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PACE4组织芯片免疫组化检测方法的比较
1
作者
林云恩
龙惠东
+2 位作者
韩秀晶
秦积龙
谭小军
《现代医药卫生》
2020年第5期668-671,共4页
目的探讨非小细胞肺癌组织偶合基本氨基酸裂解酶4(PACE4)免疫组织化学(简称免疫组化)检测方法,寻求其实验条件的规范化。方法172例非小细胞肺癌组织按照ABCAM抗体手工免疫组化的结果分为3组:A组(45例)弥漫强阳性,评分为9~12分;B组(66例...
目的探讨非小细胞肺癌组织偶合基本氨基酸裂解酶4(PACE4)免疫组织化学(简称免疫组化)检测方法,寻求其实验条件的规范化。方法172例非小细胞肺癌组织按照ABCAM抗体手工免疫组化的结果分为3组:A组(45例)弥漫强阳性,评分为9~12分;B组(66例)局灶阳性,评分为1~<9分;C组(61例)阴性,评分为0分。采用ABCAM和KALANG 2种PACE4抗体,石蜡切片行手工免疫组化染色技术(手工染色)和全自动免疫组化机器染色技术(全自动染色),比较2种染色方法的染色结果。结果ABCAM和KALANG 2种PACE4抗体手工染色和全自动染色在样本中着色效果均较良好。全自动染色整体检测结果与手工染色有良好的可重复性,与手工染色比较,全自动染色背景更干净,对比更清晰;且大大缩短了染色时间,节省了人力,更有利于整体科研实验工作的安排,可使免疫组化实验流程具有可重复性、流程可靠。结论ABCAM及KALANG 2种抗体的免疫组化染色效果无显著差异,整体有良好的可重复性。全自动染色背景更干净,对比更清晰,省时省力,从规范和效率角度出发,全自动免疫组化染色可以更好地解放双手,同时得到更理想的实验结果。
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关键词
pace4
组织芯片
手工免疫组化染色
全自动免疫组化染色
肺肿瘤
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职称材料
PACE4对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制
2
作者
王安杏
梁泽明
+2 位作者
张会军
徐楷
陈入菲
《现代生物医学进展》
CAS
2016年第31期6042-6046,共5页
目的:研究前体蛋白转化酶枯草溶菌素(PACE4)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞凋亡的作用及其可能的作用机制。方法:构建pFLAG-PACE4重组表达载体并转染H9c2心肌细胞。将心肌细胞分为四组:正常对照组(无任何干预因素)、ISO组(10μmol/L...
目的:研究前体蛋白转化酶枯草溶菌素(PACE4)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞凋亡的作用及其可能的作用机制。方法:构建pFLAG-PACE4重组表达载体并转染H9c2心肌细胞。将心肌细胞分为四组:正常对照组(无任何干预因素)、ISO组(10μmol/L ISO)、ISO+pFLAG组(空载质粒pFLAG转染+10μmol/LISO)、ISO+pFLAG-PACE4组(pFLAG-PACE4重组表达质粒转染+10μmol/LISO)。采用AnnexinV-FITC/PI双染法测定心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测活性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-12、钙网蛋白、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化转录因子4(ATF4)和PERK的表达以及真核起始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,ISO组中PACE4表达水平明显降低,而转染pFLAG-PACE4质粒后,其表达水平显著增加。PACE4过表达可以显著抑制ISO诱导的细胞凋亡和caspase-3以及caspase-12的蛋白表达。ISO处理显著增加内质网应激分子钙网蛋白、GRP78和CHOP的表达,而PACE4过表达则可以抑制这些蛋白的表达。ISO诱导的PERK、eIF2α和ATF4的表达可以显著被PACE4过表达抑制。结论:PACE4过表达可以抑制ISO诱导的H9c2心肌细胞凋亡,其机制可能与PERK信号通路介导的内质网应激反应有关。
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关键词
pace4
心肌细胞
凋亡
内质网应激
原文传递
题名
PACE4组织芯片免疫组化检测方法的比较
1
作者
林云恩
龙惠东
韩秀晶
秦积龙
谭小军
机构
广州医科大学附属肿瘤医院
广州医科大学附属第一医院
出处
《现代医药卫生》
2020年第5期668-671,共4页
基金
广东省广州市卫健委医药卫生科技项目(20161A011065)
广东省卫健委医学科学技术研究基金项目(20161132121827)
文摘
目的探讨非小细胞肺癌组织偶合基本氨基酸裂解酶4(PACE4)免疫组织化学(简称免疫组化)检测方法,寻求其实验条件的规范化。方法172例非小细胞肺癌组织按照ABCAM抗体手工免疫组化的结果分为3组:A组(45例)弥漫强阳性,评分为9~12分;B组(66例)局灶阳性,评分为1~<9分;C组(61例)阴性,评分为0分。采用ABCAM和KALANG 2种PACE4抗体,石蜡切片行手工免疫组化染色技术(手工染色)和全自动免疫组化机器染色技术(全自动染色),比较2种染色方法的染色结果。结果ABCAM和KALANG 2种PACE4抗体手工染色和全自动染色在样本中着色效果均较良好。全自动染色整体检测结果与手工染色有良好的可重复性,与手工染色比较,全自动染色背景更干净,对比更清晰;且大大缩短了染色时间,节省了人力,更有利于整体科研实验工作的安排,可使免疫组化实验流程具有可重复性、流程可靠。结论ABCAM及KALANG 2种抗体的免疫组化染色效果无显著差异,整体有良好的可重复性。全自动染色背景更干净,对比更清晰,省时省力,从规范和效率角度出发,全自动免疫组化染色可以更好地解放双手,同时得到更理想的实验结果。
关键词
pace4
组织芯片
手工免疫组化染色
全自动免疫组化染色
肺肿瘤
Keywords
pace4
Tissue microarray
Manual immunohistochemical staining
Automatic immunohistochemical staining
Lung tumor
分类号
R361.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
PACE4对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制
2
作者
王安杏
梁泽明
张会军
徐楷
陈入菲
机构
宝鸡市中医医院心血管二科
出处
《现代生物医学进展》
CAS
2016年第31期6042-6046,共5页
文摘
目的:研究前体蛋白转化酶枯草溶菌素(PACE4)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞凋亡的作用及其可能的作用机制。方法:构建pFLAG-PACE4重组表达载体并转染H9c2心肌细胞。将心肌细胞分为四组:正常对照组(无任何干预因素)、ISO组(10μmol/L ISO)、ISO+pFLAG组(空载质粒pFLAG转染+10μmol/LISO)、ISO+pFLAG-PACE4组(pFLAG-PACE4重组表达质粒转染+10μmol/LISO)。采用AnnexinV-FITC/PI双染法测定心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测活性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-12、钙网蛋白、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化转录因子4(ATF4)和PERK的表达以及真核起始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,ISO组中PACE4表达水平明显降低,而转染pFLAG-PACE4质粒后,其表达水平显著增加。PACE4过表达可以显著抑制ISO诱导的细胞凋亡和caspase-3以及caspase-12的蛋白表达。ISO处理显著增加内质网应激分子钙网蛋白、GRP78和CHOP的表达,而PACE4过表达则可以抑制这些蛋白的表达。ISO诱导的PERK、eIF2α和ATF4的表达可以显著被PACE4过表达抑制。结论:PACE4过表达可以抑制ISO诱导的H9c2心肌细胞凋亡,其机制可能与PERK信号通路介导的内质网应激反应有关。
关键词
pace4
心肌细胞
凋亡
内质网应激
Keywords
pace4
Cardiomyocytes
Apoptosis
Endoplasmic reticulum stress
分类号
R-33 [医药卫生]
R54 [医药卫生—心血管疾病]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PACE4组织芯片免疫组化检测方法的比较
林云恩
龙惠东
韩秀晶
秦积龙
谭小军
《现代医药卫生》
2020
0
下载PDF
职称材料
2
PACE4对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制
王安杏
梁泽明
张会军
徐楷
陈入菲
《现代生物医学进展》
CAS
2016
0
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