黄芪总苷通过PAR2信号通路减轻糖尿病大鼠肝纤维化的机制研究

目的探讨黄芪总苷在蛋白酶激活受体2(PAR2)信号通路的作用下缓解糖尿病大鼠肝纤维化的作用机制。方法采取随机数字表法分组,将100只大鼠平均分为5组,各20只,分别为空白对照组、模型组、黄芪总苷低、中、高剂量组。除空白对照组,其他各组均采用一次性腹腔注射构建糖尿病大鼠模型。空白对照组和模型组大鼠给予0.5 mg/kg 0.9%氯化钠溶液灌胃,黄芪总苷低、中、高剂量组大鼠分别给予0.5、1.0、2.0 mg/kg黄芪总苷灌胃。各组大鼠均连续灌胃28 d后,采用自动生化分析仪检测各组大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)和白球蛋白比例(A/G)等肝脏功能指标;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠肝组织蛋白Smad 2、Smad 3、pSmad 2、pSmad 3和α-SMA以及PAR2信号通路蛋白PAR2、P-P38 MAPK和P38 MAPK的表达水平;采用放射免疫法测定各大鼠肝脏组织透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)和Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)的水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果与空白对照组相比,模型组大鼠AST和ALT、肝组织蛋白、HA和LN、炎性细胞因子、TGF-β1和PAR2信号通路蛋白水平均显著升高,ALB、A/G、Ⅳ-C和PC-Ⅲ水平则显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);黄芪总苷灌胃治疗后,高剂量组作用效果最为显著,表现为:与模型组相比,大鼠AST和ALT、肝组织蛋白、HA和LN、炎性细胞因子、TGF-β1和PAR2信号通路蛋白水平均显著降低,ALB、A/G、Ⅳ-C和PC-Ⅲ水平则显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪总苷可通过调节糖尿病大鼠肝脏功能指标和肝组织蛋白水平,并可改善纤维化程度,降低炎症反应水平,从而减轻糖尿病大鼠肝纤维化并改善病情,其发挥作用的相关机制与PAR2信号通路激活相关,在本研究设置的剂量范围内,2.0 mg/kg的黄芪总苷治疗效果最好。