小鼠肥大细胞瘤P815模型的建立与初步应用

目的建立小鼠肥大细胞瘤 P815种植瘤模型 ,并对其体内诱发特异性 CTL应答机理进行初步的研究。方法经有限稀释法筛选 P815单克隆瘤系 ,用 RT- PCR及产物 DNA测序鉴定肿瘤抗原 P1A基因的表达 ;在此基础上 ,用活瘤苗免疫同系小鼠 ,经标准 5 1 Cr释放试验检测在体特异性 CTL的活性。结果筛选出了一个 P815单克隆成瘤系 P815 - F3,并鉴定该瘤存在 P1A基因的表达 ;用活瘤疫苗免疫 6只小鼠 ,在 3只体内诱发出了特异性 CTL 应答。结论本研究成功地建立了 P815肿瘤模型 ,对体内特异性抗瘤 CTL效应的诱发和检测做了初步的研究 。

雷公藤红素下调P物质介导的肥大细胞NK-1R mRNA表达

目的研究雷公藤红素对P物质(susbstance p,SP)介导的肥大细胞活化的影响,方法应用CCK8检测雷公藤红素对小鼠P815肥大细胞的毒性作用,筛选出最佳的浓度和时间后将细胞分为细胞空白组,SP模型组,低、中、高浓度雷公藤红素组,雷公藤红素预处理细胞后,再采用SP刺激肥大细胞,致使其活化。采用ELISA检测组胺的释放量,RT-PCR检测NK-1R mRNA表达情况。结果雷公藤红素对细胞的毒性作用呈浓度时间依赖性,随着浓度和时间的增加毒性越大;与模型组相比,组胺的释放量随浓度的增加而减少,肥大细胞表面NK-1R mRNA表达下降(P<0.05),差异有统计学意义。结论雷公藤红素能抑制小鼠P815肥大细胞组胺的释放,可能跟NK-1R的表达有关。

三种不同方法处理的蝉蜕抗变态反应研究

将蝉蜕超微粉组、蝉蜕水提物组、蝉蜕醇提物组分别进行小鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验、接触性过敏性皮炎(ACD)实验和化合物48/80诱导的小鼠全身过敏反应实验,观察三种不同方法处理的蝉蜕对三种过敏反应的抑制作用,并对PCA、ACD实验中的小鼠过敏部位进行组织切片,光镜下观察肥大细胞的聚集情况.同时制备各给药组的含药血清,检测不同方法处理的蝉蜕对体外培养的小鼠P815肥大细胞脱颗粒及组胺释放的影,比较蝉蜕的超微粉、水提物、醇提物三种不同方法处理得到产物抗变态反应的差异性,探讨其初步机制.结果表明,不同方法处理的蝉蜕对小鼠PCA、ACD和化合物48/80诱导的全身过敏反应均有不同程度的抑制作用,且不同方法处理的蝉蜕制品对体外培养的P815肥大细胞的脱颗粒及组胺释放有一定的抑制作用,但蝉蜕超微粉较其他两种方法处理的蝉蜕作用更明显.

蝉蜕超微粉抗变态反应作用及初步机制研究

为了探讨蝉蜕超微粉抗变态反应的作用及其初步机制,试验分别进行小鼠被动皮肤过敏反应(PCA)试验、接触性过敏性皮炎(ACD)试验和化合物48/80诱导的小鼠全身过敏反应试验,选择健康Balb/c小鼠,设置空白组、模型对照组、阳性对照组和蝉蜕超微粉高剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)和低剂量组(10 mg/kg),观察不同剂量蝉蜕超微粉对三种过敏反应的抑制作用,并对PCA、ACD试验中的小鼠过敏部位进行组织切片,光镜下观察肥大细胞的聚集情况,并制备各组含药血清,观察药物对体外培养的P815肥大细胞脱颗粒及组胺释放的影响。结果表明:不同剂量蝉蜕超微粉对小鼠PCA、ACD和化合物48/80诱导的全身过敏反应均有不同程度的抑制作用;不同剂量的蝉蜕制品对体外培养的P815肥大细胞的脱颗粒及组胺释放有一定抑制作用。说明蝉蜕超微粉有明显的抗变态反应作用,且该作用与抑制肥大细胞释放组胺有关。