名贵中药材血竭的DNA条形码鉴定研究

目的筛选适合树脂类药材血竭鉴定的DNA条形码序列,探索血竭药材鉴定的新方法。方法提取41份药材和基原植物样本的基因组DNA,对药材样本基因组DNA的7条候选条形码序列[ITS、ITS2、psb A-trn H、rbc L、mat K、trn L(UAA)内含子、trn L(UAA)内含子的P6环]进行PCR扩增及测序。采用软件Codon Code Aligner V4.2对测序峰图进行校对拼接,应用MEGA5.0软件计算种内种间遗传距离(Kimura 2-parameter),构建邻接树(Neighbor-joing tree,NJ Tree)。结果血竭药材的trn L(UAA)内含子的P6环序列可以成功扩增并得到高质量序列,而其他6个候选序列[ITS、ITS2、psb A-trn H、rbc L、mat K、trn L(UAA)内含子]均不能成功扩增,难以用于鉴别。血竭的trn L(UAA)内含子的P6环序列长度为45 bp,麒麟竭的种内最大K2P遗传距离远小于麒麟竭与品剑叶龙血树的种间最小K2P遗传距离,NJ树显示血竭与其混伪品各自聚为一支,可明显区分。结论 trn L(UAA)内含子的P6环序列可作为血竭药材的DNA条形码鉴定序列,成为血竭药材真伪的鉴定依据。