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清热化瘀方通过调控自噬相关基因P62/LC3保护大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量:13
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作者 胡跃强 陈炜 +3 位作者 祝美珍 梁妮 吴林 唐农 《陕西中医》 2020年第4期429-433,共5页
目的:从自噬相关蛋白P62/LC3角度探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:160只大鼠随机分为4组:假手术组(SO组)、模型组(I/R组)、清热化瘀颗粒组(QRHY组)和清开灵颗粒对照组(QKL组)。分别于再灌注后12 h、1 d、2 d、3 ... 目的:从自噬相关蛋白P62/LC3角度探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:160只大鼠随机分为4组:假手术组(SO组)、模型组(I/R组)、清热化瘀颗粒组(QRHY组)和清开灵颗粒对照组(QKL组)。分别于再灌注后12 h、1 d、2 d、3 d取材(n=10)。线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,分别采用透射电子显微镜观察神经元自噬及凋亡形态结构变化,qRT-PCR和Western blot观察P62及LC3 mRNA及其蛋白表达变化。结果:①大鼠脑缺血再灌注后激活自噬,再灌注后12 h至3 d可见自噬小体出现,之后自噬表达逐渐下降,细胞发生迟发性神经元死亡;QRHY方能减轻上述损害;②I/R组LC3 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12h开始明显上升,24 h达高峰(P<0.01),随后其表达渐趋下降(P<0.05);而P62 mRNA及其蛋白表达时相变化则与之相反(P<0.05或P<0.01);QKL组较I/R组P62表达明显升高,LC3表达明显降低(P<0.05);QRHY组较QKL组进一步升高P62表达,降低LC3的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:清热化瘀方可能通过调节P62/LC3信号通路而减轻自噬的程度,从而达到减轻脑缺血再灌注损伤,保护神经元的作用。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 清热化瘀方 神经元 自噬 p62/lc3 大鼠
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三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响 被引量:1
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作者 袁宇晴 龙丹 +4 位作者 谢超群 魏堰翀 刘旭东 朱莹 邹君君 《中医药导报》 2024年第3期30-36,共7页
目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃... 目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃,经腹主动脉采血制备含药血清。体外培养AGS细胞,设置空白对照组(空白组)、三物白散低剂量含药血清组(低剂量组)、三物白散中剂量含药血清组(中剂量组)、三物白散高剂量含药血清组(高剂量组)。采用CCK-8法检测不同浓度(5%、10%、15%、20%)三物白散含药血清对AGS细胞活性的影响;倒置显微镜下观察三物白散含药血清对AGS细胞形态的影响;RT-qPCR法检测Beclin1 mRNA、LC3 mRNA、p62 mRNA表达;Western blotting法检测Beclin1、LC3、p62蛋白表达。结果:与空白组比较,5%、10%、15%、20%三物白散高剂量含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制AGS细胞活性;随着含药血清浓度升高,细胞形态逐渐不规则,细胞数量逐渐减少;中、高剂量组Beclin1 mRNA、LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量均高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01);低剂量组LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01)。高剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均高于空白组,p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01);中剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于空白组(P<0.05或P<0.01),p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01)。结论:三物白散对胃癌细胞的增殖有抑制作用,上调Beclin1、LC3表达、下调p62的表达、诱导胃癌细胞自噬可能是其抗胃癌作用机制之一。 展开更多
关键词 胃癌 三物白散 自噬 BECLIN1 lc3 p62
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自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌中的表达及临床意义 被引量:31
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作者 张创杰 张连峰 周琳 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第2期318-323,共6页
目的:探讨自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测64例胰腺癌组织及相应癌旁正常组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62的表达情况;分析自噬蛋白表达水平与胰腺癌临床病理特征... 目的:探讨自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在进展期胰腺癌组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测64例胰腺癌组织及相应癌旁正常组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62的表达情况;分析自噬蛋白表达水平与胰腺癌临床病理特征的关系.结果:免疫组织化学法检测提示Beclin1蛋白在胰腺癌组织及癌旁正常组织中阳性表达率分别为28.1%(18/64)、90.6%(58/64),LC3蛋白阳性表达率分别为34.4%(22/64)、75%(48/64)P 6 2蛋白表达阳性率分别为7 5%(4 8/6 4)、4 6.9%(3 0/6 4),均P<0.0 5;胰腺癌组织中Beclin1与LC3的表达水平呈正相关(r=0.572P<0.05),Beclin1、LC3的表达与肿瘤分化、TNM分期相关(P<0.05),Beclin1、LC3和P62的表达均与性别、年龄、有无门脉浸润、淋巴结转移无明显相关(P>0.05).结论:自噬相关蛋白Beclin1、LC3和P62在胰腺癌组织中的异常表达及Beclin 1与LC3两者表达呈正相关提示自噬活动下降可能参与了进展期胰腺癌的发展. 展开更多
关键词 胰腺癌 自噬 BECLIN1 lc3 p62
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龟羚帕安丸对帕金森病大鼠中脑黑质病理、Beclin1、P62及LC3Ⅱ影响的研究 被引量:9
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作者 常学辉 张良芝 李天佛 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第1期5-7,I0015,I0016,I0017,I0018,共7页
目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型中脑黑质神经细胞病理及自噬相关蛋白Beclin1、P62、LC3Ⅱ表达的影响。方法采用6-羟基多巴(6-OHDA)注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型对照组、美多芭组、... 目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型中脑黑质神经细胞病理及自噬相关蛋白Beclin1、P62、LC3Ⅱ表达的影响。方法采用6-羟基多巴(6-OHDA)注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型对照组、美多芭组、龟羚帕安丸高、中、低剂量组及假手术对照组,每组10只。对照组、模型组给予等容积生理盐水,其余组给予相应药物灌胃,连续给药30 d。观察各组大鼠中脑黑质病理改变;免疫组化法检测大鼠中脑黑质Beclin1、P62及LC3Ⅱ蛋白的表达变化情况。结果模型组神经元细胞出现较为明显的损伤;模型组中脑黑质Beclin1及LC3Ⅱ表达降低,P62表达明显升高;各治疗组大鼠神经元损伤情况较模型组有所改善,中脑黑质Beclin1及LC3Ⅱ表达明显升高,P62表达明显降低。结论龟羚帕安丸可明显改善神经细胞损伤,作用机制与提高Beclin1及LC3Ⅱ表达,降低P62的蓄积,疏通自噬-溶酶体降解途径,提高细胞自噬活性,改善细胞自身稳态有关。 展开更多
关键词 帕金森病 龟羚帕安丸 自噬 BECLIN1 p62 lc3
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电针对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力及LC3 Ⅱ、P62表达水平的影响 被引量:7
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作者 高杨 李丽娜 +4 位作者 毛颖秋 周英奕 张学婷 张磊 薛卫国 《长春中医药大学学报》 2017年第4期523-526,共4页
目的研究电针对APP/PS1双转基因小鼠自噬相关蛋白LC3 Ⅱ及受体蛋白P62相关的作用机制。方法将7月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针治疗组,以同窝转基因阴性小鼠为正常对照组。电针治疗组予电针涌泉、百会,15 min/次,隔日1次,... 目的研究电针对APP/PS1双转基因小鼠自噬相关蛋白LC3 Ⅱ及受体蛋白P62相关的作用机制。方法将7月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针治疗组,以同窝转基因阴性小鼠为正常对照组。电针治疗组予电针涌泉、百会,15 min/次,隔日1次,治疗6周,利用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力以及用Western blot法检测小鼠海马区域LC3 Ⅱ及P62蛋白的表达。结果水迷宫结果显示,模型组与正常对照组比较,逃避潜伏时增加(P<0.01);WB结果显示,与对照组相比,模型组LC3 Ⅱ表达增强,P62表达减弱(P<0.05);与模型组相比,针刺组LC3 Ⅱ表达减弱,P62表达增强(P<0.05)。结论 APP/PS1转基因鼠存在神经元自噬途径功能亢进,电针可能通过抑制自噬水平,从而改善学习记忆功能。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 App/pS1 lc3 p62
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MEBO对糖尿病大鼠创面自噬信号因子Beclin1、LC3、p62的调控作用 被引量:9
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作者 麻华胆 黄庆 +5 位作者 郑爱甜 刘贤彬 李政 王琳 曾娜 吴标良 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期356-365,共10页
目的分析湿润烧伤膏(MEBO)对创面组织自噬信号因子Beclin1、LC3、p62的调控作用及其促进创面愈合的机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠250只,随机分为空白组、对照组、模型组、康复新组、MEBO组各50只。对照组建立常规创面模型,模型组... 目的分析湿润烧伤膏(MEBO)对创面组织自噬信号因子Beclin1、LC3、p62的调控作用及其促进创面愈合的机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠250只,随机分为空白组、对照组、模型组、康复新组、MEBO组各50只。对照组建立常规创面模型,模型组、康复新组、MEBO组建立糖尿病创面模型,对照组、模型组大鼠创面予生理盐水外敷治疗,康复新组、MEBO组分别予康复新和MEBO外敷治疗。分别于干预第1、5、11、18、25天观察创面愈合情况、苏木素-伊红(HE)染色病理及自噬体的变化;免疫荧光法及Western印迹检测创面组织Beclin1、LC3、p62的变化;qRT-PCR分析Beclin1、LC3、p62 mRNA的表达。结果治疗过程中,对照组愈合最快,模型组愈合最慢,早期各组创面愈合率无显著差异(P>0.05),晚期各组创面愈合率:对照组>MEBO组>康复新组>模型组(P<0.05)。对照组、康复新组、MEBO组创面组织病理形态改善优于模型组。对照组、模型组、康复新组、MEBO组创面组织中Beclin1、LC3平均光密度(OD)值上升后下降,p62 OD值下降后上升;细胞内自噬体数目升高后下降;创面组织Beclin1、p-Beclin1表达量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值上升后下降,p62表达下降后上升;Beclin1、LC3 mRNA表达上升后下降,p62表达下降后上升差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论MEBT/MEBO可有效促进糖尿病创面愈合,细胞自噬激活可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 MEBO 糖尿病溃疡创面 细胞自噬 BECLIN1 lc3 p62
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自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62在不明原因复发性流产患者绒毛组织中的表达和临床意义 被引量:6
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作者 宋鹏书 张燕华 +3 位作者 张奕梅 莫梅珍 何升 张莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第13期1602-1605,共4页
目的探讨自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62在不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织中的表达和临床意义。方法选取2020年3-7月在该院妇产科行清宫术的URSA患者及行人工流产术的正常妊娠者分别作为URSA组和对照组,每组10例。采用HE染色观察两组... 目的探讨自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62在不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织中的表达和临床意义。方法选取2020年3-7月在该院妇产科行清宫术的URSA患者及行人工流产术的正常妊娠者分别作为URSA组和对照组,每组10例。采用HE染色观察两组绒毛组织形态学差异,采用Western blot检测两组绒毛组织中LC3-Ⅱ、p62蛋白的表达水平,并通过免疫组化实验观察两组患者绒毛组织中LC3-Ⅱ、p62的定位和表达情况。结果HE染色结果显示,URSA组绒毛组织内部细胞出现皱缩,颜色暗红,细胞之间出现断离,绒毛组织有破损。Western blot检测结果显示,与对照组比较,URSA组中LC3-Ⅱ蛋白表达量上调、p62的表达量下调,差异均有统计学意义(P<0.01)。免疫组化试验结果显示,LC3、p62蛋白主要定位于细胞质,表达情况与Western blot检测结果一致。结论URSA患者绒毛组织中LC3-Ⅱ蛋白表达上调,p62蛋白表达下调,提示细胞自噬可能参与URSA的发生。 展开更多
关键词 不明原因复发性流产 绒毛组织 lc3-Ⅱ p62
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益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织LC3Ⅱ、p62表达的影响 被引量:1
8
作者 雷清清 张紫媛 +5 位作者 胡雅玲 范彦君 刘文媛 张晓东 孙艳艳 方敬爱 《中国中西医结合肾病杂志》 2023年第9期773-776,I0002,共5页
目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织LC3Ⅱ、p62表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、糖尿病肾病组、益肾胶囊组、白藜芦醇组,每组10只。益肾胶囊组给予益肾胶囊(0.625 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃、白藜芦醇... 目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织LC3Ⅱ、p62表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、糖尿病肾病组、益肾胶囊组、白藜芦醇组,每组10只。益肾胶囊组给予益肾胶囊(0.625 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃、白藜芦醇组给予白藜芦醇(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃、正常组和糖尿病肾病组每日给予等量生理盐水灌胃,时间为8周。观察大鼠一般状态,在0、4、8周末测定大鼠体重、血糖及24 h尿蛋白定量;并在8周末于大鼠腹主动脉取血,测定肌酐(Scr)、尿素(BUN)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG),用HE、PAS染色法分别观察肾脏组织病理变化,用免疫组化法测定自噬相关蛋白LC3Ⅱ及泛素结合蛋白p62(p62/SQSTMI)的表达变化。结果:(1)与正常组相比,糖尿病肾病组Scr、BUN、TC、TG、24 h尿蛋白定量均有所升高(P<0.05);与糖尿病肾病组相比,益肾胶囊组及白藜芦醇组Scr、BUN、TC、TG、24 h尿蛋白定量均有所下降(P<0.05);(2)与正常组相比,糖尿病肾病组镜下肾组织系膜基质增生较明显,肾小管管腔狭窄,上皮细胞水肿,呈现空泡样变性,足细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达减少(P<0.05),p62表达增多(P<0.05);与糖尿病肾病组相比,益肾胶囊组及白藜芦醇组肾组织病理改变明显减轻,足细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达增加(P<0.05),p62表达减少(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过改善糖尿病肾病大鼠肾组织的自噬障碍,从而对糖尿病肾病的肾脏发挥保护作用。 展开更多
关键词 益肾胶囊 足细胞 lc3 p62
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LC3、P62在口腔黏膜下纤维性变组织固有层中的表达研究 被引量:5
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作者 戴卓 吴颖芳 +3 位作者 朱冰玉 喻晖乔 吴凌云 蒋琪 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期826-829,共4页
目的:研究自噬关键蛋白LC3和P62在口腔黏膜下纤维性变(OSF)中的表达以及自噬在OSF发生、发展中的作用。方法:收集正常及口腔黏膜下纤维性变早、中、晚期颊黏膜组织各30例,免疫组织化学染色法检测固有层中自噬关键蛋白LC3和P62的表达,对... 目的:研究自噬关键蛋白LC3和P62在口腔黏膜下纤维性变(OSF)中的表达以及自噬在OSF发生、发展中的作用。方法:收集正常及口腔黏膜下纤维性变早、中、晚期颊黏膜组织各30例,免疫组织化学染色法检测固有层中自噬关键蛋白LC3和P62的表达,对两者进行相关性分析。结果:OSF早、中、晚期患者颊黏膜组织固有层和正常颊黏膜组织固有层中均可见LC3和P62表达。与正常组织相比,OSF早、中期组织固有层中LC3表达上调,P62表达下调,晚期LC3表达下调,P62表达上调,各组间表达差异具有统计学意义(P<0.05);2种蛋白在OSF组织固有层表达强度呈负相关。结论:自噬可能是促进OSF发生、发展的原因之一。 展开更多
关键词 自噬 口腔黏膜下纤维性变(OSF) lc3 p62 免疫组织化学技术
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芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达水平的影响 被引量:1
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作者 段芳芳 陆雪健 +4 位作者 鞠丽丽 庄晓彤 孙晓伟 刘天怡 蒋希成 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期13-16,共4页
目的通过研究益气活血通络中药芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达的影响,阐明该方拮抗脑缺血再灌注损伤的可能分子机制。方法将大鼠随机分为sham组、I/R组、3-MA组、中药组。中药及3-MA抑制剂干预后,复制MCAO/R模... 目的通过研究益气活血通络中药芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达的影响,阐明该方拮抗脑缺血再灌注损伤的可能分子机制。方法将大鼠随机分为sham组、I/R组、3-MA组、中药组。中药及3-MA抑制剂干预后,复制MCAO/R模型,再灌注24 h后进行神经功能评分;TTC染色评定脑梗死体积;免疫荧光、Western-Blot及电镜检测自噬发生水平、自噬相关蛋白表达水平、细胞损伤程度。结果与I/R组相比,中药组大鼠神经功能损伤显著减轻,脑梗死体积显著缩小,LC3BⅡ/Ⅰ比值明显升高,p62蛋白表达量显著降低,中药组细胞形态及细胞器保留较完整,有较多自噬小体及自噬溶酶体出现。结论芪蛭胶囊可有效缓解脑梗死及神经功能损伤,提高LC3,降低p62的表达,进一步激活细胞自噬,从而有效拮抗CIRI,保护神经元。 展开更多
关键词 芪蛭胶囊 脑缺血再灌注损伤 自噬 lc3 p62
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Klotho蛋白对缺血再灌注急性肾损伤中Bax、Bcl-2、p62及LC3蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 董丽娜 赵晔 +2 位作者 于磊 刘国平 刘艾芹 《疑难病杂志》 CAS 2019年第11期1154-1157,1189,共4页
目的观察Klotho蛋白对缺血再灌注急性肾损伤(AKI)小鼠Bax、Bcl-2、p62以及LC3蛋白表达的影响。方法2017年6月—2018年9月在内蒙古自治区人民医院动物实验室进行实验,选择小鼠60只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组... 目的观察Klotho蛋白对缺血再灌注急性肾损伤(AKI)小鼠Bax、Bcl-2、p62以及LC3蛋白表达的影响。方法2017年6月—2018年9月在内蒙古自治区人民医院动物实验室进行实验,选择小鼠60只,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和Klotho蛋白组各20只,光镜下观察各组肾组织病理学改变情况,观察肾功能变化情况,检测肾组织Bax、Bcl-2、p62以及LC3蛋白的表达情况。结果Sham组小鼠肾组织未发生病理改变,I/R组小鼠肾损伤明显,Klotho蛋白组小鼠肾损伤得到改善。SCr和BUN浓度比较,Sham组<Klotho蛋白组<I/R组(F/P=48.028/0.000、29.716/0.000);Bcl-2和p62蛋白比较,Sham组>Klotho蛋白组>I/R组,Bax蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值比较,Sham组<Klotho蛋白组<I/R组(F/P=17.143/0.000、27.305/0.000、26.127/0.000、28.528/0.000)。结论补充Klotho蛋白可缓解小鼠缺血再灌注急性肾损伤后肾功能的丢失,减轻肾组织损伤,起到肾保护作用。 展开更多
关键词 肾损伤 急性 KLOTHO蛋白 BAX BCL-2 p62 lc3 小鼠
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Expression and role of autophagy related protein p62 and LC3 in the retina in a rat model of acute ocular hypertension 被引量:7
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作者 Yu-Yu Wu Bing-Ru Zheng +3 位作者 Wan-Zhu Chen Mao-Sheng Guo Yi-Hong Huang Yan Zhang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2020年第1期21-28,共8页
AIM: To investigate the expression and possible role of the autophagy related protein p62 and LC3 in the retina based on a rat model of acute ocular hypertension.METHODS: Fifty rats were randomized into five groups: c... AIM: To investigate the expression and possible role of the autophagy related protein p62 and LC3 in the retina based on a rat model of acute ocular hypertension.METHODS: Fifty rats were randomized into five groups: control group A, B, C, and D. Groups A to D all received normal saline perfusion into the anterior chamber with pressure of 80 mm Hg for one hour, and retina tissue was obtained at 6, 12, 24 and 48 h after perfusion respectively, to investigate the activation of autophagy following ischemiareperfusion. The distribution and semi-quantification of autophagy related protein p62 and LC3 in the retina were detected using immunohistochemistry technique. The expression level of these two proteins was evaluated using Western blot.RESULTS: The number of retinal ganglion cells(RGCs) decreased with increasing reperfusion time, and significant reduction in the retinal thickness was observed 48 h after perfusion. In normal adult rats, LC3 protein was mainly expressed in the ganglion cell layer(GCL), and p62 protein was expressed in the nerve fiber layer(NFL), GCL, inner plexiform layer(IPL), inner nuclear layer(INL) and outer plexiform layer(OPL). In comparison to the control group, the expression level of LC3-II was higher in all the experimental groups(P<0.05), with the peak expression at 12 h after reperfusion. Additionally, the expression level of p62 was higher in all the experimental groups than the control(P<0.05, except for group A), with the peak level occurred 24 h after reperfusion. CONCLUSION: Both p62 and LC3 show low level and uneven expression in the retina of normal adult rats. Acute ocular hypertension can lead to upregulation of LC3-II and p62 expression in the retina. Autophagy flux is damaged 12 h after reperfusion, potentially resulting in further loss of RGCs. 展开更多
关键词 GLAUCOMA acute ocular hypertension lc3 p62 AUTOpHAGY
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基于PI3K/AKT通路介导自噬探讨电针颞区治疗血管性痴呆研究 被引量:1
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作者 邢昱一 刘波 +2 位作者 杨阳 李星桥 辛晶晶 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2024年第1期198-203,共6页
目的 观察电针颞区对血管性痴呆大鼠学习记忆能力、海马CA1区组织形态结构、海马CA1区神经元超微结构及海马组织中PI3K/AKT通路蛋白(PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT)和自噬相关蛋白(p62、Beclin-1、LC3I、LC3Ⅱ)表达水平的影响,探讨电针颞区... 目的 观察电针颞区对血管性痴呆大鼠学习记忆能力、海马CA1区组织形态结构、海马CA1区神经元超微结构及海马组织中PI3K/AKT通路蛋白(PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT)和自噬相关蛋白(p62、Beclin-1、LC3I、LC3Ⅱ)表达水平的影响,探讨电针颞区通过上调PI3K/AKT信号通路活性抑制神经元过度自噬治疗大鼠血管性痴呆的机制。方法 将SD大鼠分为假手术组、模型组、针刺组和奥拉西坦组,每组各12只。假手术组大鼠进行麻醉后分离颈总动脉,但不结扎。模型组、针刺组和奥拉西坦组采用双侧颈总动脉永久性结扎方法(BCCAO)制备血管性痴呆模型。针刺组选取头针颞区进行电针治疗。假手术组和模型组只做抓取、固定而不治疗。奥拉西坦组给予奥拉西坦溶液灌胃。治疗结束后采用Morris水迷宫实验评估各组大鼠空间学习记忆能力;HE染色观察血管性痴呆大鼠海马CA1区组织形态结构;透射电镜观察血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元超微结构;Western Blot检测大鼠海马组织中蛋白(PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、p62、Beclin-1、LC3I、LC3Ⅱ)的表达水平。结果 电针和奥拉西坦可缩短大鼠平均逃避潜伏期,增加在目标象限停留时间和穿越平台所在象限次数,改善血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元组织形态及神经元超微结构,降低LC3Ⅱ/LC3I、Beclin-1,增加p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p62,且电针效果优于奥拉西坦,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 电针颞区可能通过上调PI3K/AKT信号通路活性抑制神经元过度自噬的发生改善血管性痴呆大鼠学习和记忆能力。 展开更多
关键词 血管性痴呆 自噬 电针 pI3K AKT p62 BECLIN-1 lc3
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紫草素通过PI3K/Akt通路促进人乳腺癌MCF-7细胞自噬 被引量:51
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作者 陈菊英 刘朝纯 +3 位作者 曾智 黄文东 杨永飞 朱邦豪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期194-198,共5页
目的研究紫草素(Shikonin)对人乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测紫草素处理人乳腺癌MCF-7细胞24、48 h细胞的存活率,Western blot方法检测紫草素处理24 h和48 h时LC3、p62、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白水平... 目的研究紫草素(Shikonin)对人乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测紫草素处理人乳腺癌MCF-7细胞24、48 h细胞的存活率,Western blot方法检测紫草素处理24 h和48 h时LC3、p62、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白水平。结果 1μmol.L-1紫草素处理细胞48 h以及2.5、5μmol.L-1紫草素处理MCF-7细胞24 h和48 h时,MCF-7细胞的活力受到明显抑制,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值增加,p62表达减少,总PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt均减少。结论紫草素促进乳腺癌MCF-7细胞自噬,其作用机制可能与PI3K/Akt通路受到抑制有关。 展开更多
关键词 紫草素 MCF-7细胞 自噬 lc3 p62 pI3K Akt p-pI3K p-AKT
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酒精诱导嗜铬细胞瘤细胞自噬及其与P62作用的关系 被引量:7
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作者 董越娟 石贞玉 +4 位作者 刘诗濛 张维娟 皇甫超申 邓锦波 刘彬 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期772-777,共6页
目的采用不同浓度酒精作用于大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞,观察细胞自噬发生及其与P62变化的关系。方法用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察酒精对PC12细胞生存率的影响;间接免疫荧光法检测细胞自噬标志性蛋白LC3和P62的变化;高内涵活... 目的采用不同浓度酒精作用于大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞,观察细胞自噬发生及其与P62变化的关系。方法用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)观察酒精对PC12细胞生存率的影响;间接免疫荧光法检测细胞自噬标志性蛋白LC3和P62的变化;高内涵活细胞成像系统检测细胞LC3荧光强度;透射电镜检测细胞自噬的超微结构;Western blotting方法检测P62蛋白量的表达。结果50-800mmol/L浓度酒精对PC12细胞的增殖有显著的抑制作用,呈浓度依赖性。酒精致PC12细胞自噬标志性蛋白LC3在细胞核周围密度增高,并与P62形成点状聚集共定位,其中在200mmol/L浓度酒精作用2h,PC12细胞LC3自噬荧光强度最高;透射电镜也观察到酒精作用的PC12细胞质中自噬体和自噬溶酶体。Western blotting结果显示,不同浓度酒精处理PC12细胞2h,P62蛋白表达量显著增加(P〈0.01);用200mmol/L浓度酒精处理PC12细胞,P62蛋白表达在2h达到最高值。结论酒精诱导PC12细胞的自噬作用,P62蛋白参与自噬调控过程。 展开更多
关键词 酒精 自噬 lc3 p62 pC12细胞 间接免疫荧光法 透射电镜
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p62/SQSTM1与自噬在胃癌组织中表达及临床意义 被引量:3
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作者 林海凤 陈智伟 刘芳芳 《莆田学院学报》 2020年第2期57-61,共5页
观察p62/SQSTM1(简称p62)在胃癌组织中的表达水平,探讨p62与自噬的关系及临床意义。采用免疫组织化学检测胃癌石蜡标本中p62的表达情况,并分析p62与临床病理资料及预后的关系,同时检测胃癌和癌旁新鲜组织中p62 mRNA及蛋白的表达水平。结... 观察p62/SQSTM1(简称p62)在胃癌组织中的表达水平,探讨p62与自噬的关系及临床意义。采用免疫组织化学检测胃癌石蜡标本中p62的表达情况,并分析p62与临床病理资料及预后的关系,同时检测胃癌和癌旁新鲜组织中p62 mRNA及蛋白的表达水平。结果,190例胃癌石蜡标本中p62阳性率高于癌旁正常组织(P<0.05);p62的表达与浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05);p62阳性患者5年生存率为33.2%,低于p62阴性患者的55.3%(P<0.05);在新鲜胃癌组织中,p62 mRNA和蛋白的表达水平显著高于相应癌旁正常组织。结果表明:p62促进胃癌的发生发展及转移,是评估胃癌术后患者预后的一个重要标志。 展开更多
关键词 胃癌 p62/SQSTM1 预后 自噬 lc3
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p62敲除对细胞自噬的影响及其对泛素化修饰蛋白募集的作用
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作者 刘世玉 冯学召 +3 位作者 古丽妮尕尔·司马义 席庆 阿仙姑·哈斯木 米娜 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第9期1119-1123,1131,共6页
目的探讨p62敲除对细胞自噬及泛素化蛋白募集的影响。方法将野生型(Wild Type,WT)和p62基因敲除(p62 knockout,p62-KO)的大鼠肾上皮细胞(NRK)分别分为野生型阴性对照组(WT CT组)和野生型饥饿4 h组(WT Sta4 h组)、p62基因敲除阴性对照组(... 目的探讨p62敲除对细胞自噬及泛素化蛋白募集的影响。方法将野生型(Wild Type,WT)和p62基因敲除(p62 knockout,p62-KO)的大鼠肾上皮细胞(NRK)分别分为野生型阴性对照组(WT CT组)和野生型饥饿4 h组(WT Sta4 h组)、p62基因敲除阴性对照组(p62-KO CT组)和p62基因敲除饥饿4 h组(p62-KO Sta4 h组)。WT CT组和p62-KO CT组中加入普通培养基,对细胞进行空白对照处理;WT Sta4 h组和p62-KO Sta4 h组中加入饥饿培养基,对细胞进行饥饿4 h处理。免疫印迹法鉴定和检测p62基因的敲除及自噬体标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、泛素化修饰蛋白(Ub)的表达;电子显微镜观察自噬体形成;激光共聚焦显微镜法观察LC3蛋白阳性点状结构的数量。结果鉴定p62基因成功被敲除。饥饿处理4 h后,WT和p62-KO细胞中均能观察到自噬结构(包括自噬体和自噬溶酶体)。与WT CT组比较,WT Sta4 h组中LC3蛋白酯化和Ub蛋白表达水平升高(P<0.05),LC3蛋白阳性点状结构数量显著增加(P<0.01);与p62-KO CT组比较,p62-KO Sta4 h组中LC3蛋白酯化和Ub蛋白表达水平升高(P<0.05),LC3蛋白阳性点状结构数量显著增加(P<0.01)。结论p62参与细胞自噬并募集泛素化修饰蛋白,最终影响选择性自噬体底物的凝聚和降解。 展开更多
关键词 p62 选择性自噬 泛素化蛋白 lc3
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Apelin-13对小鼠脑出血后自噬相关蛋白表达的影响
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作者 包海军 邱海洋 +4 位作者 杨晓芳 黄艮平 肖华 谢伟 吴永平 《徐州医学院学报》 CAS 2016年第8期501-503,共3页
目的研究Apelin-13对于小鼠脑出血(ICH)后自噬相关蛋白(autophagy)的影响,并初步探讨其调节机制。方法正常CD-1小鼠纹状体注射胶原酶Ⅳ建立脑出血模型。于脑出血模型建立后5min侧脑室给药Apelin-13(0.3μg/g)或生理盐水8μl。... 目的研究Apelin-13对于小鼠脑出血(ICH)后自噬相关蛋白(autophagy)的影响,并初步探讨其调节机制。方法正常CD-1小鼠纹状体注射胶原酶Ⅳ建立脑出血模型。于脑出血模型建立后5min侧脑室给药Apelin-13(0.3μg/g)或生理盐水8μl。随机分为Apelin-13处理组、生理盐水处理组及脑出血组(Sham组)。每组分别于脑出血24、48h后断头取脑,取出血区及周边区的4mm3脑组织进行免疫印记实验检测LC3、P62、Beclin-1蛋白表达情况。结果与Sham组比较,小鼠脑出血后出血区LC3和Beclin-1蛋白表达下调、P62蛋白表达上调显著。结论Apelin-13可以显著抑制小鼠脑出血后的自噬,这种抑制机制可能是Apelin-13对于小鼠脑出血后神经保护作用机制之一。 展开更多
关键词 脑出血 ApELIN-13 自噬 lc3 BECLIN-1 p62
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基于AMPK信号通路探讨薯蓣粥对2型糖尿病大鼠胰腺自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62的影响 被引量:4
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作者 林心君 周建 +3 位作者 庞书勤 罗宗婷 陈芳 洪雪珮 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1326-1330,共5页
目的:探讨薯蓣粥对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞自噬功能及胰岛素抵抗(IR)的影响,为阐明薯蓣粥的降糖机制及推广应用提供科学依据。方法:将48只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为空白组8只(普通饲料喂养)和造模组40只(高脂高糖饲料喂养)... 目的:探讨薯蓣粥对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞自噬功能及胰岛素抵抗(IR)的影响,为阐明薯蓣粥的降糖机制及推广应用提供科学依据。方法:将48只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为空白组8只(普通饲料喂养)和造模组40只(高脂高糖饲料喂养)。6周后,造模组腹腔注射链脲佐菌素。以连续非同日2次空腹血糖(FBG)≥11.1 mmol/L为糖尿病大鼠成模标准。32只成模大鼠随机分为模型组、薯蓣粥组(薯蓣粥)、联合治疗组(薯蓣粥和二甲双胍)、二甲双胍组(二甲双胍),每组8只。灌胃干预6周后检测大鼠FBG、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹胰岛素(FINS)的变化,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。HE染色观察胰岛β细胞腺形态结构;Western blot检测AMPK、LC3-Ⅱ、p62蛋白表达。结果:HE染色结果显示:薯蓣粥组、联合治疗组以及二甲双胍组胰岛β细胞形态结构较模型组有不同程度的改善。与空白组比较,模型组大鼠FBG、TC、LDL-C、FINS、HOMA-IR水平显著升高(P<0.01),AMPK、LC3-Ⅱ蛋白表达显著下降(P<0.05),p62蛋白表达显著增加(P<0.05)。与模型组比较,薯蓣粥组、联合治疗组、二甲双胍组FBG、TC、LDL-C、FINS、HOMA-IR水平显著下降(P<0.01),AMPK、LC3蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);薯蓣粥组LC3-Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.01);薯蓣粥组与二甲双胍组p62蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:薯蓣粥能调节糖尿病大鼠糖脂代谢,改善其IR及胰岛β细胞功能,其机制可能与薯蓣粥以AMPK为作用靶点,激活胰岛β细胞自噬有关。 展开更多
关键词 薯蓣粥 2型糖尿病 腺苷酸活化蛋白激酶 微管相关蛋白1轻链3 核孔蛋白62 糖代谢 脂代谢 自噬
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Earle's盐平衡液饥饿诱导DLD-1,HCT-116,A2780,CHO,Hep G2和SMMC7721肿瘤细胞系自噬发生的时间优化(英文) 被引量:4
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作者 张文亮 张明明 +2 位作者 刘斌 石宏顺 王海河 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期108-117,共10页
肿瘤细胞在正常培养条件下自噬水平非常低,很难被监测到。与药物性自噬诱导剂相比,Earle's盐平衡液(EBSS)应用简便,除产生饥饿诱导自噬外,无其他细胞毒性,有利于研究细胞自噬的分子机制和功能。本文应用蛋白免疫印记和细胞免疫荧光... 肿瘤细胞在正常培养条件下自噬水平非常低,很难被监测到。与药物性自噬诱导剂相比,Earle's盐平衡液(EBSS)应用简便,除产生饥饿诱导自噬外,无其他细胞毒性,有利于研究细胞自噬的分子机制和功能。本文应用蛋白免疫印记和细胞免疫荧光技术探讨了EBSS对DLD-1和HCT-116结直肠癌、A2780和CHO卵巢癌、HepG 2和SMMC7721肝癌细胞系的自噬诱导效果和有效诱导时间。结果显示:EBSS短短几小时处理,能够非常有效地诱导上述6株肿瘤细胞发生自噬,但不同细胞系之间的有效诱导时间却明显不同。其中,DLD-1、HCT-116、CHO和HepG 2细胞系的有效诱导时间仅需2 h;A2780细胞需要稍微延长到4 h;然而SMMC7721却要延长到8 h左右。本研究为其他研究者在应用EBSS诱导肿瘤细胞自噬时提供了实践依据和参考。 展开更多
关键词 细胞自噬诱导 Earle's盐平衡液 lc3 SQSTM1/p62 癌细胞
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