PAI-3在正常成人皮肤中的表达及作用的初步研究

目的 探讨PAI 3在成人皮肤中的表达,为进一步研究PAI 3在皮肤表皮增殖、分化中的作用及机制提供基础。方法 采用免疫组织化学技术和RT PCR检测PAI 3和uPA在成人皮肤中的表达。结果 检测到PAI 3mRNA及uPAmRNA的表达,PAI 3在正常成人皮肤组织中主要位于表皮的基底层、颗粒层和棘层,在分化程度较高的表皮角质形成细胞(keratinocyte ,KC)中,其表达增强,而uPA主要位于皮肤表皮的基底层。结论 PAI 3在正常成人皮肤中有表达并与表皮KC的分化有关。

人表皮角质形成细胞中PAI-3/PCI的表达及作用

目的探讨人表皮角质形成细胞(KERATINOCYTE,KC)中,PAI-3/PCI的表达及作用。方法利用免疫细胞化学、RT-PCR方法,检测高CA2+浓度作用下,培养的人分化表皮KC及KC提取物角质壳中PAI-3的表达变化。结果高CA2+浓度下培养24H后,分化标记物K10弱阳性表达,PAI-3呈阳性表达;培养48H后,K10强阳性表达,而PAI-3的阳性表达明显增加,72H后,表达开始降低,在低CA2+浓度下阳性染色主要位于细胞核膜周围而高CA2+浓度下主要位于细胞质,同时,PAI-3存在终末分化KCS角质壳中。结论人表皮KC分化过程中,PAI-3的表达随着分化的增加而增加,PAI-3存在终末分化KCS角质壳蛋白中,表明PAI-3参与KC分化的作用。

Ca^(2+)调节人表皮角质形成细胞中PAI-3的表达

目的探讨Ca2+对人表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中PAI-3表达的调节作用。方法利用免疫细胞化学、RT-PCR方法,检测高低Ca2+浓度作用下,培养的人表皮KC中PAI-3的表达变化。结果PAI-3 mRNA及蛋白质在高低Ca2+浓度下培养的人表皮KC中均有表达,并且高Ca2+浓度培养条件下较低Ca2+浓度下明显增强。PAI-3阳性染色在低Ca2+浓度培养下主要位于核膜周围,而在高Ca2+浓度培养条件下主要位于细胞质。结论Ca2+调节人表皮KC中PAI-3的表达,PAI-3可能具有调节KC分化的作用。

TRB3调控TGF-β1/Smad3/PAI-1轴对胃癌细胞功能的影响

目的研究TRB3通过调控TGF-β1/Smad3/PAI-1轴对胃癌细胞功能的影响。方法采用Western blot法检测TRB3蛋白在胃癌细胞系(AGS、HGC-27、NCI-N87、SNU5和MKN45)和正常人胃黏膜细胞GES-1中的表达。敲低胃癌细胞AGS TRB3,采用CCK-8、荧光激活细胞分选仪(fluorescenceactivated cell sorter,FACS)、Transwell实验、划痕实验和Western blot法分别检测胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移情况和TGF-β1/Smad3/PAI-1信号通路蛋白的改变;在此基础上进行转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理,再次重复上述实验。结果与GES-1细胞比较,胃癌细胞系中TRB3蛋白表达增多。下调胃癌细胞TRB3,细胞增殖能力下降,活力降低(52%±12%,P<0.001);迁移能力下降,细胞愈合率降低(24%±6%,P<0.001);侵袭能力下降,侵袭细胞数降低(107±23,P<0.001);TGF-β1/Smad3/PAI-1通路被抑制,TGF-β1、p-SMAD3和PAI-1表达减少;细胞凋亡增多,凋亡细胞比例升高(17%±3%,P<0.001);在此基础上进行TGF-β1处理,细胞增殖能力增强,细胞活力升高(73%±10%,P<0.01);迁移能力增强,细胞愈合率升高(63%±8%,P<0.01);侵袭能力增强,侵袭细胞数升高(252±20,P<0.01);细胞凋亡减少,凋亡比例降低(12%±2%,P<0.01)。结论TRB3通过激活TGF-β1/Smad3/PAI-1信号通路促进胃癌发展。

银杏黄酮甙对糖尿病大鼠肾组织PAI-1、MMPs-3表达的影响

目的探讨银杏黄酮甙对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制。方法选择雄性SD大鼠48只,随机分为3组,每组16只,即正常对照组(A组),糖尿病组(B组),银杏黄酮甙治疗组(C组)。B、C组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制模成功后,C组给予银杏黄酮甙灌胃,10周后将大鼠宰杀,用免疫组化方法观察肾脏PAI-1、MMPs-3的表达。结果与A组相比免疫组化:PAI-1第6周时B、C组均高于A组(P<0.01,P<0.05),持续至第10周(P<0.01),但C组低于B组(P<0.01)。MMPs-3第6周时B组低于A组(P<0.05),持续至第10周(P<0.01),C组则高于A、B组(P<0.01)。结论STZ诱导的糖尿病大鼠PAI-1表达增强、MMPs-3表达下调。应用银杏黄酮甙治疗,可以使PAI-1的表达下调,MMPs-3的表达上调,对糖尿病大鼠肾脏有保护作用。

GSK3β抑制剂对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和血清PAI-1表达的影响

目的观察糖原合成酶激酶-3β(GSK3β)抑制剂Licl对糖尿病肾病(DN)大鼠的影响,从而明确GSK-3β抑制剂对DN的作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为四组:正常对照组(NC组,n=10),Licl组(n=10),DN组(n=20),DN+Licl组(n=20)。通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合长期高脂饮食,建立DN大鼠模型;通过腹腔注射GSK-3β抑制剂Licl进行药物干预。观察各组大鼠一般状态、体重、肾重/体重的变化;检测血糖、尿量、尿蛋白、血肌酐等指标;肾脏PAS染色观察各组大鼠肾脏病理改变;ELISA方法检测各组大鼠血清纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的水平,IHC方法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,进行组间比较。结果与NC相比,DN组大鼠一般状态、体重、肾重/体重、血糖、血肌酐、尿量、尿蛋白、肾脏病理均出现了DN特有的变化特征,血清PAI-1明显增高,肾组织TGF-β1的表达明显上调。DN+Licl组较DN组大鼠存活率高,尿蛋白、血清PAI-1表达显著减少,肾脏病理较DN组明显减轻,而肾组织TGF-β1表达明显增加。结论 GSK-3β抑制剂Licl能够降低DN大鼠血清PAI-1水平、蛋白尿及死亡率。DN大鼠较正常大鼠肾组织TGF-β1表达明显上调,GSK-3β抑制剂Licl能进一步增加DN大鼠肾组织TGF-β1蛋白的表达。抑制GSK-3β,对治疗DN有积极的意义。但是GSK-3β抑制剂Licl作为药物治疗DN,应考虑其效应的两面性。

抗栓酶3号对家兔血浆组织型纤溶酶原激活剂及其抑制物的影响

本文采用纤溶酶特异的发色底物分解产色法对注射不同剂量抗栓酶3号(Svate-3)的家兔血浆组织型纤溶酶原激活物(tPA)及其抑制物(PAI)的活性作了检测。结果发现给药后tPA活性增高.PAI活性降低.并与给药剂量及速度有关.血纤平板纤溶面积与tPA活性呈显著正相关(r=0.861;P<0.01),与PAI活性呈负相关(r=-0.769;P<0.01)因此认为Svate—3的溶纤作用可能与血管内皮tPA释放增加及PA I活性降低有关.

0~3岁婴幼儿家长对托育服务机构的需求偏好及支付意愿研究——基于华东地区和东北地区的数据

托育服务供需矛盾已成为我国民生领域主要矛盾之一,为廓清托育服务供需匹配的基本情况,采用选择实验法,抽取我国华东地区0~3岁婴幼儿家长2968名与东北地区婴幼儿家长2045名,对其进行参与托育服务机构的需求偏好、偏好异质性及支付意愿的现状调查。结果发现,两个地区家长的托育服务方案要素侧重不同;不同地区、不同人口学特征的家长对托育服务课程的偏好存在差异;华东地区家长最愿意为服务课程属性购买托育服务,每月可支付1654元,东北地区家长则更愿意为公办机构属性进行消费,每月可支付1867元。基于此,提出加强政府主导职能与投资力度、优化地域特色资源布局、增进保教质量的建议,以促使托育服务良性发展,平衡供需难题。

物理—化学复合解堵工艺技术在临11井的应用

在天然气勘探开发过程中的使用钻井液、压井液及暂堵剂造成裂缝系统产层堵塞,一直是困扰老井天然气生产的一大难题。综合运用物理—化学复合解堵工艺进行井下解堵是蜀南气矿一种新的技术尝试。结合临11井解堵实际,从该产层及井底堵塞物分析解堵药剂研制机理、现场应用情况、注意事项等多个方面,阐述了作者对物理—化学复合解堵工艺原理和应用的认识,对提高气井产能和老气田的开发水平有积极的指导意义。

清代北京城内的胡同与合院式住宅——对《加摹乾隆京城全图》中“六排三”与“八排十”的研究

本文选取《加摹乾隆京城全图》中的典型区域图“六排三”和“八排十”为研究对象,考察了元大都“44步网格”对清代北京城合院建筑的分化以及街坊的构成方式产生的可能影响,并指出这两个区域可看作为元代大型合院建筑向明清小型合院建筑转化的过渡。

葛根素对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨葛根素对过氧化氢诱导人血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及其机制。方法培养HUVECs并分组:正常组(不加任何干预因素);过氧化氢组(在细胞培养体系中加入终浓度为0.5mmol/L过氧化氢);葛根素25mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L组(先分别加入相应质量浓度葛根素干预30min后,再加入过氧化氢)。各组培养24h后,通过MTT法检测细胞增殖能力;检测纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性观察HUVECs功能;取培养上清液测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)的含量;采用Annexin V/PI染色后,应用流式细胞仪检测HUVECs凋亡率,并检测caspase-3表达水平与线粒体膜电位变化。结果与正常组比较,过氧化氢可明显降低HUVECs增殖活性(P<0.01),t-PA活性下降及PAI活性增加;而预防应用不同浓度葛根素能够不同程度对抗其作用,且最佳保护浓度是100mg/L。与过氧化氢组比较,葛根素能够显著降低HUVECs的MDA水平、细胞凋亡率、caspase-3阳性率及线粒体损伤率,能够显著提高HUVECs的SOD水平(P<0.05)。结论葛根素对氧化应激诱导HUVECs损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化、维持线粒体膜电位、减低caspase-3表达而抑制细胞凋亡有关。

高精度三维地震技术在排2探区的应用

准噶尔盆地排2块为勘探潜力较大的有利区带,以非构造油藏为主,二维地震测网密度大,无法精确识别描述圈闭,历经多年研究未获突破。为扩大勘探成果,进行高精度三维地震采集。采用小道距、高炮密度观测方式,提高了目的层的有效覆盖次数;采用小药量、小组合基距检波器组合,目的层主频由30Hz提高到了63Hz,有效频宽10～130Hz。研究发现了该块"类亮点"特征,配合拓频处理、多属性分析,地震资料的纵向分辨率明显提高,陆续发现16个岩性油气藏,建成年产原油能力达47×104t。

基于岩石物理相的储集层分类评价:以北部湾盆地乌石凹陷东区始新统流沙港组三段Ⅱ油组为例

目前储集层分类方法多数只是从储集层的物性特征角度进行分类,而没有从储集层的成因机制进行分类。通过利用分析化验资料、钻测井资料和测试资料,对北部湾盆地乌石凹陷东区始新统流沙港组三段Ⅱ油组(L_3Ⅱ油组)的沉积特征、成岩作用和构造特征进行分析,进而研究其对储集层物性的影响,并对储集层进行分类。结果表明:L_3Ⅱ油组主要发育扇三角洲内前缘水下分流河道、外前缘水下分流河道和席状砂3种沉积微相;成岩相主要识别出泥质杂基充填相、不稳定组分溶蚀相和强压实致密相3种成岩相;裂缝相则以无裂缝相为主,局部可观察到高角度和网状裂缝相。在此基础上通过三者的叠加对储集层的岩石物理相进行分类命名,划分出内前缘水下分流河道—泥质杂基充填相—高角度裂缝相等9种不同的岩石物理相。根据不同的岩石物理相特征,总结归纳出了Ⅰ类好储集层、Ⅱ类中等储集层和Ⅲ类差储集层共3类储集层,实现了从储集层成因机制的角度对储集层进行分类和评价。

“丁三配二四”的来历——兼论宣和牌对的形成和发展过程

北宋时期新形成的哲学思想——理学,吸收了道家以道为宇宙本体、“道生万物”的思想。在崇尚自然规律的理学背景下诞生的宣和牌,自然讲究天人合一。从而形成了交乂对(26-36)等官牌十二对,杂牌八扇的宣和牌制。到明朝中期打天九的出现,交乂对划归杂牌,出现了“12-24”夷偏队。到清朝中期推牌九的出现,“12-24”改称至尊,位置提至最高。

二烯丙三硫对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及与uPA系统关系的初探

目的:研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)系统的调节作用。方法:细胞增殖活性(MTS)比色法测定20、40、60μmol·L-1DATS处理前列腺癌PC-3细胞24、48、72h后PC-3细胞的增殖能力;细胞体外侵袭试验检测20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞侵袭能力的作用;划痕试验观察40μmol·L-1DATS处理PC-3细胞24h后PC-3细胞迁移能力;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法分别检测40μmol·L-1DATS作用PC-3细胞后的uPA、uPAR和PAI-1的mRNA及其蛋白表达水平。结果:20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞的生长均有较明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;DATS呈浓度依赖抑制细胞的浸润能力,其中40μmol·L-1与体内试验更接近;40μmol·L-1DATS明显抑制细胞的迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达无显著影响。结论:DATS抑制PC-3细胞的增殖、浸润和迁移,该效应可能与DATS显著上调PAI-1的表达有关系。

后现代大众文化的本质及其启迪意义

大众文化是后现代主义的文化实践,它对西方社会消费方式产生了较大影响,导致了消费社会中人格的异化。同时,它也对我国文化事业的发展产生了影响。正确评价大众文化,对发展我国文化事业具有重要的启迪意义。