槲皮素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠远期学习记忆及PARP-1/AIF信号通路的影响

目的观察槲皮素对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠远期学习记忆及多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)/凋亡诱导因子(AIF)信号通路的影响。方法 56只7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组、HIBD组、槲皮素低剂量(20 mg/kg)组和槲皮素高剂量(40 mg/kg)组,每组14只。除假手术组外,其余各组经右颈总动脉结扎并缺氧制作HIBD模型。槲皮素组在造模后立即腹腔注射相应剂量的槲皮素,每日1次,连续7 d;假手术组和HIBD组分别在同一时间点给予等量生理盐水腹腔注射。21日龄时,各组大鼠行悬挂实验和滑棒实验检测神经功能,28日龄时各组大鼠行Morris水迷宫检测空间学习记忆能力。水迷宫实验结束后,大鼠断头取脑,苏木精-伊红(HE)染色观察海马病理学改变,Western blot法检测海马PARP-1和AIF表达情况,ELISA法检测海马Bcl-2和Bax表达情况。结果与假手术组比较,HIBD组的神经功能和学习记忆能力显著下降;而与HIBD组比较,槲皮素低、高剂量组的神经功能和空间学习记忆能力显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,假手术组大鼠海马的神经元结构完整,排列整齐紧密;HIBD组海马的神经元数量明显减少,且排列疏松;槲皮素低、高剂量组则较HIBD组神经元数量明显增多。HIBD组大鼠海马PARP-1、AIF和Bax表达高于槲皮素低、高剂量组,而槲皮素低、高剂量组高于假手术组,Bcl-2的变化则与此相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。槲皮素低、高剂量组相比,神经功能、学习记忆能力以及PARP-1、AIF、Bcl-2和Bax的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论槲皮素可以改善HIBD新生大鼠的远期学习记忆能力,其机制可能通过下调PARP-1/AIF细胞凋亡信号通路,抑制神经细胞凋亡,发挥脑保护作用。

右美托咪定介导PARP-1/AIF信号通路改善高血压脑出血大鼠血肿周围细胞凋亡

目的探究右美托咪定对高血压脑出血大鼠血肿周围细胞凋亡的改善作用及可能机制。方法30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、高血压脑出血组(HICH组)和右美托咪定组(Dex组),每组10只。Longa法检测大鼠神经功能缺损评分;MRI测量大鼠脑水肿体积;取全脑称量干重湿重,计算大鼠脑组织含水量;TUNEL法检测大鼠脑血肿周围脑组织细胞凋亡;Western blot检测大鼠脑血肿周围脑组织凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2及PARP-1/AIF信号通路相关蛋白PARP-1和AIF表达。结果右美托咪定降低高血压脑出血大鼠神经功能缺损评分、脑水肿体积及脑含水量,抑制大鼠脑血肿周围脑组织细胞凋亡,降低大鼠脑血肿周围脑组织Bax、PARP-1和AIF蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达。结论右美托咪定通过抑制PARP-1/AIF信号通路改善高血压脑出血所致大鼠神经功能缺损,抑制脑血肿周围细胞凋亡。

安寐丹调控ROS/PARP-1/AIF通路改善睡眠剥夺模型神经元损伤

目的 探讨安寐丹对睡眠剥夺模型海马神经元凋亡及氧化应激的影响。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、安寐丹组和褪黑素组,每组15只。安寐丹组给药18.18 g/(kg·d),褪黑素组给药100 mg/(kg·d),空白组和模型组给予等体积生理盐水。Ethovision视频分析系统评估大鼠行为学改变,HE染色观察海马神经元形态,透射电镜观察海马神经元超微结构,Tunnel染色观察神经元凋亡情况,生化检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH-PX)含量,免疫荧光检测海马B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、Caspase 3、Caspase 9及活性氧(ROS)的表达,蛋白免疫印迹法检测多聚ADP-核糖聚合酶1(PARP-1)和凋亡诱导因子(AIF)表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠中央区探索时间和中央区穿行次数均下降(P<0.001,P<0.01),海马神经元数量减少,排列疏松紊乱,神经元凋亡指数升高(P<0.001),血清SOD活力和GSH-PX降低,MDA含量升高(P<0.001),海马BAX、Caspase 3、Caspase 9、PARP-1和AIF蛋白以及ROS含量上调,Bcl-2下调(P<0.001,P<0.01)。与模型组比较,安寐丹组和褪黑素组中央区探索时间和中央区穿行次数均升高(P<0.01,P<0.05),神经元凋亡指数降低(P<0.01),血清SOD和GSH-PX含量升高,MDA含量降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05),海马BAX、Caspase 3、Caspase 9、PARP-1和AIF蛋白以及ROS含量下调,Bcl-2上调(P<0.001,P<0.01)。结论 安寐丹可改善睡眠剥夺模型氧化应激损伤和细胞凋亡水平,其机制可能与调控ROS/PARP-1/AIF信号通路有关。

PARP-1基因多态性与妊娠期高血压的相关性及潜在分子机制研究

目的探讨多聚ADP核糖转移酶(PARP-1)基因多态性与妊娠期高血压(HDP)的相关性,以及HDP的潜在发病机制。方法纳入2021年8月至2022年6月在该院就诊的80例HDP孕妇作为HDP组,以及同期80例健康孕妇作为对照组。对比两组临床资料,采用荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞PARP-1、TRL7、MyD88和核因子-κB(NF-κB)mRNA水平及PARP-1基因不同位点的单核苷酸多态性,采用Western blotting法检测外周血单个核细胞PARP-1、TRL7、MyD88和NF-κB蛋白相对表达量;Logistic回归模型分析PARP-1单核苷酸多态性与HDP的相关性;采用Pearson相关性分析PARP-1 mRNA和蛋白表达与NF-κB通路蛋白表达的相关性。结果HDP组血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、sFlt-1/胎盘生长因子(sFlt-1/PLGF)水平,PARP-1、TRL7、MyD88和NF-κB mRNA水平,以及PARP-1、TRL7、MyD88和NF-κB蛋白相对表达量高于对照组,PARP-1基因rs1805414位点CC基因型高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归模型分析显示,sFlt-1/PLGF(OR=1.236)、PARP-1 mRNA(OR=107.998)及PARP-1基因rs1805414位点CC基因型(OR=3.788)是HDP患者发生子痫前期(PE)的独立危险因素(P<0.05);Pearson相关性分析显示,PARP-1 mRNA水平与TRL7、MyD88和NF-κB mRNA水平呈正相关(r=0.782、0.688、0.903,均P<0.05);PARP-1蛋白相对表达量与TRL7、MyD88和NF-κB蛋白相对表达量呈正相关(r=0.833、0.845、0.907,均P<0.05)。结论PARP-1表达水平及多态性与HDP发病密切相关,特别是rs1805414位点CC突变可作为HDP遗传易感性的敏感指标;NF-κB信号通路在PARP-1参与HDP发病中发挥了重要的作用。

Caspase-8、Caspase-3以及PARP-1与心房颤动相关性研究进展

Caspase-8/Caspase-3/PARP-1通路作为哺乳动物细胞内信号传导的重要信号转导通路之一,通过影响细胞的生长、存活、增殖、凋亡以及DNA修复等,继而发挥生物学稳态调控功能。Caspase-8/Caspase-3/PARP-1信号转导通路功能失调与人类多种疾病密切相关,尤其在心房颤动的发病机制的作用方面一直受到众多研究者关注。近年来,对Caspase-8/Caspase-3/PARP-1信号转导通路的结构、功能和机制的研究已取得了重大进展,但其信号转导通路在心房颤动发生、发展中的具体机制仍有待进一步探索。不久的将来,Caspase-8/Caspase-3/PARP-1信号转导通路作为心房颤动的靶酶治疗将成为研究热点,具有重要的临床意义。

IFN-γ诱导感染牛分枝杆菌的THP-1细胞凋亡及AIF信号通路

将质量浓度为15μg/L的IFN-γ作用于不同剂量M.bovis(MOI10∶1,20∶1)北京株感染的THP-1细胞,在感染后12,24,36,48、72h,使用流式细胞仪测定其细胞凋亡百分比。结果表明:IFN-γ诱导了牛分枝杆菌北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相关性。在相同时间,感染剂量为MOI10∶1和MOI20∶1的THP-1细胞经IFN-γ诱导后,细胞凋亡数无显著差异(P>0.05)。将IFN-γ(15μg/L)和牛分枝杆菌北京株(MOI10∶1)处理的THP-1细胞孵育36h后,使用免疫细胞化学的方法检测细胞核内凋亡诱导相关因子(AIF)的变化,结果发现,细胞核内牛分枝杆菌单独感染和IFN-γ刺激的牛分枝杆菌感染的巨噬细胞的AIF的百分比分别为(11.38±1.00)%和(23.26±1.85)%,两者相比差异显著(P<0.05)。表明在IFN-γ诱导的牛分枝杆菌感染的THP-1细胞凋亡过程中,AIF介导的凋亡信号通路被激活。本研究首次报道了在IFN-γ诱导的牛分枝杆菌北京株感染的THP-1细胞凋亡过程中AIF相关信号通路,对阐明IFN-γ在牛分枝杆菌感染中的作用机制具有重要意义。