p57Kip2在水泡状胎块组织中的表达及意义

目的:观察p57Kip2在正常绒毛及水泡状胎块组织中的表达,探讨其在水泡状胎块诊断及鉴别诊断中的作用及意义。方法:应用免疫组织化学方法检测p57Kip2在完全性水泡状胎块(CHM)、部分性水泡状胎块(PHM)以及正常绒毛组织(HA)中的表达。结果:28例CHM中,2例表达p57Kip2;14例PHM中,12例表达p57Kip2;10例HA中,9例表达p57Kip2。CHM与PHM、HA组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:p57Kip2可以作为CHM、PHM鉴别诊断的重要参考指标。

P57Kip2、CDK5在维甲酸致神经管发育缺陷模型中基因表达差异

目的探讨P57kip2、CDK5在神经管发育缺陷(NTD)发生过程中与正常组织的差异表达,为研究正常神经胚形成的分子机制提供线索。方法用含有1 100余个已知基因的中密度芯片比较胚胎(embryonic,E)9.5、10.5d正常与同期维甲酸(RA)诱导致NTD小鼠神经管组织的P57kip2、CDK5基因表达差异,并对芯片结果进行Northern杂交验证。结果通过比较P57kip2、CDK5基因在正常E9.5d与E10.5d、E9.5d-NTD、E10.5d-NTD的表达差异,发现在正常神经胚形成前后P57kip2、CDK5表达显著上调,在RA诱导致NTD(包括E9.5d与E10.5d两个时相)P57kip2、CDK5在RA作用后呈现下调趋势。结论P57kip2、CDK5参与了神经管发育缺陷的发生过程,为研究正常神经胚形成的分子机制提供了有益线索。

微小RNA-873、p57kip2、转移相关基因2在晚期子宫内膜癌组织中的表达及其与病理特征相关性的研究

目的分析微小RNA-873(miR-873)、p57kip2、转移相关基因2(MTA2)在子宫内膜癌组织中的表达及其与患者病理特征的相关性。方法选取2020年2月至2021年2月在保定市第二中心医院治疗的70例晚期子宫内膜癌患者作为研究组,取研究组患者的癌组织与癌旁组织;另外选取70例在保定市第二中心医院体检的健康女性作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组血清中及研究组患者癌组织、癌旁组织中miR-873、p57kip2、MTA2的表达,分析miR-873、p57kip2、MTA2在晚期子宫内膜癌发展过程中的表达变化及三者与病理特征的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析三者对晚期子宫内膜癌病情的预测价值。结果与对照组相比,研究组血清中miR-873表达降低,p57kip2、MTA2表达升高(P<0.05);与癌旁组织相比,癌组织中miR-873表达降低,p57kip2、MTA2表达升高(P<0.05)。与Ⅲ期、高分化、无淋巴结转移、<1/2肌层浸润的子宫内膜癌患者相比,Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、≥1/2肌层浸润的子宫内膜癌患者miR-873表达显著降低,p57kip2、MTA2表达显著升高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-873与p57kip2呈负相关(r=-0.491,P=0.001),miR-873与MTA2呈负相关(r=-0.477,P=0.001),p57kip2与MTA2呈正相关(r=0.453,P=0.001)。ROC曲线显示,与miR-873、p57kip2、MTA2单项预测相比,三项联合对晚期子宫内膜癌患者病情的预测价值更高(P<0.05)。结论晚期子宫内膜癌患者血清及组织中miR-873表达降低,p57kip2、MTA2表达升高,随着疾病的发展,miR-873表达逐渐降低,p57kip2、MTA2表达逐渐升高,且三者联合可用于对晚期子宫内膜癌患者病情的预测。

子痫前期患者胎盘组织P57kip2 mRNA水平及与血清sFlt-1、PLGF的关系

目的:分析子痫前期患者胎盘组织P57kip2 mRNA水平及与血清可溶性fms样酪氨酸激酶1(sFlt-1)、胎盘生长因子(PLGF)的关系。方法:选择济宁医学院附属医院2021年1月—2022年4月确诊的剖宫产或自然分娩的子痫前期孕妇80例作为子痫前期(PE)组,选择同期在我院分娩的正常孕妇80例作为对照组。依据临床检查将PE组孕妇分为轻度PE组(n=51例)和重度PE组(n=29例)。采用实时定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定上述不同分组孕妇胎盘组织中P57kip2 mRNA表达,采用酶联免疫吸附试验测定分娩前孕妇血清sFlt-1、PLGF表达;采用Pearson相关性分析P57kip2 mRNA表达与sFlt-1 mRNA和PLGF mRNA的关系,使用受试者工作特征曲线(ROC)预测P57kip2基因表达、sFlt-1 mRNA和PLGF指导PE诊断和严重程度鉴别的效能。结果:PE组P57kip2 mRNA与sFlt-1均高于对照组,PLGF低于对照组(P<0.05);重度PE组P57kip2 mRNA与sFlt均高于轻PE度组,PLGF低于轻度PE组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果示,PE患者P57kip2与sFlt-1呈正相关(r=0.478,P<0.05),P57kip2与PLGF呈负相关(r=-0.351,P<0.05);ROC曲线结果示,P57kip2、sFlt-1和PLGF诊断PE及鉴别轻度与重度PE的效能均较好,其中P57kip2的cut-off值分别为1.07、1.47时诊断PE和鉴别轻度与重度PE的效能最高,其曲线下面积(AUC)分别为0.860、0.802,约登指数分别为0.725和0.587,敏感度和特异度分别为86.25%、86.25%和72.41%、86.27%。结论:P57kip2 mRNA水平与PE患者病情严重程度密切相关,其中P57kip2 mRNA与sFlt-1水平呈正相关,P57kip2 mRNA与PLGF水平呈负相关,且三者中以P57kip2 mRNA诊断PE疾病发展效能最高,其能为临床预测PE的发生与进展提供指导。

血小板源生长因子和血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞中p57基因表达的影响

为观察血小板源生长因子BB和血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞p5 7蛋白和基因表达的影响及其在血管平滑肌细胞增殖增生中的作用。用贴壁法培养鼠胸主动脉平滑肌细胞 ,加入血小板源生长因子BB 2 0 μg L或血管紧张素Ⅱ 1μmol L刺激 2 4h。用Western蛋白印迹法检测p5 7蛋白水平 ,用DNA芯片技术检测p5 7mRNA的表达量。结果发现 ,血小板源生长因子BB刺激组p5 7mRNA和p5 7蛋白表达量明显高于血管紧张素Ⅱ刺激组 ,分别为后者的 2 .47倍和 1.7倍。而血管紧张素Ⅱ刺激组p5 7蛋白表达量与对照组接近 ,保持在较低水平。研究结果提示 ,在血小板源生长因子刺激引起的血管平滑肌细胞增殖过程中p5 7基因表达明显增高 ,p5 7基因的高表达可能起抑制血管平滑肌细胞过度增殖的作用。

△Np63基因沉默对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

目的探讨癌基因△Np63对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法通过将△Np63特异性短发夹RNA(△Np63-shRNA)和非特异性短发夹RNA(Control-shRNA)转染膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinom a of bladder,TCCB)5637细胞,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot分别检测△Np63、p27kip1、p57kip2mRNA和蛋白的表达水平,WST-1法检测细胞增殖活性,利用流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果特异性的△Np63-shRNA能够有效地沉默△Np63并上调p27kip1和p57kip2的基因和蛋白水平,转染△Np63-shRNA的5637细胞的增殖能力明显受到抑制(P<0.05),且明显促进了细胞的凋亡(P<0.05)。结论靶向△Np63基因的shRNA片段可以有效的抑制人膀胱癌5637细胞的增殖并促进其凋亡,其可能的机制是通过上调p27kip1和p57kip2的表达实现的。