益生菌Lactobacillus plantarum P8与Streptococcus thermophilus混合发酵对发酵乳品质的影响

将益生菌Lactobacillus plantarum P8以不同接种比例分别与Streptococcus thermophilus ND03、ND05和ND07复配发酵牛乳,并以S.ther-mophilus单菌发酵为对照。于0 h、发酵结束(pH=4.5)及4℃冷藏24 h,分别测定发酵乳样品的发酵时间,及pH值、黏度、脱水收缩率和活菌数并进行感官鉴评。结果表明,L.plantarum P8与S.thermophilus ND03复配,发酵时间显著高于其他组,各组样品黏度和脱水收缩率差异不显著;L.plantarum P8与S.thermophilus ND05分别以5×106mL-1接种1∶1复配时,样品中L.plantarum P8的活菌数为5.26×107mL-1,酸度适宜,无乳清析出,有良好的黏度,产品风味较好,将该组合应用于发酵乳生产,较可行。

绿色荧光蛋白和潮霉素抗性双标记载体转化草酸青霉菌P8的研究

草酸青霉菌P8(Penicillium oxalicum)溶磷菌株具有较强的溶解多种无机难溶磷的能力和促进作物生长的作用。为研究P8在作物根际的定殖状况,用携带加强型绿色荧光蛋白和潮霉素抗性的双标记载体转化溶磷青霉菌P8的原生质体,筛选出稳定、高效表达GFP并对潮霉素产生抗性的转化菌株,Southern杂交分析结果显示,外源质粒DNA是以非同源重组方式整合到转化菌株基因组染色体上。试验证明转化菌株的形态学特征和溶磷能力与野生型菌株无明显差别。

水稻矮缩病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达

【目的】为明确水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生质体后的表达动态,【方法】利用PEG介导的病毒侵染原生质体体系,通过免疫荧光和电镜技术分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒体在水稻原生质体中的定位;同时,通过Western blot和实时荧光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生质体中的积累量。【结果】病毒接种水稻原生质体48h后,Pns6蛋白在细胞质中可以形成类似于病毒原质(viroplasm)的点状内含体,P8蛋白也大量的表达。同时,病毒粒体在水稻原生质体中也形成内含体状的结构。病毒接种水稻原生质体12 h后,均可检测到Pns6和P8蛋白的表达,并且在36 h后达到最高值。病毒接种水稻原生质体后,Pns6 RNA在24 h时表达量达到最高,P8 RNA在36 h时表达量达到最高。【结论】RDV侵染水稻原生质体后,Pns6和P8蛋白均有表达,并且病毒也可能通过形成病毒原质来完成病毒在寄主细胞的复制和装配。

“补肾活血”针刺法对SAMP8小鼠海马蛋白质表达的影响

目的运用蛋白质组学技术观察"补肾活血"针刺法对SAMP8小鼠海马蛋白质表达的影响及探讨其治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将5月龄SAMP8 20只随机分为针刺治疗组(n=10)和模型空白对照组(n=10),针刺治疗组予以"补肾活血"针刺法干预,取穴百会、肾腧、血海、膈腧;模型空白对照组未予特殊处理。干预4 w后,取各组小鼠海马组织,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分别分离治疗组和对照组SAMP8海马区组织总蛋白,经胶体考马斯亮蓝染色,利用ImageScanner图像扫描仪及ImageMaster双向凝胶电泳软件对图像进行扫描分析,得到差异蛋白质点,通过质谱分析得到相应肽质量指纹图谱,经蛋白质数据库查询,鉴定差异蛋白质点。结果针刺治疗组与模型对照组存在13个差异点,初步鉴定了浮舰蛋白1(Flotillin-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、脑红蛋白(NGb)、α-烯醇酶(α-enolase)等9个差异蛋白质,其中6个表达上调,3个下调;这些蛋白的功能涉及Aβ代谢的调节、氧化应激的调节、神经炎症的调节以及细胞骨架的修复等方面。结论 "补肾活血"针刺法可调节SAMP8海马组织的多种蛋白质表达,提示其具有多靶点治疗的作用,可能通过调节Aβ的代谢、抗氧化应激、抑制神经反应、修复细胞骨架等途径来实现其治疗AD的作用。

Trp-p8结合PSADTZ测定在前列腺癌早期诊断中的作用

目的:研究不同区间PSADTZ中瞬时受体电位p8(Trp-p8)蛋白在PSA"灰区"前列腺组织中的表达规律,探讨两者联合测定在前列腺癌早期诊断中的作用。方法:通过免疫组织化学的方法研究了不同区间PSADTZ中良性前列腺增生和前列腺癌样本各30例,采用图文数据成像分析系统判定各组织中Trp-p8蛋白的表达强度,分析其差异性,揭示其与PSADTZ之间的关系。结果:良性前列腺增生组织中Trp-p8蛋白的表达强度较弱,而在前列腺癌组织中Trp-p8蛋白呈不同程度的高强度表达,且在高区间PSADTZ组中的表达强度更高,差异具有统计学意义。结论:Trp-p8在PSA灰区前列腺组织中的表达存在差异,而且这种表达差异与PSADTZ值呈正相关。通过测定Trp-p8蛋白的表达强度结合PSADTZ区间值,可以提供一个预测区间,对处于此区间的患者严密随访,通过增加穿刺频率以便早期筛查出前列腺癌患者。

快速老化小鼠P8海马神经元突触可塑性相关的AMPA受体表达异常

目的比较快速老化小鼠P8(SAMP8)与抗快速老化小鼠R1(SAMR1)海马神经元突触可塑性相关的谷氨酸α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸(AMPA)受体表达差异,为阿尔兹海默病(AD)的发病机制提供实验依据。方法取雄性10月龄SAMP8 10只和SAMR1 9只,应用Morris水迷宫实验评价动物学习记忆能力,透射电子显微镜观察海马CA1区神经元突触界面超微结构,蛋白质免疫印迹法检测海马AMPA受体亚基GluR1、GluR2的表达。结果与SAMR1比较,SAMP8逃避潜伏期延长,目标象限时间百分比下降,穿台次数减少;海马CA1区神经元突触后致密带变薄,突触间隙增宽,突触界面曲率下降;海马GluR2含量下降,GluR1含量有下降趋势,但差异无统计学意义。结论海马AMPA受体异常可能是导致突触可塑性受损,引发SAMP8认知障碍的原因之一,AMPA受体在AD的发病中可能占有重要地位。

肉苁蓉总苷对SAMP8小鼠空间学习记忆的影响及其机制

目的:探讨肉苁蓉总苷(GCs)对SAMP8小鼠空间学习记忆的影响及其作用机制。方法:GCs组动物灌胃给药,100 mg/d;氟他胺(F)组动物皮下注射氟他胺0.5 mg/d;(F+GCs)组动物联合给予上述等剂量药物;Vehicle组动物给予等体积的生理盐水灌胃;以上4组动物连续给药30 d。空白对照(Control)组不给予任何干预。测定SAMP8小鼠学习记忆能力,海马CA1区正常锥体细胞数;测定脑组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:GCs可提高SAMP8小鼠空间学习记忆能力,可降低脑组织MDA含量,提高SOD、GSHPx活性,提高海马锥体细胞的存活率。结论:GCs对脑损伤的保护机制可能与其增强自由基清除酶活性,减轻脂质过氧化反应,进而提高海马锥体细胞的存活率有关。

人剪切修复基因XPD对肝癌细胞中p8/TTDA基因的调控作用

目的探讨人剪切修复基因XPD对p8/TTDA基因的调控作用。方法用pEGFP-N2/XPD重组质粒、pEGFP-N2空载质粒分别稳定转染人肝癌细胞SMMC-7721,并用具有相同遗传背景和代数的SMMC-7721细胞作为空白对照。用RT-PCR、Western blot法检测转染前后p8、XPD、p53、c-myc表达量的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞增殖活力。结果 (1)RT-PCR检测示:p8 mRNA在人肝癌细胞SMMC-7721是低表达的,稳定转染野生型XPD后,p8 mRNA和XPD mRNA表达量明显增高(P<0.001)。稳定转染重组质粒细胞组p53 mRNA表达量亦明显增高(P<0.05),c-myc mRNA表达量则明显下降(P<0.001)。(2)Western blot法检测示:p8蛋白在人肝癌细胞SMMC-7721是低表达的。稳定转染野生型XPD后,p8蛋白、XPD蛋白、p53蛋白表达量明显增高(P<0.05),c-myc蛋白表达量则明显下降,差异有统计学意义(P<0.001)。(3)MTT检测示:稳定转染重组质粒细胞组细胞增殖率明显减弱(P<0.001)。结论人剪切修复基因XPD可调控p8/TTDA基因的表达。野生型XPD转染后亦可上调p53表达,下调c-myc表达,从而在分子途径上抑制SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。

肿瘤相关应激分子p8

p8是在研究急性胰腺损伤的分子机制中首先鉴定得到的一个小分子核蛋白。胰腺、肝脏、肾脏等诸多脏器受到损伤刺激后,p8能够在短时间内迅速、高水平地上调,被认为是一个应激分子。进一步研究显示,p8在包括胰腺癌、乳腺癌、甲状腺癌及前列腺癌等多种肿瘤中存在差异表达,并通过影响细胞的生长、凋亡及转移等过程参与肿瘤的发生、发展。但关于p8在肿瘤中的作用,不同研究的结果并不一致。我们简要综述p8在肿瘤中的作用。

淀粉样前体蛋白在快速老化痴呆小鼠P8海马中表达的免疫组化学研究

目的:观察淀粉样前体蛋白(APP)在快速老化痴呆小鼠P8(SAMP8)海马中的表达,探讨其与SAMP8小鼠增龄性变化的关系。方法:选用1、4、8、12月龄的SAMP8,用同龄正常老化小鼠R1(SAMR1)作为对照组,每组各8只,用免疫组化方法检测海马区APP的表达。结果:APP主要在SAM鼠海马神经元胞浆内表达,海马不同区域均有表达。定量结果显示对照组SAMR1小鼠海马各区域APP的表达随月龄增加无显著性改变(P>0.05);而SAMP8小鼠APP的表达则随月龄增加而增加,8月龄和12月龄SAMP8小鼠CA1区的表达量显著高于1月龄组(P<0.05),也分别显著高于同月龄对照组(P<0.05),CA3区APP的改变稍晚于CA1区,与同品系1月龄小鼠及同龄对照组比较,12月龄时显示有显著性增加(P<0.05)。结论:SAMP8小鼠海马APP的表达随月龄增加而增加,提示APP表达量的增加与SAMP8小鼠的快速老化相关。

胃癌组织中p8表达的初步研究

目的探讨胃癌组织中p8的表达情况及意义。方法应用免疫组织化学方法检测45例胃癌组织、17例正常胃窦黏膜组织(对照组)中p8的表达情况,并分析其与胃癌患者临床特征之间的关系。结果胃癌组织中p8蛋白的表达率明显高于对照组(97.8%vs23.5%,P<0.05);且胃癌组织中p8表达强度也显著高于对照组(P<0.05)。分化低胃腺癌组织、有淋巴结转移的胃癌组织的p8表达强度分别强于高-中分化胃腺癌组织、无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。但胃癌组织中p8蛋白的表达与患者性别、年龄是否大于60岁、病变部位无明显相关(P>0.05)。结论p8可能在胃癌的发生发展中有重要作用。

益肾化浊方及拆方对SAMP8小鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察益肾化浊方及拆方对7月龄SAMP8小鼠海马神经元凋亡的影响。方法将40只7月龄SAMP8小鼠随机分成SAMP8(P8)组、益肾化浊方(YSHZ)组,益肾(YS)组和化浊(HZ)组,每组10只,选择10只抗快速老化小鼠(SAMR1)作为对照(R1)组;益肾化浊方、益肾方与化浊方分别按照6.24、4.68、1.56 g/(kg·d)灌胃干预,R1和P8组予等量蒸馏水灌胃,疗程均为4 w,4 w后停止干预。采用TUNEL染色观察各组小鼠海马神经元凋亡指数变化,采用Western印迹检测凋亡途径中关键蛋白B淋巴细胞瘤相关X蛋白(Bax)/B淋巴细胞瘤(Bcl)2、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)9、Caspase10、裂解(Cleaved)Caspase3表达情况。结果海马CA1区神经元凋亡指数:与R1组比较,P8组凋亡指数明显增高(P<0.05)。与P8组比较,YSHZ组凋亡指数明显降低(P<0.05)。Western印迹检测结果:与R1组相比,P8组小鼠海马促凋亡蛋白Bax/Bcl2比值、Caspase9、Caspase10和Cleaved Caspase3表达明显升高(P<0.05)。与P8组相比,YSHZ组Bax/Bcl2比值、Caspase10和Cleaved Caspase3表达明显降低(P<0.05);YS组Caspase10表达明显降低(P<0.05)。结论益肾化浊方能明显减轻SAMP8小鼠海马神经元凋亡,该作用可能与调节Bcl-2家族蛋白表达,减少Caspase家族蛋白的活化有关;拆方中益肾方中药具有抗凋亡的作用趋势。

重组斑马鱼p8蛋白的原核表达及纯化

目的:在大肠杆菌中重组表达斑马鱼p8蛋白并纯化。方法:PCR扩增斑马鱼p8蛋白基因编码区,连接到带有6×His标签的原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-p8并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;优化表达条件后用Ni2+柱纯化重组蛋白。结果:构建了pET-28a-p8重组质粒;目的蛋白在大肠杆菌中获得表达,亲和纯化后,SDS-PAGE显示相对分子质量为预期的12.8×103。结论:获得了斑马鱼p8融合蛋白,为其生物学功能研究奠定了基础。

基于P8xC591的CAN总线与RS-232双向转换卡的设计

本文首先简单地介绍了单片机P8xC591的内部结构及特点,然后具体说明了基于P8xC591的CAN总线与RS-232双向转换卡的硬件电路及其工作原理,并给出了相应的软件设计。本文设计的CAN/RS-232转换卡在煤矿矿灯信息采集系统中的实际应用表明设计思路切实可行。

利用P8xC591进行汽车CAN总线系统智能节点的设计

介绍了P8xC591微控制器在CAN中的应用,采用带在片CAN的微控制器P8xC591进行汽车CAN总线系统智能节点的设计,包括硬件电路设计和软件设计。软件设计包括P8xC591的PeliCAN模块的初始化、查询方式发送子程序和中断方式接收子程序等应用中最基本的子程序。

SAMP8小鼠记忆能力与海马CA1区神经元脱失相关性研究

目的探讨快速老化小鼠(SAMP8)学习记忆能力改变与海马CA1区神经元脱失间的关系。方法随机选取6月龄雄性P8和R1小鼠各15只,使用水迷宫实验分别检测两组小鼠的逃避潜伏期和跨越平台次数,尼氏染色观测两组小鼠海马CA1区神经元形态和数量变化。结果与R1小鼠比较,P8小鼠水迷宫实验逃避潜伏期明显较长,空间探索实验跨越平台次数P8小鼠明显减少,且P8小鼠游泳轨迹呈现无目的性环游,而R1小鼠游泳轨迹多集中于原隐匿平台象限;海马CA1区神经元层次排列紊乱,数量减少;逃避潜伏期与海马CA1区神经元数量呈负相关,跨越平台次数与海马CA1区神经元神经元数量呈正相关。结论快速老化P8小鼠的学习记忆能力明显下降,且与海马CA1区神经元的结构和数量变化有密切关系,该品系小鼠为阿尔茨海默病的研究提供了较为理想的动物模型。

丰富环境对快速老化小鼠SAMP8情感的影响

目的:探讨丰富环境对快速老化小鼠SAMP8情感的影响.方法:3mo龄SAMP8小鼠和3mo龄SAMR1小鼠随机分为丰富环境组(n=16)和标准环境组(n=10),饲养3mo后用高架十字迷宫实验评测小鼠的情感改变.用RT-PCR方法检测小鼠海马脑源性神经生长因子(BDNF)的表达.结果:丰富环境组小鼠进入开放臂次数比例(OE%)及在开放臂停留的时间(OT%)比例均明显高于标准环境组(P<0.01).丰富环境组海马BDNFmRNA的表达明显高于标准环境组(P<0.01).结论:丰富环境能提高SAMP8小鼠海马BDNFmRNA的表达,并对SAMP8小鼠的精神行为具有干预作用,降低SAMP8小鼠的焦虑行为.

SAM-P8小鼠痕迹性眨眼条件反射的获得及其PFC-ERP变化

目的:研究快速老化P8小鼠(senescence accelerated mouse-prone/8,SAM-P8)痕迹性眨眼条件反射(trace eyeblink conditioning,TEBC)的获得及其前额叶(prefrontal cortex,PFC)事件相关电位(event related potential,ERP)的变化。方法:实验动物为SAM-P8组(n=11)与对照小鼠SAM-R1(senescence accelerated mouse-resistant/1,SAM-R1)组(n=11);对2组小鼠进行条件刺激(conditioned stimulus,CS)与非条件刺激(unconditioned stimulus,US)配对的经典TEBC训练,其中CS为250 ms、3 k Hz、85 d B的纯音,US为强度为3 Psi、持续时间100 ms的束状氧气对动物角膜进行给气。观察2组动物的经典TEBC的条件反应(conditioned response,CR)的习得及其PFC-ERP的变化。结果:行为学结果方面,SAM-P8可以获得有限的经典TEBC(CS:250ms 85 d B的纯音),SAM-R1的条件反应发生率(incidence rate of conditioned response,CR%)明显高于SAM-P8(P<0.05)。PFCERP结果方面:在CR期,无论是峰峰幅度和峰潜伏期未见SAM-P8与SAM-R1 2组间有明显差别,且2组组内训练各期之间没有统计学差异(P>0.05);在CR前期,SAM-P8的PFC-ERP的峰峰幅度显著低于SAM-R1(P<0.01),SAM-R1行为习得中期PFC-ERP的峰峰幅度明显高于其行为习得早期(P<0.05),但SAM-P8未见此显著变化。结论:SAM-P8小鼠对经典TEBC的学习能力有损伤但并不完全;在TEBC建立过程中,SAM-P8小鼠其前额叶的参与程度低于SAM-R1小鼠,PFC可能更多参与TEBC的中期获得过程,但这一时间特征对于SAM-P8似乎并不明显。

SAMP8鼠血小板线粒体超微结构的增年龄性变化

目的观察不同月龄SAMP8鼠(快速老化鼠P8)血小板线粒体超微结构的变化。方法提取2、6及9月龄SAMP8鼠的血小板并进行电镜观察。结果随月龄的增加,SAMP8鼠血小板线粒体退变逐渐明显。9月龄SAMP8鼠的血小板线粒体呈明显的退行性变。结论 SAMP8鼠血小板线粒体超微结构呈增龄性改变,提示线粒体变性可能是SAMP8鼠快速老化的机制之一。血小板可广泛地用于研究线粒体机能和老化相关疾病。

带有CAB总线接口的Philips P8XC592单片机

介绍P8XC592单片机的结构特点,着重阐述了该单片机片内CAN通信控制器及其与CPU的接口.