靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR^(262-328)的构建及免疫原性分析

目的构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性。方法采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性。结果获得了2 031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95%以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1∶16 000以上的抗体滴度。结论成功制备了肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328。

重组抗表皮生长因子疫苗P64k-EGF的构建及免疫原性分析

表皮生长因子（epidemal growth factor,EGF）的相对分子质量（Mr）为6000,由53个氨基酸组成;是具有酪氨酸激酶活性的表皮生长因子受体（epidemal growth factor receptor,EGFR）的主要配体,而EGFR在多种上皮源肿瘤中过表达[1-4]。

新型载体蛋白P64K在大肠杆菌中的可溶性表达与纯化

用常规PCR方法从脑膜炎球菌中克隆出P64K基因,构建重组质粒pET28a-P64K转化BL21穴DE3雪宿主菌,经IPTG诱导表达筛选P64K蛋白的高表达菌株。结果证实P64K蛋白为胞内可溶性表达,表达量约占胞内总蛋白的30%。重组P64K蛋白经Butyl疏水柱、G200分子筛柱和Q阴离子柱三步层析后纯度达到95%以上,为今后进一步的功能和应用研究打下了良好的基础。

脑膜炎球菌P64K蛋白作为新型抗原载体的研究进展

P64K是来自奈瑟氏属脑膜炎球菌的一种外层膜蛋白 ,发现于脑膜炎恢复期患者和接种过古巴VA MENGOC BC疫苗的个体血清内。编码P64K蛋白的基因称lpdA ,其编码序列长 1 782bp。P64K蛋白含 5 93个氨基酸 ,由两个结构域组成 ,有二氢硫辛酸酰胺酰基脱氢酶活性。P64K是抗脑膜炎疫苗的候选者。因为P64K的高分子量和强免疫原性 。

Flash M25P64驱动开发与应用

M25P64是一款8 M字节串行Flash存储器。利用其诸多特性可为大容量数据存储提供一种解决方案。介绍了M25P64的主要特点,工作原理,驱动程序的开发以及典型应用实例。在其典型应用实例中,基于SPI接口的数据存储系统能简单有效稳定运行。

Construction and evaluation of anti-gastrin immunogen based on P64K protein

瞄准：从奈瑟氏菌属 meningitids 基于 P64K 蛋白质构造二种 anti-gastrin 免疫情报并且比较他们的产生免疫性的效果。方法：G17P64K 基因被克隆并且绑扎进 pET28a 原生质标志，然后转变了成 BL21 (DE3 ) 。在磅媒介和 IPTG 正式就职的接种以后， recombinant 蛋白质 solubly 在高水平被表示。G17P64K 熔化蛋白质的纯化类似于 P64K 的。纯化由 30% 组成的起始的步浸透了硫酸铵降水被做。另外的好优化包括了 phenyl-sepharose， G200 Sephadex 胶化过滤和 Q-sepharose 阴离子 exchanger 层析。高度净化的蛋白质在 N 终端氨基酸残余被获得并且定序。多肽被 MBS 方法然后兔子 anti-gastrin 被 Fmoc 稳固的阶段化学法和 cross-linked 综合到搬运人蛋白质 P64K 和 DT 异种 17 抗体被与 cross-linked 使兔子免疫准备并且熔化了蛋白质。效价和抗体的活动在试管内被估计。结果：G17P64K 基因和 recombinant 细菌被获得。在四步纯化以后，超过 90% 有纯净的蛋白质样品被完成。在 84 (th ) 在第一免疫以后的白天，对 cross-linked 蛋白质的抗体的效价到达了 51,200。抗体在试管内的评估表明了那它在肿瘤房间 SW480 的生长上举办了一项高禁止的活动。结论：P64K 多肽 cross-linked 免疫情报使兔子免疫并且对促胃液素完成了更高的效价抗体 17 比 G17P64K 熔化蛋白质免疫情报，它能禁止肿瘤细胞 SW480 的生长。

1P64F型汽油机游车故障及其解决方法

分析了1P64F型汽油机"游车"故障的原因,并给出了解决方法。

P64型棚车简介

Ｐ６４型棚车是一种具有内衬结构的新型棚车，该车设计方案于１９９２年８月报部批准，于１９９３年１０月由齐齐哈尔车辆厂完成两辆样车试制。该车主要型钢板材件均采用耐大气腐蚀低合金钢，并进行抛丸预处理，内衬板及地板采用竹材板。其除具有栅车的一般用途外，还可兼顾人员及军事物资的运输。该车于１９９４年４月通过部级技术审查，于９４年投入小批量生产。

浅谈如何解决P64A棚车车顶螺栓串位问题

对P64A型棚车车顶螺栓串位原因进行了分析，并相应提出了解决螺拴串位的办法。

P64A型棚车设计

本文介绍了Ｐ６４Ａ型棚车的性能、尺寸和主要结构的设计，阐述了该车的应用前景和尚须解决的问题。

棚车P64系统小纵向梁、木地板故障根源分析与建议对策

对棚车P64系列木地板破损,小纵梁裂损、弯曲变形等故障原因进行分析,提出建议性措施,以保证棚车P64系列技术状态良好。

P64GK棚车侧墙钢结构组焊工艺

通过介绍P64GK棚车侧墙钢结构的技术要求，分析了其组焊工艺及相关工艺装备。

重组脑膜炎球菌P64K蛋白的表达、纯化及载体作用

目的表达并纯化重组脑膜炎球菌P64K蛋白，观察其载体作用。方法利用基因工程技术在大肠杆菌中表达P64K蛋白，用硫酸铵盐析沉淀和两步层析纯化P64K蛋白。以重组P64K蛋白为载体蛋白，以已二酰肼为连接剂，在碳化二亚胺的作用下，将P64K蛋白与活化的A群脑膜炎球菌多糖（group A meningococcal polysaccharide, GAMP）结合，制备GAMP-P64K结合物。免疫BALB／c小鼠，间接ELISA法测定血清特异性抗P64K蛋白和GAMPIgG抗体，分析P64K蛋白的免疫原性。结果重组P64K蛋白在大肠杆菌中主要以可溶性形式表达，表达量约占菌体总蛋白的35％。动物实验证明，重组P64K蛋白具有较强的免疫原性，表明P64K蛋白具有载体蛋白作用。结论在大肠杆菌中成功表达了重组P64K蛋白，以重组P64K蛋白为载体制备的GAMP—P64K结合物具有良好的免疫原性。这为以重组P64K蛋白为蛋白载体制备其他结合疫苗奠定了实验基础。

前从板座组装尺寸对车辆性能的影响

通过对前从板座(与从板接触面)至端梁外侧面尺寸374 mm制造误差相关数据的计算,分析该尺寸误差对P64GK型棚车的曲线通过能力影响。

解决P_(64A)棚车车顶内宽超差的措施

分析了造成车顶内宽超差的原因 ,提出了采用强制焊接及焊前加大或减小内宽尺寸的措施 。

P_(64K)型棚车脱轨事故原因分析及改进建议

结合P64K3401465号和P64K3401764号棚车的情况,对棚车脱轨原因进行了分析,并提出了相应的改进建议。

非接触IC卡考勤系统设计

IC卡作为电话卡、消费卡、入门卡、考勤卡得到广泛应用。目前大部分IC卡还是裸露金属触点的接触式IC卡,在不久的将来,非接触IC卡必然会占据主流地位。这里介绍非接触式IC卡在实际中的应用。该系统操作方便、快捷。并且介绍该系统的组成、系统的功能和一些问题的处理方法。

P_(64A) 型棚车研制

介绍了Ｐ６４Ａ型棚车的主要技术参数和结构，并阐述了该车的应用前景和尚须解决的问题。