CircPARD3调控miR-326/CXCL3轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

目的探究环状RNA PARD3(circPARD3)靶向微小RNA-326(miR-326)/趋化因子配体3(CXCL3)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。方法qRT-PCR法分析OSCC组织及细胞中circPARD3和miR-326表达水平。双荧光素酶实验验证circPARD3和miR-326、CXCL3和miR-326的靶向关系。在OSCC细胞CAL-27中转染si-NC、si-circPARD3、si-circPARD3+anti-NC、si-circPARD3+anti-miR-326、miR-NC、miR-326 mimics,将未转染的CAL-27细胞设为对照组。平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot法检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达。小鼠移植瘤实验验证circPARD3对OSCC肿瘤生长及miR-326/CXCL3的影响。结果在OSCC组织与细胞中,circPARD3表达上调,miR-326表达下调,抑制circPARD3表达可以显著抑制OSCC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT。抑制miR-326可以逆转抑制circPARD3表达对OSCC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT的抑制作用。小鼠移植瘤实验结果显示,抑制circPARD3表达,移植瘤体积及质量降低,miR-326表达水平升高,CXCL3表达水平降低。结论circPARD3在OSCC组织与细胞中表达上调,抑制circPARD3表达,上调miR-326表达,进而抑制CXCL3表达,抑制OSCC细胞迁移、侵袭及EMT。

质粒平均分配基因parDE对甲酸脱氢酶NADH再生系统稳定性的影响

将质粒平均分配基因parDE引入重组质粒pDK7-fdh(携带甲酸脱氢酶基因fdh)中,得到基因重组菌F6.考察了F6与未引入parDE基因的基因重组菌FY(含重组质粒pDK6-fdh)和F-1(含重组质粒pMAL-p2X-fdh)的质粒遗传稳定性及甲酸脱氢酶活性的差异.结果显示,F6传代160代后,仅有3%的菌质粒丢失,而基因重组菌F-1和FY(均只携带fdh基因)传代160代后,丢失质粒的菌分别占93%和78%.传代160代后,F6的甲酸脱氢酶比酶活为2.77U/mg,比传代前降低1.77%,FY为2.02U/mg,F-1与野生型菌株M5al相近,为1.33U/mg.结果表明,引入parDE基因的基因重组菌质粒稳定性和甲酸脱氢酶活性均远高于未引入parDE基因的基因重组菌。

利用转座子将parDE与pCPP430体内重组提高生防工程菌的遗传稳定性

带有梨火疫欧氏杆菌 (Erwiniaamylovora)完整的hrp基因簇的重组粘粒pCPP43 0转化到植物的附生菌成团泛菌 (Pantoeaagglomerans) 3 0 8R中后可以使成团泛菌获得在烟草等植物上引发过敏反应和诱导植物抗病性的能力。pCPP43 0携带着约 40kb的梨火疫欧氏杆菌的染色体DNA ,在成团泛菌 3 0 8R中不能稳定遗传。本文首先把广宿主范围质粒RK2的控制质粒稳定性的parDE片段插入到转座载体pUT mini Tn5Km的唯一克隆位点NotI上 ,然后利用Tn5的转座特性 ,将parDE体内重组到pCPP43 0上 ,经过在无抗生素选择压下反复传代和过敏反应活性测定 ,筛选到了遗传稳定性显著提高的重组生防工程菌。

利用RK2的parDE片段提高重组质粒在生防菌成团泛菌中的稳定性

用ＰＣＲ方法将广宿主范围质粒ＲＫ２中控制稳定性的片段ｐａｒＤＥ克隆到ｐＧＥＭ┐Ｔ载体上，然后插入到分泌表达载体ｐＥｘＳｅｃ１的ＢａｍＨＩ切点上，得到两个新载体ｐＺＬ２和ｐＺＬ３，其中ｐａｒＤＥ的转录方向分别与Ｔ７启动子相同和相反。经酶切物理图谱分析和ＰＣＲ扩增验证后，将ｐＺＬ２和ｐＺＬ３分别电击转化到成团泛菌３０８Ｒ中，在无抗生素的ＬＢ培养基中生长１００代后仍１００％地保留在细胞内。

hok/sok-parDE增强鼠伤寒沙门菌菌毛编码质粒稳定性研究

将编码两个质粒稳定系统的融合基因克隆至表达鼠沙门菌Ⅰ型菌毛(fim)基因的质粒pAZ44中,获得pAZ44-h。将两质粒分别转化鼠伤寒沙门菌,连续培养144 h,每隔12 h转接1代,并取样,用抗性平板计数细菌,通过抗性检测质粒存在状况。结果发现,质粒pAZ44在细菌培养12 h^24 h后开始丢失,而含稳定系统的质粒pAZ44-h在连续培养10代或120 h都未发生丢失。表明aphA-hok-parDE序列显著增强了质粒的稳定性,为进一步研究鼠沙门菌Ⅰ型菌毛的功能奠定了基础。

极性蛋白Pard3在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性

目的:探讨极性蛋白Pard3在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性。方法:收集2017年6月至2019年12月我院外科行乳腺癌切除术的93例女性乳腺癌患者的乳腺癌组织、癌旁正常组织和临床资料。采用免疫组化技术检测Pard3在乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,并结合临床资料,分析Pard3在乳腺癌组织中的表达量与患者临床病理特征之间的关系。采用二分类的Logistic回归分析进行Pard3在乳腺癌组织中的表达与患者临床病理特征相关性分析。结果:免疫组化结果显示,在乳腺癌组织中Pard3的表达水平明显下降。乳腺癌组织中阳性率为31.2%(29/93),显著低于癌旁正常组织中的阳性率72.0%(67/93),差异有统计学意义(P=0.000)。临床病理特征相关性分析结果显示Pard3的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移情况之间的关系差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期、组织分化程度、ER、PR、HER-2、Ki-67表达之间的关系差异有统计学意义(P<0.05)。经Logistic回归分析结果显示,Pard3的表达与分化程度、ER表达呈正相关,与TNM分期呈负相关,与PR、HER-2、Ki-67表达无相关性。结论:极性蛋白Pard3在乳腺癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织,其在乳腺癌组织中的表达量与组织分化程度、ER表达呈正相关,与TNM分期呈负相关。

VE-cad与Pard3在血管内皮中的相关研究进展

血管内皮是存在于血流与血管壁之间的一层上皮细胞,在血液与组织液之间起着天然屏障[1]。血管内皮还是人体最大的内分泌器官以及多种血管活性物质的靶器官,具有维持血液正常流动、调节血管的舒缩状态、抑制血小板聚集、抗炎等重要作用。在某些病理状态下,血管内皮容易受到各种理化因素的刺激而受损,引起内皮功能障碍。内皮细胞连接处有许多黏附分子,VE-cad是黏附连接的主要黏附分子,

PARD3B、HNT基因多态性与宁夏人群高血糖的相关性研究

目的探讨PARD3B基因rs849230及HNT基因rs3099797位点单核苷酸多态性与宁夏地区人群高血糖之间的相关性。方法 1)选取宁夏2型糖尿病患者及糖代谢异常者300例为高血糖病例组,血糖正常人群300例为对照组,两组人群同性别、同民族、同年龄(±3岁)、同居住地。并记录血压、体重、身高、腰围、臀围、空腹血糖、空腹胰岛素、血脂等临床指标。2)采用上海天昊生物科技有限公司的改进的多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,i MLDR)检测高血糖组和对照人群的rs849230、rs3099797位点的单核苷酸多态性,运用SPSS 17.0软件对两组样本各项数据进行统计学分析,基因交互作用采用多因子降维法分析。结果 1)高血糖组和对照组的性别、民族、年龄、文化程度、身高、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹胰岛素差异均无统计学意义(P均>0.05),但是两组的体重、腰围、臀围、收缩压、舒张压、体质指数、总胆固醇、甘油三酯和胰岛素抵抗指数差异具有统计学意义(P<0.01)。2)PARD3B基因rs849230位点AA、AG+GG基因型频率在高血糖组和对照组中分别为94.0%、6.0%和93.0%,7.0%,等位基因频率分别为97.0%、3.0%和96.3%、3.7%;HNT基因rs3099797位点CC、CT+TT基因型频率在两组中分别为87.2%、12.8%和82.9%,17.1%,等位基因频率为93.3%、6.7%和91.1%、8.9%,两位点基因型和等位基因分布在两组中差异均无统计学意义(P>0.05)。回、汉民族两组两位点的基因型和等位基因分布差异亦无统计学意义(P>0.05),MDR分析两位点无交互作用(P>0.05)。结论尚不能认为HNT(rs3099797)、PARD3B(rs849230)基因多态性与宁夏回、汉人群的高血糖的易感性有关。

Shewanella oneidensis内源性大质粒上ParE-ParD家族毒素-抗毒素系统(SO_A0088-A0087)的鉴定

毒素-抗毒素系统在原核生物中分布十分广泛,在细菌的生命活动中扮演了重要的角色,如维持水平基因转移元件的稳定性以及应对环境胁迫等。然而目前对于来自生态环境菌株中的毒素-抗毒素系统的研究仍较少。文章鉴定了自然水体环境来源的菌株ShewanellaoneidensisMR-1携带的内源性大质粒上的一对ParE-ParD家族Ⅱ型毒素-抗毒素系统SO_A0088-A0087。毒素SO_A0088在大肠杆菌以及原宿主S. oneidensis内均具有明显的细胞毒性,并导致细胞分裂存在缺陷。抗毒素SO_A0087能够完全拮抗毒素的毒性。同时,凝胶电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)证实抗毒素SO_A0087能够结合自身的启动子。另外,文章还通过易错突变的方法找到了毒素SO_A0088的3个毒性关键位点。

PARD6A调控非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和放射敏感性的功能研究

探讨PARD6A对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和放射敏感性的影响,提供肺癌的诊疗新靶点。方法:Western blot检测PARD6A在正常人肺上皮细胞系(HBE)和NSCLC细胞系中的蛋白表达。构建PARD6A低表达和过表达肺癌细胞系,CCK8法和克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移,细胞免疫荧光观察不同放射剂量下的PAR6亚细胞定位,Co60γ射线照射研究PARD6A对射线照射后的细胞增殖的影响。结果:PARD6A在NSCLC细胞系中表达明显高于HBE,过表达PARD6A增强细胞增殖、克隆形成和迁移,敲低PARD6A抑制细胞增殖、克隆形成和迁移。免疫荧光观察到经γ射线照射后,PAR6向细胞核内分布增加并定位到DNA损伤部位,并且敲低PARD6A的细胞增殖明显抑制。结论:PARD6A促进非小细胞肺癌细胞增殖和迁移,并降低放射敏感性。

极性蛋白PARD3对结直肠癌转移的影响

目的观察极性蛋白PARD3在结直肠癌转移中的作用。方法应用免疫组织化学和Western blot检测38例结直肠癌组织标本中PARD3的表达，探讨PARD3与临床病理特征的相关性。实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot分别检测结直肠癌细胞中PARD3中的表达。通过RNA干扰技术敲除PARD3后，检测上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白表达变化及Transwell实验检测细胞迁移能力的改变。结果结直肠癌组织中PARD3表达水平明显低于正常切缘组织（0.33±0.03比0.47±0.03）。PARD3低表达与患者性别、年龄及肿瘤浸润程度无明显相关（P＝0.209、0.405、1.000），而与淋巴结转移明显相关（P＝0.013）。PARD3在结直肠癌细胞株中均表达，其中SW620和LoVo中PARD3表达水明显低于其他结直肠癌细胞。SW480和LoVo细胞敲除PARD3后，E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达降低，N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达升高。Transwell实验显示小干扰RNA（siRNA）转染组中细胞穿过膜的数量明显多于对照组（214.00±35.93比66.00±13.45、521.00±26.27比146.00±23.29）。 结论PARD3表达下调促进结直肠癌转移。

利用RAPD技术研究6种蜘蛛的遗传多样性

采用RAPD技术对园蛛科6种蜘蛛的遗传多样性进行了研究.从100个10pb寡核苷酸随机引物中筛选出10个扩增结果清晰且重复性好的随机引物对基因组DNA进行了扩增,共记录129条片段,平均每个引物1 2.9条.种群内多态位点比例在1 7.05%～45.38%,平均遗传多态度0.309 6,Shannon多样性指数0.4732.从统计结果来看,6种蜘蛛没有普遍存在的位点,种间遗传多样性较丰富,种内的遗传多样性较低,外部形态相似的种间遗传距离较近,亲缘关系较近.

手持式医疗设备电源的纹波和噪声的分析和测量

本文将传统的测量电源PARD的方法改进,用于手持式医疗设备电源PARD的测量,以医用平板电脑电源为特例。测量时不做20MHz带宽限制,选择500MHz带宽做初步测量,再根据实际情况选择合适的带宽。在测量中,本文弃用示波器探头,改用1:1衰减50欧姆的同轴电缆测试。对比实验验证结果表明,改进后的测量方法能正确反映手持式医疗设备电源输出电压PARD的真实状况,为抑制电源特别是特殊用途电源PARD提供了思路。

基于控制律重组的双级滑阀真空泵故障诊断算法研究

为提高双级滑阀真空泵工作可靠性,针对双级滑阀式机械真空泵在实际生产过程中可能出现的故障现象,引入控制律重组和PARD-BP神经网络故障诊断算法,以2H-150型双级滑阀真空泵振动故障样本采集数据作为输入,以故障模式矩阵作为目标输出,对PARD-BP算法所得数据进行训练优化;再提出动态数据信息提取概念,进行其动态信息收集提取,采用目前广泛应用的Poly-Max模态参数识别方法进行结果验证,结果表明真空泵X、Y和Z方向上最大的峰值分别下降了31.93%,21.54%和19.37%,证实滑阀真空泵的故障诊断方法具有可靠性。

par DE基因对重组质粒pLM2在Enterobacter gergoviae 57-7中稳定性的影响

将 parDE基因克隆到载有组成型表达nifA基因的质粒 pST10 2 1上 ,得到重组质粒pLM2 .将 pLM2 ,pST10 2 1分别转到玉米联合固氮菌Enteorbactergergoviae 5 7 7(E5 7 7) ,获得转化子E5 7 7(pLM2 ) ,E5 7 7(pST10 2 1) ,二者在c(NH+ 4 ) =5 0mmolL-1的Kp培养基中表达的固氮活性一致 .将pLM2 ,pST10 2 1分别转到E .coliDH5α(pMGFP2 .1) ,培养物用 4 88nm光激发后在 5 10nm均有相同的的荧光特征发射峰 .上述实验表明 ,重组质粒pLM2仍保留了原质粒pST10 2 1中nifA的功能 .但质粒 pLM2和 pST10 2 1在E5 7 7中的稳定性试验表明 ,E5 7 7(pST10 2 1)在无抗生素的LB中继代培养 70代后 ,质粒几乎全部丢失 (仅存 1% ) ;而E5 7 7(pLM2 )继代培养 10 0代后 ,质粒全部存在 (10 0 % ) .图 4表 1参

Par3蛋白对体外培养子宫颈癌SiHa细胞生物学性状的影响

目的探讨Par3蛋白对子宫颈癌SiHa细胞生物学性状的影响。方法采用基因过表达和RNA干扰技术分别上调和下调子宫颈癌SiHa细胞中PARD3的表达;qRT-PCR和Western blot法检测PARD3 mRNA和Par3蛋白水平变化。Transwell小室体外实验检测其对SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响;应用流式细胞术分析其对SiHa细胞周期及凋亡的影响。结果 SiHa细胞转染基因PARD3过表达质粒后mRNA和蛋白表达水平显著增高,PARD3 siRNA干扰SiHa细胞后PARD3 mRNA和Par3蛋白表达水平显著降低;Transwell小室体外实验表明Par3过表达后细胞侵袭、迁移能力降低,而经干扰组蛋白表达下调后细胞侵袭、迁移能力增强;流式细胞术检测提示与空白对照组相比,PARD3基因被干扰后细胞被阻滞在S期,干扰组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。然而,上调PARD3的表达后细胞被阻滞在G_0/G_1期,过表达组细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 Par3蛋白参与子宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移、侵袭以及凋亡的过程,PARD3基因的异常低表达很可能对子宫颈癌的发生、发展以及侵袭、转移起促进作用。

数据中心保障应用服务质量面临的挑战与机遇

在当今信息时代,随着移动设备、互联网应用以及云计算模式的快速发展,数据中心已成为社会基础设施。然而数据中心面临资源利用率与应用服务质量之间的矛盾,一方面通过多个应用同时在数据中心部署实现资源共享能有效提高资源利用率,另一方面多个应用共享资源又会出现相互干扰,严重影响应用的服务质量。因此,目前企业不得不采用预留额外资源以保障延迟敏感的关键应用服务质量,这导致数据中心的利用率很低。并且,随着多核技术的发展,单个服务器内的资源越来越多,其上混合部署的应用数目也在不断增加,更加剧这种矛盾。如何解决资源利用率与应用服务质量之间的矛盾,是数据中心面临的核心挑战之一,同时也为计算机系统结构研究带来很多机遇。文章主要介绍了数据中心所面临的上述矛盾以及一些研究进展,最后介绍了资源可编程体系结构PARD(Programmable Architecture of Resourcing on-Demand)思想,从硬件上支持资源容量隔离与性能隔离,从而保障多应用混合环境下关键应用的服务质量,允许更大程度混合部署应用以提高数据中心资源利用率。

基于电压应力的加速试验设计

实现幅度可控制的电源纹波,对于不同纹波的电压应力下电子产品性能可靠性的研究具有重要的意义。以开关电源为例,通过对其纹波信号进行时频域分析,选择尖顶脉冲作为叠加在开关电源输出上的纹波比较符合实际。为了不破坏尖顶脉冲电路的结构,运用交直流叠加和阻抗变换,对不同纹波的电压应力进行了硬件设计,电路由尖顶脉冲生成、交直流叠加、阻抗匹配三部分组成,解决了电应力加速试验中的应力实现问题。根据试验样本的特点,以样本信号的失真度来构建评价指标,以确定试验的加速应力范围。

直流稳定电源纹波的测量方法研究

本文从分析纹波产生的机理入手,对纹波的特点,及其对负载的影响进行了概述。并给出了稳定电源纹波测量方法的建议。