低分子肝素钠联合醋酸地塞米松基于PAR-2/TRPV1信号通路治疗小鼠瘙痒模型的有效性

目的基于蛋白酶激活受体2(PAR-2)/瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)信号通路探讨低分子肝素钠联合醋酸地塞米松治疗小鼠瘙痒模型的有效性。方法选取6周龄C57小鼠48只,采用随机数字表法将其中24只制成干皮症(AEW)慢性瘙痒小鼠模型,剩余24只制成DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型。将AEW慢性瘙痒、DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型均按照随机数字表法分为模型对照组、地塞米松组、肝素组、联合用药组,每组6只。模型对照组仅在小鼠脱毛部位给予0.9%氯化钠溶液;地塞米松组在小鼠脱毛部位涂抹醋酸地塞米松乳膏;肝素组在小鼠脱毛部位涂抹低分子肝素钠软膏;联合用药组在小鼠脱毛部位涂抹醋酸地塞米松乳膏、低分子肝素钠软膏。各组小鼠均持续干预7 d。比较各组小鼠干预前、干预7 d后瘙痒次数及PAR-2、TRPV1蛋白表达量。结果在AEW慢性瘙痒、DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型中,干预7 d后,联合用药组、肝素组、地塞米松组小鼠瘙痒次数均少于模型对照组,且联合用药组小鼠瘙痒次数少于肝素组、地塞米松组(P<0.05)。干预7 d后,在AEW慢性瘙痒小鼠模型中,肝素组、联合用药组TRPV1蛋白表达量低于模型对照组,联合用药组低于地塞米松组、肝素组(P<0.05);地塞米松组、肝素组、联合用药组PAR-2蛋白表达量低于模型对照组,联合用药组低于地塞米松组、肝素组(P<0.05)。干预7 d后,在DNFB过敏性皮炎急性瘙痒小鼠模型中,肝素组、联合用药组TRPV1、PAR-2蛋白表达量低于模型对照组,联合用药组低于地塞米松组、肝素组(P<0.05)。结论低分子肝素钠软膏可通过阻断PAR-2/TRPV1信号通路改善瘙痒症状,将其与醋酸地塞米松联合治疗对该通路的抑制效果更加显著。

龙胆泻肝汤通过H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路干预湿疹大鼠的作用机制研究

目的 基于H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路探讨龙胆泻肝汤对湿疹大鼠的保护作用及相关机制。方法 60只大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、氯雷他定组(1 mg·kg^(-1))和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组(6.3g·kg^(-1)、12.6g·kg^(-1)、25.2g·kg^(-1)),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠采用二硝基氯苯(DNCB)建立湿疹模型,然后各组大鼠灌胃相应药物干预,1次/天,连续干预21天。末次给药后,测定大鼠耳肿胀度;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠背部皮肤病理学变化;采用免疫组织化学法检测大鼠皮肤组织H1R、PAR-2、TRPV1蛋白水平;采用蛋白质印迹(WB)法检测大鼠皮肤组织P38MAPK、PP38MAPK蛋白水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠耳肿胀度显著增加(P<0.05)且背部皮肤出现湿疹病理变化;皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著升高(P<0.05);与模型组比较,氯雷他定组和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组耳肿胀度显著减小(P<0.05)且病变程度减轻;皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著降低(P<0.05)。结论 龙胆泻肝汤对湿疹大鼠具有保护作用,其机制可能与抑制H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路有关。

基于H1R、PAR-2/TRPV1痒信号通路探讨马齿苋对急性湿疹的干预作用

目的:探讨马齿苋提取液对急性湿疹大鼠背部皮肤组胺受体1(H1R)、蛋白酶激活受体2(PAR-2)和瞬时感受器电位受体1(TRPV1)表达的影响及其对H1R、PAR-2/TRPV1信号通路的调控作用。方法:SD大鼠30只,分为正常组、模型组、马齿苋组,各组10只。采用二硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹模型,正常组除外。造模成功后,各组分别给予相应药物。末次给药后对各组大鼠进行湿疹面积及严重度指数(EASI)评分。免疫组化法检测H1R、PAR-2和TRPV1的表达,流式细胞技术测定细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度。结果:与正常组比,模型组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.05)和PAR-2(P<0.01)的含量、Ca^(2+)浓度(P<0.01)显著增加,TRPV1增加差异不明显(P>0.05)。与模型组比,马齿苋组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.01)和PAR-2(P<0.01)的含量及Ca^(2+)浓度(P<0.05)显著减少,TRPV1减少差异不明显(P>0.05)。结论:马齿苋可减少H1R、PAR-2含量及降低Ca^(2+)浓度,发挥治疗急性湿疹的作用,其机制可能是通过降低上游分子H1R、PAR-2含量,使其下游分子TRPV1失活,减少Ca^(2+)内流,达到抗瘙痒的作用。

肤鲜洗剂通过T细胞介导的免疫平衡对慢性皮炎湿疹小鼠H1R、PAR-2/TRPV1痒信号通路的调控作用

目的探讨辅助性T淋巴细胞1(Th1)/辅助性T淋巴细胞2(Th2)免疫平衡在组胺受体1(histamine receptor 1,H1R)、蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR-2)/瞬时电位V型1受体(transient receptor potential vanilloid-1,TRPV1)痒信号通路信号传导中的作用及肤鲜洗剂的干预机制。方法采用BALB/c小鼠60只,适应性喂养3 d后随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组,模型对照组,肤鲜洗剂高、中、低剂量组(36,12,4 mg·cm^(−2)),阳性药物对照组(1 mg·cm^(−2)),除空白对照组外,其余各组均采用7%和0.5%2,4-二硝基氯苯丙酮橄榄油溶液多次激发致敏,空白组小鼠腹部及耳部均涂以丙酮溶液对照。激发后24 h开始用药,每天给药2次,连续10 d。测定小鼠耳肿胀度,进行耳变应反应评分,记录搔抓指数,计算小鼠脾脏指数,HE染色观察小鼠耳组织病理学变化,采用ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-31(interleukin-31,IL-31)水平,实时荧光定量PCR检测上述免疫因子的mRNA水平,免疫组化法检测H1R、PAR-2、TRPV1的表达。结果与空白对照组比较,模型对照组小鼠耳厚度、耳变应反应评分、搔抓指数、脾脏指数显著升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β、IL-31蛋白水平和mRNA水平显著升高(P<0.01),H1R、PAR-2、TRPV1含量明显增加(P<0.01),并出现明显的慢性皮炎湿疹样病理改变。与模型对照组比较,肤鲜洗剂组可有效减轻小鼠的耳廓肿胀程度、降低耳变应反应评分、搔抓指数、脾脏指数,TNF-α、IL-1β、IL-31蛋白水平和mRNA水平明显降低(P<0.01);肤鲜洗剂高剂量组、肤鲜洗剂中剂量组、阳性药物对照组H1R含量明显减少(P<0.01);肤鲜洗剂各剂量组、阳性药物对照组PAR-2、TRPV1含量明显减少(P<0.01)。结论肤鲜洗剂通过调节Th1/Th2免疫平衡,下调特征性免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-31,干预痒信号通路H1R、PAR-2/TRPV1传导,从而实现抗瘙痒和抑制炎症反应,达到治疗慢性皮炎湿疹的目的。

肤黄止痒汤抑制IL-31/TRPV1/ERK1/2信号轴缓解尿毒症小鼠皮肤瘙痒的研究

目的:阐明肤黄止痒汤对尿毒症皮肤瘙痒的疗效及其作用机制。方法:将40只小鼠随机分为5组(Sham、Model、FHZYT、BCTC、FHZYT+BCTC),每组8只,干预完成后计数小鼠搔抓次数。指标检测包括免疫组化染色检测皮肤中TNF-α、IL-1β、Substance P和IL-31的表达。WB检测皮肤中Substance P、TNF-α、IL-1β、IL-31、TRPV1、ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达。结果:1.Model组小鼠肌酐、尿素氮水平升高,瘙痒次数增加(P<0.01)。2.Model组中TNF-α、IL-1β的表达上调,FHZYT、BCTC、FHZYT+BCTC组TNF-α表达则降低(P<0.01)。3.与Model组相比,FHZYT、BCTC、FHZYT+BCTC组瘙痒次数相对减少,皮肤中P物质、IL-31、TRPV1、ERK1/2及p-ERK1/2的表达水平降低(P<0.01)。结论:肤黄止痒汤可有效减少尿毒症小鼠皮肤瘙痒,其机制可能是通过抑制IL-31/TR⁃PV1/ERK1/2信号轴,改善皮肤炎症状态并发挥止痒作用。

PAR-1、PAR-2在先天性巨结肠组织中的表达及其与预后的相关性分析

[目的]探讨蛋白酶激活受体-1(PAR-1)、蛋白酶激活受体-2(PAR-2)在先天性巨结肠(HSCR)组织中表达及其与预后的关系.[方法]选取2014年1月至2019年1月在周至县中医医院接受根治性手术治疗的100例HSCR患儿,留取HSCR病变(痉挛段)组织样本和病变旁(距病变2 cm以上)正常肠道黏膜组织.采用免疫组化检测HSCR病变组织样本和正常肠道黏膜组织中PAR-1和PAR-2表达情况,采用荧光定量PCR技术检测PAR-1 mRNA、PAR-2 mRNA表达水平,采用Pearson法分析PAR-1、PAR-2与Kricken-beck评分及血清IL-6、TNF-α水平的相关性,采用Logistic多因素分析影响HSCR患儿预后不良的危险因素.[结果]病变组织中PAR-1、PAR-2阳性表达率高于病变旁组织,差异有统计学意义(P<0.05).与病变旁组织相比,病变组织中PAR-1 mRNA、PAR-2 mRNA表达水平及PAR-1、PAR-2蛋白水平显著升高(P<0.05);预后较差组患儿PAR-1、PAR-2及血清IL-6、TNF-α水平明显高于预后良好组及预后较优组(P<0.05),预后良好组高于预后较优组(P<0.05).Pearson结果显示,PAR-1、PAR-2与Krickenbeck评分均呈负相关(均P<0.05),与IL-6、TNF-α呈正相关(均P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,PAR-1、PAR-2是影响HSCR患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05).[结论]PAR-1、PAR-2在HSCR组织中呈高表达,与Krickenbeck评分呈负相关,是影响HSCR患儿预后不良的危险因素.

TRPV1对LPS致热大鼠体温及下丘脑中Ca^(2+)浓度和cAMP含量的影响

目的探讨TRPV1在脂多糖(LPS)致大鼠发热过程中的作用和机制。方法48只♂SD大鼠随机分为4组,正常对照组(N)、capsazepine组(CPZ)、LPS组(LPS)和capsaz-epine+LPS组(CPZ+LPS)。连续观察体温变化;在发热高峰期通过颈椎脱臼迅速处死动物,以Fura-2/AM为荧光指示剂,测定下丘脑细胞内[Ca2+]i;应用放射免疫法检测下丘脑中cAMP含量的变化。结果①各组体温变化最大值(ΔTmax)由高至低顺序为:CPZ+LPS组>LPS组>CPZ组>N组;其中,CPZ+LPS组与LPS组比较,ΔT(300~480 min期间)及体温反应指数TRI8均增高(P<0.01);②在发热高峰期,CPZ+LPS组[Ca2+]i明显低于其它3组(P<0.01);③CPZ+LPS组cAMP含量与其它组比较增多(P<0.01)。结论capsazepine可能通过阻断下丘脑TRPV1通道,改变细胞内钙离子浓度,进而影响LPS性发热过程。

头痛宁对偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2表达的影响

目的：观察偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区丝裂原活化蛋白激酶家族c-Jun氨基末端激酶-1（JNK-1）和G-蛋白耦联受体家族蛋白酶激活受体-2（PAR-2）的表达以及中药头痛宁对其影响。方法：成年SD大鼠30只随机均分为正常对照组、模型组和头痛宁治疗组3组,每组10只。模型组、治疗组大鼠皮下注射硝酸甘油注射剂10mg/kg建立实验性偏头痛模型,模型组造模30min后蒸馏水1.04mL/kg灌胃,治疗组造模15~20min后头痛宁1.2g/kg灌胃。1周后用免疫组化法检测各组大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2的表达。结果：模型组硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2的表达均高于其他2组（JNK-1：F硬脑膜=288.665,F三叉神经节=20016.775,F脑干=333774.771,P均〈0.001;PAR2：F硬脑膜=25790.690,F三叉神经节=820.497,F脑干=198.165,P均〈0.001）,治疗组和对照组上述指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：头痛宁可通过下调偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2的表达,防治偏头痛。

TRPV1及TGF-β2的检测对儿童UACS诊断意义的探讨

目的探讨对瞬时受体电位香草酸受体1(TRPV1)及转化生长因子β2(TGF-β2)的检测在儿童UACS中的诊断价值。方法选择32例于我院行腺样体手术的腺样体肥大患儿,其中上气道咳嗽综合征(UACS)组16例,对照组16例。所有患儿均于术前采血进行ELISA检测,术中取腺样体标本进行免疫组化试验。结果 UACS组与对照组相比,用ELISA法和免疫组化法进行检测,TRPV1及TGF-β2的检测值为(14.84±4.38)pg/ml和(159.02±2.17)pg/ml,较对照组[(4.90±5.64)pg/ml和(101.49±1.70)pg/ml]明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA与免疫组化检测结果之间无统计学意义的相关性。免疫组化的敏感性较高,阴性预测值较高,ELISA的特异性较高。结论 TRPV1及TGF-β2的ELISA及免疫组化检测对UACS有辅助诊断价值。此两项诊断试验具有一定程度的互补性。

疏肝健脾和胃方对难治性胃食管反流病患者食管黏膜PAR2及TRPV1蛋白表达的影响

目的探讨疏肝健脾和胃方对难治性胃食管反流病(rGERD)患者食管黏膜食管高敏感性相关的蛋白酶激活受体2(PAR2)及瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)蛋白表达的影响。方法收集rGERD患者60例,随机分为中药组、西药组及中西医结合组,每组20例,中药组予疏肝健脾和胃方治疗,西药组予雷贝拉唑治疗,中西医结合组予疏肝健脾和胃方联合雷贝拉唑治疗。观察治疗前后3组患者食管黏膜PAR2、TRPV1表达的差异。结果 3组患者治疗前食管黏膜PAR2表达差异无统计学意义(P>0.05),治疗后PAR2表达均显著降低(P<0.05),且中西医结合组PAR2表达显著低于中药组及中药组(P<0.05)。3组患者治疗前食管黏膜TRPV1表达差异无统计学意义(P>0.05),治疗后TRPV1的表达均较治疗前下降,中西医结合组下降最为明显,但均无统计学差异(P>0.05)。结论疏肝健脾和胃方对rGERD的治疗作用可能通过降低PAR2表达,进而降低食管高敏感性来实现。

SFRP5、TRPV1、NT-pro-BNP在2型糖尿病周围神经病变中的表达及相关性分析

目的分析SFRP5、TRPV1、NT-pro-BNP在2型糖尿病周围神经病变中的表达及相关性。方法将我院2018年1月至2019年12月间收治的99例单纯糖尿病患者作为糖尿病组,97例糖尿病周围神经病变作为神经病变组研究对象,同期选择51例健康者作为对照组;采用酶联免疫吸附法检测血清中SFRP5、TRPV1、NT-pro-BNP水平;采用Pearson相关性检验分析SFRP5、TRPV1、NT-pro-BNP与糖尿病周围神经病变的关系,采用logistics回归模型分析影响糖尿病周围神经病变的危险因素。结果糖尿病组、神经病变组、对照组三组受试者血中SFRP5、TRPV1、NT-pro-BNP水平有明显差异,且差异有统计学意义(P<0.05),其中神经病变组患者血中SFRP5和TRPV1水平最低,NT-pro-BNP水平最高,且差异有统计学意义(P<0.05);SFRP5、TRPV1与糖尿病周围神经病变呈明显负相关,NT-pro-BNP与糖尿病周围神经病变呈明显正相关,且差异有统计学意义(P<0.05);患者血中高SFRP5和高TRPV1水平是糖尿病周围神经病变的独立性保护因素,高NT-pro-BNP是影响糖尿病周围神经病变的独立性威胁因素,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病周围神经病变患者血中SFRP5和TRPV1处于低表达状态,NT-pro-BNP处于高表达状态,且高SFRP5、高TRPV1水平是糖尿病周围神经病变的保护因素,而高NT-pro-BNP是糖尿病周围神经病变危险因素。

基于CRISPR/Cas9技术构建TRPV1基因敲除的CACO-2稳定细胞系

基于CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人结直肠腺癌细胞Caco-2中的辣椒素受体基因TRPV1,构建TRPV1基因敲除的Caco-2稳定细胞系.使用CRISPR/Cas9在线靶点设计程序在TRPV1基因4个转录本的公共CDS区的第一个外显子DNA区域中设计一对gRNA,将gRNA构建到真核重组表达质粒的载体上,电转染待敲除细胞,经嘌呤毒素抗性筛选和基因测序获得敲除TRPV1基因的稳定细胞系.用Western Blot检测TRPV1基因蛋白表达量验证Caco-2中TRPV1基因的敲除效果,CCK-8检测TRPV1基因敲除细胞的生长曲线,与野生型细胞对比检测TRPV1基因敲除对细胞生长的影响.筛选出TRPV1基因敲除的CACO-2稳定细胞系,而且TRPV1基因敲除对Caco-2细胞生长无显著影响.基于CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了TRPV1基因敲除的CACO-2稳定细胞系,为后续研究辣椒素对肠道脂类吸收影响的机理研究提供了有利的工具.

肠吉泰对肠易激综合征内脏高敏感大鼠PAR2、PKCε、TRPV1蛋白表达的影响

目的:探讨肠吉泰对内脏高敏感模型大鼠的调节作用。方法:选择新生SD大鼠40只,按照随机数字表法随机分为空白组、模型对照组、阳性对照组及肠吉泰组,每组10只。参照Alchaer直肠醋酸刺激法建立IBS内脏高敏感大鼠模型。造模期间阳性对照组大鼠给予腹腔注射Capsazepine,其余各组除空白组外均给予相同体积的溶剂腹腔注射。从第8周开始,肠吉泰组每日给予0.423 g/mL的剂量中药灌胃,空白组、模型对照组和阳性对照组每日予以等量去离子水灌胃,各组均持续灌胃4周。干预4周后,采用结直肠气囊扩张法测定并记录大鼠腹壁反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分,进行肠道敏感性评估;使用Western blot法检测大鼠结肠黏膜组织蛋白酶激活受体2(proteinase-activated receptors 2,PAR2)、下游物质蛋白激酶Cε(protein kinaseCε,PKCε)、瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid1,TRPV1)、磷酸化TRPV1(p-TRPV1)的表达。结果:当气囊压力为40、60 mm Hg(1 mm Hg≈0.133 kPa)时,模型对照组大鼠AWR评分较空白组明显升高(P<0.01);肠吉泰组和阳性对照组AWR评分与模型组比较均明显降低(P<0.05)。与模型对照组比较,阳性对照组及肠吉泰组PAR2、PKCε、TRPV1、p-TRPV1的表达显著降低(P<0.05)。结论:肠吉泰可能是通过下调PAR2、PKCε、TRPV1、p-TRPV1的表达,抑制其活化,从而改善IBS内脏高敏感。

背根神经节P2X3R和TRPV1介导CFA致炎性痛大鼠不同时期痛行为

目的:动态检测完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导的炎性痛大鼠健患侧足跖厚度、痛行为和背根神经节(dorsal ganglia root,DRG)中P2X3受体(purinergic P2X3 receptor,P2X3R)、辣椒素受体(transient receptor potential vanilloid type 1,TRPV1)蛋白表达,探索炎性痛不同时期痛行为差异及其可能机制。方法:采用大鼠左侧足跖注射CFA建立炎性痛模型。将大鼠按随机数字表法分为对照组(control,Con group)和炎性痛组(CFA group)。分别检测基线(baseline,BL)和造模后1、3、7、14、28、42天时大鼠双侧足跖厚度、热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)和机械刺激缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT);Western bolt检测健(contralateral,Contra)患(ipsilateral,Ipsi)侧L_(4)-L_(6)DRG中P2X3R、TRPV1蛋白表达。结果:CFA大鼠患侧足跖厚度于造模后各时间点均显著高于Con-Ipsi组和CFA-Contra组。CFA大鼠患侧TWL仅于造模后1、3、7、14天时显著低于同期Con-Ipsi组,于造模后所有时间点均显著低于CFA-Contra组;CFA大鼠健侧TWL各时间点与Con-Contra相比均无差异。CFA大鼠患侧MWT于造模后所有时间点均显著低于同期Con-Ipsi组,于造模后1、3、7、14、28天时显著低于同期CFA-Contra组;与同期Con-Ipsi和Con-Contra组比,CFA大鼠健侧MWT于造模后28、42天时出现明显降低。CFA大鼠患侧DRG中P2X3R、TRPV1蛋白表达于造模后1、14、28、42天时均显著高于Con-Ipsi和Con-Contra组;CFA大鼠健侧DRG中P2X3R蛋白表达于造模后28、42天时显著多于Con-Contra组,而健侧DRG中TRPV1蛋白表达无差异。结论:CFA致炎性痛大鼠患侧足跖热痛觉过敏和机械痛觉异常持续存在,炎性痛后期可诱发出健侧足跖机械痛觉异常;P2X3R和TRPV1可能参与CFA大鼠早期和晚期外周痛敏化发生和维持,健侧背根神经节内P2X3R表达增加可能参与机械镜像痛的产生。

蝉芩颗粒通过下调COX-2抑制TRPV1通道减轻感染后咳嗽大鼠气道神经源性炎症

【目的】观察蝉芩颗粒不同剂量对感染后咳嗽大鼠气道神经源性炎症的作用机制。【方法】将SD大鼠随机分为空白组,模型组,蝉芩颗粒低、中、高剂量组及阿斯美组。除空白组,其他各组采用烟熏结合内毒素滴鼻及辣椒素刺激复制感染后咳嗽模型。造模成功后,各给药组对应灌胃给药,模型组给予等体积生理盐水,每天1次,连续14 d,空白组不做任何处理。以酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中P物质(SP)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织和背根神经节中环氧化酶2(COX-2)、前列腺素E2受体亚型3(EP3)、瞬时受体电位类香草酸受体亚型1(TRPV1) m RNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测TRPV1通道蛋白表达的影响。【结果】(1)ELISA结果:蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组血清中SP含量较模型组下降(P <0.05)。(2)RT-PCR结果:蝉芩颗粒高剂量组肺组织和背根神经节中COX-2 mRNA表达水平低于模型组(P <0.05);蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组肺组织和背根神经节中EP3 m RNA表达水平低于模型组,但差异无统计学意义(P> 0.05);蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组肺组织中TRPV1 m RNA表达水平低于模型组(P <0.01),蝉芩颗粒各剂量组背根神经节中TRPV1 mRNA表达水平低于模型组(P <0.05或P <0.01)。(3)Western Blot结果:蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组肺组织和背根神经节中TRPV1蛋白表达水平低于模型组(P <0.01)。【结论】蝉芩颗粒可减轻感染后咳嗽大鼠气道神经源性炎症,其机制可能与下调COX-2及TRPV1表达、减少速激肽SP的释放有关。

PIP2对外周伤害性信息整合器TRPV1活性的调控作用

瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid subfamily,member 1,TRPV1)是瞬时电压感受器阳离子通道(transient receptor potential cation channel,TRP)家族成员之一,可被伤害性热刺激或一些化学分子所激活,在热痛觉敏化形成过程中发挥重要作用,其功能活性在转录后水平受到多种方式的调控。近年来,磷脂酰肌醇4,5二磷酸(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,PIP2)调节离子通道活性的研究不断深入,因此PIP2对TRPV1的调控作用受到愈来愈多的关注,但研究结果尚存一些争议。本文着重就近年来,对于PIP2对TRPV1的活性调控以及二者之间的结合等方面的研究进展加以整理和总结。

自噬介导的STEMI心肌缺血-再灌注损伤中PAR-2、Bcl-2、Beclin1的表达及其相关性

目的:探究自噬介导的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)心肌缺血再灌注损伤中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、人抑癌基因Beclin1的表达及其相关性。方法:选取2017年1月至2018年7月诊断为STEMI患者50例为试验组,有胸痛症状但冠状动脉造影检查正常者50例为对照组,检测PCI术前及术后0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h血清PAR-2、Bcl-2及Beclin1水平,并分析三者的相关性。结果:试验组PAR-2、Bcl-2、Beclin1水平在PCI术前和术后各时间点均高于对照组(P<0.01)。PAR-2水平与Bcl-2呈正相关(r=0.932,P=0.000),Bcl-2水平与Beclin1呈负相关(r=-0.925,P=0.000)。结论:在STEMI心肌缺血-再灌注期,PAR-2、Bcl-2、Beclin1表达均升高,且三者间存在相关性,在减轻心肌缺血-再灌注损伤中发挥重要作用。

TRPV1基因多态性与2型糖尿病遗传易感性的相关性研究

目的探讨TRPV1基因多态性与2型糖尿病遗传易感性的相关性。方法使用实时荧光定量PCR技术对227例2型糖尿病患者(糖尿病组)和215例非糖尿病患者(对照组)的TRPV1等位基因突变体rs222747进行基因分型,并分析基因型及等位基因与2型糖尿病、糖化血红蛋白(Hb A1c)、糖尿病合并症之间的关系。结果 2型糖尿病组与对照组基因型分布差异有统计学意义(P=0.04),两组等位基因分布差异有统计学意义(P=0.04),提示TRPV1基因多态性与2型糖尿病遗传易感性具有相关性。结论 TRPV1基因多态性与2型糖尿病遗传易感性具有相关性,其分子病理学和临床病理学意义亟待系统研究阐明。

TRPV1和TRPV2对山羊和绵羊疼痛耐受性差异的影响

山羊和绵羊疼痛的耐受性存在差异,对于相同的伤害刺激,山羊的疼痛敏感性较强,而绵羊相对较弱.有机体的疼痛耐受性受TRPV1和TRPV2表达变化的影响.本研究通过山羊和绵羊弗氏佐剂疼痛模型,分析其背根神经组织基因表达差异,构建山羊和绵羊响应疼痛时以TRPV1和TRPV2通道为主的疼痛调控通路,并结合山羊和绵羊TRPV1和TRPV2mRNA序列和蛋白质结构差异,分析这两个基因对山羊和绵羊疼痛耐受性差异的影响.结果发现山羊和绵羊响应疼痛时,有两种不同的调控方式.绵羊主要通过抑制TRPV1通道活性,缓解疼痛.山羊TRPV2通道表达活跃,促进神经兴奋,使疼痛敏感.山羊和绵羊TRPV1基因的转录本序列不同,在山羊TRPV1转录本2缺失的序列可能是引起山羊和绵羊疼痛耐受差异的原因之一.

SLIT2和TRPV1在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的:探讨SLIT2和TRPV1在子宫内膜异位症组织中的表达及意义。方法:通过腹腔镜和宫腔镜手术,选取45例子宫内膜异位症患者的在位及同源异位内膜(实验样本)和45例正常子宫内膜(对照组)。采用免疫组化方法对上述子宫内膜组织中SLIT2和TRPV1的表达情况进行检测。结果:SLIT2在异位内膜的表达率(68.9%)>在位内膜(46.7%)>正常内膜(26.7%),组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);TRPV1在异位内膜的表达率(71.1%)>在位内膜(51.1%)>正常内膜(28.9%),组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);子宫内膜异位症患者疼痛程度越重,SLIT2和TRPV1表达水平也越高,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);SLIT2与TRPVl在子宫内膜异位症异位内膜组织中表达呈正相关。结论:SLIT2和TRPV1在子宫内膜异位症组织中的表达显著增高,且其表达强度与痛经程度相关,二者在子宫内膜异位症的发生、发展中可能起到协同促进作用。