核酸内切酶抑制剂对三尖杉酯碱诱导HL_(60)细胞凋亡的影响

目的探讨核酸内切酶在三尖杉酯碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡中的作用。方法以流式细胞仪和ＤＮＡ凝胶电泳检测ＨＬ６０细胞在核酸内切酶抑制剂及三尖杉酯碱作用下，细胞凋亡的发生。结果核酸内切酶抑制剂抑制了细胞凋亡。结论三尖杉酯碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡需要核酸内切酶参与。

血管紧张素转化酶和中性肽链内切酶的双重抑制剂

新型血管紧张素转化酶和中性肽链内切酶的双重抑制剂 ,在作用机制上较单纯ACE抑制剂有一定的优越性。它们通过抑制ACE和NEP的活性而发挥降低血压 ,增加体内ANP水平 ,促进尿钠排泄的作用。同时还具有抑制心肌肥厚 ,改善心、肾功能等作用。因此ACE和NEP双重抑制剂为高血压和心衰的治疗开辟了一条新途径。本文简要综述其药理作用机制。

脯酰肽内切酶抑制剂的研究进展

介绍了国内外对脯酰肽内切酶 (PEP)抑制剂的最新研究进展 .

木瓜蛋白酶复合剂抑制淮山酶促褐变的应用

以淮山、木瓜蛋白酶等为试验材料,研究木瓜蛋白酶复合剂对鲜切淮山的褐变防控效果,探索生物酶法在淮山鲜切加工中的应用。以多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、褐变度(BD)为考察指标,在木瓜蛋白酶、抗坏血酸、氯化钠以及柠檬酸单一抑制剂对淮山褐变控制效果研究的基础上,采用正交试验,确定复合抑制剂在淮山褐变控制中的最佳组合。结果表明:柠檬酸、抗坏血酸和木瓜蛋白酶单一抑制剂对于防止鲜切淮山的褐变具有较好的效果,而Na Cl溶液对于防止鲜切淮山的褐变效果不明显。采用柠檬酸、抗坏血酸和木瓜蛋白酶进行防褐变正交试验所筛选的最佳浓度组合为0.40%柠檬酸+0.20%木瓜蛋白酶+0.20%抗坏血酸,影响主次顺序为柠檬酸>木瓜蛋白酶>抗坏血酸。验证试验结果表明,BD值为0.194、PPO活性为0.21 U/m L、POD活性为9.2 U/m L的抑制褐变效果优于试验对照组。

ACE抑制肽生物信息及核桃蛋白虚拟酶切研究

为更加明确目标产物,简化制备流程,该文对于血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽的制备思路进行创新探索,针对收集到的691条ACE抑制肽的氨基酸组成、分子表面疏水性等分子特性规律进行归纳分析,得到ACE抑制肽的分子结构特征。采用虚拟酶切的方式分析核桃种子储藏蛋白的14种典型蛋白酶水解位点。该研究阐明了ACE抑制肽的分子结构特点,并探究了分子结构特性与功能活性之间的关系。

血管紧张素转换酶抑制剂等位基因缺失与支气管肺发育不良的危险性和严重程度相关

Objective: To explore whether the deletion (D) allele of angiotensin-converting enzyme (ACE) is associated with the risk or severity of bronchopulmonary dysplasia (BPD) among very low birth weight (BW) infants. Study design: Infants with a BW ≤1250 g were prospectively recruited. The D and I (insertion) alleles of ACE were determined using a polymerase chain reaction followed by restriction fragment length polymorphism analysis. Results: Infants with DDDI genotype of ACE had a (mean ±SD) birth weight (938 ±204 g vs 925 ±196 g) and gestational age (28 ±3 weeks vs 28 ±2 weeks), similar to infants with II genotype of ACE (P > .05). Infants with DDDI genotype of ACE were more likely to have BPD than infants with II genotype (47%vs 22%, P = .025). Among infants with BPD, ACE DDDI genotype was more common among infants with moderate or severe BPD compared with infants with mild BPD (74%vs 26%, P = .012). The number of D alleles of ACE correlated directly and positively with the severity of BPD (R = 0.23, P = .045). Conclusion: The D allele of ACE is associated with an increased risk and severity of BPD among preterm infants.

应用酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌患者胸腔积液表皮生长因子受体基因突变

目的探讨酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液表皮生长因子受体基因(EGFR)外显子19缺失和外显子21 L858R突变的临床意义。方法采用EGFR基因突变酶切富集及非酶切富集PCR法对30例NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21 L858R突变进行分析。结果30例NSCLC患者中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因外显子19缺失10例(33.3%)和外显子21 L858R突变5例(1.7%),非酶切富集PCR法则仅能分别检出6例(20.0%)和1例(3.3%);两种方法检出率差异有统计学意义(P=0.032)。在接受吉非替尼治疗的4例患者中,2例检出EGFR基因突变患者治疗后肿瘤均部分缓解。结论酶切富集PCR法可以高效、经济、准确地检测NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因突变,可能成为临床NSCLC患者选择EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的预测方法。

鲜切莲藕酶褐变的控制方法

通过单元抑制剂和多元复合抑制剂对鲜切莲藕多酚氧化酶和褐变度的影响研究表明:单元抑制剂L 半胱氨酸、抗坏血酸和柠檬酸均能降低PPO活性和抑制酶褐变;多元复合抑制剂0 3%AA+0 1%CA+0 4%L Cys也能有效控制鲜切莲藕的酶褐变,且多元复合抑制剂的作用比单元抑制剂效果更佳。

鲜切红薯酶促褐变影响因素研究

以鲜切红薯为材料,通过测定一定条件下其多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)与邻苯二酚反应产物的吸光度值,研究pH值、温度、反应时间以及肉桂酸、L-半胱氨酸、柠檬酸、抗坏血酸4种抑制剂对红薯PPO活性的影响.结果表明,在波长为410 nm的测量条件下,以0.01 mol/L的邻苯二酚为底物测得红薯PPO反应产物吸光值分别在pH值为6.5、温度为10℃和反应时间为5 min时最高,相对活性最强.4种抑制剂中,只有抗坏血酸对红薯多酚氧化酶的活性有显著抑制效果,且0.1%抗坏血酸的抑制效果最佳.研究为鲜切红薯贮藏加工提供了有效的保鲜方法,有利于提高红薯的食用品质及商品价值.

基于人皮瓣核酸内切酶抗癌策略的研究进展

人皮瓣内切酶1(human flap endonuclease1,FEN1)作为一种结构特异型的5′-核酸酶,在DNA复制和修复系统中起着重要的作用.FEN1在多种癌细胞中高表达,与癌症的发生和发展密切相关.癌细胞中某些DNA修复元素的上调是对放化疗策略产生抵抗和耐药的重要原因之一,是癌症治疗的瓶颈.近年来,FEN1的作用机制被逐渐揭示,其在抗肿瘤策略开发中的意义也逐步受到重视.本文综述了FEN1的生物学功能和作用机制以及FEN1在癌症中的作用,从合成致死角度探索FEN1抑制剂抗癌的可能以及FEN1抑制剂的研究进展.

流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选模型的建立

目的:建立适于高通量筛选的流感病毒核酸内切酶(PAN)抑制剂筛选模型。方法:在大肠杆菌中诱导表达质粒,经蛋白纯化和浓缩,得到目的蛋白PAN。提取噬菌体M13K07的单链环状DNA为底物,应用荧光定量方法建立PAN抑制剂高通量筛选体系,并对应用虚拟筛选技术挑选的100个样品进行PAN抑制活性筛选。结果:反应体系在底物质量浓度0.2μg.mL-1,pH 9.0,Mn2+浓度1 mmol.L-1,37℃温孵60 min的条件下酶活性最佳。此时Z'因子为0.77,可用于高通量筛选。筛选结果发现7个样品对PAN具有抑制活性。结论:本研究建立的流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选体系可用于PAN抑制剂的筛选。

鲜切蘑菇防褐变剂的研究

新鲜双孢蘑菇中的酪氨酸酶大多以非活性形式存在,随着贮藏期的延长、新鲜度的下降,其活性呈逐渐上升趋势,且其活性可被十二烷基硫酸钠(SDS)激活,被适宜浓度的柠檬酸、抗坏血酸、乙醇、次氯酸钠以及过氧化氢等抑制。由于酪氨酸酶的活性与鲜切蘑菇贮藏期间的褐变有着非常密切的关系,因此将酪氨酸酶抑制剂用于鲜切蘑菇的保鲜,并对鲜切蘑菇贮藏期间的褐变情况进行测定,试图确定最佳的鲜切蘑菇褐变抑制剂。结果表明,5 mmoL/L的抗坏血酸、柠檬酸、0.1%过氧化氢、乙醇和次氯酸钠均具有一定的防止褐变发生的效果,其中以2.5 mmoL/L的抗坏血酸和2.5 mmoL/L的柠檬酸的复合液以及5 mmoL/L的抗坏血酸溶液处理效果较好。

鲜切山药片生产工艺技术的研究

新鲜山药就其鲜切生产中的切分,烫漂和护色等工艺过程的参数进行了研究。结果表明适宜鲜切山药片生产的工艺参数为:切片厚度5～6mm左右为适宜,烫漂70℃/5min为优,筛选的0.15%Zn(Ac)2+0.1%NaHSO3+1.5%NaCl+1.0%CaCl2褐变抑制溶液在抑制褐变方面有显著效果,处理时间以30min为宜,在以上条件下生产的鲜切山药片贮藏在4℃下货架寿命可达6d以上。

切应力作用下联合培养的血管平滑肌细胞对内皮细胞分泌t-PA和PAI-1的影响

目的 探讨切应力作用下联合培养的血管平滑肌细胞对内皮细胞分泌ｔ－ＰＡ和 ＰＡＩ－１的影响。方法 应用发色底物法研究 ４０ｄｙｎ／ｃｍ２切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞分泌 ｔ－ＰＡ和 ＰＡＩ－ｌ的量的变化，以静态条件下单独培养的内皮细胞和联合培养的内皮细胞为两对照组。结果 静态条件下联合培养的内皮细胞分泌ｔ－ＰＡ的量较单独培养的内皮细胞分泌的量显著增多．同期ＰＡＩ－ｌ的分泌量减少。切应力作用下联合培养的内皮细胞ｔ－ＰＡ的分泌量进一步增多，ＰＡＩ－ｌ的分泌量在整个切应力作用过程中没有显著的变化。结论 切应力作用下，与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的抗血栓能力增强。

不同酶抑制剂对控制鲜切山药褐变的研究

为了延缓鲜切山药的褐变,采用不同酶抑制剂对其进行处理,研究贮藏期间山药褐变情况。将鲜切山药用不同浓度谷胱甘肽、半胱氨酸和亚硫酸钠3种酶抑制剂浸泡,贮藏期间测定山药理化指标及营养成分。结果表明, 3种酶抑制剂可显著降低鲜切山药褐变度、总酚的损失(p<0.05),并在一定程度上降低了多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性。其中0.5 mmol/L谷胱甘肽、0.1 mmol/L半胱氨酸以及0.06%亚硫酸钠处理的鲜切山药效果较好,3种酶抑制剂相比, 0.5 mmol/L谷胱甘肽效果最好,贮藏5 d后,褐变度为2.29、总酚含量为0.224 mg/g、多酚氧化酶(PPO)活性为0.219 U/(min·g)、过氧化氢酶(POD)活性为47.81 U/(min·g),能有效延缓鲜切山药褐变程度,且褐变度与总酚、PPO和POD具有较强的相关性。因此, 3种酶抑制剂中0.5 mmol/L谷胱甘肽能最大程度的控制鲜切山药褐变,延长其贮藏期。

抑制肾素-血管紧张肽系统药物研究

肾素-血管紧张肽系统(RAS)是药物治疗心血管系统疾病的关键作用靶点。目前的主要药物是血管紧张肽转化酶抑制剂(ACEI)和血管紧张肽Ⅰ受体拮抗剂(ARBs),因此被认为是作用于RAS治疗心血管疾病的经典药物,但是还有许多能够通过其他途径而产生对RAS的抑制作用。本文综述了目前发现的一些其他途径以及和经典途径的联系以及阻断它们产生的可能效应,包括ACEI抑制剂、ARBs、肾素抑制剂、糜蛋白酶抑制剂、血管紧张肽转化酶2、中性肽链内切酶抑制剂、醛固酮抑制剂以及针对RAS的基因治疗和免疫治疗。

塞来昔布治疗老年前列腺患者电切术后压力性尿失禁的疗效

目的探究塞来昔布对老年前列腺电切术后患者压力性尿失禁(SUI)的疗效及安全性。方法回顾性分析2017年1月至2021年1月武汉市第八医院诊治的老年前列腺电切术后出现SUI的108例患者的临床资料作为研究对象,其中给予常规行为治疗等非手术治疗方式的51例患者纳入对照组,基于常规行为治疗等非手术治疗行塞来昔布药物治疗的57例患者纳入研究组;检测比较两组国际前列腺症状评分表(IPSS)、压力性尿失禁用尿失禁问卷表简表(ICI-Q-SF)、美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状评分指数量表(NIH-CPSI)以及尿失禁情况。结果治疗后,两组IPSS、ICI-Q-SF评分相较于治疗前均有所降低,且研究组患者IPSS、ICI-Q-SF评分明显更低(P<0.05);两组患者中SUI症状持续1周、持续2个月以上患者占比比较,差异无统计学意义(P>0.05),但研究组患者症状持续2周、持续3周、持续1个月及以上患者占比明显低于对照组(P<0.05);治疗后,两组NIH-CPSI各维度评分均有降低,且研究组疼痛维度、排尿维度、生活质量维度评分低于对照组(P<0.05)。研究组患者1h尿垫试验明显低于对照组(P<0.05)。结论塞来昔布应用于前列腺电切术后SUI的老年患者治疗中,疗效显著且相对安全可靠,具有较高临床应用价值。

Caspase-3:治疗神经退行性疾病的新靶点

Caspase 3是caspases家族 (一类天冬氨酸特异性酶切半胱氨酸蛋白酶 )中的成员 ,是哺乳动物细胞凋亡的关键蛋白酶 .随着研究的深入 ,发现caspase 3在神经退行性疾病的病理过程中起着很重要的角色 .Caspase 3在这些疾病的病理过程中 ,不仅仅是起着凋亡的效应器作用 ,还能直接与老年性痴呆症、帕金森氏症、亨廷顿舞蹈病、脊椎小脑失调等疾病的致病蛋白质分子相互作用 ,参与致病机制 .因此 ,caspase 3是治疗神经退行性疾病的新靶点 ,寻找caspase

APE1基因沉默增强骨肉瘤U2-OS细胞硼替佐米治疗敏感性的实验研究

目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)基因沉默对蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,PS-341)抑制骨肉瘤U2-OS细胞增殖作用的影响及其生物学机制方法:将APE1特异性shRNA的重组质粒,稳定转染人骨肉瘤U2-OS细胞,采用聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后U2-OS细胞中APE1的表达,采用四甲基偶氮唑盐法观察PS-341和APE1-siRNA对人骨肉瘤U2-OS细胞生长的抑制作用,采用免疫印迹法检测PS-341和APE1-siRNA对U2-OS细胞中APE1和胞核NF-λB的表达的影响。结果:细胞稳定转染APE1-siRNA重组质粒后,APE1mRNA和蛋白表达分别下降约46.1%和62.6%,MTT法检测U2-OS细胞增殖受到抑制。转染前后U2-OS细胞PS-341的IC50值分别为371.54 nmoL/L与109.64 nmoL/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示PS-341和APE1-siRNA均抑制U2-OS细胞胞核中NF-λB的表达,两者联合应用抑制效果更明显。结论:APE1-shRNA质粒转染骨肉瘤U2-OS细胞后,肿瘤细胞的增殖率降低,对PS-341抑制U2-OS细胞的增殖具有协同作用。