱数据用于构建WGCNA网络,然后基于tom矩阵检测基因模块,在本次分析中共检测到12个基因模块。进一步通过模块与性状之间的分析,发现yellow模块与PD-L1相关性最高(r=0.91,P<0.01)。选择yellow模块中的392个候选基因进行GO和KEGG分析。这些基因主要参与了先天性免疫反应、干扰素γ反应、病毒反应、干扰素γ细胞反应、抗原处理和提呈、Th1和Th2细胞分化、Th17细胞分化等生物过程。结论本研究利用生物信息学筛选出影响p53突变型乳腺癌患者PD-L1表达的基因及相关信号通路,帮助理解其分子机制及在乳腺癌转移及免疫逃逸过程中的作用,为p53突变的乳腺癌患者寻找新的治疗靶点提供依据。

肿瘤细胞p53突变状况对p53基因治疗的影响

目的探讨肿瘤细胞p53突变状况对p53基因治疗的影响。方法PCR-SSCP及DNA测序分析MCA-205和Panc-02细胞的p53基因突变状况;流式细胞计数了解腺病毒载体对这两种细胞的转导情况;TUNEL方法分析转导p53基因后的细胞凋亡情况,培养细胞计数分析对离体肿瘤细胞生长的影响;利用小鼠肝转移肿瘤模型,分析Adv-p53对于在体肿瘤的抗肿瘤作用。结果MCA-205细胞p53基因的第769个碱基由G突变为T,Panc-02细胞未发现p53基因突变。腺病毒载体在Panc-02细胞有较高的转导率,而Adv-p53在MCA-205细胞诱导更明显的细胞凋亡。Adv-p53在离体细胞培养试验中抑制MCA-205细胞的生长,而没有明显抑制Panc-02细胞的生长。在小鼠肝转移肿瘤模型中,门静脉注射Adv-p53明显抑制MCA205肝转移肿瘤的生长,而在Panc-02肝转移肿瘤中抗肿瘤作用不明显。结论Adv-p53的抗肿瘤作用在有p53基因突变的肿瘤细胞中效果明显,肿瘤细胞p53突变状况对p53基因治疗有一定影响。

MDM2/MDMX双靶点抑制蛋白在p53突变型乳腺癌中的作用及机制

目的:明确MDM2/MDMX双靶点抑制蛋白在p53突变型乳腺癌中的抗肿瘤作用及可能机制。方法:采用MTT比色法检测细胞增殖、流式细胞仪测定细胞周期和Annexin V/FITC-PI双染法检测细胞凋亡,明确MDM2/MDMX抑制蛋白对mt-p53乳腺癌的抗肿瘤活性。应用Western Blot检测MDM2、MDMX、p53、p21、PUMA和bax蛋白在mt-p53乳腺癌细胞中的表达水平,初步探讨抑制蛋白抗mt-p53乳腺癌的可能机制。结果:MDM2/MDMX抑制蛋白抑制mt-p53乳腺癌细胞24 h、48 h细胞增殖显著优于Nutlin-3α(P均<0.05)。MDM2/MDMX抑制蛋白干预mt-p53乳腺癌细胞株24 h和48 h后G 0/G 1期的细胞比例明显高于Nutlin-3α(P<0.05)。抑制蛋白诱导mt-p53乳腺癌细胞24 h和48 h凋亡比例为(15.97±1.48)%和(17.80±2.21)%(MDA-MB-231细胞);(11.09±2.45)%和(10.44±2.90)%(BT-474细胞)。mt-p53乳腺癌细胞中,抑制蛋白干预组MDM2和MDMX蛋白表达明显降低,p53蛋白则未见明显变化;PUMA、p21和bax蛋白表达则显著增加。结论:MDM2/MDMX抑制蛋白可抑制mt-p53乳腺癌细胞增殖,阻滞周期于G0/G1期和诱导细胞凋亡。抑制蛋白可抑制MDM2和MDMX蛋白的表达,但未能激活p53蛋白表达,以p53非依赖途径上调p21,bax和PUMA蛋白表达发挥抗乳腺癌活性。

十枣汤对荷瘤小鼠p53突变及内皮素表达的影响

目的观察十枣汤对荷H22腹水瘤种小鼠的抗肿瘤作用。方法小鼠随机分为空白对照组、荷瘤模型组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组和十枣汤高、中剂量组。除空白对照组外,其余4组小鼠均以皮下注射瘤细胞悬液0.2 mL造模。于造模第2天,分别灌胃相应药物或生理盐水,或注射CTX。采用免疫组化方法检测瘤体内突变的p53蛋白;放射免疫法测定小鼠血浆内皮素(ET)水平。结果各用药组突变型p53表达水平明显低于荷瘤模型组(P<0.01),而3组间比较差异无显著性意义(P>0.05);模型组小鼠血浆ET水平明显高于空白对照组(P<0.01),各用药组ET水平均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01)。结论十枣汤可以降低突变型p53蛋白表达,降低血浆ET水平并减少肿瘤的血供,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。

p53突变在三阴性乳腺癌转移中的作用及机制

三阴性[雌激素(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)与人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)均为阴性]乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)是一个具有特殊生物学行为及临床特征的乳腺癌亚型,而转移是其发病和致死的最主要原因。最近的研究表明,在TNBC中,高频率的p53突变能使p63转录活性丧失,此外,Shar p1作为p53突变/p63调节的主要基因之一,它抑制乳腺癌转移的功能亦丧失,而Shar p1之所以能抑制TNBC的浸润性转移,是因为Sharp1是促进缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)降解以及减弱HIF诱导癌细胞恶变的重要因子,从而促进TNBC的转移。所以本文通过在中国知网、Pubmed和Highw ire上检索并研究近100篇文献的基础上,就p53突变通过p63/Shar p1/HIF信号通路促进TNBC转移的作用及机制做一综述。

免疫组化检测葡萄胎组织P53突变蛋白在预测葡萄胎恶变中的意义

用免疫组化ＡＢＣ法及Ｐ５３单克隆抗体Ｄ０－７检测了３２例葡萄胎首次清宫标本。结果表明：未恶变的９例Ｐ５３染色阳性率为３３．３３％，强度均为（＋），发生恶变的２３例Ｐ５３染色阳性率为８２．６％，强度为（＋）１０例，（＋＋）６例，（＋＋＋）３例，二者差别明显，中强以上阳性均发生恶变。可见，检测葡萄胎首次清宫标本的Ｐ５３突变蛋白，有望作为预测葡萄胎恶变的一项指标。

非小细胞肺癌FOXP3与P53突变的关联及其对Cyclin D1和CDK4的表达调控作用

目的探讨叉头蛋白3(FOXP3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达、与P53突变的关联及其对Cyclin D1和CDK4表达的调控作用.方法采用免疫组织化学染色法检测NSCLC组织中FOXP3和突变型P53(mt-P53)蛋白表达的相关性,应用脂质体转染法将FOXP3 siRNA瞬时转染到A549细胞中.实验分为A549组、Control-siRNA组和FOXP3-siRNA组.Real-time PCR和Western blotting方法检测FOXP3沉默效果,MTT方法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期情况,Western blotting方法检测Cyclin D1和CDK4的表达水平.结果NSCLC组织中,FOXP3阳性表达率为64.0%,mt-P53阳性表达率为56.0%,二者之间的表达呈显著正相关关系(r=0.342,P=0.015).与A549组和Control-siRNA组相比,FOXP3-siRNA组FOXP3 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01),细胞增殖明显减慢(P<0.01),G_(0)/G_(1)期细胞比例明显增加(P<0.05),Cyclin D1和CDK4蛋白的表达水平显著降低(P<0.01).结论NSCLC组织中FOXP3表达与P53突变密切相关,沉默FOXP3可下调Cyclin D1和CDK4的表达,诱发细胞周期G_(0)/G_(1)期阻滞,进而抑制NSCLC细胞增殖.