丹参多酚酸对PAP小鼠大脑海马组织内质网应激通路的影响

目的探讨丹参多酚酸对PAP小鼠脑海马组织内质网应激(ERS)通路的影响.方法选择PAP双转基因雄性小鼠20只,按随机数字表法分为PAP小鼠模型组和丹参多酚酸给药组,每组10只;另选择SPF级C57BL/6J雄性小鼠10只作为正常对照组.丹参多酚酸给药组经尾静脉注射丹参多酚酸0.9%生理盐水溶液(400 g/L),剂量21 mg·kg^-1·d^-1;PAP小鼠模型组和正常对照组给予等量生理盐水,3组均持续给药4周.在第4周末进行Morris水迷宫实验,观察各组小鼠逃避潜伏期、第三象限停留时间(RTQ)、入水朝向角度和跨越平台次数的变化;并检测各组小鼠大脑海马组织淀粉样前体蛋白(APP)阳性细胞、双链RNA样内质网激酶(PERK)-真核起始因子2α-增强子结合同源蛋白(PERK-eIF2α-CHOP)通路相关蛋白的表达水平.结果PAP小鼠模型组第1~5天逃避潜伏期均较正常对照组明显延长,第5天时有下降趋势,但仍明显高于正常对照组(s:58.41±2.36比28.6±10.15);丹参多酚酸给药组各时间点逃避潜伏期均较PAP小鼠模型组明显缩短,第5天时达到最低水平(s:31.97±8.36比58.41±2.36).PAP小鼠模型组RTQ、跨越平台次数均较正常对照组明显降低〔RTQ(s):8.27±2.95比15.97±7.33,跨越平台次数(次/90 s):0.70±0.47比2.70±0.48〕,而入水朝向角度较正常对照组明显增大〔(47.94±4.68)°比(32.66±2.55)°,P<0.05〕.丹参多酚酸给药组RTQ、跨越平台次数均较PAP小鼠模型组明显增加〔RTQ(s):13.57±1.86比8.27±2.95,跨越平台次数(次/90 s):1.60±0.97比0.70±0.47〕,而入水朝向角度较PAP小鼠模型组明显减小〔(35.46±6.79)°比(47.94±4.68)°,P<0.05).PAP小鼠模型组APP阳性表达率和CHOP、p-eIF2α蛋白表达均较正常对照组明显增多〔APP阳性表达率:(60.44±6.19)%比(21.05±5.87)%,CHOP蛋白表达(灰度值):3.09±0.07比1.46±0.09,p-eIF2α蛋白表达(灰度值):0.98±0.09比0.47±0.06,均P<0.01〕,PERK、p-PERK蛋白表达均较正常对照组减少〔PERK蛋白表达(灰度值):0.42±0.06比0.82±0.11,p-PERK蛋白表达(灰度值):0.98±0.09比0.64±0.10,均P<0.01〕;丹参多酚酸给药组APP阳性表达率和CHOP、p-eIF2α蛋白表达水平均较PAP小鼠模型组明显著减少〔APP阳性表达率:(33.09±10.33)%比(60.44±6.19)%,CHOP蛋白表达(灰度值):1.57±0.12比3.09±0.07,p-eIF2α蛋白表达(灰度值):0.80±0.07比0.98±0.09,均P<0.01〕,PERK、p-PERK蛋白表达较PAP小鼠模型组明显增加〔PERK蛋白表达(灰度值):0.89±0.12比0.42±0.06,p-PERK蛋白表达(灰度值):0.78±0.08比0.98±0.09,均P<0.01〕.结论丹参多酚酸可能通过PERK-eIF2α-CHOP通路减少PAP双转基因小鼠海马组织APP的蓄积,从而改善PAP双转基因小鼠的学习能力,延缓脑损伤的进程.

醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠NEP和BACE1 mRNA表达的影响

目的:探讨中药醒脑液(XNY)对PAP双转基因痴呆小鼠大脑组织中中性内肽酶(NEP)和β分泌酶(BACE1)mRNA表达的影响。方法:采用实时荧光定量PCR技术分别观测正常对照组、模型组、西药对照组、XNY高剂量组、XNY中剂量组和XNY低剂量组小鼠大脑组织中NEP和BACE1 mRNA的表达。结果:与模型组相比,XNY高剂量组脑内NEP mRNA含量表达上调(P<0.05);XNY高、中剂量组BACE1 mRNA含量表达下降(P<0.01)。结论:醒脑液对双转基因痴呆小鼠大脑组织中NEP和BACE1 mRNA表达有较好的调控作用,说明醒脑液对防治老年性痴呆能起到良好效果。

醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠脑内中性内肽酶基因和蛋白表达的影响

目的:探讨中药醒脑液(XNY)对PAP双转基因痴呆小鼠大脑组织中中性内肽酶(NEP)基因和蛋白表达的影响。方法:分别采用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术观测正常对照组、模型组、西药对照组、XNY高剂量组、XNY中剂量组和XNY低剂量组小鼠大脑组织中NEPmRNA和NEP蛋白的表达。结果:与模型组相比,XNY高剂量组脑内NEP mRNA含量表达上调(P<0.01);XNY高剂量组和中剂量组NEP蛋白含量表达增加(P<0.01)。结论:醒脑液对双转基因痴呆小鼠大脑组织中NEP mRNA和NEP蛋白表达有较好的调控作用,说明醒脑液对防治老年性痴呆能起到良好效果。

醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠行为学及脑内老年斑的早期干预作用

目的:探讨中药醒脑液(XNY)对PAP双转基因痴呆小鼠行为学及大脑组织中老年斑(SP)的干预作用。方法:采用Morris水迷宫测定小鼠空间学习记忆能力,免疫组织化学方法分别观测正常对照组、模型组、西药对照组、XNY高剂量组、XNY中剂量组和XNY低剂量组小鼠大脑组织中老年斑的表达。结果:与正常组相比,模型组小鼠学习记忆能力均有所下降,脑组织中的老年斑表达增加;与模型组相比,XNY高剂量组脑内老年斑的表达下调(P<0.05)。结论:醒脑液对双转基因痴呆小鼠大脑组织中老年斑的表达有较好的调控作用,进一步改善阿尔茨海默病模型的小鼠记忆学习能力,说明醒脑液对防治老年性痴呆能起到良好效果。