结节性红斑与硬结性红斑皮损原位抗原研究

采用PAP法对结节性红斑、慢性游走性给节性红斑、硬红斑及结节性血管炎4种疾病共35例的原位抗原进行检测。结果在血管的检出例数分别为11／12，8／8，8／8，6／7；在胶原纤维表面的检出例数分别为11／12，7／8，8／8，6／7；所有病例表皮角朊细胞内均能检出；在血管腔内与血管腔外的红细胞表面的检出例数除慢性游走性结节性红斑为5／8外，其余病种均能检出。提示结节性红斑等4种疾病均为存在免疫复合物疾病，具有共同的免疫病理基础，而且还提示免疫复合物在机体内处于动态清除过程之中。除红细胞转运降解以外还通过表皮以经皮排异形式从皮肤排出体外。

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究夏立群，王庆堂（同济医科大学组织胚胎学教研室武汉４３００３０）关键词乌鳢，内分泌细胞，免疫组织化学ＰＡＰ方法ＩＭＭＵＮＯＣＹＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＥＮＤＯＣＲＩＮＥＣＥＬＬＳＩＮＴＨＥＧＡＳＴＲＯ...

大白鼠垂体促性腺激素细胞分泌周期中颗粒和液泡结构的周期性变化

本文用光学和电子显微镜观察大白鼠垂体促性腺激素细胞分泌周期中细胞质内颗粒和液泡结构的变化。根据其变化特征,将垂体促性腺激素细胞区分为颗粒A型和B型、液泡A型和B型四类。随着促性腺激素的贮存和释放过程,这四种类型的细胞发生周期性变化。在激素贮存的早期阶段,细胞形态的变化主要与颗粒的变化有关,而在激素大量贮存和大量释放时,其相应的形态学变化则是细胞质内的液泡化和空泡化。因此作者认为:促性腺激素的贮存和释放与细胞质内颗粒及液泡结构的变化有着极密切的关系。

乙型肝炎病毒体外感染正常人骨髓中3种细胞的动态研究

用乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）体外感染正常人骨髓中的淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞。从６ｈ至３周的６个不同时期的动态观察发现：细胞内乙型肝炎核心抗原（ＨＢｃＡｇ）阳性率表明３种细胞均受到不同程度的感染，但以中性粒细胞和单核细胞最为敏感，其次为淋巴细胞，３者之间有统计学差异（Ｐ＜０．０５或０．０１），并发现病毒感染程度随细胞增殖和时间的延长而增强，无吞噬能力的淋巴细胞亦是如此。透射电镜观察感染后的中性粒细胞，６ｈ就出现线粒体和内质网的空泡变和髓样变性，２４ｈ细胞膜破裂，７２ｈ细胞表面重度破坏。表明病毒感染细胞有２种途径，其一为病毒主动侵犯细胞，其二为细胞吞噬病毒。在不同时期培养的上清液中均可较长时期检测到乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）和乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）。

对比传统巴氏涂片法与液基细胞学法在宫颈癌筛查中的作用

目的:对比分析传统巴氏涂片法与液基细胞学法在宫颈癌临床筛查中的应用效果。方法:选择2016年4月至2017年4月在西安医学院第二附属医院接受宫颈癌临床筛查的女性2000例,按照就诊的顺序进行随机分组,每组100例,分别采集标本,接受传统巴氏涂片法筛查以及液基细胞学法筛查,并将检查结果与阴道镜活检检查结果进行比较。统计不同检测方法的制片满意度和阳性检出率,以及相应的筛查结果。结果:对不同检测方法下的制片情况进行评估,可得传统巴氏涂片法的制片满意度为78. 70%,显著低于液基细胞学法的99. 40%,差异具有统计学意义(P <0. 05)。统计不同检测方法的阳性率,存在组间统计学差异,传统巴氏涂片法的阳性检出率为1. 10%,显著低于液基细胞学法的7. 10%,差异具有统计学意义(P <0. 05)。对不同检测方法的检测结果与病理结果进行比较,并进行组间统计学比较,可得传统巴氏涂片法的不同病理学筛查结果符合率均显著低于液基细胞学法,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:与传统巴氏涂片法进行比较,在宫颈癌筛查中应用液基细胞学法效果确切,可以提高制片满意度以及阳性检出率,并获得更好的病理学筛查效果,在宫颈癌的临床筛查中具有重要作用。

小鼠谷胱甘肽过氧化物酶分布的免疫组化研究

本文应用免疫组化PAP法对GSH-Px在小鼠各组织的分布进行观察,发现GSH-Px广泛存在于肝、肾、肺、胰、结肠、心肌、骨骼肌、脑、肾上腺、甲状腺以及睾丸等组织中,在肝脏小叶周边带肝细胞阳性反应明显强于中央带,肾脏酶阳性反应主要见于肾皮质近曲小管上皮细胞,肾上腺髓质嗜铬细胞、胰岛β细胞、甲状腺间质C细胞以及睾丸Leydig细胞均呈中度至强阳性反应。并就该酶细胞内的定位与其代谢功能的关系进行了讨论。

脑啡肽神经纤维在猫颞下颌关节内的分布——免疫组织化学PAP法

应用免疫组织化学ＰＡＰ法对亮氨酸－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）神经纤维在猫颞下颌关节（ＴＭＪ）内的分布作了研究。结果表明：ＴＭＪ囊及关节盘前后附着内均见Ｌ－ＥＮＫ阳性纤维分布，并以细枝丛状分布多见；关节囊滑膜下层的阳性纤维分布密度最高，并可见丛状结构突向滑膜层；关节囊外侧壁及关节盘前后附着内的阳性纤维分布密度相似，关节盘中部未见阳性纤维分布。

子宫颈癌放射治疗后宫颈阴道细胞学检查及其价值

目的 :了解子宫颈癌放射治疗后宫颈 阴道涂片的细胞学特点及临床价值。方法 :采用TBS诊断方法 ,观察 30 0例宫颈癌放疗后涂片的阴道细胞学的改变情况 ,并评价该检查结果与病理组织学检查结果的符合情况及其临床意义。结果 :30 0例涂片中 ,发现异常涂片 12 0例 ,占 4 0 % ;12例涂片后行病理组织学检查患者中 ,TBS诊断与病理组织学检查结果定性符合者 11例 ,符合率 91 6 7%。结论 :放疗后定期行宫颈 阴道涂片细胞学检查 ,有助于临床医师观察疗效 。

[HSO_3-b-N(CH_3)_3]HSO_4/SiO_2催化剂上苯基羟胺Bamberg重排制备对氨基苯酚

在硝基苯加氢合成对氨基苯酚(PAP)过程的Bamberg重排反应中,采用酸性离子液体来替代硫酸催化剂。设计并合成了一种新型的含有—SO3H基团的季铵型酸性离子液体N,N,N-三甲基-N-磺丁基硫酸氢铵([HSO3-b-N(CH3)3]HSO4),并与另外3种离子液体1-磺丁基-3-甲基咪唑硫酸氢盐([HSO3-bmim]HSO4)、N,N-二乙基硫酸氢铵([(CH3CH2)2NH2]HSO4)及N,N,N-三甲基硫酸氢铵([(CH3)3NH]HSO4)的酸性质进行了对比,考察了这些离子液体在苯基羟胺Bamberg重排制备对氨基苯酚反应中的催化性能。为了减少离子液体的用量和便于回收催化剂,采用溶胶-凝胶法制备出负载型离子液体催化剂[HSO3-b-N(CH3)3]HSO4/SiO2,并对其催化性能进行了研究。结果表明,该催化剂在苯基羟胺Bamberg重排制备对氨基苯酚反应中具有较高的催化活性,在离子液体与苯基羟胺摩尔比为0.5、反应温度85℃、反应时间30 min的条件下,苯基羟胺转化率100%,对氨基苯酚选择性60.5%。

肾组织中淋巴细胞亚群与IgA肾病临床症侯的联系

本文应用单克隆抗体和PAP四层法观察了20例原发性IgA肾病患者肾活检组织中CD_4^+、CD_8^+和B 细胞的分布。其中10例临床表现为大量蛋白尿(NP 组),另10例为反复发作性肉眼血尿(GH组)。结果发现IgA 肾病患者肾组织中CD_4^+、CD_8^+和B 细胞主要分布在间质中,肾小球内很少有淋巴细胞。NP 组和GH 组间质中CD_4、CD_8^+和B 细胞均明显高于正常对照组,其中NP 组增高更为明显。三组RT 值之间无显著差异。两组病人肾小球病变无明显不同,但NP 组间质小管病变明显重于GH 组。在NP 组还可见到间质中有较多的CD_4^+细胞聚集现象。本研究显示NP 组患者预后较差,可能与其间质淋巴细胞浸润程度以及小管间质损伤较重有关。

鼠中脑中缝核及其邻近灰质至丘脑的P物质样投射—HRP和PAP法的联合研究

用HRP逆行性追踪与免疫细胞化学相结合的方法,对大鼠中脑中缝核(中缝背核和中缝中央上核)及邻近的导水管周围灰质至丘脑腹后核的投射及其化学性质进行了研究.HRP注射至丘脑腹后核并经HRP和PAP法反应后,一些脑区,例如对侧三叉神经感觉主核、薄束核、楔束核、两侧导水管周围灰质腹外侧区和中脑中缝核等均出现既含HRP-阳性颗粒,又呈P物质样免疫反应的双标记细胞。其中中缝背核内所观察到的双标记胞体每只动物为21±7个,占HRP标记胞体总数的48％;中缝中央上核内的双标记胞体仅见于R12和R13二例,数量少,主要分布在该核的较尾侧区。导水管周围灰质腹外侧区中双标记胞体呈两侧性分布,同侧多于对侧,所观察到的双标记胞体数,平均每例同侧为26±9,对侧是11±4,两侧双标记胞体数分别占该侧HRP阳性胞体的38％.以上结果表明,大鼠丘脑腹后核接受中脑中缝核及导水管周围灰质腹外侧区的传入投射,同时也证明了该通路中的一部分神经元呈P物质样免疫反应阳性,从而首次提供了中缝核和导水管周围灰质P物质样上行性投射的形态学依据.

PAP法与PAAP法结合的双重免疫染色技术

介绍在同一切片上显示两种抗原物质在同一结构内比较分布的一种双重免疫染色技术。实验用过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法作为第一染色序列,用碱性磷酸酶标A蛋白(PAAP)法作为第二染色序列,最终分别产生深棕褐色和紫蓝色反应产物。其特点在于利用A蛋白能与IgG抗体分子Fc段牢固结合的分子生物学特性,在进行第二序列反应显色的同时,使第一序列反应产物的染色强度得以增加。结果表明,此技术能反差鲜明地显示含有不同物质的两种细胞在同一区域内的比较分布。

大鼠间脑至伏核的SP能纤维投射

采用ＨＲＰ逆行追踪技术和免疫细胞化学（ＰＡＰ法）相结合的方法，对大白鼠间脑至伏核的投射进行了定性研究。结果发现同侧丘脑带旁核、丘脑背内侧核和丘脑室旁核有少量神经元向伏核投射。

消化酶、固定剂对石蜡包埋肝组织DPC和FN—PAP法染色的影响

本文作者对不同固定剂和消化酶对石蜡包埋肝组织desmin阳性细胞(DPC)和纤维联接蛋白(FN)PAP法染色的影响进行了比较研究。所试固定剂中,除Carnoy液外,其它皆需酶消化。对FN染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、0.2％胃蛋白酶消化2 h为宜。DPC染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、胃蛋白酶与胰蛋白酶双重消化各45 min最为理想。结果提示石蜡包埋组织PAP法染色显示细胞内外抗原时应注意选择适宜的固定剂和消化酶。

下丘脑八肽胆囊收缩素对大鼠胃窦运动的作用

下丘脑外侧区(LH)和腹内侧区(VMH)微量注射10ng八肽胆囊收缩素(CCK-8)明显抑制清醒大鼠胃窦运动,这一作用可被切断隔下迷走神经所减弱,被阿托品或酚妥拉明静脉灌流所阻断,表明迷走和交感神经都介导CCK-8作用。同时,在LH注射CCK-8后,迷走背核神经元自发放电活动明显减弱。LH微量注射抗CCK-8血清则明显刺激大鼠胃运动,表明在基础状态下,内源性CCK-8对胃窦运动有持续性抑制作用。用免疫组化PAP法显示出在LH和VMH都有CCK-8免疫反应性神经元存在。

己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法测定血糖的比较

目的了解己糖激酶(HK)法和葡萄糖氧化酶(GOD-PAP)法测定血糖的性能。方法分别对两种方法进行了精密度试验、线性评价及方法对比试验。结果①精密度:HK法批内CV为0.95%,日间CV为2.15%;GOD-PAP法批内CV为1.02%,日间CV为1.75%。②线性:HK法为0.1￣28.0mmol/L,GOD-PAP法为0.1￣22.0mmol/L。③方法对比试验:以HK法为比较方法(Y),GOD-PAP法为试验方法(X),血糖的回归方程式为Y=1.053X+0.015,r=0.998。结论两种方法检测血糖的精密度、线性及方法对比试验均符合临床要求,适用于血糖的常规和自动化分析。

3种血清葡萄糖测定方法的比较

目的比较葡萄糖氧电极法和葡萄糖氧化酶法以及己糖激酶法3种测定血清葡萄糖方法之间的灵敏度、线性、精密度以及相关性,用于指导临床实验。方法采用Beckman Coulter Synchron CX3的葡萄糖氧电极法和Modular PPI的葡萄糖氧化酶法以及己糖激酶法3种方法,同时对相同的标本进行检测比较。结果 3种方法之间相关性良好。葡萄糖己糖激酶法线性范围大于氧电极法大于氧化酶法。葡萄糖氧化酶法,己糖激酶法精密度均高于氧电极法,己糖激酶法、氧化酶法的批内变异小于葡萄糖氧电极法,而二者批间变异则大于葡萄糖氧电极法。溶血对葡萄糖己糖激酶法、氧电极法有影响,对葡萄糖氧化酶法无明显影响。结论 3种方法均符合临床对血清葡萄糖检测的要求,但葡萄糖氧电极法准确﹑简便﹑快速﹑范围较宽,应是未来血清葡萄糖测定的发展方向。

对氨基苯酚的合成及其应用

本文介绍了国内外合成对氨基苯酚的四类主要工艺路线，并对合成方法的优缺点作了评述。指出了主要应用领域及应用前景。阐明我国目前在对氨基酚合成工艺的研究发展方向应是硝基苯加氢还原法。

火龙果miRNA表达分析的qRT-PCR检测体系建立

基于火龙果小RNA组测序序列设计miR 396 b特异引物,采用茎环法和加尾法分别对火龙果miR 396 b进行表达分析,并对2个常用内参基因5 S和U 6的稳定性进行评价,建立火龙果miRNA表达分析的qRT-PCR检测体系。结果表明,U 6作为内参基因更稳定;茎环法灵敏度高、特异性强,以茎环法设计的引物检测miR 396 b在火龙果不同组织均有表达,且在火龙果幼茎受干旱(15%PEG)处理后呈下调趋势。因此,茎环法实时定量更适用于火龙果miRNA的检测。

正常人及肝细胞癌患者肝脏及血浆中丙酮酸激酶同工酶免疫测定

分别从人肝及鼠肝中高度纯化L型和M_1型丙酮酸激酶(Pyk),制备相应的免抗血清。从抗血清中纯化IgG并水解成F(ab')_2,进而还原成Fab',后者与辣根过氧物酶(HRP)交联成Fab'-HRP,再利用这两种复合物建立了各自的高灵敏夹心ELISA来免疫定量L及M_2型(与鼠M_1-Pyk有交叉免疫)Pyk,结果发现:正常人肝中95％的Pyk为L型,M_2-Pyk仅占5％,而肝细胞癌中L-Pyk降至正常肝的3.5％,M_2-Pyk却增至正常的14.6倍,以致M_2-Pyk占总量的95.5％。免疫组化研究进一步证实定量的结果,正常人肝L-Pyk染色呈强阳性。M_2-Pyk染色较弱,而肝细胞癌恰好相反,L-Pyk染色明显减退,而M_2-Pyk不仅癌组织染色很深,癌周组织也明显深于正常,而且愈近癌巢,染色愈深。测定血浆Pyk,发现正常人L-Pyk占89.9％,M-Pyk(以M_2计)仅占10.1％。肝细胞癌患者血浆L-Pyk略见降低,为正常值的79.6％,p值在0.02～0.05之间,但血浆M型Pyk明显升高至正常的4.59倍,占Pyk总量的39.6％,并证明主要来源于肝癌组织中的M_2,故M_2-Pyk有可能成为肝细胞癌诊断的新指标。