头穴脉冲磁针对脑梗塞患者血浆t-PA、PAI-Ⅰ活性、D-dimer含量的影响

目的 运用自制的脉冲磁针治疗仪作用于头穴 ,治疗急性脑梗塞病人并探讨其治疗疾病的机理。方法 设立脉冲磁针组 30例 ,同时设立常规针刺组、静磁针组各 30例做对照组。测定 3组治疗前后血浆中组织型纤溶酶原激活物 (t- PA)、组织型纤溶酶原激活物抑制物 (PAI- )、D-二聚体 (D- dimer)的含量。结果与结论 脉冲磁针组与常规针刺组比较无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,两组与静磁针组比较均有显著差异 (P<0 .0 1)

uPA和PAI-1基因克隆及真核表达载体的构建及鉴定

目的:克隆人卵巢上皮癌组织uPA和PAI-1基因cDNA全长,构建表达uPA和PAI-1基因的真核表达载体。方法:采用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA和PAI-1基因的cDNA全长,克隆到pGEM-TEasy Vector上,通过酶切和测序进行鉴定;酶切后与真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(-)B连接,酶切及测序再次鉴定;采用脂质体法将重组质粒DNA转染至卵巢癌上皮细胞SKOV3细胞;采用有限稀释法和G418分别加压筛选并培养SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞及对照细胞;Western blot法检测转染前后SKOV3细胞uPA和PAI-1基因的表达。结果:成功扩增出uPA和PAI-1基因的cDNA的全长,并克隆入T载体,DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3.1-uPA和pcDNA3.1-PAI-1,Western blot能检测到uPA和PAI-1基因蛋白分别在SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞中的表达。结论:成功构建了uPA和PAI-1表达基因的真核表达载体,为进一步研究uPA和PAI-1基因在卵巢癌侵袭转移中的作用提供了实验基础。

人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体FrGGI的构建、表达及特性分析

为了获得半衰期延长,特异活性提高及具有PAI—1抗性的新型t-PA溶栓剂,利用基因重组及定位突变技术成功地构建了t-PA的K1、K2区糖基化位点消除,PAI-1结合位点缺失,F与E区连接序列His44～Ser50置换为纤粘蛋白Ⅰ型F区间连接序列GluSerLysProGluAlaGluGlu的t-PA的组合突变体FrGGI,并在中国仓鼠卵巢细胞中获得了高效表达。对表达产物的生物学特性分析表明,FrGGI在大鼠血浆中的半衰期延长了15倍,特异活性提高了40％,并获得了PAI-1抗性,是一株很有希望的新型溶栓剂候选株。

急性心肌梗死患者血清同型半胱氨酸水平与内皮细胞功能、纤溶活性及炎症因子的关系

目的探讨急性心肌梗死(AM I)患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与纤溶活性,内皮细胞功能,炎症因子的关系及其临床意义。方法分别测定AM I患者(162例)及健康对照组(90例)血中Hcy水平以及纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)活性,血管性血友病因子(vWF),心肌肌钙蛋白I(cTnI),D-二聚体(DD),C反应蛋白(CRP)及血脂各项指标,用统计学方法分析Hcy与它们的关系。结果AM I组Hcy水平较对照组明显升高(P<0.01),AM I患者PAI-1活性增强,vWF及DD水平明显高于对照组(P<0.01),CRP及CTnI在AM I组呈阳性反应。多因素相关性分析结果显示Hcy与PAI-I、vWF、CRP、cTnI、DD均有良好相关性,但与血脂无关。结论Hcy是AM I独立危险因素。Hcy可能通过损伤血管内皮细胞,引起血管壁炎症反应,抑制纤溶系统,促进AM I的发生、发展。

欣舒注射液对兔血管内膜剥脱术后血小板活化及纤溶活性的影响

目的观察欣舒注射液 (XSPS)对兔血管内膜剥脱术后血浆血小板α颗粒膜蛋白 (GMP 14 0 )及组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子 (PAI 1)含量变化的影响。方法选取日本雄性大耳白兔 2 0只 ,随机分为对照组和中药组 ,用球囊导管剥脱其腹主动脉内皮。分别于术前及术后 3天、7天耳缘静脉采血测定血浆GMP 14 0 ,t PA、PAI 1的含量。结果XSPS可显著降低血浆GMP 14 0水平 ,使t PA升高、PAI 1下降 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论XSPS可明显抑制兔动脉损伤后血小板的活化 ,促进纤溶活性 ,从而抑制动脉成形术后血栓的形成 ,可能达到防治再狭窄的作用。

黄芪含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞分泌Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子的影响

目的:观察黄芪含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞分泌Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(plasminogen activator inhibitor-typeⅠ,PAI-Ⅰ)的影响。方法:20只小鼠按照随机序号法分为单纯对照组,干预对照组,小剂量观察组和大剂量观察组,对照组灌胃采用生理盐水,观察组采用黄芪含药血清灌胃。比较4组内皮细胞分泌PAI-Ⅰ的情况。结果:单纯对照组的PAI-Ⅰ含量(172.36±8.42)μg·L^(-1),干预对照组的PAI-Ⅰ含量(171.56±7.96)μg·L^(-1),小剂量观察组的PAI-Ⅰ含量(142.52±7.21)μg·L^(-1),大剂量观察组的PAI-Ⅰ含量(120.43±6.32)μg·L^(-1)。大剂量观察组与小剂量观察组的PAI-Ⅰ含量比较,差异有统计学意义(P<0.05);大剂量观察组、小剂量观察组的PAI-Ⅰ含量与单纯对照组和干预对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪含药血清能够抑制血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞分泌PAI-Ⅰ,在临床应用能够干预患者形成血栓。