1例Schuurs-Hoeijmakers综合征的基因诊断

目的探讨Schuurs-Hoeijmakers综合征(SHMS)的基因诊断方法。方法患儿因“1月内反复抽搐数次”就诊入院,抽搐表现为癫痫局灶起始继发双侧强直-阵挛发作,患儿存在特殊面容,表现为耳位低下、拱形眉毛、眼距过远、睑裂下斜、鼻尖呈球状、宽口、嘴角下垂、人中光滑。患儿头颅MRI扫描、脑脊液、心脏彩超等检查结果均无明显异常;视频脑电图示双侧顶、枕、中后颞区多灶尖波、棘波、棘慢波、慢波发放。经患儿家长同意,抽取患儿及其父母新鲜抗凝全血样本各2 mL进行全外显子组基因测序。结果患儿存在PACS1基因4号外显子区域c.607C>T(p.Arg203Trp)杂合变异,为错义突变、新生突变。依据患儿临床表现并结合基因检测结果,明确诊断为SHMS。结论SHMS临床表现为特殊面容、癫痫发作,基因检测为确诊的金标准,PACS1基因c.607C>T突变是其主要致病原因。

酵母pac1基因介导对葡萄B病毒的抗性

为明确广谱性抗病毒基因—酵母pac1基因对葡萄B病毒（Grapevine virus B,GVB）的抗性效果,通过农杆菌介导的遗传转化,将pac1基因导入西方烟37B,对转基因植株进行PCR鉴定及Southern blot分析,通过病毒摩擦接种观察症状以及实时荧光定量RT-PCR检测植株体内病毒含量,并对转基因植株抗病性进行初步鉴定。结果表明,目的基因pac1成功导入并整合至西方烟37B基因组,共获得10个转基因株系。不同株系的T1代烟草中阳性植株比例为16.7%~72.7%,表明目的基因可成功遗传到子代。接种病毒后转基因植株普遍延迟发病,但后期症状与非转基因对照相似,其中仅1个转基因株系B6具有不表现典型症状等抗性反应。接种植株病毒含量检测中,所有转基因植株均检测到病毒存在,但表现为抗病的B6株系中病毒含量显著低于非转基因对照,表明该转基因植株虽不能完全抵抗GVB侵染,但对GVB具有耐病性。

dsRNA分解酶PAC 1对4种植物病毒、3种类病毒dsRNA的降解活性检测及转pac 1基因烟草的获得

将来自粟酒裂殖酵母的pac1基因,导入原核表达载体pET-5a中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导,其表达产物能够降解4种植物病毒Cucumber mosaic virus(CMV)、Tobacco mosaic virus(TMV)、Rice black-streakeddwarf(RBSDV)和Rice dwarf virus(RDV)和3种类病毒Apple scar skin viroid(ASSVd)、Coleus blumei viroid(CBVd)和Hopstunt viroid(HSVd)的dsRNA。将pac1导入双元载体pBI121,并转入根癌农杆菌LBA4404,以烟草(品种NC89)组培苗的叶片为受体材料进行转化,经过诱导愈伤、分化、再生和筛选培养,获得了50株Kan抗性植株,收获T1种子分别播种,对这些转基因植株进行分子生物学检测。PCR、PCR-Southern和RT-PCR检测结果表明,pac1基因已整合到受体基因组中。

Schuurs-Hoeijmakers综合征产前诊断1例

目的探讨1例Schuurs-Hoeijmakers综合征(SHS)胎儿的遗传学病因,为其产前诊断提供依据。方法选取2021年3月20日因胎儿超声异常到郑州大学第一附属医院门诊进行咨询的1名孕妇及其胎儿作为研究对象,收集胎儿临床资料和超声检查结果。羊膜腔穿刺获得胎儿羊水细胞进行常规G显带染色体核型分析及低深度全基因组拷贝数变异(CNV)检测(CNV-seq),全外显子组测序(WES)筛查胎儿可疑致病基因变异,Sanger测序进行家系验证。结果胎儿在胎龄21^(+5)周超声提示颈后皱褶增厚(9.0 mm),双肾实质回声增强,腹腔积液,左侧胸腔积液,右移心。孕妇既往1次妊娠胎儿多发畸形。胎儿羊水细胞染色体核型分析和CNV-seq检测结果均未见异常。WES提示胎儿携带PACS1基因c.607C>T(p.Arg203Trp)杂合变异,Sanger测序验证提示该变异为新发变异。根据ACMG变异评级指南,c.607C>T(p.Arg203Trp)变异评级为疑似致病变异(PS2+PM2_Supporting+PP3)。结论PACS1基因c.607C>T(p.Arg203Trp)杂合变异是该SHS胎儿多发异常的遗传学病因。针对多发结构异常胎儿,CNV未发现异常情况下进行全外显子组测序能够提高胎儿遗传学病因检出率。