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Malignant Phenotype of PC3 Cell Line Was Inhibited by siRNA Targeting PAR Gene 被引量:2
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作者 徐晓峰 周四维 +5 位作者 张征宇 葛京平 程文 位志峰 张旭 高建平 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第4期440-443,共4页
To investigate the effects of down-regulation of prostate androgen regulated (PAR) expression on proliferation of PC3 cells by using RNA interference (RNAi), suppression of PAR expression was achieved by transfect... To investigate the effects of down-regulation of prostate androgen regulated (PAR) expression on proliferation of PC3 cells by using RNA interference (RNAi), suppression of PAR expression was achieved by transfection of PC3 cells with short hairpin RNA (shRNA) expression vectors against PAR, designated as psiRNA-PAR1, psiRNA-PAR2 and psiRNA-PAR3. The inhibitory effects were confirmed by RT-PCR. The growth features of PC3 transfectants were analyzed by cell counts, colon formation in soft agar and flow cytometry. The expression of PAR was suppressed by the three shRNA expression vectors, psiRNA-PAR1 was shown to inhibit the PAR expression most efficiently, with the inhibitory rate reaching a peak at (81.18±1.68)% 48 h after the transfection. PC3 transfectants exhibited a decreased proliferation in cell culture and a low efficiency of colon formation in soft agar. Flow cytometry revealed a G2/M arrest and induced apoptosis. Down-regulated PAR expression inhibited the growth of PC3 cells by inducing G2/M arrest and activating apoptotic pathway. As a potential proto-oncogene that triggers and/or has persistent malignant proliferation, PAR may serves as a very target for the gene therapy. 展开更多
关键词 par gene prostate cancer RNA interference cell cycle apoptosis
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下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响 被引量:2
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作者 徐晓峰 周秀敏 +7 位作者 位志峰 张征宇 葛京平 魏武 周文泉 程文 侯建全 高建平 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第10期896-899,共4页
目的:本研究以RNA干扰技术下调PAR(prostate androgen regulated)基因表达,探讨其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及其相关蛋白Bcl-2/Bax表达水平的影响。方法:PC3细胞转染靶向PAR基因的siRNA,MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡,... 目的:本研究以RNA干扰技术下调PAR(prostate androgen regulated)基因表达,探讨其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及其相关蛋白Bcl-2/Bax表达水平的影响。方法:PC3细胞转染靶向PAR基因的siRNA,MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:PC3细胞PAR基因表达水平下调,此时处于G2-M期的细胞增加,为(29.95±3.25)%;细胞凋亡率亦明显增加,为(20.61±2.73)%,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),同时Bcl-2蛋白表达下降,Bax表达水平升高,Bax/Bcl-2比值升高。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2-M期阻滞和凋亡,其机制为抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达,同时促进Bax表达。 展开更多
关键词 par基因 前列腺癌 细胞凋亡 BCL-2 BAX
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下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞周期及Cdc25C蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 徐晓峰 周秀敏 +8 位作者 董杰 张征宇 葛京平 周文泉 魏武 程文 位志峰 侯建全 高建平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-4,共4页
背景与目的:前列腺雄激素调节基因(prostate androgen regulated gene,PAR)在雄激素非依赖性前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究用RNA干扰技术下调PAR基因表达,并探讨其对前列腺癌PC3细胞细胞周期及调节因子Cdc25C... 背景与目的:前列腺雄激素调节基因(prostate androgen regulated gene,PAR)在雄激素非依赖性前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究用RNA干扰技术下调PAR基因表达,并探讨其对前列腺癌PC3细胞细胞周期及调节因子Cdc25C表达的影响。方法:针对PAR基因的siRNA转染PC3细胞,以RT-PCR验证其对PAR基因表达抑制的有效性,用流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测Cdc25C表达水平。结果:siRNA转染可抑制PC3细胞PAR基因表达,同时G2/M期细胞及凋亡细胞比例分别由(23.79±3.16)%及(1.49±0.13)%增加至(29.95±3.25)%和(20.61±2.73)%,Cdc25C蛋白表达水平明显下降。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡,抑制细胞周期调节因子Cdc25C的表达。 展开更多
关键词 par基因 前列腺癌 细胞周期 Cdc25C
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肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达量检测及其与肿瘤增殖、侵袭的关系研究 被引量:3
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作者 黄朝友 李响 +2 位作者 赖飞 杨振 钱友良 《陕西医学杂志》 CAS 2018年第10期1230-1232,共3页
目的:探讨肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达量检测及其与肿瘤增殖、侵袭的相关关系。方法:选取确诊肾母细胞瘤的患者60例,活检留取肾母细胞瘤组织、瘤旁组织,采用荧光定量PCR检测其中Par-4基因,增殖相关基因IGF-Ⅱ、IRS-2、TGF-β、PTEN... 目的:探讨肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达量检测及其与肿瘤增殖、侵袭的相关关系。方法:选取确诊肾母细胞瘤的患者60例,活检留取肾母细胞瘤组织、瘤旁组织,采用荧光定量PCR检测其中Par-4基因,增殖相关基因IGF-Ⅱ、IRS-2、TGF-β、PTEN及侵袭相关基因Axin、Ecad、Ki-67表达量的差异;采用Pearson检验评估肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达量与增殖、侵袭相关基因表达量的相关关系。结果:肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达量低于瘤旁组织;增殖相关基因IGF-Ⅱ、IRS-2、TGF-βmRNA的表达量高于瘤旁组织,PTEN mRNA的表达量低于瘤旁组织;侵袭相关基因Axin、E-cad mRNA的表达量低于瘤旁组织,Ki-67mRNA的表达量高于瘤旁组织。Pearson检验发现,肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达量与IGF-Ⅱ、IRS-2、TGF-β、Ki-67表达量呈负相关,与PTEN、Axin、E-cad表达量呈正相关。结论:肾母细胞瘤组织中Par-4基因表达异常降低并且与增殖、侵袭基因表达的改变存在相关性。 展开更多
关键词 @肾母细胞瘤 @par-4基因 基因表达
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H_2O_2对分化的PC12细胞par-4基因表达的影响 被引量:2
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作者 曲喜英 祝其锋 刘勇军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第4期403-407,共5页
为观察H2 O2 对分化的PC12细胞par 4基因表达的影响 ,采用终浓度分别为 0、10 0、2 0 0和 4 0 0nmol L的H2 O2处理PC12细胞 8h ,用RT PCR检测par 4基因mRNA表达变化 ,Westernblot检测蛋白表达的变化。结果表明 ,随着H2 O2 剂量的增加 ,P... 为观察H2 O2 对分化的PC12细胞par 4基因表达的影响 ,采用终浓度分别为 0、10 0、2 0 0和 4 0 0nmol L的H2 O2处理PC12细胞 8h ,用RT PCR检测par 4基因mRNA表达变化 ,Westernblot检测蛋白表达的变化。结果表明 ,随着H2 O2 剂量的增加 ,PC12细胞存活率降低 ,凋亡明显增加 ,且par 4mRNA表达及蛋白表达亦增加 ,提示在H2 O2 诱导PC12细胞凋亡过程中Par 4可能起重要作用。 展开更多
关键词 PC12细胞 par-4 基因表达 凋亡 蛋白表达 分化 H2O2 变化 MRNA表达
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RNA干扰PAR基因表达对PC3细胞生长的影响
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作者 徐晓峰 周秀敏 +6 位作者 张征宇 葛京平 周文泉 程文 位志峰 侯健全 高建平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期520-525,共6页
背景与目的:PAR(prostate androgen regulated)基因在雄激素非依赖性的前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞的恶性转化有关。本研究采用RNA干扰技术下调前列腺癌PC3细胞中PAR基因的表达,并探讨其对PC3细胞恶性表型的影响及作用机制。方法... 背景与目的:PAR(prostate androgen regulated)基因在雄激素非依赖性的前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞的恶性转化有关。本研究采用RNA干扰技术下调前列腺癌PC3细胞中PAR基因的表达,并探讨其对PC3细胞恶性表型的影响及作用机制。方法:构建针对PAR基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒psiRNA-PAR1、psiRNA-PAR2和psiRNA-PAR3,转染PC3细胞;采用RT-PCR法检测其对PAR基因的表达抑制作用;细胞计数、软琼脂克隆形成实验、流式细胞术检测PAR基因表达下调对PC3细胞生长的抑制作用及其作用机制。结果:3组shRNA表达质粒均可抑制PC3细胞中PAR基因的表达;PAR基因的下调可使细胞生长速率明显减慢,增殖受到抑制;克隆形成能力降低,其中以psiRNA-PAR1的抑制效应最明显,并在转染48h后对PAR基因表达的抑制率达最高峰,为(81.18±1.68)%;流式细胞术检测结果表明,细胞周期阻滞于G2/M期,凋亡增加。结论:PAR基因表达下调,明显地抑制PC3细胞的生长,其作用机制主要是通过诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡实现的;PAR基因可能是一个新的与雄激素非依赖性前列腺癌细胞恶性表型相关的癌基因,有望作为基因及药物治疗雄激素非依赖性前列腺癌的一个新靶点。 展开更多
关键词 par基因 前列腺癌 RNA干扰 细胞周期 凋亡
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par-4 SAC基因的克隆及序列测定
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作者 秦天洁 马巍 +2 位作者 刘陕西 杨广笑 王全颖 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第9期1626-1629,共4页
目的:利用基因工程技术对par-4 SAC进行基因克隆并测定其序列,为进一步诱导肿瘤细胞靶向性凋亡的基因治疗奠定基础。方法:采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的par-4 SAC的cDNA,PCR产物克隆入pGEM-T Easy载体并转化感受态... 目的:利用基因工程技术对par-4 SAC进行基因克隆并测定其序列,为进一步诱导肿瘤细胞靶向性凋亡的基因治疗奠定基础。方法:采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的par-4 SAC的cDNA,PCR产物克隆入pGEM-T Easy载体并转化感受态大肠杆菌E.coli DH5α菌株,随机挑取数个菌落,筛选鉴定并测序。结果:经酶切鉴定、测序分析,表明所插入的基因片断为par-4 SAC基因,与设计完全相同。结论:应用非对称互补引物/模板法克隆par-4SAC基因是成功及可行的。 展开更多
关键词 par-4 SAC 基因克隆 凋亡
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多巴胺对分化的PC12细胞par-4基因表达的影响
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作者 曲喜英 梅寒芳 祝其锋 《广东医学院学报》 2003年第4期313-316,共4页
目的 :观察多巴胺 (dopamine ,DA)对分化的PC12细胞par 4基因表达的影响。方法 :PC12细胞采用终浓度分别为 0 ,10 0 ,2 0 0 ,4 0 0 μmol/L的DA处理 2 4h后 ,用RT PCR检测mRNA表达的变化和Westernblot检测蛋白表达的变化。结果 :随着DA... 目的 :观察多巴胺 (dopamine ,DA)对分化的PC12细胞par 4基因表达的影响。方法 :PC12细胞采用终浓度分别为 0 ,10 0 ,2 0 0 ,4 0 0 μmol/L的DA处理 2 4h后 ,用RT PCR检测mRNA表达的变化和Westernblot检测蛋白表达的变化。结果 :随着DA剂量的增加 ,PC12细胞存活率降低凋亡明显增加 ,且par 4mRNA表达及蛋白表达亦增加。结论 :在DA诱导PC12细胞凋亡过程中par 4可能起重要作用。 展开更多
关键词 多巴胺 PC12细胞 par-4 基因表达 影响
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Par-4基因增敏顺铂对肾母细胞瘤荷瘤裸鼠生长的抑制作用 被引量:2
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作者 李赟颉 殷丽萍 陆超 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1195-1199,共5页
目的 :探讨腺病毒介导的前列腺凋亡反应因子-4(prostate apoptosis response-4,Par-4)协同顺铂(CDDP)对人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:采用人肾母细胞瘤细胞株SK-NEP-1建立BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,分别用表达Pa... 目的 :探讨腺病毒介导的前列腺凋亡反应因子-4(prostate apoptosis response-4,Par-4)协同顺铂(CDDP)对人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:采用人肾母细胞瘤细胞株SK-NEP-1建立BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,分别用表达Par-4的腺病毒、CDDP及两者联合治疗,随机分成5组:Par-4+CDDP组、Par-4组、CDDP组、空Par-4(不表达Par-4的对照腺病毒)组、空白对照组。测定移植瘤的体积及瘤重,通过HE染色及免疫组化分析,检测移植瘤组织中Par-4、GRP78及BAX蛋白的表达水平。结果:Par-4+CDDP组、Par-4组及CDDP组均有抑制裸鼠移植瘤生长的作用,瘤重差异有统计学意义(P<0.05),其中,Par-4+CDDP组优于Par-4组与CDDP组。而空Par-4组与空白对照组相比,差异无统计学意义。Par-4+CDDP组能明显上调Par-4、GRP78及BAX蛋白表达(P<0.05)。结论:外源性Par-4协同CDDP抑制裸鼠移植瘤的生长可能是外源性Par-4通过结合GRP78后上调BAX蛋白所致。 展开更多
关键词 肾母细胞瘤 par-4基因 GRP78蛋白
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par区域的克隆及其对质粒pUC9稳定性的影响 被引量:3
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作者 王杨 张志毅 +1 位作者 杨胜利 吴汝平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期134-139,共6页
将pSC101上的par区域克隆到载体pUC9上,得重组质粒pEC302。将pUC9和pEC302分别转入E.coli HB 101,在无机培养基M_9中试验两者的稳定性,结果发现E.coli HB101(pUCg)传代培养40代后质粒几乎全部丢失,而E.coli HB101(pEC302)的质粒全部存... 将pSC101上的par区域克隆到载体pUC9上,得重组质粒pEC302。将pUC9和pEC302分别转入E.coli HB 101,在无机培养基M_9中试验两者的稳定性,结果发现E.coli HB101(pUCg)传代培养40代后质粒几乎全部丢失,而E.coli HB101(pEC302)的质粒全部存在。并且发现质粒的稳定性与宿主菌的recA基因有关。 展开更多
关键词 质粒稳定性 基因克隆 par区域
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小串链霉菌XG40全基因组测序及序列分析
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作者 赖宝春 戴瑞卿 +2 位作者 曾天宝 陈淑妹 姚锦爱 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期1754-1765,共12页
小串链霉菌(Streptomyces catenulae)XG40是一株对蜜柚黑斑病等真菌病害具有较好拮抗作用的生防放线菌。本研究通过第三代PacBio全基因组测序平台,对小串链霉菌XG40进行全基因组测序和分析,共获得3个contigs,包含1个染色体DNA和2个质粒D... 小串链霉菌(Streptomyces catenulae)XG40是一株对蜜柚黑斑病等真菌病害具有较好拮抗作用的生防放线菌。本研究通过第三代PacBio全基因组测序平台,对小串链霉菌XG40进行全基因组测序和分析,共获得3个contigs,包含1个染色体DNA和2个质粒DNA,其基因组全长为9772324 bp,GC含量为70.58%,蛋白编码基因8074个,占整个基因组的96.41%。利用antiSMASH软件,预测到46个次级代谢产物合成基因簇,其中包含聚酮合成酶(PKS)和非核糖体肽合成酶(NRPS)的基因簇共有24个,占总基因簇数量的52.17%。有7个基因簇与已知基因簇(desferrioxamin B、pristinol、Neoantimyci、2-methylisoborneol、nigericin、ectoine、geosmin)的相似性为100%,4个基因簇与已知基因簇(miharamycin A/B、SW-163C/E/F/G/UK-63598、gilvocarcin V、coelibactin)的相似性在80%以上,比较分析发现该菌株具备一定的合成尼日菌素和褐黄癌菌素V等抗菌物质的能力。共线性分析表明XG40与根霉链霉菌(S.rhizosphaericus)DSM41760、马来西亚链霉菌(S.malaysiensis)DSM14702、黑孢链霉菌(S.melanosporofaciens)DSM 40318和(S.himastatinicus)ATCC 53653四株链霉基因组之间存在插入和缺失、倒位、易位等基因组重排事件。该研究结果为深入挖掘XG40生防潜力,开发可用于农业生物防治的次级代谢产物提供理论基础。 展开更多
关键词 小串链霉菌 全因组测序 次级代谢合成基因簇 比较基因组分析
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蛋白酶激活受体-2基因靶向shRNA表达质粒的构建及转染食管癌细胞致沉默效应的研究 被引量:4
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作者 陈金梅 邓全军 +3 位作者 谢立群 赵建业 刘彩虹 郑艳敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期349-351,共3页
目的:构建靶向蛋白酶激活受体-2(PAR-2)基因的shRNA表达质粒,建立PAR-2基因沉默的食管癌EC109稳定细胞株。方法:针对人PAR-2的mRNA序列,设计并体外合成编码shRNA的两条特异性寡核苷酸序列,分别插入pGFP-V-RS质粒中构建2个shRNA表达质粒(... 目的:构建靶向蛋白酶激活受体-2(PAR-2)基因的shRNA表达质粒,建立PAR-2基因沉默的食管癌EC109稳定细胞株。方法:针对人PAR-2的mRNA序列,设计并体外合成编码shRNA的两条特异性寡核苷酸序列,分别插入pGFP-V-RS质粒中构建2个shRNA表达质粒(PAR-2shRNA-1、PAR-2shRNA-2),经过鉴定,然后将表达质粒转染至食管癌细胞EC109中,经嘌呤霉素筛选,获得稳定干扰的细胞株,运用RT-PCR和WesternBlot检测PAR-2的表达。结果:PAR-2shRNA-1转染人食管癌细胞EC109后,PAR-2基因表达在mRNA和蛋白质水平都受到显著抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建针对PAR-2基因的shRNA表达质粒,转染食管癌细胞EC109,能有效抑制该细胞株PAR-2基因的表达。 展开更多
关键词 食管肿瘤 EC109 小干扰RNA 蛋白酶激活受体2 基因沉默
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健康人群肠道大肠埃希菌对氟喹诺酮药物的耐药性及耐药机制研究 被引量:3
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作者 钱英 裘云庆 +3 位作者 俞云松 魏泽庆 陈亚岗 李兰娟 《浙江预防医学》 2006年第5期1-3,共3页
目的 研究健康人群(2周内未使用过抗菌药物)肠通分离的110株大肠埃希菌对4种氟喹诺酮类抗菌药物的耐药性及耐药机制。方法 用琼脂稀释法测定4种氟哇诺酮类抗菌药物对110株大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC)。用聚合酶链反应扩增gyrA、p... 目的 研究健康人群(2周内未使用过抗菌药物)肠通分离的110株大肠埃希菌对4种氟喹诺酮类抗菌药物的耐药性及耐药机制。方法 用琼脂稀释法测定4种氟哇诺酮类抗菌药物对110株大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC)。用聚合酶链反应扩增gyrA、parc基因.序列分析明确其突变情况.并与28株2周内使用过抗菌药物病人肠道分离的菌株进行比较。结果 大肠埃希菌对4种氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率未用药组为12.7%-15.5%,用药组为20.8%-25.0%。测序发现60号敏感菌株没有任何氨基酸突变。11株耐药菌中,gyrA基因编码的氨基酸均存在83传突变。即ser83→Leu;其中8株存在双突变,即同时AsD87→Ash:6株存在3个突变,还包括Clu214→Gly。parC基因编码的氨基酸中,有8株存在Ser80→Ile突变,另有2株存在Glu84→Gly突变。结论 健康人群肠道大肠埃希菌对4种氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率为12.7%-15.5%,主要山gyrA基因和parC基凶位点突变造成,以gyrA基因为主。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 氟唪诺酮类药物 靶位基因 GYRA parC
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定量多基因荧光原位杂交技术在卵巢癌研究中的初步探索 被引量:1
14
作者 黄宇婷 胡林萍 +3 位作者 鞠宝辉 袁卫平 程涛 郝权 《现代妇产科进展》 CSCD 2013年第2期86-89,共4页
目的:初步探索定量多基因荧光原位杂交技术(QM-FISH)在卵巢癌基因组不稳定性研究中的应用价值。方法:采用缺口平移法,制作出Spectrum Green:c-myc,Pro-moFluor-555:Rb1,PromoFluor-590:Chk2,HyPer5:p53,PromoFluor-415:BRCA1五色荧光探... 目的:初步探索定量多基因荧光原位杂交技术(QM-FISH)在卵巢癌基因组不稳定性研究中的应用价值。方法:采用缺口平移法,制作出Spectrum Green:c-myc,Pro-moFluor-555:Rb1,PromoFluor-590:Chk2,HyPer5:p53,PromoFluor-415:BRCA1五色荧光探针。采集卵巢癌腹水标本制片后固定细胞并进行QM-FISH检测。测量平均荧光信号强度、背景信号强度及荧光信号分裂率。结果:Spectrum Green、Cy3 v1(PromoFluor-555)、TexasRed(PromoFluor-590)、Zeiss CY5 Custom(HyPer5)、Zeiss(PF415)滤光片下观察,QM-FISH荧光信号/背景信号比值分别为12.8±0.2,8.8±0.4,3.8±0.5,5.0±0.4,9.0±0.2。荧光信号分裂率分别为(8.5±1.6)%,(12.4±1.4)%,(15.3±2.6)%,(14.4±2.2)%,(11.9±2.4)%。结论:QM-FISH技术可以成功应用于卵巢癌的研究,是研究卵巢癌基因组不稳定性、确认肿瘤标本特异性等位基因失衡极其有效的工具。 展开更多
关键词 原位杂交 荧光 卵巢肿瘤 细胞遗传学 比较基因组杂交 基因扩增
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狗腺垂体远侧部降钙素基因相关肽免疫反应神经纤维的超微结构研究 被引量:2
15
作者 张旭 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期55-59,共5页
本实验应用包埋前免疫电镜法,研究了狗腺垂体远侧部降钙素基因相关肽(CGRP)免疫反应神经纤维的超微结构,及其与腺细胞的关系。发现CGRP免疫反应神经纤维与促肾上腺皮质激素细胞和促生长激素细胞构成典型的突触结构,其中与前者之间的突... 本实验应用包埋前免疫电镜法,研究了狗腺垂体远侧部降钙素基因相关肽(CGRP)免疫反应神经纤维的超微结构,及其与腺细胞的关系。发现CGRP免疫反应神经纤维与促肾上腺皮质激素细胞和促生长激素细胞构成典型的突触结构,其中与前者之间的突触较多。大多数突触为非对称型,神经终末内含有清亮小泡和大致密芯泡。还观察到许多未被免疫染色的神经终末,它们与促肾上腺皮质激素细胞、促生长激素细胞、催乳激素细胞和促甲状腺激素细胞形成突触。我们还应用包埋后免疫双标记法,发现在狗腺垂体远侧部神经纤维中,P物质样免疫反应物质与CGRP免疫反应物质共存,但它们分布于不同大致密芯泡内。 展开更多
关键词 降钙素基因 相关肽 P物质 腺垂体
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蛋白酶激活受体-2对缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡的影响 被引量:4
16
作者 张艳 丁家望 +6 位作者 杨俊 童晓红 姜玉蓉 李松 李稳慧 李书国 林英鹏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期411-414,共4页
目的探讨蛋白酶激活受体-2(PAR-2)活化对缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡的影响及细胞外信号调节激酶(ERK)1/2在此过程中的作用。方法40只雄性SD大鼠随机均分为5组(n=8):假手术组,I/R组,PD组(0.3mg/kgERK1/2通路制剂PD98059),PAR-2AP组... 目的探讨蛋白酶激活受体-2(PAR-2)活化对缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡的影响及细胞外信号调节激酶(ERK)1/2在此过程中的作用。方法40只雄性SD大鼠随机均分为5组(n=8):假手术组,I/R组,PD组(0.3mg/kgERK1/2通路制剂PD98059),PAR-2AP组(3mg/kgPAR-2激活肽SLIGRL-NH2),PD+PAR-2AP组。建立大鼠在体心肌I/R模型。采用末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测各组凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,Western blotting检测各组大鼠心肌组织中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达水平。结果与假手术组相比,I/R组、PD组、PAR-2AP组、PD+PAR-2AP组的凋亡指数,Bcl-2、Bax蛋白表达及p-ERK1/2水平均明显增高(P<0.01)。与I/R组比较,PAR-2AP可使凋亡指数和Bax蛋白表达降低,而使Bcl-2的表达和p-ERK1/2水平增加;与PAR-2AP组比较,PD+PAR-2AP组凋亡指数和Bax蛋白表达增加,Bcl-2的表达和p-ERK1/2水平降低。PAR-2AP抑制凋亡的效应可被PD98059部分阻断。结论PAR-2活化后可增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax的表达,从而部分抑制大鼠I/R心肌细胞的凋亡,发挥心肌保护效应,其机制可能涉及ERK路径。 展开更多
关键词 受体 par-2 心肌再灌注损伤 细胞凋亡 基因 BCL-2 BCL-2相关X蛋白质 细胞外信号调节MAP激酶类
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两个重组质粒在快生型大豆根瘤菌中的稳定性的比较 被引量:1
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作者 万钧 覃筱婷 周俊初 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第11期50-52,共3页
将两个复制子(replicon)相同的重组质粒导入快生型大豆根瘤菌中,考察了得到的转移接合子在培养和共生条件下的稳定性。发现带有质粒RK2par基因的重组质粒pT2TX3K在快生型大豆根瘤菌中无论在培养还是共生条件下... 将两个复制子(replicon)相同的重组质粒导入快生型大豆根瘤菌中,考察了得到的转移接合子在培养和共生条件下的稳定性。发现带有质粒RK2par基因的重组质粒pT2TX3K在快生型大豆根瘤菌中无论在培养还是共生条件下都可以稳定存在,而不带有该基因的重组质粒pCK3在两种条件下都有一定程度的丢失。 展开更多
关键词 重组质粒 大豆 根瘤菌 稳定性
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线虫(Caenorhabditis elegans)受精卵中细胞极性的建立 被引量:2
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作者 冯应龙 《生命科学》 CSCD 2003年第4期238-241,199,共5页
早期线虫胚胎提供了一个研究发育过程的极佳模型。线虫胚胎的第一次分裂是不对称的,产生的两个子细胞在尺度的大小和发育命运上均有不同,而这些不同是由第一次有丝分裂周期中胞质决定子的不均匀分布造成的。通常相信,在受精过程中,精子... 早期线虫胚胎提供了一个研究发育过程的极佳模型。线虫胚胎的第一次分裂是不对称的,产生的两个子细胞在尺度的大小和发育命运上均有不同,而这些不同是由第一次有丝分裂周期中胞质决定子的不均匀分布造成的。通常相信,在受精过程中,精子所携带的中心体介导了对极性建成至关重要的胞质流动的产生。同时,细胞骨架成分被认为参与了胞质成分的定位事件。关于par基因的研究目前进展迅速,大多数par基因的突变都导致了线虫早期胚胎分裂不对称性的丧失。 展开更多
关键词 线虫 细胞极性 P颗粒 细胞骨架成分 par基因
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非综合征性唇腭裂的环境与基因多态性分析及归因危险度估算 被引量:5
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作者 周小平 王海琦 +4 位作者 万伟东 王小宁 刘嘉茵 周德兰 王丽君 《中国优生与遗传杂志》 2005年第12期36-37,39,共3页
目的探讨环境暴露、MTHFR、TGFα多态性与NSCL/P的关系及估算其归因危险度。方法选择76例NSCL/P患儿(病例组)和60例非NSCL/P儿童(对照组),调查环境、遗传因素,用PCR-RFLP检测MTHFR基因C677T和A1298C、TGFα基因Taq I基因型,进行多因素Lo... 目的探讨环境暴露、MTHFR、TGFα多态性与NSCL/P的关系及估算其归因危险度。方法选择76例NSCL/P患儿(病例组)和60例非NSCL/P儿童(对照组),调查环境、遗传因素,用PCR-RFLP检测MTHFR基因C677T和A1298C、TGFα基因Taq I基因型,进行多因素Logistic回归分析,计算人群归因危险度。结果分析显示孕早期感染史、孕早期服药史、MTHFR基因C677T、A1298C、TGFαTaq I位点多态性均与NSCL/P有关(P<0.05),比值比OR分别为4.524、4.246、4.387、2.263、2.565,人群归因危险度百分比分别为0.277、0.262、0.640、0.235、0.225,5个因素综合归因危险度百分比为0.886。结论孕早期感染史、孕早期服药史、MTHFR基因C677T、A1298C及TGFα基因Taq I多态性是NSCL/P的重要易感因素,人群综合归因危险度表明NSCL/P是环境与遗传因素共同作用而发生的。 展开更多
关键词 非综合征性唇腭裂 环境 基因多态性 人群归因危险度
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Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶3酶活性的影响及其抗凋亡作用 被引量:4
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作者 陆超 陈吉庆 +6 位作者 周国平 吴升华 管亚飞 袁传顺 黄松明 郭锡熔 陈荣华 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期411-415,共5页
目的研究Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)3酶活性的影响及其抗凋亡作用。方法原代培养hBMSC。谷氨酸诱导hBMSC凋亡。设计和合成两对针对Par-4基因mRNA的小RNA干扰(siRNA)... 目的研究Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)3酶活性的影响及其抗凋亡作用。方法原代培养hBMSC。谷氨酸诱导hBMSC凋亡。设计和合成两对针对Par-4基因mRNA的小RNA干扰(siRNA)序列(Par-4-SiRNA-1、2),构建真核细胞表达载体,用脂质体介导转染hBMSC,利用G418筛选稳定表达细胞株。实时荧光定量PCR法检测Par-4 mRNA表达水平。流式细胞术测定细胞凋亡百分率。Western印迹测定Smac蛋白表达量。比色法测定Caspase-3酶的活性。结果设计的Par-4-SiRNA-1、2可显著诱导hBMSC中Par-4基因沉默,Par-4 mRNA水平分别被降低88%、67%,谷氨酸诱导hBMSC凋亡,凋亡百分率为(58.9±8.9)%。Par-4-SiRNA-1可显著拈抗谷氨酸的诱导凋亡作用,凋亡百分率降为(37.2±6.3)%(F=58.26,P〈0.01)。Par-4-SiRNA-1对谷氨酸诱导的hBMSC中Smac蛋白表达上凋(P〈0.01)和Caspase-3酶活性上调(P〈0.01)有显著的抑制作用(P〈0.01)。结论Par-4基因沉默能拈抗谷氨酸对hBMSC凋亡的诱导作用。其机制可能与Smac基因表达和Caspase-3酶活性被抑制有关。 展开更多
关键词 RNA 干细胞 脱噬作用 基因 par-4
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