庞氏安胎止血汤通过调控NLRP3炎症小体改善热证自然流产的作用机制

目的研究庞氏安胎止血汤通过调控NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体改善热证自然流产的作用机制。方法采用分子对接技术预测庞氏安胎止血汤中13种主要活性成分与NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白质(ASC)、胱天蛋白酶1前体(pro-caspase-1)的结合活性。将60只孕1 d大鼠随机分为正常组、模型组、地屈孕酮组(0.002 g/kg)和庞氏安胎止血汤低、中、高剂量组(11.025、22.05、44.10 g/kg),每组10只。各组大鼠灌胃蒸馏水/相应药液,每天1次,连续12 d。除正常组外,其余各组大鼠采用温阳中药和米非司酮诱导热证自然流产模型。末次给药24 h后,检测大鼠血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)水平;计算流产率及子宫系数;观察大鼠妊娠子宫病理形态;检测妊娠子宫中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达水平。结果分子对接结果显示,庞氏安胎止血汤13种主要活性成分与NLRP3、ASC、pro-caspase-1蛋白的结合能均小于-5 kJ/mol。动物实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠子宫系数和血清中IL-4、IL-6、IL-10水平均显著降低(P<0.05),流产率和血清中T3、T4、IL-2、IFN-γ水平以及妊娠子宫中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),妊娠子宫内膜存在流产病变;与模型组比较,庞氏安胎止血汤各剂量组大鼠上述大部分定量指标均显著逆转(P<0.05),妊娠子宫内膜流产病变均有不同程度改善。结论庞氏安胎止血汤可能通过调节NLRP3炎症小体形成,下调IFN-γ、IL-2等促炎因子,上调IL-4、IL-6、IL-10等抑炎因子,从而影响母胎之间的免疫平衡,进而发挥改善热证自然流产的作用。

庞氏安胎止血汤对热证自然流产大鼠T细胞亚群表达干预的研究

目的初步探讨庞氏安胎止血汤对热证自然流产模型大鼠血清CD4+、CD8+的表达干预及庞氏安胎止血汤的安胎机制。方法将妊娠SD大鼠随机分为模型组、西药组(地屈孕酮组)、庞氏安胎止血汤高剂量组、庞氏安胎止血汤中剂量组、庞氏安胎汤止血低剂量组和正常组,用附子、干姜、肉桂和米非司酮建立热证自然流产动物模型,末次给药24 h后,腹主动脉取血并分离血清;剖视子宫观察着床数和流产率;酶联免疫法检测大鼠血清CD4+、CD8+表达。结果模型组大鼠流产率、血清CD4+明显升高、CD8+水平显著降低;经治疗后,中药低剂量组、中药中剂量组和西药组大鼠流产率显著降低(P<0.01),中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量和西药组血清CD4+明显降低,CD8+水平显著升高。结论庞氏安胎止血汤可能通过降低热证自然流产大鼠血清中T淋巴细胞亚群CD4+,升高CD8+,使CD4+/CD8+的平衡向CD8+方向转移,发挥安胎作用。

庞氏安胎止血汤治疗先兆流产血热证的效果分析

目的 先兆流产血热证患者采取庞氏安胎止血汤治疗,分析该方法的治疗效果。方法 80例先兆流产血热证患者为本研究对象,均取自于医院2020年2月—2021年2月。使用随机抽签方法均分为试验组、对照组,其中对照组采取常规西药治疗(40例),试验组在上述基础上施行庞氏安胎止血汤治疗(40例)。以治疗有效率、中医症候积分、血清性激素指标、血清学指标、妊娠结局评价两组治疗效果。结果 试验组治疗有效率为95.00%,对照组治疗有效率为70.00%。治疗有效率比较发现,试验组相比对照组较高(P<0.05)。中医证候积分比较发现,两组治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后试验组相比较对照组较低(P<0.05)。血清性激素指标比较发现,两组治疗前比较差异较小(P>0.05)。治疗后试验组相比较对照组较高(P<0.05)。血清学指标比较发现,两组治疗前比较差异较小(P>0.05)。治疗后试验组IL-10相比较对照组较高(P<0.05),IFN-γ较低(P<0.05)。妊娠结局比较发现,试验组相比较对照组较低(P<0.05)。结论 先兆流产血热证患者采取庞氏安胎止血汤治疗可获得显著的治疗效果,可对患者的症状起到显著的改善效果,能够对其血清性激素指标、血清学指标予以改善,减少妊娠不良结局发生。

庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱建立及7种成分含量测定

目的:建立庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱,并对7种成分进行含量测定,为庞氏安胎止血标准汤剂的质量控制和后续研究提供依据。方法:采用YMC-Triart C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,检测波长为230 nm,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》(2012年版)对10批标准汤剂进行相似度评价,并对其进行含量测定。结果:建立了庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱,相似度均大于0.97,共标定23个共有峰,指认13个共有峰,10批样品中绿原酸、异阿魏酸、甘草苷、菊苣酸、迷迭香酸、黄芩苷、木犀草素的质量分数分别为1.56~3.51 mg·g^(-1),3.43~5.28 mg·g^(-1),3.42~5.08 mg·g^(-1),0.53~0.62 mg·g^(-1),0.80~1.34 mg·g^(-1),3.51~6.24 mg·g^(-1),0.09~0.14 mg·g^(-1),方法学考察结果良好。结论:建立的庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱结合多成分含量测定分析方法简便易行、稳定可靠、重现性良好,可用于庞氏安胎止血汤的质量评价。

庞氏安胎止血汤通过调控p38 MAPK信号通路干预热证自然流产大鼠蜕膜组织Th1/Th2平衡的机制

目的基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路探讨庞氏安胎止血汤的保胎作用及对蜕膜组织辅助性T细胞(Th)1/Th2平衡的影响机制研究。方法采用灌胃附子、干姜、肉桂水煎剂方式制备热证自然流产大鼠模型。将模型大鼠随机分为模型组、阿司匹林组(5.25 mg·kg^(-1))、地屈孕酮组(3.02 mg·kg^(-1))和庞氏安胎止血汤低、中、高剂量组(11、22、44 g·kg^(-1)),每组10只,另取10只作为正常组。各组大鼠依据组别给予相应药物干预,1次/d,连续干预12 d,末次给药24 h后,腹主动脉取血,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测β-绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕激素(P)、雌二醇(E2)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平;取大鼠子宫及蜕膜组织,测定流产数和流产率;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蜕膜组织中GATA3、T-bet、p38 MAPK及其磷酸化水平。结果与正常组比较,模型组大鼠活胎数和血清β-HCG、P、E2、IL-4及蜕膜组织GATA3蛋白水平显著降低(P<0.01),流产数、流产率、血清IFN-γ及脱模组织p-p38 MAPK、T-bet蛋白水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,庞氏安胎止血汤中剂量组大鼠活胎数和血清β-HCG、P、E2、IL-4及蜕膜组织GATA3蛋白水平显著升高(P<0.01),流产数、流产率、血清IFN-γ及脱模组织p-p38 MAPK、T-bet蛋白水平显著降低(P<0.01);与阿司匹林组比较,地屈孕酮组和庞氏安胎止血汤中、高剂量组大鼠血清P、E2、IL-4水平显著上高(P<0.01),庞氏安胎止血汤中剂量组大鼠活胎数显著升高(P<0.01),地屈孕酮组大鼠血清β-HCG、IFN-γ水平显著降低(P<0.01),庞氏安胎止血汤中剂量组大鼠流产数、流产率、血清IFN-γ及蜕膜组织T-bet、GATA3水平明显降低(P<0.05);与庞氏安胎止血汤中剂量组比较,庞氏安胎止血汤低、高剂量组和地屈孕酮组大鼠流产数及流产率明显升高(P<0.05),庞氏安胎止血汤高剂量组和地屈孕酮大鼠活胎数显著降低(P<0.01),庞氏安胎止血汤低剂量组大鼠血清IFN-γ、蜕膜组织p-p38 MAPK、T-bet蛋白水平明显升高(P<0.05),庞氏安胎止血汤高剂量组大鼠蜕膜组织p-p38 MAPK、T-bet蛋白水平明显升高(P<0.05),庞氏安胎止血汤低剂量组、地屈孕酮组和阿司匹林组大鼠血清β-HCG、P、E2水平显著降低(P<0.01),庞氏安胎止血汤低、高剂量组和地屈孕酮组大鼠血清IL-4和蜕膜组织GATA3蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论庞氏安胎止血汤通过调控p38 MAPK信号通路,调节Th1/Th2平衡,从而实现保胎作用。